專利名稱：微生物dha發(fā)酵生產(chǎn)技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種微生物DHA發(fā)酵生產(chǎn)技術(shù)，屬于食品功能油脂生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
二十二碳六烯酸(簡稱DHA)是一種人類必需不脂肪酸之一，體內(nèi)不能自我合成，必需通過食物攝入，具有促進嬰兒腦細(xì)胞生長發(fā)育、保護視力，治療心血管疾病及提高免疫能力等多種重要的生理功能，受到醫(yī)療界及食品界的廣泛關(guān)注.目前DHA的商業(yè)來源主要是深海魚油，但由于魚油中DHA含量相對比較低，有重金屬汞污染的風(fēng)險，且受日趨匱乏的海洋資源的限制，利用微生物發(fā)酵法生產(chǎn)DHA有望成為高純度DHA的有效來源。專利“用寇氏隱甲藻工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)二十二碳六烯酸的方法”(申請?zhí)?00910061833)利用寇氏隱甲藻(Crypthecodinium Cohnii)工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)DHA油脂的方法；專利“使用改進量的氯和鉀在微藻類中產(chǎn)生高水平的DHA” (申請?zhí)?00480035685)使用改進量的氯和鉀在微藻類中產(chǎn)生高水平的DHA本發(fā)明公開了通過海洋微生物，包括異養(yǎng)的海洋溝鞭藻類隱甲藻，使用低水平的氯離子產(chǎn)生高度不飽和的脂肪酸的方法；專利“生產(chǎn)二十二碳六烯酸(DHA)的破囊壺菌菌株_SC1”(申請?zhí)?00580052523)發(fā)明涉及篩選一種未報道的破囊壺菌菌株-SC1，其產(chǎn)生明顯數(shù)量的DHA，并且除了 DHA以外還積累其各自的中間體脂肪酸。裂殖壺菌是一種異養(yǎng)型酵母菌，其單細(xì)胞進行連續(xù)二均分裂，脂肪酸組成簡單，DHA含量高，分離純化簡單，是獲取天然高濃度DHA的很好資源。但目前普遍存在菌體密度較低，DH A含量相對不高等問題，較難進行工業(yè)化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
針對上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一個微生物DHA營養(yǎng)油發(fā)酵生產(chǎn)方法，提高微藻生物質(zhì)產(chǎn)量，繁殖速度快、產(chǎn)油量及油脂中DHA含量。本專利涉及了一種微生物DHA營養(yǎng)油的發(fā)酵生產(chǎn)方法，首先把裂殖壺菌(Schizochytrium sp.)菌種接入搖瓶進行培養(yǎng),然后接入種子罐放大培養(yǎng),最后接入發(fā)酵罐進行2步發(fā)酵第一步，溫度控制在25-30°C，pH = 6，發(fā)酵培養(yǎng)基為葡萄糖、酵母膏、蛋白胨及無機鹽組成，發(fā)酵2-3天；第二步，降溫到20-25°C，繼續(xù)發(fā)酵2-3天，發(fā)酵過程通過補加葡萄糖使之濃度始終控制在10-20%。經(jīng)發(fā)酵制得微藻生物量達(dá)到60g/L，其中，油脂占干生物質(zhì)中的含量50-60%，其中DHA含量高達(dá)35-40%，DHA生產(chǎn)率達(dá)到8-10g/升.天。本發(fā)明DHA產(chǎn)量高、純度高，生產(chǎn)工藝穩(wěn)定、簡單、成本低。
具體實施例方式根據(jù)下述實施例，可以更好地理解本發(fā)明。然而，本領(lǐng)域的技術(shù)人員容易理解，實施例所描述的具體的物料配比、工藝條件及其結(jié)果僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)當(dāng)也不會限制權(quán)利要求書中所詳細(xì)描述的本發(fā)明。實例I在IL發(fā)酵罐中，按10%濃度，加入培養(yǎng)基和種子液，在發(fā)酵罐進行2步發(fā)酵 第一步，溫度控制在28°C，pH = 6，發(fā)酵培養(yǎng)基為葡萄糖、酵母膏、蛋白胨及無機鹽組成，發(fā)酵2天；第二步，降溫到20°C，繼續(xù)發(fā)酵3天，發(fā)酵過程通過補加葡萄糖使之濃度始終控制在20%,經(jīng)發(fā)酵制得二十二碳六烯酸油脂，經(jīng)發(fā)酵制得DHA含量高達(dá)55%的油脂，DHA含量高達(dá)35%，DHA生產(chǎn)率達(dá)到8. 8g/升.天。實例2
在100L發(fā)酵罐中，按10%濃度，加入培養(yǎng)基和種子液，在發(fā)酵罐進行2步發(fā)酵第一步，溫度控制在30°C，pH = 6，發(fā)酵培養(yǎng)基為葡萄糖、酵母膏、蛋白胨及無機鹽組成，發(fā)酵3天；第二步，降溫到20°C，繼續(xù)發(fā)酵3天，發(fā)酵過程通過補加葡萄糖使之濃度始終控制在20%,經(jīng)發(fā)酵制得二十二碳六烯酸油脂，經(jīng)發(fā)酵制得DHA含量高達(dá)60%的油脂，DHA含量高達(dá)40%，DHA生產(chǎn)率達(dá)到IOg/升.天。實例3在1000L發(fā)酵罐中，按10%濃度，加入培養(yǎng)基和種子液，在發(fā)酵罐進行2步發(fā)酵第一步，溫度控制在30°C，pH = 6，發(fā)酵培養(yǎng)基為葡萄糖、酵母膏、蛋白胨及無機鹽組成，發(fā)酵3天；第二步，降溫到20°C，繼續(xù)發(fā)酵3天，發(fā)酵過程通過補加葡萄糖使之濃度始終控制在20%，經(jīng)發(fā)酵制得二十二碳六烯酸油脂，經(jīng)發(fā)酵制得D H A含量高達(dá)60%的油脂，DHA含量高達(dá)38%，DHA生產(chǎn)率達(dá)到IOg/升.天。
權(quán)利要求
1.一種納米DHA營養(yǎng)粉制備方法，是指以水溶性乳化劑、助乳化劑、抗氧化劑、糖、植物膠體為壁材，以魚油為囊芯，通過剪切和均質(zhì)乳化工藝制備納米DHA乳液，然后通過霧化器將乳液和冷風(fēng)一起噴霧到干燥塔內(nèi)，當(dāng)這些顆粒落到干燥塔底部相連的流化床進行干燥，造粒，獲得流動性良好的納米DHA營養(yǎng)粉。本發(fā)明操作方便，易于工業(yè)化生產(chǎn)；得到的納米DHA營養(yǎng)粉產(chǎn)品流動性好、生物吸收利用效率。
2.一種微生物DHA(二十二碳六烯酸)營養(yǎng)油的發(fā)酵生產(chǎn)方法，首先把裂殖壺菌(Schizochytrium sp.)菌種接入搖瓶進行培養(yǎng),然后接入種子罐放大培養(yǎng),最后接入發(fā)酵罐進行2步發(fā)酵第一步，溫度控制在25-30°C，pH = 6，發(fā)酵培養(yǎng)基為葡萄糖、酵母膏、蛋白胨及無機鹽組成，發(fā)酵3天；第二步，降溫到20-25°C，繼續(xù)發(fā)酵3天。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的微生物DHA(二十二碳六烯酸)營養(yǎng)油的發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于通過補加方式，將發(fā)酵培養(yǎng)基中葡萄糖液濃度維持在10-20%之間，酵母膏濃度維持在5-10 %之間，蛋白凍濃度維持在2-5 %之間。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的微生物DHA(二十二碳六烯酸)營養(yǎng)油的發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于發(fā)酵培養(yǎng)基中，無機鹽直接由30% -80%自然海水獲得。
全文摘要
本發(fā)明公開一種微生物DHA營養(yǎng)油(二十二碳六烯酸)的發(fā)酵生產(chǎn)方法，首先把裂殖壺菌(Schizochytrium sp.)菌種接入搖瓶進行培養(yǎng)，然后接入種子罐放大培養(yǎng)，最后接入發(fā)酵罐進行2步發(fā)酵第一步，溫度控制在25-30℃，pH＝6，發(fā)酵培養(yǎng)基為葡萄糖、酵母膏、蛋白胨及無機鹽組成，發(fā)酵2-3天；第二步，降溫到20-25℃，繼續(xù)發(fā)酵2-3天，發(fā)酵過程通過補加葡萄糖使之濃度始終控制在20％，經(jīng)發(fā)酵制得微生物量達(dá)到60g/L左右，其中，油脂占干生物質(zhì)中的含量50-60％，其中DHA含量達(dá)35-40％，DHA生產(chǎn)率達(dá)到8-10g/升.天。本發(fā)明DHA產(chǎn)量高、純度高，生產(chǎn)工藝穩(wěn)定、簡單、成本低。
文檔編號C12R1/645GK102972533SQ20111028038
公開日2013年3月20日 申請日期2011年9月6日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月6日
發(fā)明者于文利 申請人:于文利