專(zhuān)利名稱(chēng)：一種產(chǎn)紫青霉菌db1菌株及其制備和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于產(chǎn)紫青霉菌菌株及其制備和應(yīng)用領(lǐng)域，特別涉及一種產(chǎn)紫青霉菌DBl 菌株及其制備和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
麻是紡織原料之一，其品種主要有亞麻、苧麻、大麻、黃麻、紅麻、羅布麻、劍麻、蕉麻、蕁麻和苘麻等。麻纖維是從各種麻植物取得的纖維的統(tǒng)稱(chēng)，具有吸濕、透氣、散熱和抗菌等其他天然纖維無(wú)法比擬的優(yōu)點(diǎn)。我國(guó)作為世界上麻類(lèi)資源最豐富的國(guó)家之一，每年生產(chǎn)的麻纖維及其制品除滿(mǎn)足國(guó)內(nèi)市場(chǎng)的需求，還作為大宗商品出口美國(guó)、西歐及東南亞國(guó)家， 年均創(chuàng)匯近百億美元。在國(guó)家節(jié)能減排政策和消費(fèi)者回歸自然、追求綠色的消費(fèi)觀念推動(dòng)下，麻類(lèi)纖維綠色加工技術(shù)已經(jīng)成為紡織領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。亞麻、大麻、黃麻和紅麻纖維的主要組成為纖維素，此外還有較多的半纖維素、果膠和木質(zhì)素等非纖維素物質(zhì)包裹在麻纖維表面。這些膠質(zhì)，特別是木質(zhì)素等非纖維素物質(zhì)膠結(jié)在纖維外面，使得原麻呈堅(jiān)固的片條狀。所以，原麻在紡紗過(guò)程中須通過(guò)一道脫膠過(guò)程去除木質(zhì)素等膠質(zhì)，以滿(mǎn)足紡紗要求。目前，麻紡行業(yè)常用的煮練方法主要是化學(xué)方法，即利用強(qiáng)酸強(qiáng)堿對(duì)原麻或麻粗紗進(jìn)行處理。化學(xué)脫膠工藝能耗大、設(shè)備損耗大，且排放的廢水無(wú)法循環(huán)利用，污染問(wèn)題嚴(yán)重。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種產(chǎn)紫青霉菌(Penicillium purpurogenum)DBl菌株及其應(yīng)用，該菌株生長(zhǎng)周期短，菌種不易被污染，處理成本低，脫膠條件溫和，抗污染能力強(qiáng)，耐熱性能好，無(wú)環(huán)境污染，處理后纖維質(zhì)量好；其制備方法簡(jiǎn)單、 生產(chǎn)流程短、適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明的一種產(chǎn)紫青霉菌(Penicilliumpurpurogenum) DBl 菌株，其 18S rRNA 基因序列，如下GCACTCTTTTACTGTGAAACTGCGAATGGCTCATTAAATCAGTTATCGTTTATTTGATAGTACCCTACT ACATGGATACCTGTGGTAATTCTAGAGCTAATACATGCGCAAAACCCCGACTTCGGAAGGGGTGTATTTATTAGATA AAAAACCAATGCCCTTCGGGGCTCCTTGGTGATTCATAATAACTTCACGAATCGCATGGCCTTGCGCCGGCGATGGT TCATTCAAATTTCTGCCCTATCAACTTTCGATGGTAGGATAGTGGCCTACCATGGTGGCAACGGGTAACGGGGAATT AGGGTTCGATTCCGGAGAGGGAGCCTGAGAAACGGCTACCACATCCAAGGAAGGCAGCAGGCGCGCAAATTACCCAA TCCCGATACGGGGAGGTAGTGACAATAAATACTGATACAGGGCTCTTTTGGGTCTTGTAATTGGAATGAGAACAATC TAAATCCCTTAACGAGGAACAATTGGAGGGCAAGTCTGGTGCCAGCAGCCGCGGTAATTCCAGCTCCAATAGCGTAT ATTAAAGTTGTTGCAGTTAAAAAGCTCGTAGTTGAACCTTGGGCCCGTCCTGCCGGTCCGCCTCACCGCGAGTACTG GTCCGGATGGGCCTTTCTTTCTGGGGAATCCCATGGCCTTCACTGGCTGTGGCGGGGAACCAGGACTTTTACTGTGA AAAAATTAGAGTGTTCAAAGCAGGCCTTTGCTCGGATACATTAGCATGGAATAATAGAATAGGACGTGCGGTTCTAT TTTGTTGGTTTCTAGGACCGCCGTAATGATTAATAGGGATAGTCGGGGGCGTCAGTATTCAGCTGTCAGAGGTGAAATTCTTGGATTTGCTGAAGACTAACTACTGCGAAAGCATTCGCCAAGGATGTTTTCATTAATCAGGGAACGAAAGTTA GGGGATCGAAGACGATCAGATCCCGTCGTAGTCTTAACCATAAACTATGCCGACTAGGGATCGGGCGGGGTTTCTAT GATGACCCGCTCGGCACCTTACGAGAAATCAAAGTTTTTGGGTTCTGGGGGGAGTATGGTCGCAAGGCTGAAACTTA AAGAAATTGACGGAAGGGCACCACAAGGCGTGGAGCCTGCGGCTTAATTTGACTCAACACGGGGAAACTCACCAGGT CCAGACAAAATAAGGATTGACAGATTGAGAGCTCTTTCTTGATCTTTTGGATGGTGGTGCATGGCCGTTCTTAGTTG GTGGAGTGATTTGTCTGCTTAATTGCGATAACGAACGAGACCTCGGCCCTTAAATAGCCCGGTCCGCGTTTGCGGGC CGCTGGCTTCTTAGGGGACTATCGCT。上述的產(chǎn)紫青霉菌(Penicillium purpurogenum) DBl菌株，特征如下?tīng)I(yíng)養(yǎng)菌絲體無(wú)色、淡色或具鮮明顏色；菌絲有橫隔，分生孢子梗亦有橫隔，光滑或粗糙；基部無(wú)足細(xì)胞，頂端不形成膨大的頂囊，其分生孢子梗經(jīng)過(guò)多次分枝，產(chǎn)生幾輪對(duì)稱(chēng)或不對(duì)稱(chēng)的小梗，形如掃帚，稱(chēng)為帚狀體；分生孢子球形、橢圓形或短柱形，光滑或粗糙，大部分生長(zhǎng)時(shí)呈藍(lán)綠色；馬鈴薯土豆培養(yǎng)基菌落生長(zhǎng)速度稍快，培養(yǎng)14天后直徑約8cm， 分生孢子結(jié)構(gòu)大量，表面灰綠色，邊緣白色，質(zhì)地為致密棉絮狀，背面無(wú)色；分生孢子梗莖70-250 μ mX2. 5-3. 5 μ m,壁光滑，頂端通常膨大；帚狀枝雙輪生，彼此緊貼而近于平行；?；惠?-8個(gè)，9. 0 -13 X 2. 5 -3. 0 μ m ；披針形，梗頸明顯，分生孢子呈現(xiàn)橢圓形， 2. 8-3. 5X2. 2-3. Oym,壁平滑。本發(fā)明提供的產(chǎn)紫青霉菌(Penicillium purpurogenum)DBl菌株的保藏號(hào)為 CGMCCNo.4694，保藏日為2011年3月17日，建議分類(lèi)命名為產(chǎn)紫青霉(Penicillium purpurogenum)。根據(jù)18sR DNA測(cè)序(如圖5-9)Blast及聚類(lèi)分析結(jié)果，該菌與產(chǎn)紫青霉菌相似性為99%，結(jié)合生理生化試驗(yàn)結(jié)果和鏡檢分析，命名此菌株為產(chǎn)紫青霉菌(Penicillium purpurogenum) DBl 菌株。本發(fā)明的一種產(chǎn)紫青霉菌DBl菌株的制備方法，包括(1)將腐爛海草按Ig 20ml的比例置于富集培養(yǎng)基中室溫靜置培養(yǎng)30天，然后取0. Iml富集培養(yǎng)基涂布于分離培養(yǎng)基中，30°C靜置培養(yǎng)1 4天，獲得野生型亞麻生物處理優(yōu)勢(shì)菌株；(2)將步驟(1)中得到的菌株接種到亞麻木質(zhì)素營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中，28°C培養(yǎng)72h ；(3)從上述亞麻木質(zhì)素營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中選擇出具有降解木質(zhì)素能力的菌株。所述步驟(1)中的富集培養(yǎng)基配方為亞麻粉5g，自來(lái)水200ml，pH自然；分離培養(yǎng)基配方為亞麻粉 5g, (NH4)2SO4 5g，K2HPO4 lg，MgSO4 0. 5g，KCl 0. 5g，F(xiàn)eSO4 0. 01，瓊脂 20g,水 IOOOmL,用 NaOH 將 pH 調(diào)節(jié)到 7-7. 2。所述步驟O)中的亞麻木質(zhì)素營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基的組分包括亞麻木質(zhì)素2g，NaNO3 3g， K2HPO4 0. 5g，MgSO4 lg,瓊脂 20g，水 lOOOmL，用 NaOH 將 pH 調(diào)節(jié)到 7-7. 2。本發(fā)明的一種產(chǎn)紫青霉菌DBl菌株在過(guò)氧化物脫膠制備紡織用亞麻、大麻、黃麻或紅麻等韌皮纖維工藝中的應(yīng)用。所述的應(yīng)用步驟，包括(1)將產(chǎn)紫青霉菌DBl菌株保存于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，30°C 220rpm培養(yǎng) 48h，添加凍存緩沖液；凍存緩沖液由磷酸二氫鉀0. 0627g，磷酸氫二鉀0. 0177g，檸檬酸鈉 0. 0588g，七水合硫酸鎂0. (^645g，甘油10ml，加水定容至IOOrnl制得；
(2)在滅菌冷卻后的50mL馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基中，接入步驟(1)所得的菌一環(huán)，在轉(zhuǎn)速220r/min、溫度30°C條件下?lián)u瓶培養(yǎng)48h ；(3)將步驟( 所得的培養(yǎng)基接種入亞麻木質(zhì)素發(fā)酵培養(yǎng)基5L，在轉(zhuǎn)速220r/min、 溫度30°C條件下?lián)u瓶培養(yǎng)4 得到發(fā)酵菌液；其中，亞麻發(fā)酵培養(yǎng)基配方為亞麻原麻木質(zhì)素 5g，KCl 0.05g，磷酸氫二鉀 0. lg，MgSO4 0. 05g, FeSO4 0. OOlg, (NH4)2SO4 0.5g，補(bǔ)水至 IOOml定容；(4)將滅菌后的亞麻、大麻、黃麻或紅麻原料與步驟C3)所得發(fā)酵菌液按浴比 1 20混合，在30°C，160-220rpm搖床中分別處理1 4天，處理時(shí)間到時(shí)，除去發(fā)酵液，得到亞麻、大麻、黃麻或紅麻纖維；(5)將上述亞麻、大麻、黃麻或紅麻纖維和脫膠液按混合，在70-10(TC溫度下處理 1-8小時(shí)，然后水洗，并按常規(guī)的方法上油、干燥，即得到可供紡織用的纖維；其中亞麻、大麻、黃麻或紅麻纖維對(duì)脫膠液的重量比為1 8-1 25，脫膠溫度為70-100°C，時(shí)間為1-8 小時(shí)。步驟中所述的亞麻、大麻、黃麻或紅麻原料為麻的原莖、紗線或織物。步驟(5)中所述的脫膠液是由過(guò)氧化物脫膠劑、螯合劑、氫鍵破壞劑和水組成；其中過(guò)氧化物脫膠劑、螯合劑和氫鍵破壞劑之和與脫膠溶液的重量比1:8-1: 25。步驟(5)中所述的過(guò)氧化物脫膠劑為過(guò)氧化氫、過(guò)硫酸鉀、過(guò)硫酸鈉、過(guò)硫酸銨、 過(guò)碳酸鉀、過(guò)碳酸鈉、過(guò)碳酸銨、過(guò)硼酸鉀、過(guò)硼酸鈉或過(guò)硼酸銨，其用量為亞麻、大麻、黃麻或紅麻纖維重量的0. 25-8%。步驟(5)中所述的螯合劑是磷酸鈉、三聚磷酸鈉，偏磷酸鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、檸檬酸、乙二胺四乙酸二鈉的一種或幾種，其用量為亞麻、大麻、黃麻或紅麻纖維重量的0. 1-4% ；氫鍵破壞劑是尿素，其用量為亞麻、大麻、黃麻或紅麻纖維重量的0. 05-2%。提取菌株的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，選用真菌18S rRNA基因通用引物序列(5-ATT GGAGGG CAA GTC TGG TG-3 和 5-CCG ATC CCT AGT CGG CAT AG-3)；進(jìn)而測(cè)得菌株 18SrRNA 全序列，如下AGAGTTTGATCCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTCGAGCGAACAGAAA AGGAGCTTGCTCCTTTGACGTTAGCGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGCAACCTACCCTATAGTTTGGGATAACT CCGGGAAACCGGGGCTAATACCGAATAATCTCTTTTGCTTCATGGCAAGAGACTGAAAGACGGCATCTCGCTGTCGC TATAAGATGGGCCCGCGGCGCATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGATGCGTAGCCGACCTGA GAGGGTGATCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAAT GGGCGAAAGCCTGATGGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAAAACTCTGTTGTAAGGGAAGAA CAAGTACAGTAGTAACTGGCTGTACCTTGACGGTACCTTATTAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCG GTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGGAATTATTGGGCGTAAAGCGCGCGCAGGCGGTCCTTTAAGTCTGATGTG AAAGCCCACGGCTCAACCGTGGAGGGTCATTGGAAACTGGGGGACTTGAGTGCAGAAGAGGAAAGTGGAATTCCAAG TGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATTTGGAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGACTTTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAG GCGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAGTGCTAAGTGTTAGG GGGTTTCCGCCCCTTAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTACGGTCGCAAGACTGAAACTCA AAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTC TTGACATCCCGTTGACCACTGTAGAGATATAGTTTCCCCTTCGGGGGCAACGGTGACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGATCTTAGTTGCCATCATTTAGTTGG GCACTCTAAGGTGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTG GGCTACACACGTGCTACAATGGACGATACAAACGGTTGCCAACTCGCGAGAGGGAGCTAATCCGATAAAGTCGTTCT CAGTTCGGATTGTAGGCTGCAACTCGCCTACATGAAGCCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGA ATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCACGAGAGTTTGTAACACCCGAAGTCGGTGAGGTAACCTT TTGGAGCCAGCCGCCGAAGGTGGGATAGATGATTGGGGTGAAGTCGTAACAAGGTAACC。在構(gòu)建的培養(yǎng)條件下，該菌株培養(yǎng)條件粗放，耐熱性好，生長(zhǎng)繁殖快，可以有效去除亞麻、大麻、黃麻或紅麻纖維中的木質(zhì)素等膠質(zhì)，且酶活穩(wěn)定，菌、酶均無(wú)毒性。該菌株及培養(yǎng)系統(tǒng)能夠直接用于亞麻脫膠。菌種前處理或處理后，實(shí)用環(huán)境友好型過(guò)氧化物進(jìn)行滅活處理，以替代傳統(tǒng)的沸水滅活工藝，以節(jié)約用水；同時(shí)利用滅活工藝中過(guò)氧化物的強(qiáng)氧化性對(duì)菌種處理后的麻試樣進(jìn)行精煉和漂白處理，以進(jìn)一步優(yōu)化工藝，節(jié)能減排。本發(fā)明的菌株具有對(duì)亞麻、大麻、黃麻或紅麻等韌皮纖維木質(zhì)素降解的能力，能應(yīng)用于韌皮纖維表面改性。本發(fā)明提供菌株及培養(yǎng)系統(tǒng)能夠直接用于亞麻、大麻、黃麻或紅麻纖維等韌皮纖維紡織加工的生物前處理。本發(fā)明提供菌株具有生長(zhǎng)周期短，菌種不易被污染，處理成本低，脫膠條件溫和，抗污染能力強(qiáng)，耐熱性能好，無(wú)環(huán)境污染，處理后纖維質(zhì)量好等優(yōu)點(diǎn)；與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明將環(huán)境友好型過(guò)氧化物應(yīng)用于菌種的滅活、麻纖維的精煉和漂白工序，并將三個(gè)工序合并為一個(gè)工序。因此本發(fā)明具有工藝簡(jiǎn)單、生產(chǎn)流程短、適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)等特點(diǎn)，對(duì)于探索產(chǎn)紫青霉菌在大規(guī)模生產(chǎn)條件下進(jìn)行韌皮纖維表面改性和紡織加工前木質(zhì)素去除的生物前處理具有重要意義。有益效果(1)本發(fā)明提供菌株及培養(yǎng)系統(tǒng)，經(jīng)檢測(cè)高產(chǎn)木質(zhì)素降解酶，能夠直接用于亞麻脫膠，具有脫膠周期短，木質(zhì)素去除率達(dá)到70-80%，纖維分散率達(dá)100%，對(duì)亞麻脫膠效果良好，脫膠效率達(dá)95 %，菌種不易被污染，處理成本低，纖維質(zhì)量好，脫膠條件溫和，抗污染能力強(qiáng)，耐熱性能好，無(wú)環(huán)境污染等優(yōu)點(diǎn)；( 本發(fā)明具有工藝簡(jiǎn)單、適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)等特點(diǎn)。利用該體系進(jìn)行亞麻脫膠具有脫膠時(shí)間短，亞麻纖維分散率達(dá)到100%，脫膠率達(dá)到90%以上，精干麻質(zhì)量好。


圖1為顯微鏡染色照片(油鏡)；圖2為土豆馬鈴薯培養(yǎng)基菌落照片；圖3為真菌處理過(guò)程照片；圖4為處理后亞麻纖維照片；圖5-9為產(chǎn)紫青霉菌DBl菌株的18SrDNA序列。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書(shū)所限定的范圍。實(shí)施例1亞麻脫膠菌種的篩選獲得(1)先將腐爛海草與富集培養(yǎng)基按Ig 20ml的比例于富集培養(yǎng)基中室溫靜置培養(yǎng)30天，然后取0. Iml富集培養(yǎng)基涂布于分離培養(yǎng)基，30°C靜置培養(yǎng)1 4天，獲得野生型亞麻生物處理優(yōu)勢(shì)菌株；其中，富集培養(yǎng)基配方為亞麻粉5g，自來(lái)水200ml，pH自然；分離培養(yǎng)基配方為亞麻粉 5g，(NH4)2SO4 5g，K2HPO4 lg，MgSO4 0. 5g, KCl 0. 5g, FeSO4 0. 01，瓊脂 20g，/K IOOOmL,用 NaOH 將 pH 調(diào)節(jié)到 7-7. 2 ；(2)將步驟(1)中得到的菌株接種到亞麻木質(zhì)素營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中，28°C培養(yǎng)72h。亞麻木質(zhì)素營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基，其組分包括亞麻木質(zhì)素2g，NaNO3 3g，K2HPO4 0. 5g，MgSO4 lg，瓊脂 20g,水 IOOOmL,用 NaOH 將 pH 調(diào)節(jié)到 7-7. 2 ；( 從上述培養(yǎng)基中選擇出具有降解木質(zhì)素能力的菌株。實(shí)施例2發(fā)酵菌液的制備(1)產(chǎn)紫青霉菌DBl菌株保存于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，30°C 220rpm培養(yǎng) 48h，添加凍存緩沖液；凍存緩沖液由磷酸二氫鉀0. 0627g，磷酸氫二鉀0. 0177g，檸檬酸鈉 0. 0588g，七水合硫酸鎂0. 02645g，甘油10ml，加水定容至100ml制得。(2)在滅菌冷卻后的50mL馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基中，接入步驟(1)所得的菌一環(huán)，在轉(zhuǎn)速220r/min、溫度30°C條件下?lián)u瓶培養(yǎng)48h ；(3)將步驟( 所得的培養(yǎng)基接種入亞麻木質(zhì)素發(fā)酵培養(yǎng)基5L，在轉(zhuǎn)速220r/min、 溫度30°C條件下?lián)u瓶培養(yǎng)4 得到發(fā)酵菌液；其中，亞麻發(fā)酵培養(yǎng)基配方為亞麻原麻木質(zhì)素 5g，KCl 0.05g，磷酸氫二鉀 0. lg，MgSO4 0. 05g, FeSO4 0. OOlg, (NH4)2SO4 0.5g，補(bǔ)水至 100ml定容。實(shí)施例3亞麻脫膠工藝如下將5g亞麻原莖置入250ml三角瓶，以亞麻原莖與實(shí)施例2的發(fā)酵菌液按浴比 1 20分裝于三角瓶中，裝液量為100ml，在40°C，200rpm搖床中分別脫膠1天；脫膠時(shí)間到時(shí)，除去脫膠液，停止生物處理。將生物處理后的亞麻原莖進(jìn)行滅活處理，其工藝為生物處理后的亞麻原莖和脫膠液以1 10的比例混合，并在70°C的條件下處理3小時(shí)，其中過(guò)氧化物的用量為亞麻原莖的3%，尿素用量為亞麻原莖的0. 05%，三聚磷酸鈉的用量為亞麻原莖的2%，乙二胺四乙酸二鈉的用量為亞麻原莖的0. 1%。脫膠后可制的2130支的紡織用亞麻纖維。實(shí)施例4大麻脫膠工藝如下將5g滅菌后的大麻纖維置入250ml三角瓶，以大麻與實(shí)施例2的發(fā)酵菌液按浴比 1 20分裝于三角瓶中，裝液量為100ml，在35°C，200rpm搖床中分別脫膠2天；脫膠時(shí)間到時(shí)，除去脫膠液，停止生物處理。將生物處理后的大麻進(jìn)行滅活處理，其工藝為生物處理后的大麻和脫膠液以1 25的比例混合，并在90°C的條件下處理1小時(shí)，其中過(guò)氧化物的用量為大麻的5%，尿素用量為大麻的1%，磷酸氫二鈉的用量為大麻的2%，磷酸二氫鈉的用量為大麻的2%。脫膠后可制的1190支的紡織用大麻纖維。實(shí)施例5黃麻脫膠工藝如下將5g滅菌后的黃麻置入250ml三角瓶，以黃麻與實(shí)施例2的發(fā)酵菌液按浴比 1 20分裝于三角瓶中，裝液量為100ml，在40°C，200rpm搖床中分別脫膠4天；脫膠時(shí)間到時(shí)，除去脫膠液，停止生物處理。將生物處理后的黃麻進(jìn)行滅活處理，其工藝為生物處理后的黃麻和脫膠液以1 8的比例混合，并在100°C的條件下處理8小時(shí)，其中過(guò)氧化物的用量為黃麻的8%，尿素用量為黃麻原莖的2%，偏磷酸鈉的用量為黃麻原莖的2%，乙二胺四乙酸二鈉的用量為黃麻的2%，三聚磷酸鈉的用量為黃麻的2%。脫膠后可制的820支的紡織用黃麻纖維。實(shí)施例6亞麻紗線煮練工藝如下將5g滅菌后的亞麻紗線(亞麻粗紗或亞麻二粗)置入250ml三角瓶，以亞麻紗線與實(shí)施例2的發(fā)酵菌液按浴比1 20分裝于三角瓶中，裝液量為100ml，在40°C，200rpm 搖床中分別脫膠1天；脫膠時(shí)間到時(shí)，除去脫膠液，停止生物處理。將生物處理后的亞麻紗線進(jìn)行滅活處理，其工藝為生物處理后的亞麻紗線和脫膠液以1 15的比例混合，并在 90°C的條件下處理2小時(shí)，其中過(guò)氧化物的用量為亞麻紗線的2%，尿素用量為亞麻紗線的 0.05%，三聚磷酸鈉的用量為亞麻紗線的2%，磷酸鈉的用量為亞麻紗線的1%。脫膠后可制的1530支的紡織用亞麻紗線。實(shí)施例7亞麻織物生物處理工藝如下將5g滅菌后的亞麻織物置入250ml三角瓶，以亞麻原莖與實(shí)施例2的發(fā)酵菌液按浴比1 20分裝于三角瓶中，裝液量為100ml，在40°C，200rpm搖床中分別脫膠1天；脫膠時(shí)間到時(shí)，除去脫膠液，停止生物處理。將生物處理后的亞麻織物進(jìn)行滅活處理，其工藝為 生物處理后的亞麻織物和脫膠液以1 10的比例混合，并在85°C的條件下處理1小時(shí)，其中過(guò)氧化物的用量為亞麻織物的2. 5%，尿素用量為亞麻織物的1%，磷酸鈉的用量為亞麻織物的3%，乙二胺四乙酸二鈉的用量為亞麻織物的1%，檸檬酸的用量為亞麻織物的1%。 脫膠后，亞麻織物白度、柔軟度顯著改善，刺癢感顯著減低。
權(quán)利要求
1.一種產(chǎn)紫青霉菌(Penicillium purpurogenum)DBl菌株，其18S rRNA基因序列，如下GCACTCTTTTACTGTGAAACTGCGAATGGCTCATTAAATCAGTTATCGTTTATTTGATAGTACCCTACTACA TGGATACCTGTGGTAATTCTAGAGCTAATACATGCGCAAAACCCCGACTTCGGAAGGGGTGTATTTATTAGATAAAA AACCAATGCCCTTCGGGGCTCCTTGGTGATTCATAATAACTTCACGAATCGCATGGCCTTGCGCCGGCGATGGTTCA TTCAAATTTCTGCCCTATCAACTTTCGATGGTAGGATAGTGGCCTACCATGGTGGCAACGGGTAACGGGGAATTAGG GTTCGATTCCGGAGAGGGAGCCTGAGAAACGGCTACCACATCCAAGGAAGGCAGCAGGCGCGCAAATTACCCAATCC CGATACGGGGAGGTAGTGACAATAAATACTGATACAGGGCTCTTTTGGGTCTTGTAATTGGAATGAGAACAATCTAA ATCCCTTAACGAGGAACAATTGGAGGGCAAGTCTGGTGCCAGCAGCCGCGGTAATTCCAGCTCCAATAGCGTATATT AAAGTTGTTGCAGTTAAAAAGCTCGTAGTTGAACCTTGGGCCCGTCCTGCCGGTCCGCCTCACCGCGAGTACTGGTC CGGATGGGCCTTTCTTTCTGGGGAATCCCATGGCCTTCACTGGCTGTGGCGGGGAACCAGGACTTTTACTGTGAAAA AATTAGAGTGTTCAAAGCAGGCCTTTGCTCGGATACATTAGCATGGAATAATAGAATAGGACGTGCGGTTCTATTTT GTTGGTTTCTAGGACCGCCGTAATGATTAATAGGGATAGTCGGGGGCGTCAGTATTCAGCTGTCAGAGGTGAAATTC TTGGATTTGCTGAAGACTAACTACTGCGAAAGCATTCGCCAAGGATGTTTTCATTAATCAGGGAACGAAAGTTAGGG GATCGAAGACGATCAGATCCCGTCGTAGTCTTAACCATAAACTATGCCGACTAGGGATCGGGCGGGGTTTCTATGAT GACCCGCTCGGCACCTTACGAGAAATCAAAGTTTTTGGGTTCTGGGGGGAGTATGGTCGCAAGGCTGAAACTTAAAG AAATTGACGGAAGGGCACCACAAGGCGTGGAGCCTGCGGCTTAATTTGACTCAACACGGGGAAACTCACCAGGTCCA GACAAAATAAGGATTGACAGATTGAGAGCTCTTTCTTGATCTTTTGGATGGTGGTGCATGGCCGTTCTTAGTTGGTG GAGTGATTTGTCTGCTTAATTGCGATAACGAACGAGACCTCGGCCCTTAAATAGCCCGGTCCGCGTTTGCGGGCCGC TGGCTTCTTAGGGGACTATCGCT。
2.一種產(chǎn)紫青霉菌DBl菌株的制備方法，包括(1)將腐爛海草按Ig 20ml的比例置于富集培養(yǎng)基中室溫靜置培養(yǎng)30天，然后取 0. Iml富集培養(yǎng)基涂布于分離培養(yǎng)基中，30°C靜置培養(yǎng)1 4天，獲得野生型亞麻生物處理菌株；(2)將步驟(1)中得到的菌株接種到亞麻木質(zhì)素營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中，28°C培養(yǎng)72h;(3)從上述亞麻木質(zhì)素營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中選擇出具有降解木質(zhì)素能力的菌株，即得。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種產(chǎn)紫青霉菌DBl菌株的制備方法，其特征在于所述步驟(1)中的富集培養(yǎng)基配方為亞麻粉5g，自來(lái)水200ml，pH自然；分離培養(yǎng)基配方為亞麻粉 5g，(NH4)2SO4 5g, K2HPO4 IgjMgSO4 0. 5g, KCl 0. 5g, FeSO4 0· 01，瓊脂 20g，水 lOOOmL，pH 值為7-7.2。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種產(chǎn)紫青霉菌DBl菌株的制備方法，其特征在于所述步驟O)中的亞麻木質(zhì)素營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基的組分包括亞麻木質(zhì)素2g，NaNO3 3g，K2HPO4 0. 5g, MgSO4 lg，瓊脂 20g，水 lOOOmL，pH 值為 7-7. 2。
5.一種產(chǎn)紫青霉菌DBl菌株在過(guò)氧化物脫膠制備紡織用亞麻、大麻、黃麻或紅麻纖維的工藝中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種產(chǎn)紫青霉菌DB1菌株及其制備和應(yīng)用，其制備方法，包括(1)將腐爛海草置于富集培養(yǎng)基中室溫靜置培養(yǎng)，然后取富集培養(yǎng)基涂布于分離培養(yǎng)基中，30℃靜置培養(yǎng)1～4天，獲得野生型亞麻生物處理菌株；(2)將步驟(1)中得到的菌株接種到亞麻木質(zhì)素營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中，28℃培養(yǎng)72h；(3)從上述亞麻木質(zhì)素營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中選擇出具有降解木質(zhì)素能力的菌株，即得；該產(chǎn)紫青霉菌DB1菌株該菌株可應(yīng)用于過(guò)氧化物脫膠制備紡織用亞麻、大麻、黃麻或紅麻纖維工藝中。本發(fā)明的菌株生長(zhǎng)周期短，菌種不易被污染，處理成本低，處理后纖維質(zhì)量好，反應(yīng)條件溫和，耐熱性能好，無(wú)環(huán)境污染；本發(fā)明的工藝簡(jiǎn)單、適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C12N1/02GK102337220SQ201110254279
公開(kāi)日2012年2月1日 申請(qǐng)日期2011年8月30日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月30日
發(fā)明者丁若垚, 劉國(guó)亮, 張興群, 董政娥, 郁崇文, 黎征帆 申請(qǐng)人:東華大學(xué)