專利名稱：醫(yī)院感染利用枸櫞酸鹽致病菌鑒別診斷劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種醫(yī)院感染利用枸櫞酸鹽致病菌鑒別診斷劑，其主要成分是枸櫞酸鈉、氯化鈉、硫酸鎂、磷酸二氫鉀、磷酸二氫銨、溴麝香草酚藍(lán)、酵母浸膏、瓊脂， 經(jīng)一定的工藝制成。用以鑒別細(xì)菌能否利用枸櫞酸鹽。利用生化反應(yīng)試驗(yàn)鑒別細(xì)菌的種類， 其關(guān)鍵在于準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)便。由于不同細(xì)菌具有其各自的獨(dú)特酶系統(tǒng)，因而在代謝過程中所產(chǎn)生的分解和合成的代謝產(chǎn)物也不同，這些分解或合成的代謝產(chǎn)物又各具有不同的生化特點(diǎn)，再利用其不同生化特點(diǎn)在相應(yīng)的培養(yǎng)條件下所產(chǎn)生的生化反應(yīng)，來進(jìn)行細(xì)菌種類的鑒別，這是目前微生物實(shí)驗(yàn)室最常用的手段。由于目前培養(yǎng)條件及指示劑的應(yīng)用范圍所限， 生化反應(yīng)試驗(yàn)中觀察細(xì)菌對(duì)有機(jī)酸鹽及銨鹽利用的鑒別鑒別診斷劑存在所需接種量大、培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)、指示劑變色不明顯、易出現(xiàn)假陽性或假陰性等問題。醫(yī)院感染利用枸櫞酸鹽致病菌鑒別診斷劑是觀察細(xì)菌對(duì)有機(jī)酸鹽及銨鹽利用的一綜合性鑒別診斷劑，用以鑒別細(xì)菌能否利用枸櫞酸鹽，從而進(jìn)一步判斷細(xì)菌的種類及生化特點(diǎn)。隨著生物研究的進(jìn)展，國內(nèi)外對(duì)細(xì)菌鑒別的研究也在不斷的發(fā)展中。生物工作者一直希望能有一種能克服上述不足的鑒別診斷劑一醫(yī)院感染利用枸櫞酸鹽致病菌鑒別診斷劑。
技術(shù)背景本發(fā)明的目的在于提供一種能克服已有鑒別診斷劑不足的醫(yī)院感染利用枸櫞酸鹽致病菌鑒別診斷劑。與其它同類鑒別診斷劑相比具備下列特點(diǎn)所需接種量小， 少量細(xì)菌即可出現(xiàn)產(chǎn)堿變色；指示劑變色快速明顯，24小時(shí)即可觀察結(jié)果；不易出現(xiàn)假陽性，僅限能利用枸櫞酸鈉的細(xì)菌能生長(zhǎng)、變色；不易出現(xiàn)假陰性，能破壞標(biāo)本中存在的抑菌物質(zhì)，使細(xì)菌生長(zhǎng)不受抑制；試驗(yàn)陽性對(duì)照菌在該固體鑒別診斷劑中增菌繁殖迅速，并且產(chǎn)堿使鑒別診斷劑變色
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的要點(diǎn)在于選擇合適的組分，并進(jìn)行合理混配，經(jīng)加溫、溶解、混合、冷卻、分裝、高溫滅菌等工藝而成一種醫(yī)院感染利用枸櫞酸鹽致病菌鑒別診斷劑。
本發(fā)明選擇的配方如下(組分及其重量百分比％ ):枸櫞酸鈉O. 8-0. 9 ;氯化鈉 O. 8-0. 85 ;硫酸鎂O. 01-0. 03 ;磷酸二氫鉀O. 08-0. 12 ;磷酸二氫銨O. 13-0. 15 ;溴麝香草酚藍(lán)O. 3-0. 5 ;酵母浸膏3. 5-4. O ;瓊脂1. 5-2. 5 ;蒸餾水加至100。
枸櫞酸鈉是鑒別診斷劑中碳的唯一來源，而磷酸二氫銨是鑒別診斷劑中氮的唯一來源。能利用枸櫞酸鈉為碳源的細(xì)菌在鑒別診斷劑上能生長(zhǎng)，并且分解枸櫞酸鹽最后產(chǎn)生碳酸鹽，使鑒別診斷劑變?yōu)閴A性，此時(shí)鑒別診斷劑中的溴麝香草酚藍(lán)指示劑由綠色變?yōu)樯畋O(jiān)色。硫Ife續(xù)能破壞標(biāo)本中存在的四環(huán)素、金霉素、土霉素、新霉素、多粘囷素及鏈霉素的抑菌作用；氯化鈉用于調(diào)整滲透壓；磷酸二氫鉀用于調(diào)節(jié)pH。酵母浸膏、瓊脂是鑒別診斷劑中的營養(yǎng)和支持成分；試驗(yàn)陽性對(duì)照菌在該固體鑒別診斷劑中增菌繁殖，并且產(chǎn)堿使鑒別診斷劑變色。
本發(fā)明產(chǎn)品的制備方法是
I)、將枸櫞酸鈉、氯化鈉、硫酸鎂、磷酸二氫鉀、磷酸二氫銨、瓊脂按比例加入蒸餾水中，再加熱溶解，矯正pH至6. 8，以絨布過濾；
2)、再加入溴麝香草酚藍(lán)混勻，壓力蒸汽滅菌1. 05kgl5分鐘；
3)、無菌條件下，加入無菌酵母浸膏，分裝試管，每管約2ml，趁熱將含有鑒別診斷劑的滅菌試管傾斜一定角度，冷凝后制成斜面，待用。
本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)(I)所需接種量小，少量細(xì)菌即可出現(xiàn)產(chǎn)堿變色；(2)指示劑變色快速明顯，24小時(shí)即可觀察結(jié)果；(3)不易出現(xiàn)假陽性，僅限能利用枸櫞酸鈉的細(xì)菌能生長(zhǎng)、變色；(4)不易出現(xiàn)假陰性，硫酸鎂能破壞標(biāo)本中存在的四環(huán)素、金霉素、土霉素、 新霉素、多粘菌素及鏈霉素的抑菌作用；(5)試驗(yàn)陽性對(duì)照菌在該鑒別診斷劑中增菌繁殖迅速，并且產(chǎn)堿使鑒別診斷劑變色。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明按照下表所列數(shù)據(jù)(重量百分比％)及其所述步驟進(jìn)行配置 配方一枸櫞酸鈉氯化鈉硫酸鎂磷酸二氫鉀磷酸二氫銨溴麝香草酚藍(lán)酵母浸膏瓊脂蒸餾水配方二 枸櫞酸鈉氯化鈉硫酸鎂磷酸二氫鉀磷酸二氫銨溴麝香草酚藍(lán)酵母浸膏瓊脂蒸餾水
權(quán)利要求
1.本發(fā)明涉及一種醫(yī)院感染利用枸櫞酸鹽致病菌鑒別診斷劑，其特征在于具有如下的配方(組分及其重量百分比％ ):枸櫞酸鈉O. 8-0. 9 ;氯化鈉O. 8-0. 85 ;硫酸鎂O. 01-0. 03 ； 磷酸二氫鉀O. 08-0. 12 ;磷酸二氫銨O. 13-0. 15 ;溴麝香草酚藍(lán)O. 3-0. 5 ;酵母浸膏3.5-4. O ;瓊脂1. 5-2. 5 ;蒸餾水加至100。
2.—種權(quán)利要求1所述醫(yī)院感染利用枸櫞酸鹽致病菌鑒別診斷劑，其特征在于具有如下制備方法1)、將枸櫞酸鈉、氯化鈉、硫酸鎂、磷酸二氫鉀、磷酸二氫銨、瓊脂按比例加入蒸餾水中， 再加熱溶解，矯正pH至6. 8，以絨布過濾；2)、再加入溴麝香草酚藍(lán)混勻，壓力蒸汽滅菌1.05kgl5分鐘；3)、無菌條件下，加入無菌酵母浸膏，分裝試管，每管約2ml，趁熱將含有鑒別診斷劑的滅菌試管傾斜一定角度，冷凝后制成斜面，待用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種醫(yī)院感染利用枸櫞酸鹽致病菌鑒別診斷劑，其主要成分是枸櫞酸鈉等，經(jīng)一定的工藝制成。用以鑒別細(xì)菌能否利用枸櫞酸鹽。利用該生化反應(yīng)試驗(yàn)鑒別醫(yī)院感染利用枸櫞酸鹽致病菌的種類，其關(guān)鍵性能是準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)便。
文檔編號(hào)C12Q1/04GK102994608SQ20111027704
公開日2013年3月27日 申請(qǐng)日期2011年9月19日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月19日
發(fā)明者蔣欣, 崔瑛 申請(qǐng)人:蔣欣, 崔瑛