專利名稱：與脂肪酸合成相關(guān)的蛋白GmMYB118及其編碼基因與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域中與脂肪酸合成相關(guān)的蛋白GmMYBllS及其編碼基因與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
植物油作為主要的食用油和重要的可再生能源物質(zhì)而受到廣泛關(guān)注。目前，世界上食用油的85%來自于植物油，只有25%來自于動(dòng)物和海洋生物。同時(shí)，植物油也被廣泛應(yīng)用于工業(yè)領(lǐng)域，如洗滌劑，潤(rùn)滑油，油漆和生物可降解塑料等。另外，值得一提的是，植物柴油的開發(fā)可能為解決全球能源危機(jī)和環(huán)境污染提供了一條新的途徑。隨著人們對(duì)植物油的需求量越來越大，現(xiàn)有的產(chǎn)量將遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足社會(huì)的需求。大豆作為主要的經(jīng)濟(jì)作物之一，是食用植物油的重要來源。大豆油的飽和脂肪酸與不飽和脂肪酸的比例相對(duì)其它的植物油(如菜籽油、花生油等)較為合理，其消費(fèi)量和食用量也已經(jīng)逐步超過了其它植物油，成為人們?nèi)粘ｏ嬍持匾臓I(yíng)養(yǎng)來源之一。我國(guó)是大豆的故鄉(xiāng)，世界上其他國(guó)家種植的大豆，大都是直接或間接從我國(guó)傳入的。20世紀(jì)50年代以前，中國(guó)是世界大豆的重大生產(chǎn)國(guó)。然而從1953年，這個(gè)地位被美國(guó)取而代之，隨著大豆在美洲的扎根、受扶植以及轉(zhuǎn)基因技術(shù)盛行，到1996年，中國(guó)由大豆凈出口國(guó)變成了凈進(jìn)口國(guó)。至2006年，大豆進(jìn)口量已接近中國(guó)糧食進(jìn)口總量的90%，而且大多來自美洲。因此提高大豆油的產(chǎn)量和含油量是我國(guó)目前迫切需要解決的問題。隨著生物技術(shù)的發(fā)展，轉(zhuǎn)基因工程為我們提供了一個(gè)有效的途徑。首先通過遺傳學(xué)的方法鑒定與油脂合成有關(guān)的調(diào)控基因，然后利用基因工程的方法來改善這些調(diào)控基因，從而提高大豆種子的含油量。近十余年來，科學(xué)家們利用生物技術(shù)對(duì)脂肪酸生物合成過程中的關(guān)鍵基因進(jìn)行遺傳改良，但都沒能取得顯著的效果，其中一個(gè)主要的原因是植物體內(nèi)的脂肪酸合成是一個(gè)復(fù)雜和高度協(xié)調(diào)的過程，是多基因協(xié)同完成的，因此改良單個(gè)的脂肪酸合成的基因，并不能有效的改善脂肪酸的含量。最近的研究發(fā)現(xiàn)，在脂肪酸的代謝過程中，很可能存在一種蛋白激酶或其它調(diào)控因子(例如轉(zhuǎn)錄因子)在起全面的調(diào)控作用 (Girke，Τ.，Todd, J.，Ruuska, S.，White, J.，Benning，C.，and Ohlrogge，J. . Microarray analysis of developing Arabidopsis seeds. Plant Physiol· 2000，124，1570-158L )。J|3 么通過對(duì)這些調(diào)控因子的遺傳改良達(dá)到增加脂肪酸含量的目的將成為可能。目前，通過對(duì)擬南芥的研究發(fā)現(xiàn)，參與植物脂肪酸代謝的最重要的轉(zhuǎn)錄因子是 LECl (Leafy Cotyledon 1)。LECl是擬南芥胚胎發(fā)生和種子成熟過程中一個(gè)關(guān)鍵的調(diào)控因子，同時(shí)也對(duì)胚胎形成過程中胚胎儲(chǔ)存物的積累進(jìn)行調(diào)控(Lotan，Τ.，Ohto, Μ.，Yee, K. Μ. , West, Μ. Α. , Lo, R. , Kwong, R. W. , Yamagishi, K. , Fischer, R. L. , Goldberg, R. B., and Harada, J. J. Arabidopsis LEAFY COTYLEDON1 is sufficient to induce embryo development in vegetative cells. Cell. 1998，93，1195-1205.)。過量表達(dá) LECl 可以誘導(dǎo)數(shù)目眾多的與脂肪酸合成相關(guān)基因的表達(dá)，包括編碼脂肪酸從頭合成關(guān)鍵限速酶乙酰輔酶A羧化酶中三個(gè)核基因組編碼亞基的基因，與此相吻合，在LECl過量表達(dá)植株中主要脂肪酸組分的含量大幅度上升(Mu, J.，Tan, H.，Zheng, Q.，F(xiàn)u, F.，Liang, Y.，Zhang, J.， Yang,X. ,Wang, Τ.，Chong，K. ,Wang, X. J. , et al. . LEAFY COTYLEDON 1 is a key regulator of fatty acid biosynthesis in Arabidopsis. Plant Physiol. 2008，148，1042—1054·)。 另外，我們前期的工作發(fā)現(xiàn)擬南芥中的另一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子AtMYBllS的過量表達(dá)也大量提高了 LECl的表達(dá)，從而導(dǎo)致脂肪酸含量上升(Wang，X.，Niu, Q. W.，Teng, C.，Li C.，Mu J. Y.，Chua N. H.，and Zuo J. R. Overexpression of PGA37/MYB118 and MYBl15 promotes vegetative-to-embryonic transition in Arabidopsis. Cell Res. 2009,19 :224-235.)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供與脂肪酸合成相關(guān)的蛋白及其編碼基因。本發(fā)明所提供的與脂肪酸合成相關(guān)的蛋白，名稱為GmMYBllS，來源于大豆 (Glycine max L.)，是如下1)或2)的蛋白質(zhì)1)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；2)將序列表中序列1的氨基酸殘基序列經(jīng)過一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與脂肪酸合成相關(guān)的由1)衍生的蛋白質(zhì)。為了使1)中的GmMYBllS蛋白便于純化，可在由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)的氨基末端或羧基末端連接上6XMYC標(biāo)簽(序列為EQKLISEEDL)。上述幻中的GmMYBllS蛋白可人工合成，也可先合成其編碼基因，再進(jìn)行生物表達(dá)得到。上述2)中的GmMYBllS的編碼基因可通過將序列表中序列2所示的DNA序列中缺失或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的密碼子，和/或進(jìn)行一個(gè)或幾個(gè)堿基對(duì)的錯(cuò)義突變，和/或在其5'端和/或3'端連上6XMYC標(biāo)簽的編碼序列得到。上述與脂肪酸合成相關(guān)蛋白的編碼基因(命名為GmMTOllS基因)也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。所述與脂肪酸合成相關(guān)蛋白的編碼基因?yàn)槿缦?)-5)中任一所述的基因1)其核苷酸序列是序列表中的序列2 ；2)其核苷酸序列是序列表中的序列3 ；3)其核苷酸序列是序列表中的序列4 ；4)在嚴(yán)格條件下與1)或幻或幻的基因雜交且編碼所述與脂肪酸合成相關(guān)蛋白的基因；5)與1)或2)或3)或4)的基因具有90%以上的同源性且編碼所述與脂肪酸合成相關(guān)蛋白的基因。上述嚴(yán)格條件可為用6XSSC，0. 5% SDS的溶液，在65°C下雜交，然后用2XSSC， 0. 1 % SDS 和 1 X SSC, 0. 1 % SDS 各洗膜一次。序列表中的序列3由1819個(gè)堿基組成，自5’末端第位為第一個(gè)外顯子，自 5’末端第355-391位堿基為第一個(gè)內(nèi)含子，自5’末端第392-571位堿基為第二個(gè)外顯子， 自5’末端第572-867位堿基為第二個(gè)內(nèi)含子，自5’末端第868-993位堿基為第三個(gè)外顯子，自5，末端第994-1250位堿基為第三個(gè)內(nèi)含子，自5，末端第1251-1719位堿基為第四個(gè)外顯子，自5’末端第1720-1755位堿基為第四個(gè)內(nèi)含子，自5’末端第1756-1819位堿基為第五個(gè)外顯子。
含有上述與脂肪酸合成相關(guān)蛋白的編碼基因的表達(dá)盒、重組表達(dá)載體、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。所述重組表達(dá)載體具體可為在雙元載體pERlO的多克隆位點(diǎn)間插入上述與脂肪酸合成相關(guān)蛋白的編碼基因得到重組表達(dá)載體。擴(kuò)增所述與脂肪酸合成相關(guān)蛋白的編碼基因全長(zhǎng)或其任一片段的引物對(duì)也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍；所述引物對(duì)中，一條引物序列如序列表中序列5所示，另一條引物序列如序列表中序列6所示。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種培育轉(zhuǎn)基因植物的方法。本發(fā)明所提供的培育轉(zhuǎn)基因植物的方法，是將上述與脂肪酸合成相關(guān)蛋白的編碼基因GmMYBllS或基因組DNA轉(zhuǎn)入目的植物中，得到脂肪酸含量高于所述目的植物的轉(zhuǎn)基因植物。所述脂肪酸為:C16:0、C18:0、C18:1、C18:2、C18:3、C20:0和 C20:l 中的至少一種。上述與脂肪酸合成相關(guān)蛋白的編碼基因GmMYBllS是通過上述重組表達(dá)載體導(dǎo)入目的植物中的。所述重組表達(dá)載體為在雙元載體pERlO的多克隆位點(diǎn)間插入所述與脂肪酸合成相關(guān)蛋白的編碼基因得到的重組表達(dá)載體。上述與脂肪酸合成相關(guān)蛋白GmMYB118、編碼基因GmMYB118和/或含有編碼基因 GmMYBllS的表達(dá)盒、重組表達(dá)載體、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌在合成脂肪酸中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍；所述脂肪酸為C16:0、C18:0、C18:1、C18:2、C18:3、C20:0和C20:l中的至少一種。攜帶有本發(fā)明編碼的GmMYBllS基因或其同源序列的植物表達(dá)載體可通過使用原生質(zhì)體-化學(xué)介導(dǎo)法(Ca2+、PEG)、Ti質(zhì)粒、Ri質(zhì)粒、植物病毒載體、直接DNA轉(zhuǎn)化、花粉管、 微注射、電激、基因槍、農(nóng)桿菌介導(dǎo)等常規(guī)生物學(xué)方法中的任何一種或幾種方法的組合轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞、組織或器官，并將轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞、組織或器官培育成植株；所述組織和器官可包括宿主植物的果莢、愈傷組織、莖尖、葉片和種子等。被轉(zhuǎn)化的宿主植物(目的植物)為雙子葉植物；所述雙子葉植物具體為擬南芥或大豆。本發(fā)明獲得了與脂肪酸合成相關(guān)的基因GmMYBllS，并通過轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證了該基因的功能。實(shí)驗(yàn)證明，將本發(fā)明保護(hù)的基因GmMYBllS在擬南芥中過量表達(dá)后，可以提高擬南芥幼苗中脂肪酸的含量。這對(duì)提高大豆的脂肪酸含量及相關(guān)性狀的改良具有重要的理論及實(shí)際意義，在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用和市場(chǎng)前景。


圖1為重組表達(dá)載體pER10-GmMYB118-6XMYC的圖譜。圖2為通過RT-PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)基因植株中GmMYBl 18基因的表達(dá)量。圖3為通過蘇丹紅染色指示轉(zhuǎn)基因擬南芥植株體內(nèi)脂肪酸含量的變化。圖4為通過氣象色譜-質(zhì)譜連用儀(GC-MS)測(cè)定的脂肪酸各組份的含量。圖5為野生型擬南芥植株和轉(zhuǎn)基因擬南芥植株的脂肪酸相對(duì)含量。
具體實(shí)施例方式下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。實(shí)施例1、基因的發(fā)現(xiàn)通過同源序列比對(duì)，在大豆中找到擬南芥AtMYB118基因的同源基因GmMYB118。在序列比對(duì)中發(fā)現(xiàn)大豆GmMYBl 18基因與擬南芥AtMYBl 18基因的保守結(jié)構(gòu)域達(dá)到42%的同源性。實(shí)施例2、轉(zhuǎn)基因植物的獲得及其檢測(cè)一、轉(zhuǎn)基因植物的獲得1、重組表達(dá)載體構(gòu)建以大豆(Glycine max cultivar Nannongl 1382)(公眾可從中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所獲得，記載過該材料的非專利文獻(xiàn)是LiaoY，Zou HF, Wei W，Hao YJ, Tian AG, Huang J, Liu YF, Zhang JS* and Chen SY*. Soybean GmbZIP44, GmbZIP62and GmbZIP 78genes function as negative regulator of ABA signaling and conf er salt and freezing tolerance in transgenic Arabidopsis. Planta. 2008，228 :225-240)的葉片基因組DNA為模板，用以下引物GmMYB 118-F :CCctcgagATGTTCAAAGAAAGCTATGTCTCA (小寫字母為 XhoI 的酶切位點(diǎn))(序列表中序列5)和GmMYBl 18-R GGcccgggCACACGAAGAATTTCATTACTAAT (小寫字母為 SmaI 酶切位點(diǎn)) (序列表中序列6)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到的PCR產(chǎn)物連接到中間載體pGEM-T Easy(購(gòu)自 Promega公司)上，獲得重組載體pT_GmMYB118，經(jīng)測(cè)序得到序列表中序列3第1_1擬8位所示的核苷酸序列。序列表中的序列3由19 個(gè)堿基組成，為包含GmMYBl 18基因的基因組DNA片段。 序列3自5’末端第1-285位為第一個(gè)外顯子，自5’末端第觀6-317位堿基為第一個(gè)內(nèi)含子，序列3自5’末端第318-3M位為第二個(gè)外顯子，自5’末端第355-391位堿基為第二個(gè)內(nèi)含子，自5’末端第392-571位堿基為第三個(gè)外顯子，自5’末端第572-867位堿基為第三個(gè)內(nèi)含子，自5，末端第868-993位堿基為第四個(gè)外顯子，自5，末端第994-1250位堿基為第四個(gè)內(nèi)含子，自5’末端第1251-1719位堿基為第五個(gè)外顯子，自5’末端第1720-1755位堿基為第五個(gè)內(nèi)含子，自5’末端第1756-19 位堿基為第六個(gè)外顯子。序列表中的序列3第1_1擬8位所示的基因組DNA對(duì)應(yīng)的cDNA編碼區(qū)的核苷酸序列如序列表中序列2所示。序列2由1269個(gè)堿基組成，編碼具有序列表中序列1的氨基酸序列的蛋白，將該蛋白命名為GmMYBllS。序列表中序列1由423個(gè)氨基酸殘基組成。用SmaI和BamHI酶對(duì)載體pBA_6xMYC(公眾可從中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所獲得，記載過該載體的非專利文獻(xiàn)是aiou Q, Hare PD，Yang S V, Zeidler M，Huang LF and Chua NH. FHL is required for full phytochrome A signaling and shares overlapping functions with FHYl.Plant Journal. 2005. 43, 356-370.)雙酶切得到的小片段插入中間載體PSK(購(gòu)自默克公司上海辦事處)的SmaI和BamHI酶切位點(diǎn)間，得到重組載體pSK-6xMYC。然后用BioI和SmaI雙酶切上述獲得的pT_GmMYB118得到的小片段插入 pSK-6xMYC 的 XhoI 和 SmaI 識(shí)別位點(diǎn)間，得到 ρSK-GmMYB 118_6xMYC。然后用 XhoI 和 spel雙酶切上述獲得的pSK-GmMYB118-6xMYC，得到的小片段與用BioI和SpeI雙酶切雙元載體 PERlO (公眾可從中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所獲得，記載過該載體的非專利文獻(xiàn)是 Zuo, J. , Hare, P.D., and Chua, N. H. Applications of chemical—inducible expression systems in functional genomics and biotechnology. Methods in Molecular Biology-Arabidopsis Protocols, eds. Salinas, J.，and Sanchez-Serrano, J. J.，pp 2006. 329-342. Humana Press, NJ) (pERlO細(xì)菌抗性為壯觀酶素，轉(zhuǎn)基因植物抗性為卡那酶素)連接，得到最終載體pER10-GmMYB118-6XMYC，測(cè)序驗(yàn)證，結(jié)果在pERlO的BioI和SpeI酶切位點(diǎn)間插入了序列4所示DNA片段，序列4中第1-19 位為GmMYBl 18基因，第1938-2176 位為6xMYC，表明構(gòu)建的載體構(gòu)建正確。圖1為重組表達(dá)載體pER10-GmMYB118-6XMYC結(jié)構(gòu)模式圖其中promoter指啟動(dòng)子；Ter為終止子；NPTII為卡那抗性篩選基因；LexA是細(xì)菌抑制子；XVE是LexA細(xì)菌抑制子的DNA結(jié)合域(X)和單純皰疹病毒蛋白VP16的反式活化域(V)以及雌激素受體的配體結(jié)合域(E)構(gòu)成。pERlO在雌激素的誘導(dǎo)下可以使目的基因在植物體內(nèi)過量表達(dá)，是35S啟動(dòng)子的3-5倍。2、轉(zhuǎn)基因植物獲得將步驟1得到的重組表達(dá)載體pERlO-GmMYB 118-6XMYC用電激轉(zhuǎn)化方法轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌GV3101(購(gòu)自^witrogen公司)菌株中。篩選出具有壯觀霉素抗性的農(nóng)桿菌即為陽性轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌。挑取陽性轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌單菌落接種于20ml LB液體培養(yǎng)基(含壯觀酶素 50mg/L，利福平50mg/L)中，，150rpm振蕩培養(yǎng)2天。所獲菌液以2%接種量接菌于含有利福平和壯觀酶素的300ml LB培養(yǎng)基，按照上述條件振蕩培養(yǎng)16-18小時(shí)。所獲菌液經(jīng)5，OOOrpm,20分鐘離心收集菌體，菌體重懸于250ml含有5%蔗糖和Silwet L-77 (LEHLE SEEDS公司)轉(zhuǎn)化液中，慢慢搖勻。轉(zhuǎn)化液轉(zhuǎn)入250ml燒杯中，將已去掉花和果莢的野生型擬南芥Col-O (公眾可從中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所獲得，記載過該材料的非專利文獻(xiàn)是:Ren, B. , Liang, Y, Deng, Y, Chen, Q. , Zhang, J. , Yang, X. , and Zuo, J. (2009) Genome-wide comparative analy sis of type—A Arabidopsis response regulator genes by overexpression studies reveals their diverse roles and regulatory mechanisms in cytokinin signaling. Cell Res. 19 :1178-1190.)倒置于燒杯中，在真空狀態(tài)保持20秒為宜。將轉(zhuǎn)化后的擬南芥培養(yǎng)得到種子，將得到的擬南芥種子在含卡那霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，長(zhǎng)出綠葉和根系的苗為轉(zhuǎn)基因擬南芥Tl代。從Tl代轉(zhuǎn)基因擬南芥單株上收獲種子，播種后獲得T2代轉(zhuǎn)基因擬南芥植株的純合系。同時(shí)，用與獲得轉(zhuǎn)GmMYBllS基因植株相同的方法，得到轉(zhuǎn)空載體對(duì)照擬南芥植株；并設(shè)未進(jìn)行任何轉(zhuǎn)基因處理的擬南芥作為野生型對(duì)照植株。二、轉(zhuǎn)基因植物的檢測(cè)1、通過RT-PCR檢測(cè)GmMYBl 18基因的表達(dá)量T2代轉(zhuǎn)基因的純合系種子以及野生型對(duì)照植株的種子萌發(fā)后7天，用10 μ M的雌激素(購(gòu)自Sigma公司)處理24h后，參照下面的方法提取RNA，并取1 μ g RNA反轉(zhuǎn)成相應(yīng)的cDNA，然后利用引物GmMYBl 18RT-F和GmMYBl 18-R進(jìn)行RT-PCR檢測(cè)GmMYBl 18基因的表達(dá)量。利用引物UBQ5-F1和UBQ5-F2擴(kuò)增UBQ基因作為內(nèi)標(biāo)，引物序列如表1。結(jié)果如圖2 所示，Col代表野生型植株，L4和L9分別代表不同的pER10-GmMYB118-6XMYC轉(zhuǎn)基因株系， 從圖中可見，與野生型(Col)對(duì)照植株相比，轉(zhuǎn)基因植株中GmMYBllS基因的表達(dá)量顯著增加。這兩個(gè)高表達(dá)量的pER10-GmMYB118-6XMYC轉(zhuǎn)基因株系L4和L9，將用于下面脂肪酸的檢測(cè)。轉(zhuǎn)空載體對(duì)照擬南芥植株中GmMYBllS基因的表達(dá)量與野生型對(duì)照植株無顯著差異。表1引物序列
權(quán)利要求
1.一種蛋白，是如下1)或幻的蛋白質(zhì)1)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；2)將序列表中序列1的氨基酸殘基序列經(jīng)過一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與脂肪酸合成相關(guān)的由1)衍生的蛋白質(zhì)。
2.權(quán)利要求1所述蛋白的編碼基因。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的編碼基因，其特征在于所述編碼基因?yàn)槿缦?)-5)中任一所述的基因1)其核苷酸序列是序列表中的序列2；2)其核苷酸序列是序列表中的序列3；3)其核苷酸序列是序列表中的序列4；4)在嚴(yán)格條件下與1)或幻或幻的基因雜交且編碼權(quán)利要求1所述蛋白的基因；5)與1)或幻或幻或4)的基因具有90%以上的同源性且編碼權(quán)利要求1所述蛋白的基因。
4.含有權(quán)利要求2或3所述編碼基因的表達(dá)盒、重組表達(dá)載體、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌。
5.一種培育轉(zhuǎn)基因植物的方法，是將權(quán)利要求2或3所述的編碼基因轉(zhuǎn)入目的植物中， 得到脂肪酸含量高于所述目的植物的轉(zhuǎn)基因植物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于權(quán)利要求2或3所述的編碼基因是通過權(quán)利要求4或5所述的重組表達(dá)載體導(dǎo)入目的植物中。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征在于所述重組表達(dá)載體為在雙元載體 PERlO的多克隆位點(diǎn)間插入權(quán)利要求2或3所述的編碼基因得到的重組表達(dá)載體。
8.根據(jù)權(quán)利要求5-7中任一所述的方法，其特征在于所述目的植物為雙子葉植物；所述雙子葉植物具體為擬南芥或大豆。
9.根據(jù)權(quán)利要求5-8中任一所述的方法，其特征在于所述脂肪酸為C16:0、C18:0、 C18:1、C18:2、C18:3、C20:0 和 C20:l 中的至少一種。
10.權(quán)利要求1所述的蛋白、權(quán)利要求2或3所述的編碼基因和/或權(quán)利要求4所述的表達(dá)盒、重組表達(dá)載體、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌在合成脂肪酸中的應(yīng)用；所述脂肪酸為C16:0、C18:0、C18:1、C18:2、C18:3、C20:0 和 C20:l 中的至少一種。
全文摘要
本發(fā)明公開了與脂肪酸合成相關(guān)的蛋白GmMYB118及其編碼基因與應(yīng)用。本發(fā)明所提供的與脂肪酸合成相關(guān)的蛋白，名稱為GmMYB118，來源于大豆(Glycine max L.)，是如下1)或2)的蛋白質(zhì)1)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；2)將序列表中序列1的氨基酸殘基序列經(jīng)過一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物脂肪酸合成相關(guān)的由1)衍生的蛋白質(zhì)。將本發(fā)明保護(hù)的基因GmMYB118在擬南芥中過量表達(dá)后，可以提高擬南芥幼苗中脂肪酸的含量。這對(duì)提高大豆的脂肪酸含量及相關(guān)性狀的改良具有重要的理論及實(shí)際意義，在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用和市場(chǎng)前景。
文檔編號(hào)C12N15/29GK102304175SQ20111025272
公開日2012年1月4日 申請(qǐng)日期2011年8月30日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月30日
發(fā)明者左建儒, 梁巖, 牟金葉 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所