專利名稱：一種低氟南極磷蝦蛋白基料的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及利用南極磷蝦制備蛋白基料的方法。
背景技術(shù)：
南極磷蝦(Euphausia superba)是地球上最大的單種生物資源之一，其現(xiàn)存量的估計(jì)值約為4 15億噸，成熟蝦年產(chǎn)量為3 5億噸，年可捕獲量可達(dá)1億噸左右，形成巨大的潛在漁業(yè)資源。近年來，隨著世界性傳統(tǒng)漁業(yè)資源的逐漸衰竭，以及200海里專屬經(jīng)濟(jì)區(qū)的提出，使南極水域中巨大的南極磷蝦資源受到一些遠(yuǎn)洋漁業(yè)發(fā)達(dá)國家的關(guān)注。我國也已把南極磷蝦資源列入今后遠(yuǎn)洋漁業(yè)發(fā)展的主要開發(fā)品種之一。南極磷蝦中含有11. 9%至15. 4%蛋白(濕基)，是現(xiàn)已查明的人類可利用的最大蛋白資源之一。南極磷蝦被譽(yù)為人類的蛋白資源寶庫，這是由于南極磷蝦不但蛋白質(zhì)含量高，且蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價(jià)值也高。世界衛(wèi)生組織曾將南極磷蝦、對(duì)蝦、牛乳和牛肉的氨基酸綜合營養(yǎng)價(jià)值比較評(píng)分，結(jié)果磷蝦得100分，牛肉96分，牛乳91分，對(duì)蝦71分。據(jù)分析，人體所必需的8種氨基酸，磷蝦中均有，且合起來占蛋白質(zhì)含量的40%以上。因此，南極磷蝦可作為人類重要的優(yōu)質(zhì)動(dòng)物蛋白資源而加以利用。南極洲地處遙遠(yuǎn)、南極磷蝦捕撈后需長期運(yùn)輸、保藏。南極磷蝦殼中含有高濃度的氟，在保藏過程中會(huì)向蝦肉遷移，污染蝦肉，影響蝦肉蛋白產(chǎn)品的安全性。同時(shí)，南極磷蝦中富含多不飽和脂肪酸，易腐敗變質(zhì)。因此，南極磷蝦捕撈需迅速冷凍、超低溫保存才能保證蝦的原有品質(zhì)，這大大提高了南極磷蝦的運(yùn)輸保藏成本，成為制約南極磷蝦資源開發(fā)利用的瓶頸。要解決南極磷蝦運(yùn)輸、保藏困難的問題，最好的辦法就是在捕撈后迅速將南極磷蝦加工以制備蛋白，但目前尚缺乏南極磷蝦蛋白的船上加工制備方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在提供一種簡易方法在南極磷蝦捕撈后立即制成南極磷蝦蛋白基料的方法，具有低氟特性，尤其適合捕撈船上操作，可以為南極磷蝦的開發(fā)利用提供技術(shù)支持。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明公開了一種低氟南極磷蝦蛋白基料的制備方法，其特征在于，依次包括如下步驟Step 1、低溫自溶將捕撈的鮮活南極磷蝦浙干后直接勻漿獲得勻漿液，用功率 20 40瓦、波長200 300納米、距離0. 5 1米的紫外線照射處理5 10分鐘，之后將所述勻漿液置于0 4°C下自溶0. 1 1小時(shí)。Step 2、蛋白提取向所述勻漿液中加入與1 4倍體積的水，混勻，在0 4°C條件下攪拌浸提5 15分鐘，離心分離，得第一次上層液相和第一次沉淀。Step 3、蛋白制備將所述的第一次上層液相通過調(diào)節(jié)PH值至4. 8 5. 8，或者 80 100°C下加熱10 30分鐘后離心的方法，得第二次上層液相和第二次沉淀，將所述第二次沉淀經(jīng)噴霧干燥即獲得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。優(yōu)選方式下，在步驟乂印2中，向勻漿液加水的同時(shí)，加入終濃度為0.01% 0.03%的氯化鈣，以促進(jìn)蛋白質(zhì)溶解。此外，步驟^ep 2中在離心分離之前調(diào)節(jié)勻漿液的 pH值至2 3. 5。為了提高南極磷蝦蛋白質(zhì)基料的質(zhì)量，針對(duì)第二次沉淀可進(jìn)一步提純后再進(jìn)行噴霧干燥。具體說，在步驟乂印3中，可向所述第二次沉淀中加入2 4倍體積的水，混勻， 調(diào)節(jié)混合液PH值為4. 8 5. 8，離心分離得第三次上層液相和第三次沉淀，所述第三次沉淀經(jīng)噴霧干燥后即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。優(yōu)選方式下，步驟乂印3中，可在捕撈船上，將第一次上層液相凍存于-15 至_25°C或經(jīng)噴霧干燥后得干粉后凍存于-15至_25°C保存；而后運(yùn)至操作間，再將所述凍存的第一次上層液相融化或者將所述凍存的干粉溶解于2 4倍體積的水中恢復(fù)為液態(tài)， 作為上述步驟乂印3中的第一次上層液相完成步驟乂印3及后續(xù)步驟。為了提高南極磷蝦蛋白質(zhì)基料的產(chǎn)量，在步驟^ep 2中，向所述第一次沉淀加入 2 4倍體積的0 4°C水，攪拌混合，在0 4°C條件下攪拌浸提5 15分鐘，離心分離， 得第四次上層液相和第四次沉淀；混合所述第一次液相和所述第四次液相作為步驟Mep 3中使用的第一次液相。上述步驟中，調(diào)節(jié)勻漿的pH值可選用1 6M的HCl或NaOH。此外乂印1中“浙干”目的是將鮮活南極磷蝦附著的水清除，浙干后蝦本身仍保持鮮蝦狀態(tài)。本發(fā)明整個(gè)制備過程均在0 4°C下完成，該溫度為捕撈季節(jié)南極地區(qū)的平均環(huán)境溫度，操作步驟均可在船上完成，其優(yōu)勢(shì)在于利用了鮮活南極磷蝦自溶能力強(qiáng)的特點(diǎn)，增加結(jié)構(gòu)蛋白的自身溶解，提高水溶性蛋白的得率。鮮活南極磷蝦中氟主要集中于蝦殼，尚未向蝦肉遷移，此時(shí)以水提取，氟主要分布在沉淀中，對(duì)水溶性粗蛋白的污染較輕。另外，水溶性南極磷蝦粗蛋白經(jīng)噴霧干燥后運(yùn)輸，增加運(yùn)輸能力，節(jié)約運(yùn)輸成本。本發(fā)明具有以下優(yōu)占.
^ \\\ ·1、本發(fā)明涉及的操作過程簡單，不需要復(fù)雜的設(shè)備，整個(gè)制備過程均在0 4°C下完成，該溫度為捕撈季節(jié)南極地區(qū)的平均環(huán)境溫度，適合在捕撈船上進(jìn)行操作。2、本發(fā)明利用鮮活南極磷蝦自溶能力強(qiáng)的特點(diǎn)，增加結(jié)構(gòu)蛋白的自身溶解，提高水溶性蛋白的得率。3、本發(fā)明將捕撈的鮮活南極磷蝦浙干后直接勻漿進(jìn)行操作，由于鮮活南極磷蝦中氟主要集中于蝦殼，尚未向蝦肉遷移，此時(shí)以水提取，氟主要分布在沉淀中，大大減少了對(duì)水溶性粗蛋白的污染。4、本發(fā)明的方法涉及將水溶性南極磷蝦粗蛋白凍干或噴霧干燥的步驟，增加了對(duì)南極磷蝦粗蛋白的運(yùn)輸能力，節(jié)約運(yùn)輸成本。本發(fā)明的方法簡便有效能使南極磷蝦的粗蛋白回收率為46% 51%，粗脂質(zhì)回收率為 60%。制備的低氟南極磷蝦蛋白質(zhì)基料氟含量低于1. 5ug/g ；營養(yǎng)價(jià)值高， 產(chǎn)品中蛋白質(zhì)含量為70 78g/100g干基，脂肪含量為25 31g/100g干基，磷脂含量為 400 440mg/g;用途廣，適合工業(yè)化應(yīng)用，本發(fā)明可以為南極磷蝦的有效利用提供技術(shù)支持。此外，根據(jù)本發(fā)明方法的工藝參數(shù)，能夠提高生產(chǎn)效率，同時(shí)產(chǎn)品純度及質(zhì)量較好，具有較高的經(jīng)濟(jì)效益。
具體實(shí)施例方式發(fā)明公開了一種低氟南極磷蝦蛋白基料的船上加工制備方法，依次包括如下步驟1、低溫自溶將捕撈的鮮活南極磷蝦浙干后直接勻漿，用功率20 40瓦、波長 200 300納米、距離0. 5 1米的紫外線照射處理5 10分鐘，之后將勻漿液置于捕撈地區(qū)環(huán)境溫度下自溶0. 1 1小時(shí)。此步驟利用了鮮活南極磷蝦自溶能力強(qiáng)的特點(diǎn)，增加結(jié)構(gòu)蛋白的自身溶解，提高水溶性蛋白的得率。2、蛋白提取向低溫自溶后的勻漿液中加入與1 4倍體積的0 4°C水，混勻， 在0 4°C條件下攪拌浸提5 15分鐘，離心分離，得第一次上層液相和第一次沉淀。由于鮮活南極磷蝦中氟主要集中于蝦殼，尚未向蝦肉遷移，此時(shí)以水提取，氟主要分布在沉淀中，對(duì)水溶性粗蛋白的污染較輕。3、穩(wěn)定蛋白將步驟2中得到的第一次上層液相直接凍存或經(jīng)噴霧干燥后得干粉后凍存。此步驟增加了運(yùn)輸能力，并節(jié)約運(yùn)輸成本。4、蛋白制備將步驟3中得到的凍存液融化或者將所述凍存干粉溶解于2 4倍體積的水中，通過調(diào)節(jié)PH值至4. 8 5. 8，或者在80 100°C下加熱10 30分鐘后離心的方法，得到沉淀，經(jīng)噴霧干燥即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。上述步驟2中，向勻漿液加水的同時(shí)，加入終濃度為0. 010% 0. 030%的氯化鈣。 通過調(diào)節(jié)勻漿液的pH值至2 3. 5，增加蛋白得率。上述步驟4中制備蛋白質(zhì)的方法，根據(jù)步驟3的產(chǎn)物不同，具體來說有以下四種情況方法1 將凍存的液相融化后，調(diào)節(jié)pH值為4. 8 5. 8，攪拌混勻后靜置5 15分鐘，離心分離得沉淀A ；向沉淀A中加入2 4倍體積的水，攪拌混勻，調(diào)節(jié)混合液pH值為 4. 8 5. 8，攪拌混勻后靜置5 15分鐘，離心分離得沉淀B ；沉淀B經(jīng)噴霧干燥后即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。方法2 將凍存的液相融化后，80 100°C下加熱10 30分鐘，攪拌混勻后靜置 5 15分鐘，離心分離得沉淀A ；沉淀A經(jīng)噴霧干燥后即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。方法3 將凍存的干粉溶解于2 4倍體積的水，調(diào)節(jié)pH值為4. 8 5. 8，攪拌混勻后靜置5 15分鐘，離心分離得沉淀A ；向沉淀A加入2 4倍體積的水，攪拌混勻，調(diào)節(jié)混合液PH值為4. 8 5. 8，攪拌混勻后靜置5 15分鐘，離心分離得沉淀B ；沉淀B經(jīng)噴霧干燥后即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。方法4 將凍存的干粉溶解于2 4倍體積的水，80 100°C下加熱10 30分鐘， 攪拌混勻后靜置5 15分鐘，離心分離得沉淀A ；沉淀A經(jīng)噴霧干燥后即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。實(shí)施例1 本發(fā)明以南極磷蝦為原料，采用現(xiàn)代蛋白質(zhì)的提取分離技術(shù)，制備了低氟南極磷蝦蛋白質(zhì)基料的船上加工制備工藝。捕撈后的鮮活南極磷蝦浙干水分，與2 4倍體積的0 4°C水混合后勻漿，用功率20 40瓦、波長200 300納米、距離0. 5 1米的紫外線照射處理5 10分鐘，之后將勻漿液置于捕撈地區(qū)環(huán)境溫度下自溶0. 1 1小時(shí)。 向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 01% 0. 03%，用1 6M鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)勻漿液的pH值為2 3. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提5 15分鐘，離心分離得液相A和沉淀A ；向沉淀A加2 4倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 01 %至0. 03%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)混合液的pH值為2 3. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提5 15分鐘，離心分離得液相B和沉淀B ；合并液相A和液相B，得到液相C ；向液相C加入IM鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為4. 8 5. 8，攪拌混勻后在0 4°C條件下靜置 5 15分鐘，離心分離得沉淀C ；向沉淀C加入2 4倍體積的0 4°C的水，攪拌混勻，向混合液中加入IM鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為4. 8 5. 8，攪拌混勻后0 4°C條件下靜置 5 15分鐘，離心分離得沉淀D ；沉淀D經(jīng)噴霧干燥后即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。實(shí)施例2 捕撈后的鮮活南極磷蝦浙干水分，與2倍體積的0 4°C水混合后勻漿， 用功率40瓦、波長200納米、距離1米的紫外線照射處理10分鐘，之后將勻漿液置于捕撈地區(qū)環(huán)境溫度下自溶1小時(shí)。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 03%，用6M鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)勻漿液的PH值為3. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相 A和沉淀A ；向沉淀A加4倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 03%，用6M鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)混合液的pH值為3. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提 15分鐘，離心分離得液相B和沉淀B ；合并液相A和液相B，得到液相C ；向液相C加入6M鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH值為5. 8，攪拌混勻后在0 4°C條件下靜置15分鐘，離心分離得沉淀C ；向沉淀C加入4倍體積的0 4°C的水，攪拌混勻，向混合液中加入6M鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH值為5. 8，攪拌混勻后0 4°C條件下靜置15分鐘，離心分離得沉淀D ；沉淀D經(jīng)噴霧干燥后即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。實(shí)施例3 捕撈后的鮮活南極磷蝦浙干水分，與2 4倍體積的0 4°C水混合后勻漿，用功率30瓦、波長250納米、距離0. 8米的紫外線照射處理7分鐘，之后將勻漿液置于捕撈地區(qū)環(huán)境溫度下自溶0. 5小時(shí)。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 02%，用2M 鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)勻漿液的PH值為3，在0 4°C條件下攪拌浸提10分鐘，離心分離得液相A和沉淀A ；向沉淀A加3倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 02%，用2M鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)混合液的pH值為3，在0 4°C條件下攪拌浸提10分鐘，離心分離得液相B和沉淀B ；合并液相A和液相B，得到液相C ；向液相C加入2M 鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH值為5，攪拌混勻后在0 4°C條件下靜置10分鐘，離心分離得沉淀C ；向沉淀C加入3倍體積的0 4°C的水，攪拌混勻，向混合液中加入2M鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH值為5，攪拌混勻后0 4°C條件下靜置10分鐘，離心分離得沉淀D ；沉淀D經(jīng)噴霧干燥后即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。實(shí)施例4 捕撈后的鮮活南極磷蝦浙干水分，與2倍體積的0 4°C水混合后勻漿， 用功率20瓦、波長210納米、距離0. 5米的紫外線照射處理5分鐘，之后將勻漿液置于捕撈地區(qū)環(huán)境溫度下自溶0.2小時(shí)。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0.01%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)勻漿液的PH值為2，在0 4°C條件下攪拌浸提5分鐘，離心分離得液相A和沉淀A ；向液相A加入IM鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為4. 8，攪拌混勻后在0 4°C條件下靜置5分鐘，離心分離得沉淀B ；向沉淀B加入2倍體積的0 4°C的水，攪拌混勻，向混合液中加入IM鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為4. 8，攪拌混勻后0 4°C條件下靜置5分鐘，離心分離得沉淀C ；沉淀C經(jīng)噴霧干燥后即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。實(shí)施例5 捕撈后的鮮活南極磷蝦浙干水分，與4倍體積的0 4°C水混合后勻漿， 用功率40瓦、波長280納米、距離1米的紫外線照射處理5分鐘，之后將勻漿液置于捕撈地CN 102524510 A區(qū)環(huán)境溫度下自溶0. 1小時(shí)。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 030%，用4M鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)勻漿液的PH值為3. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相 A和沉淀A ；向液相A加入IM鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為5. 8，攪拌混勻后在0 4°C條件下靜置15分鐘，離心分離得沉淀B ；向沉淀B加入4倍體積的0 4°C的水，攪拌混勻，向混合液中加入IM鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為5. 2，攪拌混勻后0 4°C條件下靜置15分鐘， 離心分離得沉淀C ；沉淀C經(jīng)噴霧干燥后即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。實(shí)施例6 捕撈后的鮮活南極磷蝦浙干水分，與3倍體積的0 4°C水混合后勻漿， 用功率30瓦、波長300納米、距離0. 8米的紫外線照射處理6分鐘，之后將勻漿液置于捕撈地區(qū)環(huán)境溫度下自溶0. 4小時(shí)。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 020%，用2M鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)勻漿液的PH值為3，在0 4°C條件下攪拌浸提10分鐘，離心分離得液相 A和沉淀A ；向液相A加入IM鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為5，攪拌混勻后在0 4°C條件下靜置10分鐘，離心分離得沉淀B ；向沉淀B加入3倍體積的0 4°C的水，攪拌混勻，向混合液中加入IM鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為5，攪拌混勻后0 4°C條件下靜置10分鐘，離心分離得沉淀C ；沉淀C經(jīng)噴霧干燥后即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。實(shí)施例7 捕撈后的鮮活南極磷蝦浙干水分，與2倍體積的0 4°C水混合后勻漿， 用功率25瓦、波長220納米、距離0. 6米的紫外線照射處理8分鐘，之后將勻漿液置于捕撈地區(qū)環(huán)境溫度下自溶0. 7小時(shí)。在0 4°C條件下攪拌浸提6分鐘，離心分離得液相A和沉淀A ；向沉淀A加3倍體積的0 4°C水，攪拌混合，在0 4°C條件下攪拌浸提8分鐘，離心分離得液相B和沉淀B ；合并液相A和液相B，得到液相C ；將液相C凍存于_15°C保存；融化凍存液，調(diào)節(jié)PH值至4. 8后離心，得到沉淀，將沉淀噴霧干燥即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。實(shí)施例8 捕撈后的鮮活南極磷蝦浙干水分，與4倍體積的0 4°C水混合后勻漿， 用功率35瓦、波長290納米、距離0. 7米的紫外線照射處理8分鐘，之后將勻漿液置于捕撈地區(qū)環(huán)境溫度下自溶0.3小時(shí)。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0.015%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)勻漿液的PH值為2. 4，在0 4°C條件下攪拌浸提11分鐘，離心分離得液相A和沉淀A ；向沉淀A加2倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 015%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)混合液的pH值為2. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提11分鐘，離心分離得液相B和沉淀B ；合并液相A和液相B，得到液相C ；將液相C凍存于-20°C保存；融化凍存液，調(diào)節(jié)PH值至5. 2后離心，得到沉淀C，向沉淀C中加入2倍體積的水，攪拌混勻，調(diào)節(jié)混合液PH值為5. 2，離心分離得液相D和沉淀D，沉淀D經(jīng)噴霧干燥后即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。實(shí)施例9 捕撈后的鮮活南極磷蝦浙干水分，與3倍體積的0 4°C水混合后勻漿， 用功率35瓦、波長255納米、距離0. 8米的紫外線照射處理6分鐘，之后將勻漿液置于捕撈地區(qū)環(huán)境溫度下自溶0. 4小時(shí)。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 025%，用2M鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)勻漿液的PH值為3，在0 4°C條件下攪拌浸提12分鐘，離心分離得液相 A和沉淀A ；向沉淀A加2 4倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 025%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)混合液的pH值為2，在0 4°C條件下攪拌浸提12分鐘，離心分離得液相B和沉淀B ；合并液相A和液相B，得到液相C ；將液相C凍存于_25°C保存；融化凍存液，調(diào)節(jié)PH值至5后離心，得到沉淀，經(jīng)噴霧干燥即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。
實(shí)施例10 捕撈后的鮮活南極磷蝦浙干水分，與2. 5倍體積的0 4°C水混合后勻漿，用功率觀瓦、波長230納米、距離0. 9米的紫外線照射處理8分鐘，之后將勻漿液置于捕撈地區(qū)環(huán)境溫度下自溶0. 5小時(shí)。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 010%，用3M 鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)勻漿液的PH值為2. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提5分鐘，離心分離得液相A和沉淀A ；向沉淀A加3倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 010%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)混合液的pH值為2. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提5分鐘，離心分離得液相B和沉淀B ；合并液相A和液相B，得到液相C ；將液相C凍存于_22°C保存；融化凍存液，調(diào)節(jié)PH值至5. 5后離心，得到沉淀C，向沉淀C中加入4倍體積的水，攪拌混勻，調(diào)節(jié)混合液PH值為5. 5，離心分離得液相D和沉淀D，沉淀D經(jīng)噴霧干燥后即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。實(shí)施例11 捕撈后的鮮活南極磷蝦浙干水分，與3. 5倍體積的0 4°C水混合后勻漿，用功率36瓦、波長205納米、距離1米的紫外線照射處理9分鐘，之后將勻漿液置于捕撈地區(qū)環(huán)境溫度下自溶0. 6小時(shí)。在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相A 和沉淀A ；向沉淀A加2倍體積的0 4°C水，攪拌混合，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相B和沉淀B ；合并液相A和液相B，得到液相C ；得到液相C ；將液相C經(jīng)噴霧干燥后得干粉后凍存于_21°C保存；將所述凍存干粉溶解于2倍體積的水中，調(diào)節(jié)PH 值至4. 9后離心，得到沉淀，經(jīng)噴霧干燥即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。實(shí)施例12 捕撈后的鮮活南極磷蝦浙干水分，與2 4倍體積的0 4°C水混合后勻漿，用功率30瓦、波長245納米、距離0. 8米的紫外線照射處理8分鐘，之后將勻漿液置于捕撈地區(qū)環(huán)境溫度下自溶0. 7小時(shí)。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 030%，用 4M鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)勻漿液的pH值為3，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相A和沉淀A ；向沉淀A加4倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 030%，用4M鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)混合液的pH值為3，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相B和沉淀B ；合并液相A和液相B，得到液相C ；將液相C經(jīng)噴霧干燥后得干粉后凍存于_18°C保存；將所述凍存干粉溶解于4倍體積的水中，調(diào)節(jié)PH值至5. 1后離心，得到沉淀C，向沉淀C中加入4倍體積的水，攪拌混勻，調(diào)節(jié)混合液pH值為 5. 1，離心分離得液相D和沉淀D，沉淀D經(jīng)噴霧干燥后即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。實(shí)施例13 捕撈后的鮮活南極磷蝦浙干水分，與3倍體積的0 4°C水混合后勻漿，用功率30瓦、波長265納米、距離0. 8米的紫外線照射處理6分鐘，之后將勻漿液置于捕撈地區(qū)環(huán)境溫度下自溶0. 8小時(shí)。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 030%，用5M 鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)勻漿液的PH值為3，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相A和沉淀A ；向沉淀A加2倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 010%，用5M鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)混合液的pH值為3，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相B和沉淀B ；合并液相A和液相B，得到液相C ；將液相C經(jīng)噴霧干燥后得干粉后凍存于保存；將所述凍存干粉溶解于2倍體積的水中，調(diào)節(jié)PH值至 5. 0后離心，得到沉淀，將沉淀噴霧干燥即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。實(shí)施例14 捕撈后的鮮活南極磷蝦浙干水分，與4倍體積的0 4°C水混合后勻漿，用功率40瓦、波長260納米、距離0. 5米的紫外線照射處理9分鐘，之后將勻漿液置于捕撈地區(qū)環(huán)境溫度下自溶0.9小時(shí)。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0.025%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)勻漿液的PH值為2. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相A和沉淀A ；向沉淀A加4倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 010%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)混合液的pH值為2，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相B和沉淀B ；合并液相A和液相B，得到液相C ；將液相C經(jīng)噴霧干燥后得干粉后凍存于_16°C保存；將所述凍存干粉溶解于2 4倍體積的水中，調(diào)節(jié)PH 值至5. 8后離心，得到沉淀C，向沉淀C中加入2倍體積的水，攪拌混勻，調(diào)節(jié)混合液pH值為 5. 0，離心分離得液相D和沉淀D，沉淀D經(jīng)噴霧干燥后即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。實(shí)施例15 捕撈后的鮮活南極磷蝦浙干水分，與2倍體積的0 4°C水混合后勻漿，用功率30瓦、波長275納米、距離0. 5米的紫外線照射處理9分鐘，之后將勻漿液置于捕撈地區(qū)環(huán)境溫度下自溶0. 2小時(shí)。在0 4°C條件下攪拌浸提10分鐘，離心分離得液相 A和沉淀A ；向沉淀A加2倍體積的0 4°C水，攪拌混合，在0 4°C條件下攪拌浸提5分鐘，離心分離得液相B和沉淀B ；合并液相A和液相B，得到液相C ；將液相C凍存于-20°C保存；融化凍存液，100°C下加熱10分鐘后離心，得到沉淀，經(jīng)噴霧干燥即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。實(shí)施例16 捕撈后的鮮活南極磷蝦浙干水分，與3倍體積的0 4°C水混合后勻漿，用功率30瓦、波長285納米、距離0. 8米的紫外線照射處理9分鐘，之后將勻漿液置于捕撈地區(qū)環(huán)境溫度下自溶0.3小時(shí)。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0.010%，用IM 鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)勻漿液的PH值為2. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提10分鐘，離心分離得液相A和沉淀A ；向沉淀A加2倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 010%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)混合液的pH值為2. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提10分鐘，離心分離得液相B和沉淀B ；合并液相A和液相B，得到液相C ；將液相C凍存于_19°C保存；融化凍存液，80°C下加熱30分鐘后離心，得到沉淀，經(jīng)噴霧干燥即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。實(shí)施例17 捕撈后的鮮活南極磷蝦浙干水分，與2倍體積的0 4°C水混合后勻漿，用功率20瓦、波長295納米、距離0. 5米的紫外線照射處理8分鐘，之后將勻漿液置于捕撈地區(qū)環(huán)境溫度下自溶0. 6小時(shí)。在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相 A和沉淀A ；向沉淀A加2倍體積的0 4°C水，攪拌混合，在0 4°C條件下攪拌浸提10分鐘，離心分離得液相B和沉淀B ；合并液相A和液相B，得到液相C ；得到液相C ；將液相C經(jīng)噴霧干燥后得干粉后凍存于_21°C保存；將所述凍存干粉溶解于2倍體積的水中，90°C下加熱20分鐘后離心，得到沉淀，經(jīng)噴霧干燥即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。實(shí)施例18 捕撈后的鮮活南極磷蝦浙干水分，與4倍體積的0 4°C水混合后勻漿，用功率40瓦、波長225納米、距離0. 5的紫外線照射處理8分鐘，之后將勻漿液置于捕撈地區(qū)環(huán)境溫度下自溶0.2小時(shí)。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0.010%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)勻漿液的PH值為3. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提5分鐘，離心分離得液相A和沉淀A ；向沉淀A加2倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 010%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)混合液的pH值為3. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相B和沉淀B ；合并液相A和液相B，得到液相C ；將液相C經(jīng)噴霧干燥后得干粉后凍存于_23°C保存；將所述凍存干粉溶解于2倍體積的水中，85°C下加熱 30分鐘后離心，得到沉淀，經(jīng)噴霧干燥即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。
以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實(shí)施方式
，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此， 任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種低氟南極磷蝦蛋白基料的制備方法，其特征在于，依次包括如下步驟51、低溫自溶將捕撈的鮮活南極磷蝦浙干后勻漿獲得勻漿液，用功率20 40瓦、波長 200 300納米、距離0. 5 1米的紫外線照射處理5 10分鐘，之后將所述勻漿液置于 0 4°C下自溶0. 1 1小時(shí)；52、蛋白提取向所述勻漿液中加入1 4倍體積的水，混勻，在0 4°C條件下攪拌浸提5 15分鐘，離心分離，得第一次上層液相和第一次沉淀；53、蛋白制備將所述的第一次上層液相通過調(diào)節(jié)PH值至4.8 5. 8或者80 100°C 下加熱10 30分鐘，而后離心的方法得第二次上層液相和第二次沉淀，將所述第二次沉淀經(jīng)噴霧干燥即獲得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。
2.如權(quán)利要求1所述的低氟南極磷蝦蛋白基料的制備方法，其特征在于在步驟S2 中，向勻漿液加水的同時(shí)，加入終濃度為0. 01% 0. 03%的氯化鈣。
3.如權(quán)利要求2所述的低氟南極磷蝦蛋白基料的制備方法，其特征在于在步驟S2中在離心分離之前調(diào)節(jié)所述勻漿液的pH值至2 3. 5。
4.如權(quán)利要求3所述的低氟南極磷蝦蛋白基料的制備方法，其特征在于在步驟S3 中，向所述第二次沉淀中加入2 4倍體積的水，混勻，調(diào)節(jié)混合液pH值為4. 8 5. 8，離心分離得第三次上層液相和第三次沉淀，所述第三次沉淀經(jīng)噴霧干燥后即得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。
5.如權(quán)利要求4所述的低氟南極磷蝦蛋白基料的制備方法，其特征在于在步驟 S3中，將所述第一次上層液相凍存于-15至_25°C或經(jīng)噴霧干燥后得干粉后凍存于-15 至-25°C保存；而后運(yùn)至操作間后，將所述凍存的第一次上層液相融化或者將所述凍存的干粉溶解于2 4倍體積的水中恢復(fù)為液態(tài)，完成步驟S3及后續(xù)步驟。
6.如權(quán)利要求1 5任一所述的低氟南極磷蝦蛋白基料的制備方法，其特征在于步驟S2中，向所述第一次沉淀加入2 4倍體積的0 4°C水，攪拌混合，在0 4°C條件下攪拌浸提5 15分鐘，離心分離，得第四次上層液相和第四次沉淀；混合所述第一次液相和所述第四次液相作為步驟S3中使用的第一次液相。
7.如權(quán)利要求1 5任一所述的低氟南極磷蝦蛋白基料的制備方法，其特征在于調(diào)節(jié)所述勻漿的PH值選用1 6M的HCl或NaOH。
全文摘要
本發(fā)明公開一種低氟南極磷蝦蛋白基料的制備方法，步驟為1、低溫自溶將鮮活南極磷蝦勻漿，用紫外線照射處理后自溶。2、蛋白提取向勻漿液中加水，攪拌浸提，離心分離，得上層液相和沉淀。3、穩(wěn)定蛋白將上層液凍存或干燥后凍存。4、蛋白制備將凍存物恢復(fù)液態(tài)；通過調(diào)節(jié)pH值至4.8～5.8，或者80～100℃下加熱10～30分鐘后離心的方法，得產(chǎn)物沉淀，經(jīng)噴霧干燥獲得南極磷蝦蛋白質(zhì)基料。本發(fā)明操作簡單，尤其適合捕撈船現(xiàn)場操作，能使蛋白質(zhì)回收率達(dá)46％～51％，脂肪回收率達(dá)54％～60％。產(chǎn)品中蛋白質(zhì)含量為70～78g/100g干基，脂肪含量為25～31g/100g干基，氟含量低于1.5ug/g干基。
文檔編號(hào)A23J1/04GK102524510SQ20101058682
公開日2012年7月4日 申請(qǐng)日期2010年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月14日
發(fā)明者吳海濤, 朱蓓薇, 李冬梅, 李明, 楊靜峰, 陳躍文 申請(qǐng)人:大連工業(yè)大學(xué)