專利名稱：一種用于篩檢食品中乙酰甲胺磷殘留的微生物方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一株長雙歧桿菌菌株及其作為工作菌株在篩檢食品中乙酰甲胺磷殘留的應用。
背景技術：
乙酰甲胺磷，化學名稱是0，S-二甲基，N-乙?；虼柞０?，是殺蟲劑甲胺磷 (methmaidophos)的N-乙酰基衍生物。國際通用英文名為Ac印hate，分子式C4HltlNO3PS,分子量183. 16，結構式為
權利要求
1.一株長雙歧桿菌LJM002的應用，其特征在于所述菌株的應用為一株長雙歧桿菌 (Bifidobacterium longum)LJM002 CGMCC No. 4900應用于食品乙酰甲胺磷殘留的篩檢。
2.根據權利要求1所述的一株長雙歧桿菌LJM002的應用，其特征在于所述的一株長雙歧桿菌LJM-002應用于食品乙酰甲胺磷殘留的篩檢，包括步驟(1)篩檢培養(yǎng)基制備蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g，葡萄糖20g，乙酸鈉5g，K2HPO4 2g, MgSO4 ‘ 7 H2O 0. 5g，MnSO4 · 4H20 0. 2g，低聚果糖 3g，檸檬酸二銨 2g，吐溫-80 1ml，瓊脂 15g，顯色劑0. lg，蒸餾水1L，加熱溶解校正ρΗ6· 5，115°C高壓滅菌15-20分鐘；(2)菌懸液制備長雙歧桿菌LJM002接種于營養(yǎng)瓊脂的斜面培養(yǎng)基，35士2°C厭氧培養(yǎng) 24小時，用滅菌生理鹽水將菌苔洗下，制成懸液，置2-8°C冰箱中保存；(3)菌層平板制備取直徑約90mm、高16 17mm的平板，注入加熱融化的篩檢培養(yǎng)基 20mL，使在碟底內均勻攤布，放置水平臺上使凝固，作為底層；在已凝固的底層培養(yǎng)基(放冷至48 50°C )上加入菌懸液0. 5mL，充分混勻，使在底層上均勻攤布，作為菌層；(4)樣品處理取待檢的食品樣品勻漿組織5g，用無菌磷酸鹽緩沖液(pH6.0)20ml 稀釋，漩渦混勻，于80°C水浴加熱5min，冷卻后于5000r/min離心15min，取上清液作為供試樣品液；(5)樣品測定在菌層平板的培養(yǎng)皿中放置圓濾紙片(直徑13士1mm)，用鑷子輕壓紙片，使紙片與培養(yǎng)基緊密接觸，用微量移液器在圓濾紙片上滴加供試樣品液90μ 1。每個供試樣至少重復2個培養(yǎng)皿，35 士2°C厭氧培養(yǎng)18 M小時，抑菌圈直徑通過抑菌圈電腦測量分析儀測量；(6)結果判定當抑菌圈>15mm，判斷食品樣品中乙酰甲胺磷殘留陽性(+)。
3.根據權利要求2所述的一株長雙歧桿菌LJM002應用于食品乙酰甲胺磷殘留的篩檢， 其特征在于，其中步驟(1)所述的顯色劑為5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷(X-Gal)。
4.根據權利要求2所述的一株長雙歧桿菌LJM002應用于食品乙酰甲胺磷殘留的篩檢，其特征在于，其中步驟( 所述菌懸液在721分光光度計580nm波長下光透過率控制為 0. 8。
5.根據權利要求2所述的一株長雙歧桿菌LJM002應用于食品乙酰甲胺磷殘留的篩檢， 其特征在于，其中步驟(4)所述的食品樣品包括白菜、茄子、黃瓜、南瓜、冬瓜、蘋果、梨子、 桃子等蔬菜水果。
全文摘要
本發(fā)明提供了一株長雙歧桿菌LJM002菌株，保藏號為CGMCC No.4900。LJM002菌株對乙酰甲胺磷超敏感，是檢測食品中乙酰甲胺磷殘留的工作菌株。本發(fā)明還提供了一種篩檢食品中乙酰甲胺磷殘留的微生物法，根據篩檢培養(yǎng)基上抑菌圈的大小判定待測食品樣品中乙酰甲胺磷殘留量是否超標。本發(fā)明提供篩檢食品中乙酰甲胺磷殘留的方法具有操作簡便、費用低廉、靈敏度高、適合樣本篩檢的特點，更符合我國農藥殘留檢測部門的大量樣品篩檢要求。
文檔編號C12R1/01GK102268471SQ201110187990
公開日2011年12月7日 申請日期2011年6月25日 優(yōu)先權日2011年6月25日
發(fā)明者劉佳明, 方芳, 王文蔚 申請人:溫州醫(yī)學院