專利名稱：一種防止紫色非硫細(xì)菌貼壁生長培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于微生物學(xué)、微生態(tài)學(xué)領(lǐng)域。具體的說，涉及一種紫色非硫細(xì)菌的培養(yǎng)基。
背景技術(shù)：
紫色非硫細(xì)菌屬于紅螺菌科(Iihodospirillaceae)是一類變化多樣的紫色光合細(xì)菌(phototrophic purple bacteria，PNS)。能在厭氧光照、好氧黑暗條件下以不同的生理代謝方式生長繁殖，具有豐富的代謝多樣性。由于它的細(xì)胞干物質(zhì)中蛋白質(zhì)含量高達(dá)到 60%以上，其蛋白質(zhì)氨基酸組成比較齊全，細(xì)胞中還含有多種維生素，尤其是B族維生素極為豐富，Vb2、葉酸、泛酸、生物素的含量也較高，同時還含有大量的類胡蘿卜素、輔酶Q等生理活性物質(zhì)。因此具有很高的營養(yǎng)價值，這正是它在水產(chǎn)養(yǎng)殖中作為餌料及作為飼料添加成分物質(zhì)基礎(chǔ)。同時，菌體在生長過程中可以有效利用水體中有機物有效降低水體COD值， 實現(xiàn)水產(chǎn)飼料和水處理的雙重作用，但其推廣和應(yīng)用的關(guān)鍵是培養(yǎng)的菌體應(yīng)有較高的菌體濃度，可目前的常規(guī)培養(yǎng)基主要配方為氯化銨1. Og,乙酸鈉3. 5g，氯化鎂0. Ig,氯化鈣 0. lg，磷酸二氫鉀0. 6g，磷酸氫二鉀0. 4g，酵母膏0. lg，水IOOOmI，ρΗ7· 2.此培養(yǎng)基配方在培養(yǎng)過程中有諸多缺陷，最主要表現(xiàn)在菌體生長過程中往往出現(xiàn)明顯的貼壁生長的現(xiàn)象， 前期生長起來的菌體在光照生物反應(yīng)器內(nèi)壁生長阻止光的照射，從而影響菌體的進一步生長。

發(fā)明內(nèi)容
為解決以上問題，本發(fā)明提供了一種防止紫色非硫細(xì)菌貼壁生長培養(yǎng)基，本發(fā)明的紫色非硫細(xì)菌培養(yǎng)基，可有效防止菌體貼壁生長，提高菌體最終培養(yǎng)濃度。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是在前述常規(guī)培養(yǎng)基中，添加0. 3% 0. 5%的皂角粉， 即每1000ml基本培養(yǎng)基，添加3 5g皂角粉。優(yōu)選的培養(yǎng)基每1000ml加5g皂角粉。調(diào)節(jié)本發(fā)明培養(yǎng)基pH為7. 2，121°C滅菌25分鐘，將紫色非硫細(xì)菌接種于培養(yǎng)基中，置于光照培養(yǎng)箱中，光照條件20001UX，溫度32°C。紫色非硫細(xì)菌貼壁現(xiàn)象隨皂角粉的增加而減弱，當(dāng)每1000ml加5g皂角粉時，基本不出現(xiàn)貼壁生長現(xiàn)象，培養(yǎng)4天OD66tl達(dá)2. 8，因此選用5g/L皂角粉的添加比較適宜，但考慮添加成本可根據(jù)實際情況適當(dāng)增加。本發(fā)明的有益效果1、采用本發(fā)明培養(yǎng)基培養(yǎng)紫色非硫細(xì)菌，生長周期縮短、最大生長量提高。具體表現(xiàn)為采用本發(fā)明培養(yǎng)基培養(yǎng)的紫色非硫細(xì)菌最快4天就可以達(dá)到菌體生長的穩(wěn)定期，較常用培養(yǎng)基提前2 3天；隨著培養(yǎng)時間的增加，培養(yǎng)基中菌體OD66tl也逐漸增加，采用本發(fā)明培養(yǎng)基菌體的最終OD66tl可達(dá)到2. 5以上，見附圖中a ；而常規(guī)培養(yǎng)基一般僅能達(dá)到1. 9 2.0，見附圖中b。2、用本發(fā)明培養(yǎng)基培養(yǎng)的紫色非硫細(xì)菌用于水產(chǎn)養(yǎng)殖水體的凈化，效果明顯。按紫色非硫細(xì)菌的35kg/hm2用量一次性撒入魚塘，試驗池比對照池改善明顯，COD下降沈％， 氨氮減少34. 5%。


本發(fā)明培養(yǎng)基(添加5g皂粉/L)與常規(guī)培養(yǎng)基，在培養(yǎng)紫色非硫細(xì)菌的過程中， 光密度OD66tl的變化圖。附圖中a代表發(fā)明培養(yǎng)基、b代表常規(guī)培養(yǎng)基。
具體實施例方式實施例1 (一 )防止紫色非硫細(xì)菌貼壁生長培養(yǎng)基配制基本培養(yǎng)基氯化銨1. Og,乙酸鈉3. 5g，氯化鎂0. Ig,氯化鈣0. Ig,磷酸二氫鉀 0.68，磷酸氫二鉀0.48，酵母膏0.化，水1000mI，pH7. 2.在上述培養(yǎng)基中，加皂角粉3g。( 二)紫色非硫細(xì)菌的培養(yǎng)將上述培養(yǎng)基pH調(diào)節(jié)為7. 2，121°C滅菌25分鐘，將紫色非硫細(xì)菌按培養(yǎng)基體積 3%接種于培養(yǎng)基中，置于光照培養(yǎng)箱中，光照條件20001UX，溫度32°C。培養(yǎng)結(jié)果光照培養(yǎng)5天后，菌體生長進入穩(wěn)定期，菌液OD66tl到達(dá)2. 5實施例2:(一 )防止紫色非硫細(xì)菌貼壁生長培養(yǎng)基配制基本培養(yǎng)基氯化銨1. Og,乙酸鈉3. 5g，氯化鎂0. Ig,氯化鈣0. Ig,磷酸二氫鉀 0.68，磷酸氫二鉀0.48，酵母膏0.化，水1000mI，pH7. 2.在上述培養(yǎng)基中，加皂角粉5g。( 二)紫色非硫細(xì)菌的培養(yǎng)將上述培養(yǎng)基pH調(diào)節(jié)為7. 2，121°C滅菌25分鐘，將紫色非硫細(xì)菌按培養(yǎng)基體積 3%接種于培養(yǎng)基中，置于光照培養(yǎng)箱中，光照條件20001UX，溫度32°C。培養(yǎng)結(jié)果光照培養(yǎng)4天后，菌體生長進入穩(wěn)定期，菌液OD66tl到達(dá)2. 8。
權(quán)利要求
1.一種防止紫色非硫細(xì)菌貼壁生長的培養(yǎng)基，其特征有常規(guī)培養(yǎng)基、皂角粉組成。在常規(guī)培養(yǎng)基中每IOOOml加入3 5g皂角粉。常規(guī)培養(yǎng)基為氯化銨1. Og,乙酸鈉3. 5g，氯化鎂0. lg，氯化鈣0. lg，磷酸二氫鉀0. 6g，磷酸氫二鉀0. 4g，酵母膏0. IgjjC IOOOmI，pH7. 2.
2.根據(jù)權(quán)利1的要求，培養(yǎng)的紫色非硫細(xì)菌菌液或干粉制劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種經(jīng)過改造可以有效防止紫色非硫細(xì)菌貼壁生長的培養(yǎng)基。采用的技術(shù)方案是在常規(guī)培養(yǎng)基中添加0.3％～0.5％的皂角粉。采用此培養(yǎng)基培養(yǎng)紫色非硫細(xì)菌可有效解決菌體貼壁生長問題，與常規(guī)培養(yǎng)基相比，用本發(fā)明的培養(yǎng)基培養(yǎng)菌體，生長周期更短，4天可進入穩(wěn)定期；菌體最終培養(yǎng)濃度更高，菌液OD660達(dá)到2.8。
文檔編號C12N1/20GK102477406SQ20111025924
公開日2012年5月30日 申請日期2011年9月5日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月5日
發(fā)明者周浩, 張柏松, 方井霞, 杜鳳梅 申請人:周浩