專利名稱：多酚組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從茶(Camellia Sinensis)得到的多酚組合物。
背景技術(shù)：
近年來，隨著消費(fèi)者的嗜好多樣化、健康意識(shí)高漲的發(fā)展，對多種多樣健康食品上市的需求正在擴(kuò)大。例如，已知多酚具有抗氧化能力，并被人們認(rèn)為是為獲得抗動(dòng)脈硬化、 抗過敏、增強(qiáng)血液流動(dòng)等效果的健康食品的重要成分。這樣的多酚，例如，可以通過使烏龍茶的水提取液與活性炭或者吸附樹脂接觸除去非聚合型兒茶素類之后得到多酚餾分(專利文獻(xiàn)1)。現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)1 國際公開第2005/077384號(hào)小冊子

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種多酚組合物，所述多酚組合物含有來自茶(Camellia Sinensis) 的黃酮醇苷元以及黃酮醇配糖物，其中，以下㈧和⑶的質(zhì)量比[⑶/(A)]為0. 01 18，(A)通過高效液相色譜法測定的水解后的該多酚組合物的固形物中所含的黃酮醇苷元總量。(B)通過酒石酸鐵法測定的該多酚組合物的固形物中所含的多酚總量。本發(fā)明還提供含有上述多酚組合物的飲食品。本發(fā)明還提供上述多酚組合物的制造方法，所述制造方法包含使茶(Camellia Sinensis)提取物吸附在合成吸附劑上的工序、使第1有機(jī)溶劑水溶液與上述合成吸附劑接觸，溶出第1餾分的工序，以及使比上述第1有機(jī)溶劑水溶液的疏水性高的第2有機(jī)溶劑水溶液與溶出上述第1 餾分之后的合成吸附劑接觸，溶出含有多酚組合物的第2餾分的工序。


圖1是表示在試驗(yàn)例1中的食后血糖值推移的圖。圖2是表示在試驗(yàn)例2中的α -淀粉酶活性阻礙作用的圖。圖3是表示在試驗(yàn)例3中的脂肪酶活性阻礙作用的圖。
具體實(shí)施例方式因?yàn)槎喾颖緛砭蜐侗容^重，所以在飲食品中大量含有的情況下，經(jīng)常會(huì)大大降低飲食品的可口性。本發(fā)明者們通過對來自茶(Camellia Sinensis)的多酚組合物進(jìn)行種種研討之后，發(fā)現(xiàn)當(dāng)多酚組合物中的黃酮醇苷元和黃酮醇配糖物的含有比例在特定范圍內(nèi)時(shí)，可以顯著地降低多酚特有的澀味。 通過本發(fā)明，即使含有高濃度的多酚，也能提供能夠降低多酚特有的澀味的來自茶(Camellia Sinensis)的多酚組合物。該多酚組合物雖然有著單獨(dú)使用非聚合型兒茶素類或黃酮醇類所沒有的適口性高的苦味，但是，用甜味劑、調(diào)味料等緩和苦味的話也不會(huì)在后味中出現(xiàn)不協(xié)調(diào)，所以適合作為健康食品等經(jīng)常食用。
首先，針對本說明書中使用的用語進(jìn)行說明。在本說明書中，“多酚”是指通過酒石酸鐵法測定的，具體可舉出黃酮醇類、黃烷-3-醇類、花青素類以及它們的聚合物。黃酮醇類包含槲皮素、楊梅黃素、山奈黃素等以及它們的配糖物，另外黃烷-3-醇類包含兒茶素類，此外它們的聚合物包含茶黃素類、烏龍 ) .(oolonghomobisflavan)“茶(Camellia Sinensis) ”是指山茶科山茶屬的茶樹，根據(jù)加工方法不同，可以大致分為不發(fā)酵茶、半發(fā)酵茶、發(fā)酵茶。其中，優(yōu)選為不發(fā)酵茶。作為不發(fā)酵茶，例如，可以舉出山茶(Camellia)屬，C. var. sinensis (含有藪北種)、C. var. assamica以及從它們的雜交種中選出來的茶制備得到的莖茶、棒茶、芽茶、煎茶、番茶、碾茶、釜炒茶等綠茶。作為半發(fā)酵茶，可舉出總稱為烏龍茶的鐵觀音、色種、黃金桂、武夷巖茶等。作為發(fā)酵茶，可舉出稱為紅茶的大吉嶺茶、烏巴(Uva)茶、祁門等。在此，本說明書中所說的“不發(fā)酵茶、半發(fā)酵茶、 發(fā)酵茶、綠茶、烏龍茶、紅茶”不是指用于飲用的茶提取物，而是指為得到該茶提取物的茶原料。本說明書中所述的“黃酮醇苷元”是指由楊梅黃素、槲皮素以及山奈黃素構(gòu)成的混合物的總稱。在本發(fā)明中的“黃酮醇配糖物”是指具有楊梅黃素、槲皮素以及山奈黃素作為苷元骨架的配糖物，也包括在這些配糖物上進(jìn)一步結(jié)合了糖的物質(zhì)。在本說明書中的“黃酮醇苷元總量”是將包括這些黃酮醇苷元以及黃酮醇配糖物的多酚組合物水解，基于水解后的溶液中所含有的楊梅黃素、槲皮素以及山奈黃素的合計(jì)量來定義的。接下來，針對本發(fā)明的多酚組合物進(jìn)行說明。在本發(fā)明中的多酚組合物其特征在于以特定比例含有以下㈧和⑶。在此，(A)是通過高效液相色譜測定的，在水解后該多酚組合物的固形物中所含有的黃酮醇苷元總量(以下稱為“ (A)黃酮醇苷元總量”)，優(yōu)選(A)黃酮醇苷元總量為0. 7 50質(zhì)量％，從風(fēng)味和溶解性的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選為1. 5 45質(zhì)量％，進(jìn)一步優(yōu)選為5 40質(zhì)量％，更進(jìn)一步優(yōu)選為7 35質(zhì)量％，特別優(yōu)選為9 25質(zhì)量％。另外，(B)是指通過酒石酸鐵法測定的在該多酚組合物的固形物中所含有的多酚總量(以下稱為“⑶多酚總量”)，優(yōu)選⑶多酚總量為5 95質(zhì)量％，從風(fēng)味和溶解于水的溶解性觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選為10 90質(zhì)量％，進(jìn)一步優(yōu)選為15 80質(zhì)量％、更進(jìn)一步優(yōu)選為20 70質(zhì)量％，特別優(yōu)選為25 40質(zhì)量％。在此，在本說明書中“固形物”是指將多酚組合物置于105°C的電恒溫干燥機(jī)中干燥3小時(shí)除去水等揮發(fā)性物質(zhì)之后的殘留成分。上述(A)和(B)的質(zhì)量比[(B)/(A)]為0. 01 18，從降低澀味的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選為0. 01 16，進(jìn)一步優(yōu)選為0. 1 11，更進(jìn)一步優(yōu)選為0. 3 9，更進(jìn)一步優(yōu)選為0. 5 7，特別優(yōu)選為1 5。另外“ (A)黃酮醇苷元總量”以及“⑶多酚總量”是通過后述實(shí)施例中記載的方
法定量的。
另外，本發(fā)明中的多酚組合物可以含有蕓香苷，但是從降低澀味的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選較之從茶(Camellia Sinensis)中提取得到的現(xiàn)有提取物(例如，綠茶提取物、紅茶提取物以及烏龍茶提取物)，本發(fā)明的多酚組合物中的蕓香苷含量高。具體來說，(C)該多酚組合物的固形物中的蕓香苷含量優(yōu)選為0. 4 30質(zhì)量％，從進(jìn)一步降低澀味的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選為0. 8 25質(zhì)量％，更進(jìn)一步優(yōu)選為2 20質(zhì)量％，更進(jìn)一步優(yōu)選為4 15質(zhì)量％，特別優(yōu)選為6 15質(zhì)量％。在此，“蕓香苷”是黃酮醇配糖物的一種，是在槲皮素的3位的氧原子上結(jié)合了蕓香糖(6-0-α-L-鼠李糖基-D-β-葡萄糖)的配糖物。上述質(zhì)量比[(B)/(A)]以及(C)蕓香苷含量在上述范圍內(nèi)的多酚組合物可通過下述工序(1) (3)分離茶(Camellia Sinensis)提取物來得到。(1)使茶(Camellia Sinensis)提取物吸附在合成吸附劑上的工序、(2)使第1有機(jī)溶劑水溶液與上述合成吸附劑接觸，溶出第1餾分的工序，以及(3)使比上述第1有機(jī)溶劑水溶液的疏水性高的第2有機(jī)溶劑水溶液與溶出上述第1餾分之后的合成吸附劑接觸，溶出含有多酚組合物的第2餾分的工序。作為工序(1)中使用的茶(Camellia Sinensis)提取物，例如，可以舉出用熱水或水溶性有機(jī)溶劑從茶(Camellia Sinensis)中提取出來的提取物。茶(Camellia Sinensis) 提取物可以這樣直接使用、也可以通過干燥和濃縮之后使用。作為茶提取物的形態(tài)，可以舉出例如液體、漿體、半固體、固體。作為提取方法來說，可以采用攪拌提取、柱提取、滴濾法提取等公知的方法。另夕卜，作為茶(Camellia Sinensis)提取物，也可以代替上述茶(Camellia Sinensis)提取物，使用用水或有機(jī)溶劑將茶(Camellia Sinensis)提取物的濃縮物溶解或稀釋后得到的物質(zhì)，也可以并用茶(Camellia Sinensis)提取物以及其濃縮物。在此， 茶(Camellia Sinensis)提取物的濃縮物是指從茶(Camellia Sinensis)提取物中除去一部分溶劑所得到的濃縮物，例如，可通過特開昭59-219384號(hào)公報(bào)、特開平4-20589號(hào)公報(bào)、特開平5460907號(hào)公報(bào)、特開平5-306279號(hào)公報(bào)等記載的方法調(diào)制得到。另外也可以使用作為茶(Camellia Sinensis)提取物的濃縮物的市售品，例如，三井農(nóng)林(株)的 “Polyphenol!”、伊藤園(株)的“THEAFLAN”、太陽化學(xué)(株)的“Simphenon”等的綠茶提取物的濃縮物。作為茶(Camellia Sinensis)提取物，優(yōu)選使用綠茶提取物。另外，該茶(Camellia Sinensis)提取物根據(jù)需要可以通過鞣酸酶處理(例如，特開2004-321105號(hào)公報(bào))，也可以經(jīng)過該鞣酸酶處理后使用選自活性炭、酸性白土以及活性白土中的至少1種進(jìn)行進(jìn)一步處理(例如，特開2007-282568號(hào)公報(bào))。作為合成吸附劑，優(yōu)選離子交換能不足lmeq/g、且由不溶性的具有三維交聯(lián)結(jié)構(gòu)的高分子構(gòu)成的吸附劑。另外，合成吸附劑的顆粒形態(tài)可以為球形、不均勻形狀等任意形狀，但是從滿足良好的分離條件考慮優(yōu)選為球形。這樣的吸附劑可通過公知的方法制造得到，也可以使用市售品。作為市售的合成吸附劑，可以舉出例如Amberlite XAD4、XAD16HP、XADl 180, XAD2000(供應(yīng)美國羅門哈斯公司(Rohm&Haas))，DIAION HP20、HP21 (三菱化學(xué)公司制造)，SEPABEADS SP-850、SP-825、SP-700、SP-70 (三菱化學(xué)公司制造)，VP0C1062 (Bayer 制造)等苯乙烯類；SEPABEADS SP205、SP206、SP207 (三菱化學(xué)公司制造)等在芳香環(huán)上導(dǎo)入溴原子提高吸附能的置換苯乙烯類；Diai0nHPlMG、HP2MG(三菱化學(xué)公司制造)等甲基丙酸烯類；AmberliteXAD761 (Rohm&Haas 公司制造)等苯酚類；Amberlite XAD7HP(Rohm&Haas 公司制造)等丙烯酸類；TOYPPEARL、HW-40C(東曹公司制造)等聚乙烯類；SEPHADEX、 LH-20 (Pharmacia公司制造)等葡聚糖類。其中，作為合成吸附劑，其母體優(yōu)選苯乙烯類、甲基丙酸烯類、丙烯酸類、聚乙烯類，從分離能的觀點(diǎn)出發(fā)，特別優(yōu)選苯乙烯類。作為合成吸附劑的使用量的選擇，從分離能的觀點(diǎn)考慮優(yōu)選使茶(Camellia Sinensis)提取物中的非聚合型兒茶素類的總質(zhì)量和合成吸附劑的總?cè)萘恐葹?0 60g/L，進(jìn)一步優(yōu)選為25 55g/L、更進(jìn)一步優(yōu)選為30 50g/L。在工序(1)中，可以采用在茶(Camellia Sinensis)提取物中加入合成吸附劑攪拌吸附之后，再通過過濾操作回收合成吸附劑的間歇方法，或者采用用填充有合成吸附劑的色譜柱進(jìn)行連續(xù)吸附處理的柱方法，但是從生產(chǎn)的觀點(diǎn)考慮優(yōu)選通過柱進(jìn)行的連續(xù)處理方法。在提供給工序(1)時(shí)，茶(Camellia Sinensis)提取物中的非聚合型兒茶素類的濃度，從吸附效率的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選調(diào)整為0. 5 10質(zhì)量％、特別優(yōu)選調(diào)整為0. 8 5質(zhì)量％。為了調(diào)整茶(Camellia Sinensis)提取物中的非聚合型兒茶素類濃度在上述范圍內(nèi)， 可以根據(jù)需要將茶(Camellia Sinensis)提取物濃縮或者稀釋。作為第1和第2有機(jī)溶劑水溶液，可以舉出乙醇、甲醇等醇類，丙酮等酮類，乙酸乙酯等酯類等有機(jī)溶劑的水溶液。作為第2有機(jī)溶劑水溶液，只要是比第1有機(jī)溶劑水溶液的疏水性高的溶液則沒有特別限制，例如，可以使用比第1有機(jī)溶劑水溶液中的有機(jī)溶劑濃度高的水溶液，或者使用含有比第1有機(jī)溶劑的碳原子數(shù)多的有機(jī)溶劑的水溶液。第1 和第2有機(jī)溶劑水溶液中的有機(jī)溶劑濃度可以適當(dāng)設(shè)定，例如，第1有機(jī)溶劑水溶液中的有機(jī)溶劑濃度優(yōu)選為10 45質(zhì)量％、特別優(yōu)選為20 40質(zhì)量％，另外，第2有機(jī)溶劑水溶液中的有機(jī)溶劑濃度優(yōu)選為50 98質(zhì)量％、特別優(yōu)選為50 95質(zhì)量％。作為在上述工序(1)和O)的具體操作方法，可以采用如特開2006-160656號(hào)公報(bào)、特開2008-079609號(hào)公報(bào)等記載的方法。有機(jī)溶劑水溶液的通液條件可以適當(dāng)設(shè)定，第2有機(jī)溶劑水溶液的通液條件可以與第1有機(jī)溶劑水溶液相同，也可以不同。作為第1和第2有機(jī)溶劑水溶液的通液條件，例如，通液速度(SV)優(yōu)選為0. 5 10 [h-1]，特別優(yōu)選為0. 5 5 [h-1]，而且通液倍數(shù)(BV)相對于合成吸附劑的容量之比優(yōu)選為0. 5 10 [ν/ν]，特別優(yōu)選為1 4 [ν/ν]。在工序3之后，通過濃縮第2餾分可以得到疏水性的多酚組合物，濃縮可以通過蒸餾、減壓蒸餾、精餾、薄膜蒸餾、膜濃縮等方法進(jìn)行。另外，在濃縮前或濃縮后可以根據(jù)需要通過過濾以及/或者離心分離處理分離雜質(zhì)。作為多酚組合物的形態(tài)，可以舉出固體、半固體、液體、漿體等種種。另外，在本發(fā)明中，上述多酚餾分中也可以配合從茶(Camellia Sinensis)提取物、其濃縮物以及它們的精制物、以及其他的多酚組合物中選出的至少1種組合物從而調(diào)整到所希望的質(zhì)量比[(B)/(A)]以及(C)蕓香苷含量。在此，茶(Camellia Sinensis)提取物的精制物是指用溶劑或色譜柱從茶(Camellia Sinensis)提取物或者其濃縮物中除去沉淀物等后得到的精制物。作為茶(Camellia Sinensis)提取物、其濃縮物以及它們的精制物的形態(tài)，可以舉出例如固體、水溶液、漿料狀等的種種形態(tài)。另外，配合于多酚餾分中的 “茶(Camellia Sinensis)提取物、其濃縮物以及它們的精制物”，可以是與多酚餾分同種或不同種類的任意的茶(Camellia Sinensis)中提取而來的物質(zhì)。另一方面，作為“其他的多酚組合物”可以舉出例如不同分離條件下得到的多酚餾分、或者從不同種類的含有多酚的植物中得到的多酚餾分。本發(fā)明的多酚組合物，盡管含有高濃度的多酚，但多酚特有的澀味被降低。另外， 本發(fā)明的多酚組合物雖然具有比單獨(dú)使用非聚合型兒茶素類或黃酮醇類所沒有的適口性高的苦味，但是，如果用甜味劑或調(diào)味料緩等和其苦味也不會(huì)在后味中產(chǎn)生不協(xié)調(diào)。因此， 本發(fā)明的多酚組合物可以在飲食品中配合使用。在本發(fā)明的飲食品中的多酚組合物的含量可以根據(jù)食品的種類和形態(tài)適當(dāng)選擇， 但是通常情況下，換算成固形物的含量為0. 1 10質(zhì)量％。作為本發(fā)明的飲料，可以舉出例如茶飲料、非茶類飲料。作為茶飲料，可以舉出例如綠茶飲料、烏龍茶飲料、紅茶飲料。另外作為非茶類飲料，可以舉出清涼飲料(例如果汁、 蔬菜汁、運(yùn)動(dòng)飲料、滲透飲料、碳酸飲料)、咖啡飲料、營養(yǎng)飲劑、美容飲劑等非酒精飲料、啤酒、葡萄酒、清酒、梅酒、發(fā)泡酒、威士忌、白蘭地、燒酒、朗姆酒、杜松子酒、利口酒類等酒精飲料。本發(fā)明的飲料可以將多酚組合物直接或者稀釋后作為容器裝飲料，但是從改善多酚組合物的水溶解性的目的出發(fā)，可以配合有機(jī)酸和/或其鹽。作為有機(jī)酸，只要是分子中具有1個(gè)以上的羧基即可，可以是芳香族的，可以是脂肪族的，也可以是內(nèi)酯，但優(yōu)選為羥基羧酸或者其內(nèi)酯。具體可以舉出抗壞血酸、異抗壞血酸、檸檬酸、葡萄糖酸、琥珀酸、酒石酸、乳酸、己二酸、富馬酸、蘋果酸等，其中優(yōu)選抗壞血酸、檸檬酸、葡萄糖酸、酒石酸、乳酸、蘋果酸。另外，作為鹽可以舉出堿金屬鹽、堿土類金屬鹽、氨基酸鹽，其中優(yōu)選堿金屬鹽，特別優(yōu)選鈉鹽、鉀鹽。對于有機(jī)酸和/或其鹽，在本發(fā)明的飲料中的有機(jī)酸離子濃度優(yōu)選配合到1 100mmol/Lo從提高溶解性以及改善外觀的觀點(diǎn)出發(fā)，有機(jī)酸離子濃度優(yōu)選為2 95mmol/ L,更優(yōu)選為5 90mmol/L，更優(yōu)選為10 85mmol/L，進(jìn)一步優(yōu)選為15 80mmol/L，更進(jìn)一步優(yōu)選為18 70mmol/L，特別優(yōu)選為20 60mmol/L。另外，有機(jī)酸離子濃度，在例如有機(jī)酸是η元的多元羧酸的情況下，是處于第1段 第η段的解離狀態(tài)的羧基陰離子(COO—)的合計(jì)濃度。本發(fā)明的飲料除了可以配合在調(diào)制飲食品時(shí)所用的一般添加劑，例如，抗氧化劑、 苦澀味抑制劑、維生素、香料、各種酯類、無機(jī)酸類、無機(jī)酸鹽類、無機(jī)鹽類、色素類、乳化劑、 保存劑、調(diào)味劑、甜味劑、酸味劑、果汁提取物類、蔬菜提取物類、花蜜提取物類、PH調(diào)節(jié)劑， 品質(zhì)穩(wěn)定劑等之外，還可以與咖啡提取物等植物提取物單獨(dú)或者一起配合使用。本發(fā)明的飲料，優(yōu)選pH(25°C )為2 9，從口味和外觀的觀點(diǎn)出發(fā)優(yōu)選為2. 5 8，進(jìn)一步優(yōu)選為3 7. 0，特別優(yōu)選為3. 5 6. 5。作為填充本發(fā)明的飲料的容器，可以舉出與普通飲料一樣以聚對苯二甲酸乙二醇酯為主成分的成型容器(PET瓶)、金屬罐、與金屬箔或塑料膜等復(fù)合而成的紙容器、瓶等通常的包裝容器。另外，本發(fā)明的容器裝飲料，例如，在填充于金屬罐那樣的容器中后，在能夠加熱殺菌時(shí)，在食品衛(wèi)生法規(guī)定的殺菌條件下進(jìn)行制造，而對于PET瓶、紙容器等不能蒸餾殺菌的容器，則采用預(yù)先在與上述同等的殺菌條件，例如用板式熱交換器等進(jìn)行短時(shí)間的高溫殺菌，然后待冷卻到一定溫度后，再填充到容器中等的方法。另外，也可在無菌條件下，在填充了的容器中配合并填充其它成分。進(jìn)而，還可進(jìn)行在酸性條件下加熱殺菌后，在無菌條件下將PH調(diào)回到中性的操作，或者進(jìn)行在中性條件下加熱殺菌后，在無菌條件下將pH調(diào)回到酸性等的操作。作為本發(fā)明的食品形態(tài)，只要是攝取方便的形態(tài)都沒有特別的限制。可舉出例如膏狀、粉末狀、液體、凝膠狀、漿體狀、造粒物、顆粒、片劑、膠囊劑等固態(tài)形狀物。另外，對應(yīng)于食品形態(tài)，可以將本發(fā)明的多酚組合物通過減壓濃縮或者薄膜濃縮等除去溶劑，也可以通過噴霧干燥或者凍結(jié)干燥等將其粉體化。作為本發(fā)明中的食品，可以舉出例如點(diǎn)心類(例如面包、蛋糕、曲奇、餅干等焙烤點(diǎn)心，口香糖、巧克力、糖果)、甜點(diǎn)類(例如果凍、酸奶、冰淇淋)、蒸煮類食品、調(diào)味料(例如調(diào)味汁、湯類、調(diào)料(dressing)、蛋黃醬、奶油)。在本發(fā)明的食品中，可以配合調(diào)制食品時(shí)所用的一般食品添加劑、例如，礦物質(zhì)、 維生素、氨基酸、甜味劑、酸味劑、香料、水果或者蔬菜的干燥品、果汁、蔬菜汁或者它們的粉末干燥品等。另外，也可以配合使用賦形劑、潤滑劑、被覆劑等成形助劑。實(shí)施例1.非聚合型兒茶素類以及咖啡因的測定將試料溶液用過濾器(0. 45 μ m)過濾，使用高效液相色譜儀(型號(hào)SCL-10AVP、 島津制作所制造)，安裝導(dǎo)入十八烷基的液相色譜充填柱(L-columm TM 0DS, 4. 6mmΦ X 250mm 財(cái)團(tuán)法人化學(xué)物質(zhì)評價(jià)研究機(jī)構(gòu)制造)，在柱溫度為35°C下，利用梯度法進(jìn)行分析。流動(dòng)相A液是含有0. lmol/L醋酸的蒸餾水溶液，B液是含有0. lmol/L醋酸的乙腈溶液，在試料注入量為20μ L、UV檢測器波長為^Onm的條件下進(jìn)行測定。另外，梯度
條件如下所示。
時(shí)間(分)A液濃度(體積％) B液濃度(體積％)
0.09735.097337.0802043.0802043.5010048.5010049.097360.09732.蕓香苷的測定將試料溶液用過濾器(0. 45 μ m)過濾，使用高效液相色譜儀(型號(hào)Waterd695， WATERS制造)，安裝柱(Shimpach VP 0DS、150 X 4. 6mml. D.)，在柱溫度為40°C下，利用梯度法進(jìn)行分析。流動(dòng)相A液是含有0. 05質(zhì)量％磷酸的蒸餾水溶液，B液是甲醇溶液，流速為ImL/分，在試料注入量為1(^1^、而檢測器波長為36811111的條件下進(jìn)行測定。另外，梯度條
件如下所示。
時(shí)間(分)A液濃度(體積％)B液濃度(體積％)0.095520.0802040.0307041.0010046.0010047.095560.0955
3.黃酮醇苷元(楊梅黃素、槲皮素以及山奈I^素)的測定
(1)試料的水解
在固形物濃度調(diào)整為0. 2質(zhì)量％的試料溶液5mL中添加巰基乙醇200 μ L、2N鹽酸500 μ L0之后放置在干浴恒溫器中(As one株式會(huì)社制造)以設(shè)定溫度120°C加熱40分鐘
將試料中的黃酮醇配糖物水解生成黃酮醇苷元(楊梅黃素、槲皮素、山奈黃素)之后，冷卻。(2)分析通過高效液相色譜法定量水解后試料溶液中存在的楊梅黃素、槲皮素、山奈黃素。 另外，雖然定量是通過梯度法進(jìn)行的，但是其分析方法與上述“蕓香苷的測定”相同。(3)黃酮醇苷元的總量求出通過上述分析定量的楊梅黃素量、槲皮素量以及山奈黃素量的總和。4.多酚的測定(1)試劑的調(diào)制1)酒石酸鐵試劑的調(diào)制取七水合硫酸亞鐵鹽0. 50g和⑴四水合酒石酸鈉鉀2. 50g至500mL的容量瓶， 用去離子水定容。2)調(diào)制磷酸緩沖液取二水合磷酸氫二鈉20. OOg和磷酸二氫鉀2. 90g至2000mL容量瓶，用去離子水定容。將此溶液的PH值調(diào)至7. 5 7. 6。當(dāng)pH值超過7. 6時(shí)添加0. 9g/100mL的二水合磷酸二氫鉀水溶液，當(dāng)PH不滿7. 5時(shí)，添加1. 2g/100mL的磷酸二氫鉀水溶液進(jìn)行調(diào)節(jié)。(2)裝置和器具1)分光光度計(jì)(U-2010 日立制作所制造)2)石英比色皿(IOmmXlOmm)3) 25mL、100mL、200mL、500mL、2000mL 的容量瓶4) lmL、5mL、10mL、20mL、30mL 的全量移液管5) lmL、3mL、5mL 的微量移液管。(3)分析條件1)測定波長540nm
2)溫度20°C 士2°C(4)操作1)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線i)在使用前干燥約0. 5g沒食子酸乙酯2 3小時(shí)。ii)取干燥后的沒食子酸乙酯0.2g至200mL的容量瓶，用去離子水定容 (IOOmg/IOOmL 標(biāo)準(zhǔn)液)iii)在IOOmL容量瓶中，用ii)中配制的標(biāo)準(zhǔn)液，分別調(diào)制5mg/100mL、 1 Omg/1 OOmL、20mg/lOOmL、30mg/IOOmL 的各標(biāo)準(zhǔn)液。iv)在25mL的容量瓶中，分別取iii)中的標(biāo)準(zhǔn)液各5mL，加入5mL酒石酸鐵試劑， 用磷酸緩沖液定容。另外，調(diào)制不加標(biāo)準(zhǔn)液的空白對照液。ν)在分光光度計(jì)中檢測吸光度制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。另外，對于標(biāo)準(zhǔn)曲線以下述為標(biāo)準(zhǔn)，在偏離時(shí)再作調(diào)整。R2 :0· 9995 1. 0000標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率34. 5士0.4切片0. 3以下2)試料測定i)用離子交換水對分光光度計(jì)進(jìn)行調(diào)零。ii)取規(guī)定量的試料至25mL容量瓶，加入5mL酒石酸鐵之后用磷酸緩沖液定容，測定吸光度。而且吸光度的測定是在顯色后40分鐘以內(nèi)測定。實(shí)施例1多酚組合物A將綠茶葉(大葉種)用熱水法提取后，通過噴霧干燥得到綠茶提取物A。“綠茶提取物A”中，非聚合型兒茶素類濃度為30. 8質(zhì)量％，咖啡因濃度為5. 5質(zhì)量％。接下來，用去離子水稀釋“綠茶提取物A”使其非聚合型兒茶素類濃度成為1質(zhì)量％。接下來，將800g “綠茶提取物Α”的稀釋液用填充在色譜柱(內(nèi)徑50mmX高180mm、 容積353.3mL)中的200mL合成吸附劑(SP-70、三菱化學(xué)(株)制造)吸附。然后，依次向合成吸附劑中通入離子交換水300mL、30質(zhì)量％的乙醇水溶液400mL進(jìn)行通液，使非聚合型兒茶素類溶出。之后向合成吸附劑中通入50質(zhì)量％乙醇水溶液400mL進(jìn)行通液，使多酚組合物溶出。另外，在此所有的分離操作中，流量都調(diào)整到通液速度SV = 0. 8 1. 2DT1]、通液倍數(shù)(BV) = 2.0[ν/ν]。接下來，將得到的溶出液通過減壓濃縮蒸發(fā)掉乙醇同時(shí)除去不溶物之后，通過凍結(jié)干燥除去水分得到“多酚組合物Α”?！岸喾咏M合物Α”中，(A)黃酮醇苷元總量為19. 2質(zhì)量％，(B)多酚總量為33. 1質(zhì)量％，質(zhì)量比[(B)/(A)]為1.72，(C)蕓香苷的含量為10.6質(zhì)量％。另外，“多酚組合物Α” 在后述的本發(fā)明品1 5中使用。實(shí)施例2多酚組合物B將綠茶葉(大葉種)通過熱水提取之后，通過噴霧干燥得到綠茶提取物B?！熬G茶提取物B”中非聚合型兒茶素類濃度為30. 3質(zhì)量％，咖啡因濃度為5. 5質(zhì)量％。接下來用去離子水稀釋“綠茶提取物B”使其中的非聚合型兒茶素類濃度達(dá)到1質(zhì)量％。接下來，將8000g “綠茶提取物B”的稀釋液用填充于色譜柱(內(nèi)徑89.2mmX高 600mm，容積3748mL)中的2000mL合成吸附劑(SP-70、三菱化學(xué)(株)制造)吸附。然后， 依次使用3000mL離子交換水、9000mL25質(zhì)量％的乙醇水溶液對合成吸附劑進(jìn)行通液，使非聚合型兒茶素類溶出。之后用4000mL92. 5質(zhì)量％乙醇水溶液對合成吸附劑進(jìn)行通液，使多酚組合物溶出。另外，在此所有的分離操作中，流量調(diào)節(jié)都調(diào)整到通液速度為SV = 0. 5 2. 1DT1]、通液倍數(shù)(BV) = 2.0[ν/ν] 0接下來，將得到的溶出液通過減壓濃縮蒸發(fā)掉乙醇之后，通過凍結(jié)干燥除去水分得到“多酚組合物B”?！岸喾咏M合物B”中，㈧黃酮醇苷元總量為18. 3質(zhì)量％，⑶多酚總量為34. 0質(zhì)量％，質(zhì)量比[(B)/(A)]為1.86，(C)蕓香苷的含量為9.3質(zhì)量％。另外，“多酚組合物B” 在后述的本發(fā)明品6中使用。實(shí)施例3多酚組合物C用離子交換水稀釋在實(shí)施例2中得到的“綠茶提取物B”使其非聚合型兒茶素類濃度達(dá)到1質(zhì)量％。接下來，將MOOg “綠茶提取物B”的稀釋液用填充于色譜柱(內(nèi)徑 60. 6mmX高330mm，容積95 ImL)中的600mL合成吸附劑(SP-70，三菱化學(xué)(株)制造)吸附。然后，依次使用900mL離子交換水、2700mL25質(zhì)量％的乙醇水溶液對合成吸附劑進(jìn)行通液，使非聚合型兒茶素類溶出。之后用1200mL92.5質(zhì)量％乙醇對合成吸附劑進(jìn)行通液，使多酚組合物溶出。另外，在此所有的分離操作中，流量調(diào)節(jié)都調(diào)整到通液速度為SV = 0. 7 1.8DT1]、通液倍數(shù)(BV) = 2.0 [ν/ν] 0接下來，將得到的溶出液通過減壓濃縮蒸發(fā)掉乙醇之后，通過凍結(jié)干燥除去水分得到“多酚組合物C”?！岸喾咏M合物C”中，㈧黃酮醇苷元總量為23. 3質(zhì)量％，⑶多酚總量為34. 1質(zhì)量％，質(zhì)量比[(B)/(A)]為1.46，(C)蕓香苷的含量為7.4質(zhì)量％。另外，“多酚組合物C” 在后述的本發(fā)明品7中使用。實(shí)施例4多酚組合物D將0.08質(zhì)量份在實(shí)施例1中所得的多酚組合物A和0. 12質(zhì)量份的市售綠茶提取物(EGCg制劑，DSM Nutritional Products公司制造，以下稱為“綠茶提取物a” )混合得到“多酚組合物D”。另外“綠茶提取物a”中，(A)黃酮醇苷元總量為0.0質(zhì)量％，(B)多酚總量為110. 5質(zhì)量％※丨※酒石酸法的分析值)。“多酚組合物D”中，㈧黃酮醇苷元總量為7. 7質(zhì)量％，⑶多酚總量為79. 5質(zhì)量％，質(zhì)量比[(B)/(A)]為10. 32，(C)蕓香苷的含量為4.2質(zhì)量％。另外，“多酚組合物D” 在后述的本發(fā)明品8中使用。實(shí)施例5多酚組合物E將5g市售紅茶葉(Nuwaraeliya、Brook Bond House公司制造)加入到5OOg沸水中，以150rpm轉(zhuǎn)速攪拌提取5分鐘。然后用2號(hào)濾紙抽吸過濾測定取液量之后，用冰降溫 (液體溫度25°C以下)。此后，通過凍結(jié)干燥除去水分得到紅茶提取物。得到的紅茶提取物，以下稱為“紅茶提取物a”。將0. 42質(zhì)量份的紅茶提取物a和0. 025質(zhì)量份的實(shí)施例1中得到的多酚組合物A混合得到“多酚組合物Ε”。“多酚組合物Ε”中，㈧黃酮醇苷元總量為1. 9質(zhì)量％，⑶多酚總量為17. 7質(zhì)量％，質(zhì)量比[(B)/(A)]為9. 32，(C)蕓香苷的含量為1.3質(zhì)量％。另外，“多酚組合物Ε” 在后述的本發(fā)明品9中使用。實(shí)施例6多酚組合物F
將5g市售紅茶(AS CTC,Brook Bond House公司制造)茶葉添加入500g沸水中， 以150rpm轉(zhuǎn)速攪拌提取5分鐘。然后用2號(hào)濾紙抽吸過濾測定取液量之后，用冰降溫(液體溫度25°C以下)。通過凍結(jié)干燥除去水分得到紅茶提取物。得到的紅茶提取物，以下稱為“紅茶提取物b”。將0. 39質(zhì)量份的紅茶提取物b和0. 025質(zhì)量份的實(shí)施例1中得到的多酚組合物 A混合得到“多酚組合物F”。“多酚組合物F”中，㈧黃酮醇苷元總量為1. 4質(zhì)量％，⑶多酚總量為13. 3質(zhì)量％，質(zhì)量比[(B)/(A)]為9. 5，(C)蕓香苷的含量為0.9質(zhì)量％。另外，“多酚組合物F”在后述的本發(fā)明品10中使用。實(shí)施例7多酚組合物G將5g市售烏龍茶葉(烏龍茶、國太樓公司制造)添加到500g沸水中，以150rpm轉(zhuǎn)速攪拌提取5分鐘。然后用2號(hào)濾紙抽吸過濾測定取液量之后，用冰降溫(液體溫度25°C 以下)。然后通過凍結(jié)干燥除去水分得到烏龍茶提取物。得到的烏龍茶提取物，以下稱為 “烏龍茶提取物a”。將0. 39質(zhì)量份的烏龍茶提取物a和0. 025質(zhì)量份的實(shí)施例1中得到的多酚組合物A混合得到“多酚組合物G”。“多酚組合物G”中，㈧黃酮醇苷元總量為1. 6質(zhì)量％，⑶多酚總量為14. 7質(zhì)量％，質(zhì)量比[(B)/(A)]為9. 19，(C)蕓香苷的含量為0.8質(zhì)量％。另外，“多酚組合物G” 在后述的本發(fā)明品11中使用。實(shí)施例8多酚組合物H將0. 05質(zhì)量份的實(shí)施例1中得到的多酚組合物A和0. 138質(zhì)量份的綠茶提取物 a混合得到“多酚組合物H”?！岸喾咏M合物H”中，㈧黃酮醇苷元總量為5. 1質(zhì)量％，⑶多酚總量為89. 9質(zhì)量％，質(zhì)量比[(B)/(A)] ^J 17. 63,(C)蕓香苷的含量為2.8質(zhì)量％。另外，“多酚組合物H” 在后述的本發(fā)明品12中使用。實(shí)施例9多酚組合物I將0. 01質(zhì)量份的實(shí)施例1中得到的多酚組合物A和0. 43質(zhì)量份的紅茶提取物a 混合得到“多酚組合物I”。“多酚組合物I”中，(A)黃酮醇苷元總量為1. 3質(zhì)量％，(B)多酚總量為17. 2質(zhì)量％，質(zhì)量比[(B)/(A)]為13. 23，(C)蕓香苷的含量為0.9質(zhì)量％。另外，“多酚組合物I”在后述的本發(fā)明品13中使用。實(shí)施例10多酚組合物J將0. 01質(zhì)量份的實(shí)施例1中得到的多酚組合物A和0. 44質(zhì)量份的紅茶提取物b 混合得到“多酚組合物J”?！岸喾咏M合物J”中，㈧黃酮醇苷元總量為0. 7質(zhì)量％，⑶多酚總量為12. 5質(zhì)量％，質(zhì)量比[(B)/(A)]為17. 85，(C)蕓香苷的含量為0.5質(zhì)量％。另外，“多酚組合物J” 在后述的本發(fā)明品14中使用。實(shí)施例11多酚組合物K將0.01質(zhì)量份的實(shí)施例1中得到的多酚組合物A和0.41質(zhì)量份的烏龍茶提取物 a混合得到“多酚組合物K”?！岸喾咏M合物K”中，㈧黃酮醇苷元總量為0. 9質(zhì)量％，⑶多酚總量為14. 0質(zhì)量％，質(zhì)量比[(B)/(A)]為15. 56，(C)蕓香苷的含量為0.4質(zhì)量％。另外，“多酚組合物K” 在后述的本發(fā)明品15中使用。比較例1使用市售綠茶提取物(Polyphenol! 70A,三井農(nóng)林(株)公司制造，以下稱為“綠茶提取物b”)。綠茶提取物b中，(A)黃酮醇苷元總量為1. 1質(zhì)量％，(B)多酚總量為99. 0質(zhì)量％， 質(zhì)量比[(B)/(A)]為90. 00，(C)蕓香苷的含量為0.1質(zhì)量％。另外，“綠茶提取物b”在后述的比較品1中使用。比較例2使用紅茶提取物a。紅茶提取物a中，(A)黃酮醇苷元總量為0.9質(zhì)量％，⑶多酚總量為16. 8質(zhì)量％， 質(zhì)量比[(B)/(A)]為18. 67，(C)蕓香苷的含量為0.7質(zhì)量％。另外，“紅茶提取物a”在后述的比較品2中使用。比較例3使用紅茶提取物b。紅茶提取物b中，㈧黃酮醇苷元總量為0.3質(zhì)量％，(B)多酚總量為12.0質(zhì)量％， 質(zhì)量比[(B)/(A)]為40. 00，(C)蕓香苷的含量為0.2質(zhì)量％。另外，“紅茶提取物b”在后述的比較品3中使用。比較例4使用烏龍茶提取物a。烏龍茶提取物a中，㈧黃酮醇苷元總量為0.5質(zhì)量％，⑶多 酚總量為13. 5質(zhì)量％，質(zhì)量比[(B)/(A)]為27. 00，(C)蕓香苷的含量為0.1質(zhì)量％。另外，“烏龍茶提取物 a”在后述的比較品4中使用。比較例5將600g烏龍茶葉在0. 15質(zhì)量％碳酸氫鈉水溶液(95°C )中用柱法提取，得到提取物約6000g。將液體溫度保存在60 65°C下，通液于400g的粒狀活性炭(kuraray公司制造，GW-H32/60)，選擇性除去非聚合型兒茶素類以及咖啡因。將此通過液減壓濃縮，調(diào)制約 900g的白利度Brix為10以上的茶提取物，得到“烏龍茶提取物b”?！盀觚埐杼崛∥颾”中，㈧黃酮醇苷元總量為0. 84質(zhì)量％，⑶多酚總量為19. 4 質(zhì)量％，質(zhì)量比[(B)/(A)]為23. 1，(C)蕓香苷的含量為0.18質(zhì)量％。另外，“烏龍茶提取物b”在后述的比較品5中使用。比較例6
綠茶提取物c的制造將200g綠茶提取液的濃縮物(Polyphenol! HG，三井農(nóng)林(株)制造)在25°C、 250r/min的攪拌條件下分散于800g 40質(zhì)量％的乙醇水溶液中，投入800g酸性白土 (MizUkaesU#600，水澤化學(xué)公司制造)之后，持續(xù)攪拌約10分鐘。然后，用2號(hào)濾紙過濾之后，在濾液中加入8g活性炭再用2號(hào)濾紙過濾。接下來，用0. 2 μ m的薄膜濾器再次過濾。 然后在40°C、減壓條件下，從濾液中蒸發(fā)掉乙醇，用去離子水調(diào)整非聚合型兒茶素類的濃度，得到“綠茶提取物C”?！熬G茶提取物C”中，㈧黃酮醇苷元總量為1. 5質(zhì)量％，⑶多酚總量為47. 7質(zhì)量％，質(zhì)量比[(B)/(A)]為32. 49，(C)蕓香苷的含量為0.96質(zhì)量％。另外，“綠茶提取物 c”在后述的比較品6中使用。風(fēng)味評價(jià)按各配合量稱量表1和表2中所示的各成分于樣品瓶中，向其中加入離子交換水使其分散。之后在60°C的水浴中溶解，然后在室溫(25°C)下靜置2小時(shí)，調(diào)制飲料。將各飲料調(diào)溫至室溫下后依照下述標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行感官試驗(yàn)。其結(jié)果如表1和表2所示。(評價(jià)標(biāo)準(zhǔn))5 非常優(yōu)良(有適口性高的苦味，很少有澀味)4 優(yōu)良(感覺到澀味，但是不影響心情)3 良(有一些澀味，會(huì)在意到)2 稍微不好(澀味稍微有點(diǎn)重)1:不好(澀味很重)
權(quán)利要求
1.一種多酚組合物，其中，是含有來自茶(Camellia Sinensis)的黃酮醇苷元以及黃酮醇配糖物的多酚組合物， 其中，以下(A)和(B)的質(zhì)量比[(B)/(A)]為0.01 18，(A)通過高效液相色譜法測定的水解后的該多酚組合物的固形物中所含的黃酮醇苷元總量，(B)通過酒石酸鐵法測定的該多酚組合物的固形物中所含的多酚總量。
2.如權(quán)利要求1所述的多酚組合物，其中， 所述(A)黃酮醇苷元總量為0. 7 50質(zhì)量％。
3.如權(quán)利要求1或2所述的多酚組合物，其中， 所述(B)多酚總量為5 95質(zhì)量％。
4.如權(quán)利要求1 3中任一項(xiàng)所述的多酚組合物，其中， 所述多酚組合物含有蕓香苷，(C)所述多酚組合物的固形物中所含的蕓香苷的含量為0.4 30質(zhì)量％。
5.如權(quán)利要求1 4中任一項(xiàng)所述的多酚組合物，其中， 所述茶(Camellia Sinensis)為綠茶。
6.一種飲食品，其中，含有權(quán)利要求1 5中任一項(xiàng)所述的多酚組合物。
7.—種制造方法，其中，所述制造方法是權(quán)利要求1 5中任一項(xiàng)所述的多酚組合物的制造方法，包含 使茶(Camellia Sinensis)提取物吸附在合成吸附劑上的工序、 使第1有機(jī)溶劑水溶液與所述合成吸附劑接觸，溶出第1餾分的工序，以及使比所述第1有機(jī)溶劑水溶液的疏水性高的第2有機(jī)溶劑水溶液與溶出所述第1餾分之后的合成吸附劑接觸，溶出含有多酚組合物的第2餾分的工序。
全文摘要
本發(fā)明提供一種減輕了澀味的來自茶(Camellia Sinensis)的多酚組合物。本發(fā)明的多酚組合物是含有來自茶(Camellia Sinensis)的黃酮醇苷元以及黃酮醇配糖物的多酚組合物，其特征在于，下述(A)和(B)的質(zhì)量之比[(B)/(A)]為0.01～18，其中(A)通過高效液相色譜法測定的水解后的該多酚組合物的固形物中的黃酮醇苷元總量，(B)通過酒石酸鐵法測定的該多酚組合物的固形物中所含的多酚總量。
文檔編號(hào)A23L1/30GK102361562SQ20108001367
公開日2012年2月22日 申請日期2010年3月17日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月23日
發(fā)明者佐竹紀(jì)彥, 大石進(jìn), 小西知子, 高嶋慎一郎 申請人:花王株式會(huì)社