專利名稱：一種混合酶酶解制備花生蛋白活性肽的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種活性肽的制備方法，尤其涉及一種混合酶酶解制備花生蛋白活性肽的方法。
背景技術(shù)：
隨著現(xiàn)代蛋白質(zhì)工程、生物酶工程技術(shù)的發(fā)展，大量的生物活性肽被發(fā)現(xiàn)，由生物技術(shù)的應(yīng)用生產(chǎn)出的生物活性肽已廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、化妝品、飼料、和農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。生物活性肽的研究領(lǐng)域發(fā)展迅速，已經(jīng)受到了世界各國(guó)科學(xué)家及政府的高度重視?；ㄉ鞍谆钚噪淖鳛樯锘钚噪牡囊环N，其具有粉末狀、無結(jié)塊、無雜質(zhì)、無異味、 有花生原有的清香氣味、良好的水溶性、持水性，與其他食品配料完全融合保持各有的物化營(yíng)養(yǎng)特性等特點(diǎn)。花生蛋白活性肽氨基酸組成均衡、全面，含人體必需的8種氨基酸，特別是谷氨酸和天門冬氨酸的含量較高，對(duì)促進(jìn)人體腦細(xì)胞發(fā)育和增加記憶力都有良好的作用；花生蛋白活性肽氨基酸與人體氨基酸的組成非常相近，極易被人體吸收利用，且不含膽固醇；因此花生蛋白活性肽具有易于消化吸收、恢復(fù)體力、增強(qiáng)免疫力、降低血壓、促進(jìn)脂肪代謝、保健養(yǎng)生等功效。目前，花生蛋白活性肽所采取的水解制備工藝中存在著酶解時(shí)間過長(zhǎng)(一般在 6 13小時(shí))，工藝過程復(fù)雜，活性肽得率較低(傳統(tǒng)得率在70%以下)，致使花生蛋白活性肽制備成本高，且生產(chǎn)過程中由于調(diào)節(jié)PH值加入堿溶液，極易造成環(huán)境污染。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為解決上述工藝中存在的不足，提供一種混合酶酶解制備花生蛋白活性肽的方法。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種混合酶酶解制備花生蛋白活性肽的方法，其步驟如下1、蛋白鈍化，取花生分離蛋白粉加入蒸餾水，使之溶解后，放入80 90°C恒溫水浴中保持20分鐘，使花生分離蛋白鈍化；2、酶解，冷卻至室溫，加入混合蛋白酶，所述混合蛋白酶包含堿性蛋白酶37% 39%、中性蛋白酶37% 39%和風(fēng)味蛋白酶22% ，在 50 60°C的恒溫水浴振蕩器中反應(yīng)12 15分鐘；3、酶滅活，反應(yīng)結(jié)束后立即取出，放入 100°C水浴中保持5分鐘，使酶失活；4、得到活性肽，冷水冷卻，測(cè)定水解液中可溶性氮含量，冷凍干燥得到花生蛋白活性肽。本發(fā)明的有益效果在于花生蛋白活性肽的制備時(shí)間大大縮短，制備時(shí)間由傳統(tǒng)的6 13小時(shí)縮短到40分鐘以下，花生蛋白活性肽得率從傳統(tǒng)的70%以下提高到75% 95%。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作詳細(xì)描述。實(shí)施例1
取10克蛋白質(zhì)含量在70%以上的花生分離蛋白粉，溶解入盛有80克蒸餾水的三角瓶中，花生分離蛋白粉和蒸餾水的質(zhì)量比設(shè)置在1 8 1 11的范圍內(nèi)，根據(jù)不同的量在此范圍內(nèi)相應(yīng)調(diào)整 ’放入80°C恒溫水浴中保持20分鐘，使花生分離蛋白鈍化；冷卻至室溫，加入混合蛋白酶，所述混合蛋白酶包含12140u/g堿性蛋白酶、12000u/g中性蛋白酶和7390u/g風(fēng)味蛋白酶；在50°C的恒溫水浴振蕩器中反應(yīng)12分鐘；反應(yīng)結(jié)束后立即取出， 放入100°C水浴中保持5分鐘，使酶失活；冷水冷卻，測(cè)定水解液中可溶性氮含量達(dá)到19mg/ ml，冷凍干燥得到花生活性肽。實(shí)施例2取5克蛋白質(zhì)含量在70%以上的花生分離蛋白粉，溶解入盛有50克蒸餾水的三角瓶中，放入90°C恒溫水浴中保持20分鐘，使花生分離蛋白鈍化；冷卻至室溫，加入混合蛋白酶，所述混合蛋白酶包含6072u/g的堿性蛋白酶、6001u/g的中性蛋白酶和3690u/g風(fēng)味蛋白酶；在60°C的恒溫水浴振蕩器中反應(yīng)15分鐘；反應(yīng)結(jié)束后立即取出，放入100°C水浴中保持5分鐘，使酶失活；冷水冷卻，測(cè)定水解液中可溶性氮含量達(dá)到20mg/ml，冷凍干燥得到花生活性肽。
權(quán)利要求
1.一種混合酶酶解制備花生蛋白活性肽的方法，其特征在于步驟如下1、蛋白鈍化， 取花生分離蛋白粉加入蒸餾水，使之溶解后，放入80 90°C恒溫水浴中保持20分鐘，使花生分離蛋白鈍化；2、酶解，冷卻至室溫，加入混合蛋白酶，所述混合蛋白酶包含堿性蛋白酶 37% 39%、中性蛋白酶37% 39%和風(fēng)味蛋白酶22% M%，在50 60°C的恒溫水浴振蕩器中反應(yīng)12 15分鐘；3、酶滅活，反應(yīng)結(jié)束后立即取出，放入100°C水浴中保持5分鐘，使酶失活；4、得到活性肽，冷水冷卻，測(cè)定水解液中可溶性氮含量，冷凍干燥得到花生蛋白活性肽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的混合酶酶解制備花生蛋白活性肽的方法，其特征在于所述花生分離蛋白粉和蒸餾水取用的質(zhì)量比設(shè)置在1 8 1 11的范圍內(nèi)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種混合酶酶解制備花生蛋白活性肽的方法，通過蛋白鈍化、酶解、酶滅活、得到活性肽四個(gè)步驟，利用包含堿性蛋白酶、中性蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶的混合蛋白酶，使花生蛋白活性肽的制備時(shí)間大大縮短，制備時(shí)間由傳統(tǒng)的6～13小時(shí)縮短到40分鐘以下，花生蛋白活性肽得率從傳統(tǒng)的70％以下提高到75％～95％。
文檔編號(hào)C12P21/06GK102242175SQ20111010583
公開日2011年11月16日 申請(qǐng)日期2011年4月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月27日
發(fā)明者于麗娜, 孫杰, 張會(huì)翠, 張初署, 朱鳳, 楊慶利, 畢杰, 高俊安 申請(qǐng)人:山東省花生研究所