專利名稱：茶類提取物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及甜味、釅味和香味強(qiáng)、澀味淡的茶類提取物。
背景技術(shù)：
近年來市場上出現(xiàn)了將茶類飲料填充于罐或PET瓶等中的商品，由于是消費(fèi)者習(xí)慣的甜味，因此獲得了很高的支持，其產(chǎn)量日益增加。最近的傾向是，人們偏好香味或釅味強(qiáng)、澀味得到抑制的茶類飲料。制備茶類提取物時(shí)，作為用酶制劑進(jìn)行處理的方法，人們提出了如下方法:結(jié)合使用原果膠酶和纖維素酶來提取茶葉的方法(參照專利文獻(xiàn)I);將紅茶葉用鞣酸酶處理的方法(參照專利文獻(xiàn)2);用果膠酶、淀粉酶和多酚氧化酶處理的方法(參照專利文獻(xiàn)3);含浸淀粉酶或蛋白酶或纖維素酶或者它們的混合酶的水溶液，使其干燥，接著在100-170°C下加熱烘烤的谷物茶的制備方法(參照專利文獻(xiàn)4);用粘性淀粉和選自a-或￠-淀粉酶、纖維素酶和蛋白酶的至少I種酶的混合物提取的速溶茶的制備方法(參照專利文獻(xiàn)5);將紅茶的葉用鞣酸酶和至少一種細(xì)胞壁消化酶濕潤的方法(參照專利文獻(xiàn)6);將茶葉提取殘?jiān)美w維素酶和蛋白酶處理的方法(參照專利文獻(xiàn)7);將茶類的熱水提取液預(yù)先用鞣酸酶處理，然后冷凍濃縮的方法(參照專利文獻(xiàn)8);使綠原酸酯酶與茶提取液作用，制備渾濁少的茶類飲料的方法(參照專利文獻(xiàn)9);茶類提取物的制備方法，其特征在于:在蛋白酶和鞣酸酶的存在下提取茶類原料(參照專利文獻(xiàn)10);茶葉提取液的制備方法，其特征在于:使用至少含有纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶和原果膠酶的酶組，對茶葉進(jìn)行酶解提取處理(參照專利文獻(xiàn)11);茶類提取物的提取方法，其特征在于:在蛋白酶存在下，將茶葉用水提取，進(jìn)一步將所得提取液用蛋白酶進(jìn)行處理(參照專利文獻(xiàn)12);茶類提取物的制備方法，其特征在于:在茶類原料提取時(shí)和/或提取后，用葡糖淀粉酶、半纖維素酶、果膠酶、甘露聚糖酶、轉(zhuǎn)化酶或a-半乳糖苷酶等的糖分解酶進(jìn)行酶解處理(參照專利文獻(xiàn)13);茶類提取物的制備方法，其特征在于:使用產(chǎn)生緋紅密孔菌(Pycnoporus coccineus)的酶和纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶或原果膠酶，對茶類原料進(jìn)行酶解提取處理(參照專利文獻(xiàn)14)等。但是，這些方法雖然在改善呈現(xiàn)的甜味、釅味、香味等味道、提高收率上取得了一定的成果，但茶的提 取殘?jiān)羞€殘留有細(xì)胞壁或蛋白質(zhì)等有用成分，難以說已將它們完全有效地利用?，F(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)1:日本特公昭46-17958號公報(bào)專利文獻(xiàn)2:日本特公昭52-42877專利文獻(xiàn)3:日本特公昭62-15175號公報(bào)專利文獻(xiàn)4:日本特開昭57-47465號公報(bào)專利文獻(xiàn)5:日本特公平1-47979號公報(bào)專利文獻(xiàn)6:日本特公平4-63662號公報(bào)
專利文獻(xiàn)7:日本特許第3157539號公報(bào)專利文獻(xiàn)8:日本特開平5-328901號公報(bào)專利文獻(xiàn)9:日本特開平11-308965號公報(bào)專利文獻(xiàn)10:日本特開2003-144049號公報(bào)專利文獻(xiàn)11:日本特開2003-210110號公報(bào)專利文獻(xiàn)12:日本特開2008-67631號公報(bào)專利文獻(xiàn)13:日本特開2008-86280號公報(bào)專利文獻(xiàn)14:日本特開2008-125477號公報(bào)

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于:通過提取在以往對茶葉進(jìn)行的酶處理提取中未能分解、提取盡的來自茶葉的細(xì)胞壁成分，并且伴隨細(xì)胞壁成分的分解將可提取的蛋白質(zhì)進(jìn)一步分解為氨基酸，豐富地提取氨基酸成分，結(jié)果提供富有甜味、釅味和香味、且澀味淡的茶類提取物。茶葉中含有約25%的蛋白質(zhì)(第5次修訂食品成分表)，如果將該蛋白質(zhì)用蛋白酶分解，預(yù)計(jì)可獲得香味強(qiáng)的茶類提取物。但是，即使只使蛋白酶與茶葉作用，也未見有那么多的氨基酸游離。本申請人在之前的研究中推測茶葉中的蛋白質(zhì)可能與鞣質(zhì)結(jié)合，并進(jìn)行了深入的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn):通過在蛋白酶和鞣酸酶的存在下提取茶類原料，得到了香味和釅味強(qiáng)、澀味淡的茶類提取物，并在之前提出了專利申請(參照前述專利文獻(xiàn)10)。但是，即使實(shí)施專利文獻(xiàn)10中記載的方法，也可看到提取后的茶葉中還殘留有相當(dāng)多的未提取的細(xì)胞壁成分和蛋白質(zhì)。本發(fā)明人認(rèn)為應(yīng)有效利用該未被提取的、殘留的細(xì)胞壁成分和蛋白質(zhì)，為此進(jìn)行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在果膠酶中，特別是多聚半乳糖醛酸酶可高效分解茶葉的細(xì)胞組織。為了分解茶葉中的果膠質(zhì)、增加可溶性固形成分，通常認(rèn)為增加所添加的多聚半乳糖醛酸酶的活性單位即可。但是，市售的幾乎所有的果膠酶中，多聚半乳糖醛酸酶的活性單位都不太高，采用常規(guī)添加量(相對于茶葉為0.1-2質(zhì)量％左右)，則效果小，另外，如果大量添加，則來自酶制劑的賦形劑或酶的蛋白質(zhì)使所得茶類提取物的味道變淡，產(chǎn)生與茶不同的不自然的甜味，或產(chǎn)生雜味等，對呈現(xiàn)的味道產(chǎn)生不良影響。本發(fā)明人為解決該問題進(jìn)行了進(jìn)一步的研究，結(jié)果令人驚異地發(fā)現(xiàn):在茶葉中除了加入蛋白酶和鞣酸酶，再進(jìn)一步添加具有20000U/g以上的多聚半乳糖醛酸酶活性的酶制劑，使相對于Ig茶葉多聚半乳糖醛酸酶活性為800U以上，進(jìn)行提取，則茶葉的可溶性固形成分收率飛躍性提高，大量生成半乳糖醛酸，另外氨基酸收率也提高，所得提取物富有甜味、釅味和香味，從而完成了本發(fā)明。即，本發(fā)明提供茶類提取物，其特征在于:至少含有鞣質(zhì)、氨基酸和半乳糖醛酸，
(a)以茶類提取物的全部固形成分(換算為Bx)為基準(zhǔn)，含有1.1-5質(zhì)量％半乳糖醛酸，(b)半乳糖醛酸/鞣質(zhì)的質(zhì)量比為0.04-0.8 ； (c)半乳糖醛酸/氨基酸的質(zhì)量比為0.08-0.8。本發(fā)明的茶類提取物將用作原料的茶類原料的約40質(zhì)量％ -約80質(zhì)量％轉(zhuǎn)換為可溶性固形成分，可大幅提高來自茶類原料的提取物收率，大量含有半乳糖醛酸。還可提高來自茶類原料的氨基酸收率。并且，本發(fā)明的茶類提取物富含甜味、釅味和香味，通過添加到茶類飲料等中，可以使茶類飲料等具有甜味、釅味和香 味，或使茶類飲料等的甜味、釅味和香味增強(qiáng)。通過茶類原料的酶處理制備本發(fā)明的茶類提取物時(shí)，伴隨著酶處理，酶處理中的粘度降低，變得流暢Q b )，可以容易地進(jìn)行從酶處理漿中分離茶葉殘?jiān)牟襟E。具體來說，可大幅縮短分離、過濾等作業(yè)所需的時(shí)間，可提高制備中的作業(yè)性，通過縮短作業(yè)時(shí)間，得到可降低制備成本的效果。實(shí)施發(fā)明的方式本發(fā)明的茶類提取物例如可通過將茶類原料添加蛋白酶、鞣酸酶、和具有20000U/g以上的多聚半乳糖醛酸酶活性的酶制劑，進(jìn)行提取處理來制備。上述茶類原料可舉出:由山茶科的常綠樹茶(學(xué)名:Camelliasinensis (L)
0.Kuntze)的芽、葉、莖等得到的鮮葉、經(jīng)制茶的不發(fā)酵茶、半發(fā)酵茶和發(fā)酵茶。不發(fā)酵茶例如可舉出煎茶、粗茶、焙茶、玉露、蓋茶、天茶等蒸制的不發(fā)酵茶，或嬉野茶、青柳茶、各種中國茶等的炒制茶等的不發(fā)酵茶；半發(fā)酵茶例如可舉出包種茶、鐵觀音茶、烏龍茶等；發(fā)酵茶例如可舉出紅茶、普洱茶、阿波粗茶、巖茶等。也可使用將不發(fā)酵茶或半發(fā)酵茶用花加香得到的茶等。其中，特別從可獲得具有清新自然的香氣或甜味、香味等的茶類提取物考慮，優(yōu)選綠茶、烏龍茶、茉莉花茶等。上述的茶類原料的酶處理中使用的蛋白酶是將蛋白質(zhì)或肽的肽鍵水解的酶。所述蛋白酶沒有特別限定，可以使用來自動植物或來自微生物的蛋白酶，例如可舉出蛋白酶
”、蛋白酶M uT-^J ”、蛋白酶P “7 I J ”3G、蛋白酶N “7* 7 7 ”、胰酶制劑F、木瓜蛋白酶W-40、菠蘿蛋白酶F(以上由天野二 i A制備)^千一K (注冊商標(biāo))AP、LP、MP、FP、LPL(以上由新日本化學(xué)工業(yè)制備)；7°口々 > (注冊商標(biāo))FN (大和化成制備)；r f 7° V > (注冊商標(biāo))2P、f''f f 一^ (注冊商標(biāo))AP、XP-415、食品用純化木瓜蛋白酶、匕' 才7。5—七(注冊商標(biāo))XL-416F、SP-4FG、SP-15FG(以上由于免夂’ k吁、” > 制備)；才丨j工 > 夕一七(注冊商標(biāo))228卩、90隊(duì)0吧、20八(以上由工^ t ^ 7 4制備)；壬卟'> >(注冊商標(biāo))F、F1D酶、IP酶、AO-蛋白酶(以上由今、y 3 — 7 >制備);寸力f 一七(科研7 7 制備的來自米曲菌的蛋白酶) 夕''一七(注冊商標(biāo))NP-2、P、可溶性木瓜蛋白酶(廣^ ^ > y ^ 7" A )、蛋白酶YP-SS(以上由\ ^卜藥品工業(yè)制備)；7 > — K開'^ A (注冊商標(biāo))、7° U ” I (注冊商標(biāo))、二二一卜9 一七(注冊商標(biāo))、7 >力’一七(注冊商標(biāo))(八卞'開M A文制備)；- >7 7--t￡ (注冊商標(biāo))SS、P(以上由三菱化學(xué) 7 一 X 制備)；VER0N PS、C0R0LASE PN-L、C0R0LASE N、C0R0LASE 7089、VERON W、VERON P (以上由AB工 > 開'4 A制備);7。口予> P、r 7今 >、于.' 匕。> < 義、7?？谟?gt; A、寸*7 —￥ (注冊商標(biāo))(以上由大和化成制備)；才1J工 > 夕一七(注冊商標(biāo))90N、10NL、22BF、s夕X '> > (注冊商標(biāo))(以上由工4予匕' 4 7 4制備)；7 口 7—七(注冊商標(biāo))AP-1O ( ^^卜藥品工業(yè)制備)；工 口 > NBS (洛東化成工業(yè)制備)^ f f—七(注冊商標(biāo))八5、八卩(以上由科研77;^制備)；堿性蛋白酶61440、匕、97工夕卜(注冊商標(biāo))4000L、蛋白酶899、7° 口 f 7 6L、夕'> f 一七(注冊商標(biāo))(夕工才、> ^ 7協(xié)和制備)；以及來自動物的胃蛋白酶、胰蛋白酶等。這些蛋白酶可分別單獨(dú)或?qū)?種以上組合使用。這些蛋白酶的使用量根據(jù)效力等而不同，不能一概而論，例如每Ig茶類原料，通常在約
0.0lU-約100U，優(yōu)選約IU-約80U的范圍內(nèi)。

作為上述茶類原料的酶處理中使用的鞣酸酶，只要具有分解鞣質(zhì)的活性即可，沒有特別限定，可使用任意鞣酸酶。具體來說，例如有:將屬于曲霉屬、青霉屬、根霉屬、毛霉屬等的鞣酸酶生產(chǎn)菌用這些絲狀菌的培養(yǎng)中通常使用的培養(yǎng)基，按照常規(guī)方法進(jìn)行固體培養(yǎng)或液體培養(yǎng)，按照常規(guī)方法對所得的培養(yǎng)物或其處理物進(jìn)行純化處理而得到的鞣酸酶。需說明的是，也可以使用市售的鞣酸酶，例如鞣酸酶” H > (5，ooou/g)” (今、y 2 —I >制備)、鞣酸酶” H > (500U/g)”(々、y H >制備)、鞣酸酶(三菱化學(xué)7一*制備)、7 ^十一k TAN(新日本化學(xué)制備)等。這些鞣酸酶可分別單獨(dú)或?qū)?種以上組合使用。鞣酸酶的使用量根據(jù)效力等而不同，不能一概而論，例如每Ig茶類原料，通常在約0.1U-約50U，優(yōu)選約0.5U-約45U的范圍內(nèi)。本發(fā)明中，除上述的蛋白酶和鞣酸酶之外，通過添加具有20000U/g以上的多聚半乳糖醛酸酶活性的酶制劑，優(yōu)選使每Ig茶類原料的多聚半乳糖醛酸酶活性為800U以上，進(jìn)行提取，可得到目標(biāo)茶類提取物。由此，來自茶葉原料的可溶性固形成分收率飛躍性提高，所得茶類提取物富含半乳糖醛酸和氨基酸，且可得到甜味、釅味和香味豐富的顯著效果。將茶類原料用果膠酶處理并提取的技術(shù)在本申請?zhí)岢鲋熬褪且阎?。茶類原料中除了加入蛋白酶和鞣酸酶之外，在添加果膠酶進(jìn)行提取時(shí)，與只添加蛋白酶和鞣酸酶進(jìn)行提取時(shí)比較可得到一定的效果。但是，若茶類原料中除了添加蛋白酶和鞣酸酶，還按照每Ig茶類原料通常添加800U以上、優(yōu)選1000U以上、進(jìn)一步優(yōu)選1000U-10000U、更進(jìn)一步優(yōu)選1500U-5000U的多聚半乳糖醛酸酶進(jìn)行提取處理，則發(fā)生茶葉原料(干燥茶葉)中約40質(zhì)量％ -約80質(zhì)量％可溶這樣令人驚訝的現(xiàn)象，伴隨細(xì)胞壁成分的分解，大量生成半乳糖醛酸，并且氨基酸的提取量也增加，伴隨這些增加，香味、甜味、釅味等增強(qiáng)，證明可以高收率得到風(fēng)味豐富的茶類提取物。多聚半乳糖醛酸酶是果膠酶的一種。通常被歸類于果膠酶的酶中包含多聚半乳糖醛酸酶、果膠裂解酶和果膠甲酯酶。多聚半乳糖醛酸酶是水解果膠中的多聚半乳糖醛酸主鏈的a-1，4鍵的酶，果膠裂解酶是通過￠-消去反應(yīng)來分解果膠中的多聚半乳糖醛酸主鏈的a-1，4鍵的酶，果膠甲酯酶是水解果`膠的甲基酯的酶。果膠酶是位于破壞植物組織的酶組中心的酶，如上所述，將茶類原料用果膠酶處理并提取的技術(shù)在本申請?zhí)岢鲋熬褪且阎?。但是，即使以常?guī)添加量使用以往的例如上述專利文獻(xiàn)等中記載的果膠酶對茶類原料進(jìn)行酶處理，也很難說充分分解了茶類的細(xì)胞組織。為此，在研究果膠酶中的多聚半乳糖醛酸酶、果膠裂解酶、果膠甲酯酶的哪一種對茶類的細(xì)胞組織特別有效時(shí)，發(fā)現(xiàn)單獨(dú)的多聚半乳糖醛酸酶即是有效的，通過使用具有比以往使用的高的活性單位的該酶，細(xì)胞組織得到充分分解。需說明的是，本說明書中，多聚半乳糖醛酸酶活性是通過下述方法測定的值:按照y ^ ^ ^ y >法(J.Biol.Chem.153，375-380，1994年)，以多聚半乳糖醛酸水溶液為底物，使多聚半乳糖醛酸酶與其作用，將酶促反應(yīng)產(chǎn)物——還原糖用比色法進(jìn)行定量；1單位(IU)的酶是指I分鐘內(nèi)生成I U mo I半乳糖醛酸的酶量。上述果膠酶的市售商品例如可舉出:果膠酶PL “ n 7 ”、果膠酶G “ 7 7 7 ”(以上由天野工'U ^制備)、果膠酶_G0D0(合同酒精制備)、^ ^(注冊商標(biāo))A、N、S(以上由三菱化學(xué)7—文'制備)、7 m (注冊商標(biāo))AP-2、SPC、SPG、MC、PX、液狀7 ^子一 A AP-2、(以上由新日本化學(xué)工業(yè)制備)、果膠酶XP-534( f -fc ^ A r ^ ^制備)、 夕子木義夕7 (注冊商標(biāo))、 夕子木義夕7 9卟卜歹SP-L,々卟卜歹開M A (注冊商標(biāo))、tf A (注冊商標(biāo))、'> 卜口 A (注冊商標(biāo))、一 A (注冊商標(biāo))(以上由)術(shù)7卟7夕/SM才j >夕' 7卜'J 一制備)；七卟口 -> > (注冊商標(biāo))PC5、PE60、PEL、可溶性果膠酶T(以上由工^ T ^制備)、果膠酶SS、果膠酶HL(以上由\夕^卜藥品工業(yè)制備)等。其中，特別是作為多聚半乳糖醛酸酶活性高的果膠酶，可舉出例如7m AP-2、SPC、SPG(以上由新日本化學(xué)工業(yè)制備)。普通的市售果膠酶制劑的多聚半乳糖醛酸酶活性通常為500U/g_約20000U/g左右。因此，為了在Ig茶葉原料中添加800U，必須在Ig茶葉原料中添加0.04g-l.6g這樣大量的果膠酶制劑。此時(shí)，例如相對于Ig茶葉原料添加0.06g以上、特別是0.08g以上的酶制劑量，則賦形劑或其它成分的影響在茶類提取液中較強(qiáng)，所得茶類提取物的味道變淡，帶來與茶不同的不自然的甜味，產(chǎn)生雜味等，對呈現(xiàn)的味道產(chǎn)生不良影響。因此，作為多聚半乳糖醛酸酶活性，原本可以直接使用具有20000U/g以上的高活性的果膠酶，但如果是多聚半乳糖醛酸酶活性低于20000U/g的果膠酶制劑，則例如需要將該酶制劑通過水混合性有機(jī)溶剤(丙酮、乙醇等)沉淀、等電點(diǎn)沉淀、超濾、凝膠過濾等純化，回收多聚半乳糖醛酸酶活性為20000U/g以上的組分來使用。提取處理時(shí)，除上述的蛋白酶、鞣酸酶和多聚半乳糖醛酸酶之外，可以通過進(jìn)一步添加來自長枝木霉(Trichoderma 1ngibrachiatum)或里氏木霉(Trichoderma reesei)的纖維素酶進(jìn)行提取，進(jìn)一步高效地分解茶葉組織，增加水溶性成分的提取效率。如上所述，將茶類用纖維素酶處理并提取的技術(shù)在本申請之前是已知的。茶類原料中除了添加蛋白酶和鞋酸酶之外，還添加來自黑曲霉(Aspergillus niger)或綠色木霉(Trichoderma viride)等的纖維素酶進(jìn)行提取時(shí),與只添加蛋白酶和鞋酸酶進(jìn)行提取時(shí)比較，可得到一定的效果。但是，茶類原料中除了添加蛋白酶和鞣酸酶，進(jìn)一步添加來自長枝木霉或里氏木霉的纖維素酶進(jìn)行提取時(shí)，細(xì)胞組織得到充分分解。上述來自長枝木霉或里氏木霉的纖維素酶例如可舉出:★> a > (注冊商標(biāo))T3(工^ f 7 ^制備)、7 S f —A (注冊商標(biāo))CS、C(以上由新日本化學(xué)工業(yè)制備)、纖維素酶SS( f -fc A r ^ ^制備)、^ ^(注冊商標(biāo))C(三菱化學(xué)7—文制備)等。來自長枝木霉或里氏木霉的纖維素酶的使用量根據(jù)效力等而不同，不能一概而論，例如每Ig茶類原料，通常 在約0.1U-約200U，優(yōu)選約0.5U-約100U，更優(yōu)選約IU-約50U的范圍內(nèi)。本發(fā)明中，在不妨礙本發(fā)明效果的范圍內(nèi)，可以進(jìn)一步結(jié)合使用半纖維素酶、原果膠酶、葡糖淀粉酶、葡聚糖酶、甘露聚糖酶、a -半乳糖苷酶等其它的糖分解酶。用于制備本發(fā)明的茶類提取物的一個實(shí)施方案示例如下:準(zhǔn)備相對于I重量份茶類原料溶解了 4質(zhì)量份-40質(zhì)量份水以及根據(jù)需要的茶類原料的0.1質(zhì)量％ -1質(zhì)量％抗壞血酸或抗壞血酸鈉的溶液，向其中添加茶類原料，根據(jù)需要，在約60°C -約121°C下滅菌約2秒-約20分鐘后冷卻。接著，首先加入鞣酸酶，均勻混合，然后進(jìn)一步添加蛋白酶以及具有20000U/g以上的多聚半乳糖醛酸酶活性的酶制劑，使相對于Ig茶類原料，多聚半乳糖醛酸酶活性為800U以上，在約20°C -約60°C下進(jìn)行約30分鐘-約24小時(shí)的酶處理。酶處理后，在約60°C -約121°C下使酶失活約2秒-約20分鐘，冷卻，采用離心分離、濾紙過濾等適當(dāng)?shù)姆蛛x手段進(jìn)行分離，由此可得到澄清的茶類提取物。所得茶類提取物可根據(jù)需要，采用適當(dāng)?shù)臐饪s手段制成濃縮液的形態(tài)。通過以上的酶處理提取，與完全未進(jìn)行酶處理的茶類提取物相比，生成約4倍量-約5倍量的氨基酸。另外，茶類原料的細(xì)胞組織分解，生成大量的半乳糖醛酸，用作原料的茶類中，約40質(zhì)量％ -約80質(zhì)量％可變換成可溶性固形成分。按照上述方法，茶類原料的固形成分收率、氨基酸收率和半乳糖醛酸收率均增加，結(jié)果可得到:(a)以茶類提取物的全部固形成分(換算為Bx)為基準(zhǔn)，含有1.1-5質(zhì)量％半乳糖醛酸、(b)半乳糖醛酸/鞣質(zhì)的質(zhì)量比為0.04-0.8、且(c)半乳糖醛酸/氨基酸的質(zhì)量比為0.08-0.8的茶類提取物；優(yōu)選(a)以茶類提取物的全部固形成分(換算為Bx)為基準(zhǔn)，含有1.2-4質(zhì)量％半乳糖醛酸、(b)半乳糖醛酸/鞣質(zhì)的質(zhì)量比為0.06-0.4、且(c)半乳糖醛酸/氨基酸的質(zhì)量比為0.14-0.6的茶類提取物；更優(yōu)選(a)以茶類提取物的全部固形成分(換算為Bx)為基準(zhǔn)，含有1.3-3質(zhì)量％半乳糖醛酸、(b)半乳糖醛酸/鞣質(zhì)的質(zhì)量比為0.07-0.2、且(c)半乳糖醛酸/氨基酸的質(zhì)量比為0.19-0.4的茶類提取物。需說明的是，半乳糖醛酸給人以抹茶等高級茶的印象，粘稠、具有清爽的酸味，因此推定其具有遮蓋苦澀味、遮 蓋異味、賦予粘稠感(^ 一感)等的作用，推測本發(fā)明的茶類提取物具有甜味、釅味、香味等，半乳糖醛酸的增加是重要的原因之一。因此，作為本發(fā)明的一個實(shí)施方案，可提供茶類提取物中的半乳糖醛酸通過茶類原料的酶解來產(chǎn)生的茶類提取物。本發(fā)明的茶類提取物可根據(jù)需要在填充到容器中之后或填充之前加熱滅菌，由此也可形成可長時(shí)間保管的狀態(tài)。本發(fā)明的茶類提取物通?？梢灾苯右砸后w狀利用，也可根據(jù)需要，在該提取物中添加糊精、化工淀粉、環(huán)糊精、阿拉伯樹膠等賦形劑，制成粉末狀。以下通過實(shí)施例和比較例，進(jìn)一步具體說明本發(fā)明。
實(shí)施例參考例I多聚半乳糖醛酸酶活性的測定(y * ￥—彳、> y >法:參照j.Bio1.Chem.153，375-380，1994 年)在0.9ml含有I %多聚半乳糖醛酸的50mM乙酸緩沖液(pH4.5)中添加0.1ml酶溶液的適當(dāng)?shù)南♂屢骸⑸鲜龌旌先芤涸?5°C下反應(yīng)適當(dāng)?shù)臅r(shí)間，然后在沸水浴中加熱10分鐘，使酶失活，冰冷卻，制成反應(yīng)液。在0.3ml反應(yīng)液中加入0.3ml ” ^ < 一銅試劑，在沸水浴中加熱10分鐘，冰冷卻，加入0.3ml彳、^ ” >試劑，用試管混合器充分?jǐn)嚢?，進(jìn)一步加入3ml離子交換水，用試管混合器充分?jǐn)嚢?。將該溶液用離心分離機(jī)、以9000轉(zhuǎn)處理3分鐘，測定上清液的500nm的吸光度(Abs.)。另一方面，將上述酶溶液的適當(dāng)?shù)南♂屢侯A(yù)先加熱失活，使用該溶液，進(jìn)行與上述完全同樣的操作，以此作為空白吸光度。由所使用的酶濃度、酶促反應(yīng)時(shí)間、吸光度計(jì)算Ig酶I分鐘內(nèi)生成的半乳糖醛酸的U mol數(shù)，以此作為Ig酶的單位⑶。測定的酶和多聚半乳糖醛酸酶活性測定值:7 S f — A AP2 (新日本化學(xué)工業(yè)制備):12400U/g七卟口> PE60( ^ -1 ^ ^ T ^ 制備):20600U/g7 S f — A MC (新日本化學(xué)工業(yè)制備):1690U/g^ ^ 7—-tf N(三菱化學(xué) 7 — 文制備):4550U/g參考例2將IOOg ^ ^子一 ^ AP2(新日本化學(xué)工業(yè)制備，上述測定得到的多聚半乳糖醛酸酶活性:12400U/g)溶解于IOOOg離子交換水，用e7 a —(注冊商標(biāo))50VF05P2 (分級分子量30，000:吁 > 卜U7制備)超濾濃縮，回收30ml未通過的部分，進(jìn)一步冷凍干燥，得到12.0g參考品2 (上述測定得到的多聚半乳糖醛酸酶活性:86500U/g)。實(shí)施例1向在900g軟水中溶解了 0.6g抗壞血酸鈉的溶液中添加IOOg綠茶葉(中國產(chǎn)蒸汽殺青制法)，在80°C下滅菌5分鐘，冷卻至45°C。向其中加入Ig鞣酸酶(三菱化學(xué)7 一文制備:500U/g)，攪拌15分鐘。然后添加Ig蛋白酶M( 7 7工 >開'< A制備:5500U/g)和4.Sg參考品2 (對于Ig茶葉，上述測定得到的多聚半乳糖醛酸酶活性為4152U/g)，溶解后在40°C下進(jìn)行8小時(shí)的酶處理。酶處理后，在90°C下滅菌10分鐘，冷卻至30°C，用漂白布除去茶葉殘?jiān)绦挝镔|(zhì)，然后使用在2號濾紙(8cm)上預(yù)涂了 IOg纖維素粉的真空吸濾過濾器，以一定壓力進(jìn)行吸濾(減壓度13.33KPa)，得到825g澄清的提取液(過濾所需時(shí)間3分42秒)。將該提取液減壓濃縮，得到165.3g Bx48°的濃縮液。將該濃縮液在95°C下加熱滅菌30秒，填充到密閉容器中，然后急速冷卻至常溫，得到本發(fā)明品I的綠茶提取物。實(shí)施例2
實(shí)施例1中，將參考品2的添加量由4.8g改為2.4g(相對于Ig茶葉,上述測定得到的多聚半乳糖醛酸酶活性為2076U/g)，除此之外進(jìn)行與實(shí)施例1完全同樣的操作(過濾所需時(shí)間4分25秒)，得到149.1g本發(fā)明品2。實(shí)施例3實(shí)施例1中，將參考品2的添加量由4.8g改為1.2g(相對于Ig茶葉，上述測定得到的多聚半乳糖醛酸酶活性為1038U/g)，除此之外進(jìn)行與實(shí)施例1完全同樣的操作(過濾所需時(shí)間5分52秒)，得到138.5g本發(fā)明品3。實(shí)施例4實(shí)施例1中，添加5.0g七> 口'> > PE60(相對于Ig茶葉，上述測定得到的多聚半乳糖醛酸酶活性為1030U/g)代替4.Sg參考品2，除此之外進(jìn)行與實(shí)施例1完全同樣的操作(過濾所需時(shí)間5分21秒)，得到146.3g本發(fā)明品4。實(shí)施例5實(shí)施例1中，除4.8g參考品2之外，進(jìn)一步添加0.25g ^彡f 一 A C (新日本化學(xué)工業(yè)制備的來自長枝木霉的纖維素酶:1500U/g)，除此之外進(jìn)行與實(shí)施例1完全同樣的操作(過濾所需時(shí)間3分21秒)，得到167.3g本發(fā)明品5。實(shí)施例6實(shí)施例1中，除4.8g參考品2之外，進(jìn)一步添加0.25g七> 口'> > T3 (工4子匕'制備的來自里氏木霉的纖維素酶:2600U/g)，除此之外進(jìn)行與實(shí)施例1完全同樣的
操作(過濾所需時(shí)間3分32秒)，得到165.4g本發(fā)明品6。參考例3將150g ^ ^子一^ MC(新日本化學(xué)制備，上述測定得到的多聚半乳糖醛酸酶活性:1690U/g)溶解于1500g離子交換水，洗滌，通過離心分離(4，500X g，5分鐘)回收沉淀部分，進(jìn)一步冷凍干燥，得到9.Sg參考品3(上述測定得到的多聚半乳糖醛酸酶活性:20770U/g)。
實(shí)施例1實(shí)施例1中，添加4.9g參考品3 (相對于Ig茶葉，上述測定得到的多聚半乳糖醛酸酶活性為1018U/g)代替4.Sg參考品2，除此之外進(jìn)行與實(shí)施例1完全同樣的操作(過濾所需時(shí)間4分49秒)，得到153.2g本發(fā)明品7。參考例4將IOOg卞m N(三菱化學(xué)7 — X制備，上述測定得到的多聚半乳糖醛酸酶活性:4550U/g)溶解于IOOOg離子交換水，用e7 a —(注冊商標(biāo))50VF05P2 (分級分子量30，000:吁 > 卜U7制備)超濾濃縮，回收25ml未通過的部分，進(jìn)一步冷凍干燥，得到10.0g參考品4(上述測定得到的多聚半乳糖醛酸酶活性:32，000U/g)。實(shí)施例8實(shí)施例1中，添加5.0g參考品4(相對于Ig茶葉，上述測定得到的多聚半乳糖醛酸酶活性為1600U/g)代替4.8g參考品2,除此之外進(jìn)行與實(shí)施例1完全同樣的操作(過濾所需時(shí)間4分16秒)，得到155.4g本發(fā)明品8。比較例I實(shí)施例1中，不使用任何酶，除此之外，進(jìn)行與實(shí)施例1完全同樣的操作(過濾所需時(shí)間10分25秒)，得到比較品I (66.8g)。比較例2
實(shí)施例1中，不使用4.Sg參考品2，除此之外進(jìn)行與實(shí)施例1完全同樣的操作(過濾所需時(shí)間9分57秒)，得到比較品2 (72.9g)。比較例3-5實(shí)施例1中，分別使用2.0g ^ S子一 ^ AP2(新日本化學(xué)工業(yè)制備，相對于Ig茶葉，上述測定得到的多聚半乳糖醛酸酶活性為248U/g)、2.0g ^ ^ ★一 A MC(新日本化學(xué)工業(yè)制備，相對于Ig茶葉，上述測定得到的多聚半乳糖醛酸酶活性為33.8U/g)、2.0g ^々9 一七' N (三菱化學(xué)X制備，相對于Ig茶葉，上述測定得到的多聚半乳糖醛酸酶活性為91U/g)代替4.Sg參考品2，除此之外進(jìn)行與實(shí)施例1完全同樣的操作，得到比較品3-5(將過濾所需時(shí)間和產(chǎn)量與其它測定值一起示于下表I)。比較例6-8 (通過大量使用市售的果膠酶，相對于Ig茶葉，使多聚半乳糖醛酸酶活性為800U以上的例子)實(shí)施例1中，分別添加8.0g ^ ^子一 ^ AP2(新日本化學(xué)工業(yè)制備，相對于Ig茶葉，上述測定得到的多聚半乳糖醛酸酶活性為992U/g)、50.0g ^ ^ ★一 A MC (新日本化學(xué)工業(yè)制備，相對于Ig茶葉，上述測定得到的多聚半乳糖醛酸酶活性為845U/g)、20g ^々7一七' N(三菱化學(xué)X制備，相對于Ig茶葉，上述測定得到的多聚半乳糖醛酸酶活性為910U/g)代替4.Sg參考品2，除此之外進(jìn)行與實(shí)施例1完全同樣的操作，得到比較品6-8 (將過濾所用時(shí)間和產(chǎn)量與其它測定值一起示于下表I)。成分分析對本發(fā)明品1-8和比較品1-8進(jìn)行鞣質(zhì)、氨基酸和半乳糖醛酸的濃度為質(zhì)量基準(zhǔn))的測定。測定方法氨基酸:氨基酸自動分析儀
鞣質(zhì):酒石酸鐵法半乳糖醛酸:高效液相色譜(HPLC)法來自本發(fā)明品1-8和比較品1-8的綠茶原料的產(chǎn)量和各成分的測定值(濃度)以及過濾所用時(shí)間如下表I所示。表權(quán)利要求
1.茶類提取物，其特征在于:至少含有鞣質(zhì)、氨基酸和半乳糖醛酸，(a)以茶類提取物的全部固形成分(換算為Bx)為基準(zhǔn)，含有1.1-5質(zhì)量％半乳糖醛酸， (b)半乳糖醛酸/鞣質(zhì)的質(zhì)量比為0.04-0.8，且 (c)半乳糖醛酸/氨基酸的質(zhì)量比為0.08-0.8。
2.權(quán)利要求1的茶類提取物，其中，茶類提取物中的半乳糖醛酸是由于茶類原料的酶解而產(chǎn)生的。
3.權(quán)利要求1的茶類提取物，其中，(a)以茶類提取物的全部固形成分(換算為Bx)為基準(zhǔn)，含有1.2-4質(zhì)量％半乳糖醛酸， (b)半乳糖醛酸/鞣質(zhì)的質(zhì)量比為0.06-0.4，且 (c)半乳糖醛酸/氨基酸的質(zhì)量比為0.14-0.6。
4.權(quán)利要求1的茶類提取物，其中，(a)以茶類提取物的全部固形成分(換算為Bx)為基準(zhǔn)，含有1.3-3質(zhì)量％半乳糖醛酸， (b)半乳糖醛酸/鞣質(zhì)的質(zhì)量比為0.07-0.2，且 (c)半乳糖醛酸/氨基酸的質(zhì)量比為0.19-0.4。
5.含有權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的茶類提取物的茶類飲料。
全文摘要
本發(fā)明提供茶類提取物，其至少含有鞣質(zhì)、氨基酸和半乳糖醛酸，以茶類提取物的全部固形成分(換算為Bx)為基準(zhǔn)，含有1.1-5質(zhì)量％半乳糖醛酸，半乳糖醛酸/鞣質(zhì)的質(zhì)量比為0.04-0.8，且半乳糖醛酸/氨基酸的質(zhì)量比為0.08-0.8，該茶類提取物的苦澀味被遮蓋，富含甜味、釅味、香味，風(fēng)味均衡性良好。
文檔編號A23F3/16GK103228147SQ201080002450
公開日2013年7月31日 申請日期2010年10月8日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月8日
發(fā)明者陳風(fēng)雷, 川口理衣, 木野遙, 加?xùn)|冴美, 長野和種, 村井弘二, 藤田憐 申請人:長谷川香料株式會社