專利名稱:用于檢測親密度影響指數(shù)的試劑、試劑盒、方法及其應用的制作方法
技術領域:
本發(fā)明屬于衛(wèi)生健康領域,具體而言,本發(fā)明涉及檢測親密度影響指數(shù)的方法、該方法所涉及的試劑和試劑盒及其應用。
背景技術:
人類作為一個龐大的生物群體,時時刻刻存在著人際之間的交往。人際關系和交往對其個人的生活素質和發(fā)展有著極為重要的影響,尤其是在經濟高速發(fā)展的全球化時代,人們都希望得到尊重和喜愛。人們往往通過衣著、妝扮、體育鍛煉、生活衛(wèi)生習慣以及提升生活素養(yǎng)和品質等方面來提升自己的形象,達到營造和諧社會關系的目的。這些都是可以看見和感覺到的影響人際關系的現(xiàn)象和事物,也是人際關系參與者本人可掌控和感受到的,屬于視覺范疇。屬于嗅覺范疇的現(xiàn)象和事物也直接影響著人際關系,例如來自口腔的各種氣味也在不同程度上直接對人與人之間的交往造成影響??谇皇沁M入人體內的通道,許多事件在此發(fā)生??谇唤邮苁澄?,并將固體的食物顆粒變小,與唾液混合,啟動消化過程??谇徽衬ひ约巴僖合袤w分泌提供潤滑液,幫助言語表達、吞咽和食物消化。因此,口腔特別容易發(fā)生感染、損傷或各種有害狀況,包括齲齒、牙周疾病、口腔潰瘍等。而口腔內發(fā)生的有些情況如不良嗅覺、口臭,甚至多痰、打鼾等都是影響人際關系的因素。目前,針對上述影響人際交往中的親密度的各種因素,尚未有一個統(tǒng)一的檢測方法或判斷標準。尤其目前尚無統(tǒng)一的檢測方法來檢測由不良嗅覺引起的影響人際關系的因素,更沒有一個指標來量化這些因素。
發(fā)明內容
為了解決上述技術問題,本發(fā)明提供涉及這一領域的檢測方法及相關產品。具體而言,本發(fā)明涉及檢測不良氣味對親密度的影響,該不良氣味的主要來源為口腔。為有助于理解本發(fā)明,下面定義了一些術語。本文定義的術語具有本發(fā)明相關領域的普通技術人員通常理解的含義。除非另外說明,本文所用的術語“親密度影響指數(shù)”是指影響人際關系和親密程度的、可以進行科學檢測的量化性指標。親密度指數(shù)的建立和檢測有利于人們科學地了解自身的狀態(tài),及時進行科學干預、消除影響人際關系和親密程度的負面性因素。在人與人的交往過程中,口頭上的語言表達是至關重要的;語言上的表達和溝通需要人與人之間相對近距離的接觸而實現(xiàn)??谇坏慕】禒顟B(tài)是影響近距離交流的重要因素。。在本申請中,所述 “親密度影響指數(shù)”具體由口腔內可收集到的嗜中性白血球細胞的數(shù)量代表。除非另外說明,本文所用的術語“個性化的親密度影響指數(shù)”由檢測對象口腔內嗜中性白血球細胞數(shù)或其特異性成分(或產物)濃度的增長倍數(shù)表示,該指數(shù)的計算公式如下Ii = nt/nh
其中的Ii為個性化的親密度影響指數(shù);nt為從檢測對象中獲取的嗜中性白血球細胞數(shù)目或其特異性成分(或產物)濃度;nh為該檢測對象在無炎癥的健康情況下所獲取的嗜中性白血球細胞數(shù)目或其特異性成分(或產物)濃度。除非另外說明,本文所用的術語“比較性親密度影響指數(shù)”由檢測對象的嗜中性白血球細胞數(shù)或其特異性成分(或產物)濃度,相對于無炎癥的健康參照者的增長倍數(shù)。該指數(shù)的計算公式如下Ic = nt/nr其中的I。為比較性親密度影響指數(shù);nt為從檢測對象中獲取的嗜中性白血球細胞數(shù)目或其特異性成分(或產物)濃度為無炎癥的健康參照者的嗜中性白血球細胞數(shù)目或其特異性成分(或產物)濃度。根據(jù)本發(fā)明的一個具體實施方式
,無炎癥的健康參照者的嗜中性白血球細胞數(shù)目OO為10,000。為了解決上述技術問題,本發(fā)明的一個目的是提供一種用于檢測親密度指數(shù)和/ 或釋放口腔內嗜中性白血球細胞的溶液。本發(fā)明的另一個目的是提供用于檢測親密度指數(shù)和/或口腔內嗜中性白血球細胞數(shù)量的試劑盒。本發(fā)明又一個目的是上述溶液和試劑盒在制備檢測口腔內嗜中性白血球細胞數(shù)量的產品中的用途。本發(fā)明再一個目的是提供檢測哺乳動物親密度影響指數(shù)的方法。本發(fā)明還一個目的是提供一種檢測哺乳動物口腔衛(wèi)生改善情況的方法。本發(fā)明的目的是通過以下技術方案來實現(xiàn)的。一方面,本發(fā)明提供一種用于釋放口腔內嗜中性白血球細胞的溶液,其特征在于, 所述溶液包括用于釋放口腔內嗜中性白血球細胞的鹽離子和酸離子;其中鹽離子和酸離子由化合物提供,優(yōu)選地,提供所述鹽離子和酸離子的化合物選自氯化鉀,氯化鈉和磷酸鈉的一種或多種;所述溶液可進一步包含用于提供細胞所需能量的化合物;優(yōu)選地,提供所述細胞所需能量的化合物為D-葡萄糖。所述溶液可進-步包含用于調節(jié)該溶液的PH值和緩沖性能的化合物;優(yōu)選地,所述化合物為無水磷酸二氫鉀,磷酸鈉和無水磷酸氫二銨的一種或多種。此外,所述溶液還可進一步包含用于著色的化合物;優(yōu)選地,所述化合物為酚紅鈉。進一步優(yōu)選地,所述溶液中包含0. 01-10. 00克/L氯化鉀,0. 01-10. 00克/L無水磷酸二氫鉀,0. 01-10. 00克/L氯化鈉,0. 01-10. 00克/L無水二元磷酸鈉,0. 01-10. 00克/ LD-葡萄糖和0. 01-0. 02克/L酚紅鈉;更優(yōu)選地,所述溶液包括0. 4克/L氯化鉀,0. 06克/L無水磷酸二氫鉀,8. 0克/L 氯化鈉,0. 04788克/L無水二元磷酸鈉,1. 0克/L D-葡萄糖和0. 011克/L酚紅鈉。并且,所述溶液可以為水溶液、酒精溶液或葡萄糖溶液;優(yōu)選地,所述酒精溶液中的酒精濃度為1-70% (V/V);或優(yōu)選地,所述葡萄糖溶液中的葡萄糖濃度為0. 1-15% (g/ml)。另一方面,本發(fā)明提供一種用于檢測口腔內嗜中性白血球細胞數(shù)量的試劑盒,所述試劑盒包括上述用于釋放口腔內嗜中性白血球細胞的溶液。在上述試劑盒中,還可以進一步包括用于特異性固定所述嗜中性白血球細胞的固定劑和/或用于對所述嗜中性白血球細胞進行特異性染色的染色劑;優(yōu)選地,所述固定劑為甲醛,所述染色劑為吖啶橙。此外,所述試劑盒還可以進一步包括檢測嗜中性白血球細胞的特異成分或產物所需的檢測試劑;優(yōu)先地,所述特異性成分為中性粒細胞彈性蛋白酶,組織蛋白酶G,髓過氧化物酶,乳鐵蛋白和明膠酶的一種或多種;其檢測試劑包括檢測該特異蛋白所需的抗體及其相應的檢測試劑;其檢測試劑為酶聯(lián)反應所需的試劑。又一方面,本發(fā)明提供上述溶液或上述試劑盒在制備檢測哺乳動物口腔內嗜中性白血球細胞數(shù)量的產品中的用途;優(yōu)選地,所述哺乳動物是人。再一方面,本發(fā)明提供一種檢測哺乳動物親密度影響指數(shù)的方法,所述方法包括 檢測包含所述哺乳動物口腔內含物的樣本中嗜中性白血球細胞的數(shù)量;優(yōu)選地,所述親密度影響指數(shù)為個性化的親密度影響指數(shù)或比較性親密度影響指數(shù);優(yōu)選地,所述哺乳動物是人。其中,上述方法優(yōu)選具體包括1)使所述哺乳動物用適量溶液漱口,從而獲得包含所述哺乳動物口腔內含物的溶液;2)使用固定劑固定經步驟1)獲得的溶液中的嗜中性白血球細胞;3)使用染色劑將經步驟2、固定的嗜中性白血球細胞進行染色并計數(shù);優(yōu)選地,在步驟2、前,先離心所述包含哺乳動物口腔內含物的溶液;進一步優(yōu)選地,所述離心速度為20-100g,時間為10-30分鐘;更優(yōu)選地,所述離心速度為20g,時間為 10分鐘。并且,所述步驟1)中的溶液優(yōu)選為上述用于從哺乳動物口腔內釋放嗜中性白血球細胞的溶液;所述步驟2)中的固定劑優(yōu)選為甲醛;進一步優(yōu)選地,所述固定劑為2. 5% (g/ml) 的甲醛水溶液;所述步驟幻中的染色劑優(yōu)選為吖啶橙;進一步優(yōu)選地,所述染色劑為1. 6% (g/ ml)的吖啶橙水溶液。此外,所述方法進一步包括通過將所述樣本中檢測到的嗜中性白血球細胞的數(shù)量和被檢測哺乳動物在健康狀態(tài)下口腔內的嗜中性白血球細胞的數(shù)量進行比較,計算所述哺乳動物的個性化的親密度影響指數(shù)??蛇x地,所述方法進一步包括通過將所述樣本中檢測到的嗜中性白血球細胞的數(shù)量和健康狀態(tài)下的哺乳動物參照者口腔內的嗜中性白血球細胞的數(shù)量進行比較,計算所述哺乳動物的比較性親密度影響指數(shù);優(yōu)選地,所述健康狀態(tài)下的哺乳動物參照者口腔內的嗜中性白血球細胞的數(shù)量為10000。本發(fā)明還提供另外一種檢測哺乳動物親密度影響指數(shù)的方法,所述方法包括檢測包含所述哺乳動物口腔內含物的樣本中嗜中性白血球細胞特異成分或產物的含量,所述特異成分如中性粒細胞彈性蛋白酶,組織蛋白酶G,髓過氧化物酶,乳鐵蛋白和明膠酶。這些特異蛋白可以采用本領域常規(guī)技術,使用相應的抗體,通過酶聯(lián)反應來進行檢測。優(yōu)選地,所述親密度影響指數(shù)為個性化的親密度影響指數(shù)或比較性親密度影響指數(shù);優(yōu)選地,所述哺乳動物是人。此外,所述方法進一步包括通過將所述樣本中檢測到的嗜中性白血球細胞特異成分或產物的含量和被檢測哺乳動物在健康狀態(tài)下口腔內的嗜中性白血球細胞特異成分或產物的含量進行比較,計算所述哺乳動物的個性化的親密度影響指數(shù)??蛇x地,所述方法進一步包括通過將所述樣本中檢測到的嗜中性白血球細胞特異成分或產物的含量和健康狀態(tài)下的哺乳動物參照者口腔內的嗜中性白血球細胞特異成分或產物的含量進行比較,計算所述哺乳動物的比較性親密度影響指數(shù)。還一方面,本發(fā)明提供一種檢測哺乳動物口腔衛(wèi)生改善情況的方法,所述方法包括在對哺乳動物口腔衛(wèi)生進行改善之前和之后,根據(jù)上述任一項方法分別檢測哺乳動物親密度影響指數(shù),然后比較改善之前和之后的親密度影響指數(shù);優(yōu)選地,所述親密度影響指數(shù)為個性化的親密度影響指數(shù)或比較性親密度影響指數(shù);優(yōu)選地,所述哺乳動物是人。以下是本發(fā)明的詳細描述炎癥是一種應對感染、損傷或各種有害狀況的重要免疫反應。炎癥過程對機體來說是很重要的,因為它服務于修復損傷、殺傷病原微生物和腫瘤的過程中。本發(fā)明在下文披露了發(fā)生并嵌入口腔黏膜組織中的以前未知的炎癥來源。清除該炎癥來源,可以治愈病人的慢性牙周炎和經常性潰瘍,以及口臭等不良口腔狀態(tài)。這表明, 嵌入黏膜組織的炎癥是與炎癥相關的口腔疾病和不良口腔狀態(tài)的一種誘因。選擇參與這項研究的志愿者,該志愿者45歲,患有15年的牙周炎病,由三個不同的牙周炎專家確診。該患者每三月就需要到牙周炎??七M行專業(yè)清理,也經常遭受口腔潰瘍的困擾(圖1A)。采用一個Y形的特制清洗工具對該患者粘膜和牙齦組織進行了徹底的清潔。該工具的設計專門優(yōu)化了清洗能力、并可避免傷害任何有關組織(圖1B),被稱之為除炎刷(具體參見CN201010109442. 1)。用除炎刷對口腔黏膜組織進行刷擦,然后用水沖洗。發(fā)白的殘渣從口腔黏膜組織中釋放出來,偶爾會有血跡的出現(xiàn),但沒有發(fā)生持續(xù)出血現(xiàn)象。隨后,潰瘍樣點(ulcer-like spot)出現(xiàn)在附近的黏膜牙齦交界處(圖1C)的黏膜組織上。令人驚奇的是,褐色分泌物從潰瘍樣點中釋放出來(圖2A)。該分泌物用Turk’ s 溶液進行染色,然后在熒光顯微鏡下進行了觀察。很顯然,該分泌物中含有大量的嗜中性白血球(neutrophil)(圖2B),這些細胞都含有典型的多形核特征(圖2C)。該樣本由吖啶橙 (Acridine orange)進行了染色,在熒光顯微鏡下被證實含有嗜中性白血球(圖2D)。該褐色分泌物似乎含有一個具有結構單元的嗜中性白血球聚集群體,這些匯集一起的嗜中性白血球群體被稱之為口炎斑(oral inflammatory plague)。在褐色分泌物中出現(xiàn)的嗜中性白血球是一種炎癥癥狀;嗜中性白血球釋放可以損傷牙齒和組織的分解酶。從一個潰瘍樣點中可釋放出多于10個口炎斑,隨后潰瘍樣點被治愈。然后口炎斑將不會再從患過潰瘍樣點的部位中釋放出來??谘装叽嬖谟跐儤狱c中的時侯,患者會在該部位有一種熱度和不舒服的感覺。一旦口炎斑被釋放出來,患者就立刻感到一種如釋重負的感覺。這些都表明口炎斑是一種炎癥反應。據(jù)推測,口炎斑嵌入在黏膜組織中(圖3)。支持這一想法的事實是,需要花時間和力量將口炎斑從黏膜組織中釋放出來。很多口炎斑可匯集在一起,由于黏膜組織的折疊,口炎斑被嵌入其中,形成一種“結”狀構造,被稱之為“口炎結”(oral inflammatory knotitis)??谘捉Y可導致可見的炎癥癥狀,如上述所說的潰瘍樣點(圖3)。在潰瘍樣點處可見的白色殘渣或沉淀物可能是由嗜中性白血球所致的細胞死亡而造成的。通過除炎刷清洗的過程,發(fā)現(xiàn)在這個病患者含有12個以上的潰瘍樣點。這些潰瘍樣點存在于黏膜牙齦交界處附近、舌頭下邊、腭扁桃體附近,并在臉頰內部;這些都是不能輕易被當前口腔清潔措施所清理的地方。有些潰瘍樣點比其它更難清除,可能是因為其所在部位、大小和復雜程度所致。從一個潰瘍樣點中釋放出來的口炎斑的數(shù)目有所不同,有的有10個左右,有的高達100個以上。有的口炎斑為褐色,有的口炎斑為黃色??谘装叩捏w積也有所變化,有的在10微升左右,有的高達200微升以上。從這個病患者中釋放的口炎斑總量估計在10毫升以上??谘装咧惺戎行园籽虻臐舛裙罍y在107ml左右。因此,該病患者的口腔黏膜組織中含有至少IO8個嗜中性白血球。這可能是一個具有顯著影響力的炎癥反應,由此而導致口腔疾病。當12個潰瘍樣點中的3至5個被清除后,該病患者注意到他已經沒有牙周炎疾病了。這表明清除潰瘍樣點是治療牙周炎的有效措施。令人驚喜的是,隨著潰瘍樣點的進一步清除,患者的口腔潰瘍也較少發(fā)生。在潰瘍樣點清除結束后,該患者也不再遭受口腔潰瘍的困擾了。這表明口腔炎癥是導致口腔復發(fā)性潰瘍的誘因。該病患者也注意到,在潰瘍樣點清除以后,他的口臭問題也得以消除??梢韵胂螅?被困在潰瘍樣點里面的微生物是導致口臭的原因(圖幻。有趣的是,他的感覺系統(tǒng)改善了, 他能聞到更多的氣味。據(jù)推測,在口腔中的嗜中性白血球可能會破壞呼吸系統(tǒng)中的感覺細胞。因此,清除潰瘍樣點可治療牙齦疾病,也有益于身體健康。上述研究表明,當前口腔衛(wèi)生習慣的不足,導致了食品殘留(圖2B),細胞碎片(白色沉淀物,如圖1)和微生物(口臭問題)的積累,這些將導致炎癥和不良口腔狀態(tài),誘發(fā)嗜中性白血球的聚集(圖3)。因此,在口腔內的口臭等不良口腔狀態(tài)可以由口腔內可收集的嗜中性白血球數(shù)目來代表。親密度影響指數(shù)可以采用從口腔中取得的嗜中性白血球數(shù)量來進行計算。這些嗜中性白血球細胞的數(shù)目可以在進行特異性染色之后,在顯微鏡下進行計算;此外,這些嗜中性白血球細胞的數(shù)目可以通過計算這些嗜中性白血球細胞的特異性成分或產物的濃度所代表。根據(jù)本發(fā)明的一個具體實施方式
,個性化的親密度影響指數(shù) (intimacy-interfering index of an individual) (Ii)的表達方式,為該個體由炎癥所致的嗜中性白血球細胞數(shù)或其特異性成分(或產物)濃度的增長倍數(shù)。該指數(shù)的計算公式如下Ii = nt/nh其中Ii為個性化的親密度影響指數(shù);nt為從檢測對象中獲取的嗜中性白血球細胞數(shù)目或其特異性成分(或產物)濃度;nh為該檢測對象在無炎癥的健康情況下所獲取的嗜中性白血球細胞數(shù)目或其特異性成分(或產物)濃度。在另一個具體實施方式
中,比較性親密度影響指數(shù)(intimacy-interferingindex of comparison) (Ic)的表達方式為檢測對象的嗜中性白血球細胞數(shù)或其特異性成分(或產物)濃度,相對于無炎癥的健康參照者的增長倍數(shù)。該指數(shù)的計算公式如下Ic = nt/nr其中I。為比較性親密度影響指數(shù);nt為從檢測對象中獲取的嗜中性白血球細胞數(shù)目或其特異性成分(或產物)濃度;!^為無炎癥的健康參照者的嗜中性白血球細胞數(shù)目或其特異性成分(或產物)濃度。在其中的一個實施例中,無炎癥的健康參照者的嗜中性白血球細胞數(shù)目(nr)為10,000。需要指出的是,親密度影響指數(shù)是嗜中性白血球細胞數(shù)或其特異性成分(或產物)濃度的增長倍數(shù),這可以反映親密度影響的程度。此外,嗜中性白血球細胞數(shù)目或其特異性成分(或產物)從口腔釋放出的效率,受所用取樣緩沖液和條件的影響。本發(fā)明公開了可以產生一致性和可重復性結果的取樣緩沖液、程序和條件。本發(fā)明提供了涉及檢測親密度影響指數(shù)的方法及其相關產品。首先,本發(fā)明提供了一種用于從哺乳動物口腔內釋放嗜中性白血球細胞的新型溶液,采用該溶液作為口腔內含物中嗜中性白血球細胞的取樣溶液,可以從口腔釋放嗜中性白血球,而不傷害人體,并能固定保留嗜中性白血球的多形核特征,可以確保獲得具有一致性和可重復性的結果;其次, 基于上述溶液以及包括該溶液的試劑盒,本發(fā)明提供了檢測親密度影響指數(shù)的方法,通過測量口腔內嗜中性白血球細胞的數(shù)量,可間接檢測和評價影響人際關系度的指數(shù)。
以下,結合附圖來詳細說明本發(fā)明的實施例,其中圖1為潰瘍樣點及其清除工具,其中IA 潰瘍出現(xiàn)在腭扁桃體附近;IB —個專門設計的工具“除炎刷”,它可以用來清除嵌入在口腔中的炎癥源;IC 一個潰瘍樣點出現(xiàn)在黏膜牙齦交界處附近;ID 潰瘍樣點清洗后痊愈。圖2為口炎斑和嗜中性白血球,其中2A 用除炎刷清洗后,從一個潰瘍樣點釋放來的褐色分泌物(箭頭所示);2B:褐色分泌物用Turk’ s溶液染色,該分泌物含有大量的嗜中性白血球,食物殘渣似乎是相關的(箭頭);2C 分泌物中的細胞具有典型的多形核特征; 2D 樣品用吖啶橙(Acridineorange)染色,在熒光顯微鏡下觀察。圖3為口腔內發(fā)生炎癥提出的模型。
具體實施例方式下面結合具體的實施例,并參照數(shù)據(jù)進一步詳細描述本發(fā)明。應理解,這些實施例只是為了舉例說明本發(fā)明,而非以任何方式限制發(fā)明的范圍。在以下的實施例中,未詳細描述的各種過程和方法是本領域中公知的常規(guī)方法。 所用試劑的來源、商品名以及有必要列出其組成成分者,均在首次出現(xiàn)時標明,其后所用相同試劑如無特殊說明,均以首次標明的內容相同。
實施例1 對口腔中釋放的嗜中件白血球細胞數(shù)的檢測此實施例中測試了接受潰瘍樣點清除治療的患者(下稱“一號病人”)和未接受相應治療的普通患者(下稱“二號病人”)在10個月前后的口腔內的嗜中性白血球細胞數(shù)目。所述一號病人45歲,患有15年牙周炎,伴隨有偶爾的口臭和口腔潰瘍;二號病人 30歲,患有口腔潰瘍并且經常發(fā)生口臭。在2010年1月1日和2010年10月2日分別對一號病人和二號病人分別進行了口腔嗜中性白血球細胞數(shù)目的檢測,具體檢測步驟如下1、收集口腔中的嗜中性白血球細胞,用適量的取樣緩沖液漱口,以釋放口腔中的嗜中性白血球細胞。采用15毫升的取樣緩沖液進行兩次洗漱口腔,每次30秒,從口中釋放嗜中性白血球細胞,將所得的漱口液樣本混合為30毫升的樣本。該取樣緩沖液為0. 4克/L 氯化鉀,0. 06克/L無水磷酸二氫鉀,8. 0克/L氯化鈉,0. 04788克/L無水二元磷酸鈉,1. 0 克/L D-葡萄糖和0. 011克/L酚紅鈉;2、用固定液將嗜中性白血球細胞固定。采用2. 5%的甲醛固定嗜中性白血球細胞, 然后在4攝氏度環(huán)境下儲藏,直至使用。3、如果嗜中性白血球細胞濃度偏低,需要將其濃縮,以便于準確計算。在這一具體的實施例中,在20g的離心轉速下,集中嗜中性白血球細胞。4、在進行特異性染色之后,檢測和計算嗜中性白血球細胞數(shù)。在這一具體的實施例中,嗜中性白血球細胞由1.6%的吖啶橙(Aridine orange) (AO)染色,然后在熒光顯微鏡下進行觀察和計數(shù)。嗜中性白血球細胞數(shù)也可以由該細胞所特有的成分(或產物)濃度所反映;在口腔取樣時,可收集這一特有的成分(或產物),然后進行定量分析,測定其濃度。所測定的嗜中性白血球細胞特有成分(或產物)可能是蛋白質、去氧核糖核酸、核糖酸或其它在其細胞所特有的成分(或產物)。這些特有成分(或產物)的檢測和定量分析,可以由現(xiàn)有的可知的方法進行。在科技文獻中,現(xiàn)有很多方法用來檢測蛋白質、去氧核糖核酸、核糖酸和其它化合物。比如說,ELISA可以檢測蛋白質;PCR可以檢測去氧核糖核酸;特異性探針雜交可以檢測RNA ;小分子化合物可以由高壓液相色譜或氣象色譜檢測等等。檢測結果見下表1。表1、一號病人和二號病人的嗜中性白血球細胞數(shù)和親密度影響指標的比較
權利要求
1.一種用于釋放口腔內嗜中性白血球細胞的溶液,其特征在于,所述溶液包括用于釋放口腔內嗜中性白血球細胞的鹽離子和酸離子;優(yōu)選地,所述鹽離子和酸離子由化合物提供,所述化合物選自氯化鉀,氯化鈉和磷酸鈉的一種或多種。
2.如權利要求1所述的溶液,其特征在于,所述溶液可進一步包含用于提供細胞所需能量的化合物;優(yōu)選地,提供所述細胞所需能量的化合物為D-葡萄糖。
3.如權利要求1或2所述的溶液,其特征在于,所述溶液可進一步包含用于調節(jié)該溶液的PH值和緩沖性能的化合物;優(yōu)選地,所述化合物選自無水磷酸二氫鉀,磷酸鈉和無水磷酸氫二銨的一種或多種。
4.如權利要求1-3中任一項所述的溶液,其特征在于,所述溶液可進一步包含用于著色的化合物;優(yōu)選地,所述化合物為酚紅鈉。
5.如權利要求1-4中任一項所述的溶液,其特征在于,所述溶液包含0.01-10. 00克/ L氯化鉀,0.01-10. 00克/L無水磷酸二氫鉀,0.01-10. 00克/L氯化鈉,0. 01-10. 00克/L 無水二元磷酸鈉,0. 01-10. 00克/L D-葡萄糖和0. 01-0. 02克/L酚紅鈉;優(yōu)選地,所述溶液包括0. 4克/L氯化鉀,0. 06克/L無水磷酸二氫鉀,8. 0克/L氯化鈉, 0. 04788克/L無水二元磷酸鈉,1. 0克/L D-葡萄糖和0. 011克/L酚紅鈉。
6.如權利要求1-5中任一項所述的溶液,其特征在于,所述溶液為水溶液、酒精溶液或葡萄糖溶液;優(yōu)選地,所述酒精溶液中的酒精濃度為1-70% ;優(yōu)選地,所述葡萄糖溶液中的葡萄糖濃度為0. 1-15%。
7.一種用于檢測口腔內嗜中性白血球細胞數(shù)量的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括如權利要求1-6中任一項所述的溶液。
8.如權利要求7所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒進一步包括用于特異性固定所述嗜中性白血球細胞的固定劑;和/或用于對所述嗜中性白血球細胞進行特異性染色的染色劑;優(yōu)選地,所述固定劑為甲醛;優(yōu)選地,所述染色劑為吖啶橙。
9.如權利要求7或8所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒進一步包括檢測嗜中性白血球細胞的特異成分或產物所需的檢測試劑;優(yōu)先地,所述特異性成分為中性粒細胞彈性蛋白酶,組織蛋白酶G,髓過氧化物酶,乳鐵蛋白和明膠酶的一種或多種;其檢測試劑包括檢測該特異蛋白所需的抗體及其相應的檢測試劑;其檢測試劑為酶聯(lián)反應所需的試劑。
10.如權利要求1-6中任一項所述的溶液或如權利要求7-9中任一項所述的試劑盒在制備用于檢測口腔內嗜中性白血球細胞數(shù)量的產品中的應用。
11.一種檢測哺乳動物親密度影響指數(shù)的方法,其特征在于,所述方法包括檢測包含所述哺乳動物口腔內含物的樣本中嗜中性白血球細胞的數(shù)量;優(yōu)選地,所述親密度影響指數(shù)為個性化的親密度影響指數(shù)或比較性親密度影響指數(shù);優(yōu)選地,所述哺乳動物是人。
12.如權利要求11所述的方法,其特征在于,所述方法包括1)使所述哺乳動物用適量溶液漱口,從而獲得包含所述哺乳動物口腔內含物的溶液;2)使用固定劑固定經步驟1)獲得的溶液中的嗜中性白血球細胞;3)使用染色劑將經步驟幻固定的嗜中性白血球細胞進行染色并計數(shù);優(yōu)選地,在步驟幻前,先離心所述包含哺乳動物口腔內含物的溶液;進一步優(yōu)選地,所述離心速度為20-100g,時間為10-30分鐘;更優(yōu)選地,所述離心速度為20g,時間為10分鐘。
13.如權利要求12所述的方法,其特征在于,所述步驟1)中的溶液為如權利要求1-6 中任一項所述的溶液;優(yōu)選地,所述步驟2、中的固定劑為甲醛;進一步優(yōu)選地,所述固定劑為2. 5%的甲醛;優(yōu)選地,所述步驟幻中的染色劑為吖啶橙;進一步優(yōu)選地,所述染色劑為1. 6%的吖啶橙。
14.如權利要求10-13中任一項所述的方法,其特征在于,所述方法進一步包括通過將所述樣本中檢測到的嗜中性白血球細胞的數(shù)量和被檢測哺乳動物在健康狀態(tài)下口腔內的嗜中性白血球細胞的數(shù)量進行比較,計算所述哺乳動物的個性化的親密度影響指數(shù)。
15.如權利要求10-14中任一項所述的方法,其特征在于,所述方法進一步包括通過將所述樣本中檢測到的嗜中性白血球細胞的數(shù)量和健康狀態(tài)下的哺乳動物參照者口腔內的嗜中性白血球細胞的數(shù)量進行比較,計算所述哺乳動物的比較性親密度影響指數(shù);優(yōu)選地,所述健康狀態(tài)下的哺乳動物參照者口腔內的嗜中性白血球細胞的數(shù)量為 10000。
16.一種檢測哺乳動物親密度影響指數(shù)的方法,其特征在于,所述方法包括檢測包含所述哺乳動物口腔內含物的樣本中嗜中性白血球細胞特異成分或產物的含量,所述特異性成分選自中性粒細胞彈性蛋白酶,組織蛋白酶G,髓過氧化物酶,乳鐵蛋白和明膠酶的一種或多種;優(yōu)選地,所述親密度影響指數(shù)為個性化的親密度影響指數(shù)或比較性親密度影響指數(shù);優(yōu)選地,所述哺乳動物是人。
17.如權利要求16所述的方法,其特征在于,所述方法進一步包括通過將所述樣本中檢測到的嗜中性白血球細胞特異成分或產物的含量和被檢測哺乳動物在健康狀態(tài)下口腔內的嗜中性白血球細胞特異成分或產物的含量進行比較,計算所述哺乳動物的個性化的親密度影響指數(shù)。
18.如權利要求16所述的方法,其特征在于,所述方法進一步包括通過將所述樣本中檢測到的嗜中性白血球細胞特異成分或產物的含量和健康狀態(tài)下的哺乳動物參照者口腔內的嗜中性白血球細胞特異成分或產物的含量進行比較,計算所述哺乳動物的比較性親密度影響指數(shù)。
19.一種檢測哺乳動物口腔衛(wèi)生改善情況的方法,其特征在于,所述方法包括在對哺乳動物口腔衛(wèi)生進行改善之前和之后,根據(jù)權利要求10-18中任一項所述方法分別檢測哺乳動物親密度影響指數(shù),然后比較改善之前和之后的親密度影響指數(shù);優(yōu)選地,所述親密度影響指數(shù)為個性化的親密度影響指數(shù)或比較性親密度影響指數(shù);優(yōu)選地,所述哺乳動物是人。
全文摘要
本發(fā)明提供了用于從哺乳動物口腔內釋放嗜中性白血球細胞的溶液,以及包含所述溶液的試劑盒。此外,本發(fā)明還提供了檢測哺乳動物親密度影響指數(shù)的方法。所述親密度影響指數(shù)可以由從口腔中所獲取的嗜中性白血球細胞數(shù)或嗜中性白血球細胞特有的成分或產物的濃度所表達。此外,本發(fā)明還公開了檢測哺乳動物口腔衛(wèi)生改善情況的方法。
文檔編號C12Q1/06GK102559836SQ20101058852
公開日2012年7月11日 申請日期2010年12月15日 優(yōu)先權日2010年12月15日
發(fā)明者潘申權 申請人:潘申權