專利名稱：一種山羊草屬殺配子染色體2c特異scar標(biāo)記的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種山羊草屬殺配子染色體2C特異SCAR標(biāo)記，尤其涉及一種檢測(cè)小 麥遺傳背景下殺配子染色體2C的試劑盒及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
小麥?zhǔn)鞘澜缟现匾募Z食作物之一。在中國(guó)它是僅次于水稻的第二大農(nóng)作物，小 麥生產(chǎn)對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)發(fā)展有著十分重要的戰(zhàn)略意義。由于小麥栽培品種單一化，使其遺傳基 礎(chǔ)日益狹窄，抗源匱乏，極大地限制了其產(chǎn)量和品質(zhì)的進(jìn)一步改良。小麥的近緣物種中存在 著大量的遺傳變異，是小麥改良可以利用的有益基因資源，將這些有益基因?qū)胄←溡恢?是遺傳學(xué)家和育種學(xué)家經(jīng)久不衰的研究課題。創(chuàng)制易位系是把外源有益基因?qū)胄←湹囊?種有效途徑。常用的創(chuàng)制易位系的方法有自發(fā)易位、輻射誘發(fā)、利用Ph基因、染色體錯(cuò)分 裂與著絲點(diǎn)再融合、組織培養(yǎng)以及利用殺配子染色體等。國(guó)內(nèi)外的研究都已證明，利用殺配 子染色體誘導(dǎo)產(chǎn)生易位的頻率要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其它方法。山羊草屬植物中的一些殺配子染色體，當(dāng)單體附加到不同基因型普通小麥中 時(shí)，具有完全或不完全的殺配子作用，在不完全殺配子作用下，可高頻誘導(dǎo)各種類型的染 色體結(jié)構(gòu)變異，變異頻率可達(dá)10%以上，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于自發(fā)易位、輻射誘發(fā)、Ph基因等其他 方法的誘導(dǎo)效率。這些殺配子染色體是經(jīng)長(zhǎng)期自然選擇保留下來的，有的與小麥有部 分同源關(guān)系，在誘導(dǎo)染色體結(jié)構(gòu)變異中有特殊的意義。殺配子染色體不僅可誘導(dǎo)普通 小麥染色體結(jié)構(gòu)變異，而且對(duì)附加或代換到普通小麥中的外源染色體也具有同樣的功 能，這就為小麥的誘變育種開辟了一條新途徑。殺配子染色體起源于不同的基因組(C， S或M)，就同祖性來說，現(xiàn)已識(shí)別出三種類型的山羊草殺配子染色體同祖群2中的殺 配子染色體 Ae. Iongissima (2)、Ae. sharonensis、Ae. cylindrica、Ae. speltoides (1) 和Ae. speltoides (2)；同袓群3中的殺配子染色體Ae. triuncialis (1)和 Ae. triuncialis(2)；同袓群 4 中的殺配子染色體 Ae. Iongissima(I)、Ae. Iongissima (3)、 Ae.sharonensis(2)禾口 Ae. sharonensis(3)0殺配子染色體效應(yīng)的強(qiáng)度是多樣的，從致死到半致死，而且也受不同小麥的遺傳 背景的影響，其作用特點(diǎn)、方式也各不相同。染色體2S1()，2Ssh，T2B-2Ssp'au,4Sl0,4Ssh,4Ssh#2, 在“中國(guó)春”小麥中引起不帶這些染色體的配子完全不育，因此無法傳遞給下一代。3C染色 體在“中國(guó)春”中發(fā)揮很強(qiáng)的殺配子效應(yīng)，但在其它品種中卻產(chǎn)生溫和的、半致死效應(yīng)，暗示 在這些栽培品種中仍存在阻遏基因。染色體T2B-2SSP "，2C，3(fAT*4Mg，在中國(guó)春中誘導(dǎo)半 致死效應(yīng)的染色體斷裂，而且結(jié)構(gòu)重排的染色體可以被保留和分離。染色體3C和3Csat都 起源于離果山羊草，但是它們的殺配子效應(yīng)強(qiáng)度在“中國(guó)春”中卻不相同；其中3C的效應(yīng)是 致死的，而3CSAT則是半致死的。殺配子染色體2C在普通小麥“中國(guó)春”等遺傳背景下可誘導(dǎo)半致死效應(yīng)的染色體 斷裂，使后代產(chǎn)生易位、缺失等染色體結(jié)構(gòu)畸變。利用殺配子染色體2C在構(gòu)建大麥染色體 缺失圖譜，誘導(dǎo)小麥-偃麥草、小麥-冰草易位等方面取得了很好的成效。在殺配子染色體2C的利用過程中，雜種后代中2C染色體的鑒定是非常重要的環(huán)節(jié)。有很多學(xué)者利用分帶的 方法對(duì)后代進(jìn)行鑒定，但該方法非常繁瑣，而且需要結(jié)合相關(guān)的細(xì)胞學(xué)技術(shù)。與之相比，利 用DNA分子標(biāo)記進(jìn)行鑒定則是十分方便快捷的途徑。隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(RAPD)技術(shù)具有操作簡(jiǎn)單、模板DNA用量少、擴(kuò)增產(chǎn)物多態(tài)性 高、經(jīng)濟(jì)快捷等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于遺傳多樣性分析、品種鑒定、分子標(biāo)記輔助育種、基 因定位及遺傳圖譜構(gòu)建等多個(gè)研究領(lǐng)域。但由于它的重復(fù)性和穩(wěn)定性較差，將RAPD標(biāo)記轉(zhuǎn) 化為SCAR標(biāo)記后，其特異性和穩(wěn)定性大幅度提高，可以更方便快捷地應(yīng)用于異源染色體的 檢測(cè)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種檢測(cè)小麥遺傳背景下殺配子染色體2C的試劑盒。本發(fā)明提供的試劑盒，包括如下引物對(duì)所述引物對(duì)中的一條引物為序列表中的序列3所示的核苷酸，所述引物對(duì)中的另 一條引物為序列表中的序列4所示的核苷酸。所述植物為含有殺配子染色體2C的小麥屬植物，所述含有殺配子染色體2C的小 麥屬植物具體為“中國(guó)春”-長(zhǎng)穗偃麥草7E 二體附加系與“中國(guó)春”-殺配子染色體2C 二 體附加系雜交得到的F1代和/或所述F1代自交得到的F2代。本發(fā)明另一個(gè)目的是提供一種檢測(cè)植物殺配子染色體2C的PCR試劑。本發(fā)明提供的PCR試劑由如下引物對(duì)、dNTP、氯化鎂、DNA聚合酶和PCR緩沖液組 成所述引物對(duì)中的一條引物為序列表中的序列3所示的核苷酸，所述引物對(duì)中的另 一條引物為序列表中的序列4所示的核苷酸。所述引物對(duì)中各引物在所述PCR試劑中的濃度均為0. 5 μ M ；所述dNTP在所述的PCR試劑中的濃度為0. 18mM,所述DNA聚合酶在所述的PCR試 劑中的濃度為0. 06υ/μ 1 ；所述氯化鎂在所述的PCR試劑中的濃度為0. ISmM ；所述植物為含有殺配子染色體2C的小麥屬植物。所述含有殺配子染色體2C的小麥屬植物為“中國(guó)春”-長(zhǎng)穗偃麥草7Ε 二體附加系 與“中國(guó)春”-殺配子染色體2C 二體附加系雜交得到的F1代和/或所述F1代自交得到的F2 代。PCR緩沖液購(gòu)自寶生物工程(大連)有限公司，產(chǎn)品目錄號(hào)R10T1。所述的試劑盒在檢測(cè)小麥遺傳背景下殺配子染色體2C中的應(yīng)用；所述的PCR試劑 在檢測(cè)小麥殺配子染色體2C中的應(yīng)用；以上應(yīng)用均是本發(fā)明保護(hù)的范圍。本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供一種輔助檢測(cè)待測(cè)植物中是否含有殺配子染色體2C 的方法。本發(fā)明提供的方法，包括如下步驟用所述試劑盒中的引物對(duì)或所述的PCR試劑 對(duì)待測(cè)植物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；檢測(cè)所述PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，若所述PCR擴(kuò)增產(chǎn) 物中含有大小為586bp，則所述待測(cè)植物中候選含有殺配子染色體2C，若所述PCR擴(kuò)增產(chǎn)物 中不含有大小為586bp的片段，則所述待測(cè)植物中候選不含有殺配子染色體2C。所述PCR擴(kuò)增中，以待測(cè)植物的基因組DNA為模板；
所述PCR擴(kuò)增的退火溫度為53°C。所述PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的核苷酸序列為序列表序列2自5’末端第405-990位核苷酸。所述檢測(cè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的方法為瓊脂糖凝膠電泳或測(cè)序。本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明開發(fā)的SCAR分子標(biāo)記為快速、準(zhǔn)確地鑒定小麥遺傳背 景下的外源山羊草屬殺配子染色體2C奠定基礎(chǔ)。該SCAR標(biāo)記的開發(fā)對(duì)于鑒定普通小麥中 導(dǎo)入的殺配子染色體2C是極其有價(jià)值的，它為跟蹤鑒定普通小麥-殺配子染色體2C的后 代提供了十分方便快捷的途徑，也為雜種后代染色體構(gòu)型的分析奠定了良好的基礎(chǔ)。


圖1為RAPD引物在普通小麥“中國(guó)春”、殺配子染色體2C 二體附加系、柱穗山羊草 三種材料中的擴(kuò)增結(jié)果圖2為SCAR標(biāo)記在柱穗山羊草、“中國(guó)春”_殺配子染色體2C 二體附加系、二倍體 長(zhǎng)穗偃麥草、“中國(guó)春”-長(zhǎng)穗偃麥草7E 二體附加系中的擴(kuò)增結(jié)果圖3為SCAR標(biāo)記在“中國(guó)春”-長(zhǎng)穗偃麥草7E 二體附加系與“中國(guó)春”-殺配子 染色體2C 二體附加系雜種后代F”F2中的擴(kuò)增結(jié)果
具體實(shí)施例方式下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。供試材料為柱穗山羊草(Endo TR. Gc chromosomes and their induction ofchromosome mutations in wheat. Jpn J Genet, 1990,65 :135-152.,公眾可從哈爾濱 師范大學(xué)獲得。)、“中國(guó)春”-殺配子染色體2C 二體附加系(2n = 44AABBDD+2C II, Endo TR. Allocation of a Gc chromosome of Aegilops cylindrica to wheathomoeologous group 2. Genes Genet Syst，1996，71 :243_246，公眾可從哈爾濱師范大學(xué)獲得。)和“中 國(guó)春”-長(zhǎng)穗偃麥草 7E 二體附加系(2n = 44AABBDD+7E II，DvorakJ，Knott DR. Disomic and diteleosomic additions of diploid Agropyron elongatumchromosomes to Triticum aestivum[J]. Can J Genet Cytol，1974，16 :399_417，公眾可從哈爾濱師范大學(xué) 獲得。)；普通小麥“中國(guó)春”(Miller TE, Hutchinson J, Chapman V Investigation of a preferentially transmitted Aegilops sharonesischromosome in wheat. Theor Appl Genet, 1982,61 :27-33.，公眾可從哈爾濱師范大學(xué)獲得)；“中國(guó)春”-長(zhǎng)穗偃麥草7E 二體 附加系與“中國(guó)春”-殺配子染色體2C 二體附加系雜交獲得的FpF2代。實(shí)施例1、山羊草屬殺配子染色體2C特異SCAR標(biāo)記的獲得1、山羊草屬殺配子染色體2C特異RAPD標(biāo)記0PF03標(biāo)記的篩選與克隆利用40條RAPD引物，對(duì)普通小麥“中國(guó)春”、普通小麥“中國(guó)春”-殺配子染色體 2C 二體附加系、柱穗山羊草等材料進(jìn)行擴(kuò)增篩選，分離和克隆2C基因組特異擴(kuò)增片段。其中，PCR擴(kuò)增的20 μ 1體系Template DNA50ngIOxPCR buffer2. 5 μ 11. 5mM MgCl22. 5 μ 1
dNTP Mix (2. 5mM)
Random Primer(10 μ Μ)
1. 5μ 1 1 μ 1r Taq polymerase (5U/μ 1) 0. 25 μ 1_Distilled sterile water up to 20 μ 1IOx PCR buffer購(gòu)自寶生物工程(大連)有限公司，產(chǎn)品目錄號(hào)RlOTl。PCR程序94°C預(yù)變性 3min，94°C變性 15s，36°C復(fù)性 30s，72°C延伸 45s，46 個(gè)循環(huán) 結(jié)束后72°C延伸lOmin。4°C保存。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)1. 2%的瓊脂糖膠電泳進(jìn)行檢測(cè)，BIORAD紫外儀掃描，拍照。PCR擴(kuò)增結(jié)果如圖1所示，其中，M.為DL2000Marker ；a.為普通小麥“中國(guó) 春”(AABBDD)，b.為“中國(guó)春”-殺配子染色體2C 二體附加系Qn = 44AABBDD+2C II) ；c.為柱穗山羊草；箭頭所示為殺配子染色體2C特異擴(kuò)增帶，從圖中看出，引物 0PF035，-CCTGATCACC-3，(序列1)在“中國(guó)春”-殺配子染色體2C 二體附加系、柱穗山羊 草中擴(kuò)增出一條HOObp左右的片段，此產(chǎn)物在普通小麥“中國(guó)春”中沒有出現(xiàn)，表明這個(gè)片 段是殺配子染色體2C所特有的?；厥諒钠胀ㄐ←湣爸袊?guó)春”-殺配子染色體2C 二體附加系中擴(kuò)增得到的特異片段， 送去測(cè)序。經(jīng)測(cè)序結(jié)果可知，該P(yáng)CR產(chǎn)物具有序列表中序列2的核苷酸序列，序列表的序列 2由1496個(gè)核苷酸組成，將PCR產(chǎn)物命名為0PF031496。在GeneBank中將其進(jìn)行Blast同源性搜索，結(jié)果發(fā)現(xiàn)它與大麥的1個(gè)cDNA克隆 序列(genbank號(hào)為AK252862. 1)同源性達(dá)92%。也可人工合成序列2。2、山羊草屬殺配子染色體2C特異SCAR標(biāo)記的建立根據(jù)序列表序列2中的序列，利用I^rimer Premier 5. 0軟件，設(shè)計(jì)了一對(duì)SCAR引 物2C-F5865，TCTGTCGGGAAACTAATT 3，(序列 3)2C-R5865，AAGATAGCAACAGGGGAG 3，(序列 4)反應(yīng)體系為20 μ 1，將RAPD擴(kuò)增條件調(diào)整為正反向引物各0.5 μ 1，53°C退火，35個(gè) 循環(huán)外，其他同RAPD分析。PCR擴(kuò)增的20 μ 1體系PCR擴(kuò)增體系Template DNA50ngIOxPCR buffer2. 5 μ 11. 5mM MgCl2 (終濃度為 0. 18mM)2. 5 μ 1dNTP Mix (2. 5mM,終濃度為 0. 18mM)1· 5 μ 12C-F586 上游引物(10 μ Μ,終濃度為 0· 5 μ Μ)0. 5 μ 12C-R586 下游引物(10 μ Μ,終濃度為 0· 5 μ Μ)0. 5 μ 1r Taq polymerase (5U/ μ 1，終濃度為 0. 06U/ μ 1) 0. 25 μ 1_ Distilled sterile waterup to 20 μ 1
分別以“中國(guó)春”-殺配子染色體2C 二體附加系、柱穗山羊草、“中國(guó)春”、二倍體長(zhǎng) 穗偃麥草(Knott D R. The inheritance of rust resistance. VI. The transferof stem rust resistance from Agropyron elongatum to common wheat. CanadianJournal of Plant Science, 1961,41 :108-123.，公眾可從哈爾濱師范大學(xué)獲得)、“中國(guó)春”-長(zhǎng)穗偃麥 草7E 二體附加系的基因組DNA為模板，進(jìn)行PCR擴(kuò)增。結(jié)果如圖2所示，其中，1.為柱穗山羊草；2.為“中國(guó)春”-殺配子染色體2C 二體 附加系；3.為“中國(guó)春”;4.為Marker :DL2000 ；5.為二倍體長(zhǎng)穗偃麥草；6.為“中國(guó)春”-長(zhǎng) 穗偃麥草7E 二體附加系。從圖中看出，在“中國(guó)春””-殺配子染色體2C 二體附加系、柱穗 山羊草材料中均得到586bp的片段，而在“中國(guó)春”、二倍體長(zhǎng)穗偃麥草、“中國(guó)春”-長(zhǎng)穗偃 麥草7E 二體附加系中沒有此片段。測(cè)序兩個(gè)586bp的片段，結(jié)果為該片段均為具有序列表 序列2自5’末端第405-990位核苷酸，表明該片段為殺配子染色體2C所特有。實(shí)施例2、山羊草屬殺配子染色體2C特異SCAR標(biāo)記的應(yīng)用用SCAR引物2C-F586、2C-R5a;對(duì)“中國(guó)春”-長(zhǎng)穗偃麥草7E 二體附加系與“中國(guó) 春”-殺配子染色體2C 二體附加系雜交后代F1和F1自交得到的F2代進(jìn)行了鑒定。以普通 小麥“中國(guó)春”為對(duì)照。結(jié)果如圖3所示，1.為普通小麥“中國(guó)春”;2-12.為“中國(guó)春”-長(zhǎng)穗偃麥草7E 二體 附加系與“中國(guó)春”-殺配子染色體2C 二體附加系雜交獲得的F1代；13.為DL2000Marker ； 14 25.為F1代自交獲得的F2代。從圖中看出，在&代材料中均擴(kuò)增出了 586bp的產(chǎn)物，符合理論預(yù)期，經(jīng)過測(cè)序?yàn)?該片段具有序列表序列2自5’末端第405-990位核苷酸，為殺配子染色體2C所特有,F1代 均表現(xiàn)為陽性結(jié)果。而在115株F2代材料中擴(kuò)增結(jié)果出現(xiàn)分離現(xiàn)象，其中有65株F2材料中有擴(kuò)增出 產(chǎn)物，說明在這些材料中存在2C染色體，占整個(gè)F2代材料的56. 52%，其余50株材料中沒 有擴(kuò)增產(chǎn)物，說明這些材料中沒有2C染色體，占整個(gè)F2代材料的43. 48% (殺配子染色體 2C是一種可以誘導(dǎo)染色體產(chǎn)生畸變的特殊染色體，它可以使不含有它的配子產(chǎn)生致死或半 致死的效應(yīng)，半致死的效應(yīng)就包括如染色體的易位、缺失等染色體畸變，達(dá)到要?jiǎng)?chuàng)制易位系 或缺失系的目的，這是一種誘導(dǎo)染色體產(chǎn)生畸變的一種方式，但2C產(chǎn)生的這些畸變行為完 全是隨機(jī)的。在F2代中，理論上存在2C染色體的幾率為75%，但在實(shí)際的雜交后代中經(jīng)檢 驗(yàn)，實(shí)際情況往往低于理論值，因?yàn)?C染色體的殺配子作用，可能會(huì)使一些后代產(chǎn)生致死 效應(yīng)，所以，一般情況下，實(shí)際值要低于理論值，實(shí)驗(yàn)結(jié)果是在實(shí)際情況范圍內(nèi)的。)；進(jìn)一步 證明了此SCAR標(biāo)記可以用來檢測(cè)小麥背景下的殺配子染色體2C，為小麥背景中殺配子染 色體2C的快速跟蹤檢測(cè)提供了新途徑。
權(quán)利要求
1.一種檢測(cè)植物殺配子染色體2C的試劑盒，包括如下引物對(duì)所述引物對(duì)中的一條引物為序列表中的序列3所示的核苷酸，所述引物對(duì)中的另一條 引物為序列表中的序列4所示的核苷酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于所述植物為含有殺配子染色體2C的小麥屬植物，所述含有殺配子染色體2C的小麥屬 植物具體為“中國(guó)春”-長(zhǎng)穗偃麥草7E 二體附加系與“中國(guó)春”-殺配子染色體2C 二體附 加系雜交得到的F1代和/或所述F1代自交得到的F2代。
3.一種檢測(cè)植物殺配子染色體2C的PCR試劑，由如下引物對(duì)、dNTP、氯化鎂、DNA聚合 酶和PCR緩沖液組成所述引物對(duì)中的一條引物為序列表中的序列3所示的核苷酸，所述引物對(duì)中的另一條 引物為序列表中的序列4所示的核苷酸。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的PCR試劑，其特征在于所述引物對(duì)中各引物在所述PCR試劑中的濃度均為0. 5μΜ ；所述dNTP在所述的PCR試劑中的濃度為0. 18mM,所述DNA聚合酶在所述的PCR試劑中 的濃度為0. 06U/y 1 ；所述氯化鎂在所述的PCR試劑中的濃度為0. 18mM ；所述植物為含有殺配子染色體2C的小麥屬植物。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的PCR試劑，其特征在于所述含有殺配子染色體2C的小麥屬植物為“中國(guó)春”-長(zhǎng)穗偃麥草7Ε二體附加系與“中 國(guó)春”-殺配子染色體2C 二體附加系雜交得到的F1代和/或所述F1代自交得到的F2代。
6.權(quán)利要求1或2所述試劑盒或權(quán)利要求3-5中任一所述的PCR試劑在檢測(cè)小麥殺配 子染色體2C中的應(yīng)用。
7.一種輔助檢測(cè)待測(cè)植物中是否含有殺配子染色體2C的方法，包括如下步驟用權(quán)利 要求1或2所述試劑盒中的引物對(duì)或權(quán)利要求3或4中所述的PCR試劑對(duì)待測(cè)植物進(jìn)行 PCR擴(kuò)增，得到PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；檢測(cè)所述PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，若所述PCR擴(kuò)增產(chǎn)物中含有大小為 586bp，則所述待測(cè)植物中候選含有殺配子染色體2C，若所述PCR擴(kuò)增產(chǎn)物中不含有大小為 586bp的片段，則所述待測(cè)植物中候選不含有殺配子染色體2C。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于所述PCR擴(kuò)增中，以待測(cè)植物的基因組DNA為模板；所述PCR擴(kuò)增的退火溫度為53°C。
9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的方法，其特征在于所述PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的核苷酸序列為序列表序列2自5’末端第405-990位核苷酸。
10.根據(jù)權(quán)利要求7-9中任一所述的方法，其特征在于所述檢測(cè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的方法為瓊脂糖凝膠電泳或測(cè)序。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種山羊草屬殺配子染色體2C特異SCAR標(biāo)記。本發(fā)明提供了一種檢測(cè)植物殺配子染色體2C的試劑盒，所述引物對(duì)中的一條引物為序列表中的序列3所示的核苷酸，所述引物對(duì)中的另一條引物為序列表中的序列4所示的核苷酸。殺配子染色體2C是誘導(dǎo)易位系的一種有效方式，通過它可以將許多作物的優(yōu)良性狀導(dǎo)入小麥，以改良小麥的品質(zhì)。通過本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)證明，該SCAR標(biāo)記的開發(fā)對(duì)于鑒定普通小麥中導(dǎo)入的殺配子染色體2C是極其有價(jià)值的，大量雜交后代的篩選和鑒定工作非常繁雜，殺配子染色體2C分子標(biāo)記的開發(fā)為跟蹤鑒定普通小麥-殺配子染色體2C的后代提供了十分方便快捷的途徑，也為雜種后代染色體構(gòu)型的分析奠定了良好的基礎(chǔ)。
文檔編號(hào)C12Q1/68GK102146444SQ201110002658
公開日2011年8月10日 申請(qǐng)日期2011年1月7日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月7日
發(fā)明者叢雯雯, 徐國(guó)輝, 束永俊, 郭東林, 郭長(zhǎng)虹 申請(qǐng)人:哈爾濱師范大學(xué)