專利名稱:醫(yī)療機構(gòu)污水中致病痢疾桿菌快速診斷試劑的制作方法
技術領域:
本發(fā)明涉及一種醫(yī)療機構(gòu)污水中致病痢疾桿菌快速診斷試劑,其主要成分是胰蛋白胨、枸櫞酸鈉、去氧膽酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、氯化鈉、小牛血清、葡萄糖、甘露醇經(jīng)一定的工藝制成。用以供醫(yī)療機構(gòu)污水和糞便中增菌培養(yǎng)痢疾桿菌。利用培養(yǎng)試驗鑒別細菌的種類,其關鍵在于準確、快速、簡便。而細菌接種量大小,會直接影響檢測結(jié)果。往往需要將樣本通過不同方法進行增菌培養(yǎng),來進行細菌種類的鑒別,這是目前微生物實驗室最常用的手段。由于目前培養(yǎng)條件的應用范圍所限,醫(yī)療機構(gòu)污水和糞便中的痢疾桿菌增菌快速的診斷試劑,沒有特效的,存在所需接種量大、培養(yǎng)時間長、易出現(xiàn)假陽性或假陰性等問題。隨著國家對醫(yī)療機構(gòu)污水和糞便安全排放要求的嚴厲和規(guī)范,國內(nèi)對療機構(gòu)污水中致病痢疾桿菌快速診斷試劑的研究也在不斷的發(fā)展中。醫(yī)務工作者,尤其是臨床檢驗者一直希望能有一種能克服上述不足的,醫(yī)療機構(gòu)污水中致病痢疾桿菌快速診斷試劑。
技術背景本發(fā)明的目的在于提供一種能克服已有鑒別診斷試劑不足的,醫(yī)療機構(gòu)污水中致病痢疾桿菌快速診斷試劑。與其它同類診斷試劑相比具備下列特點所需接種量小,少量細菌即可迅速繁殖,在通常室溫下或37°C培養(yǎng)5-6小時即可觀察結(jié)果;不易出現(xiàn)假陽性和假陰性;能破壞標本中存在的抑菌物質(zhì),使細菌生長不受抑制
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的要點在于選擇合適的組分,并進行合理混配,經(jīng)加溫、溶解、 混合、冷卻、分裝、高溫滅菌等工藝而成一種醫(yī)療機構(gòu)污水中致病痢疾桿菌快速診斷試齊U。本發(fā)明選擇的配方如下(組分及其重量百分比%):胰蛋白胨(1. 8-2. 2)、枸櫞酸鈉 (O. 4-0. 5)、去氧膽酸鈉(O. 04-0. 06)、磷酸二氫鉀(O. 14-0. 16)、磷酸氫二鉀(O. 38-0. 42)、 氯化鈉(O. 4-0. 5)、葡萄糖(O. 10-0. 12)、甘露醇(O. 15-0. 25)、小牛血清(O. 4-0. 5)、蒸餾水加至IOOmlo
本診斷試劑含有枸櫞酸鈉和去氧膽酸鈉,對革蘭氏陰性菌有抑制作用,大腸桿菌, 綠膿桿菌及變形桿菌 ,在接種6小時內(nèi)生長緩慢,而痢疾桿菌可快速地得到增殖.氯化鈉用于調(diào)整滲透壓;磷酸二氫鉀用于調(diào)節(jié)pH。胰蛋白胨、小牛血清、葡萄糖、甘露醇是診斷試劑中的營養(yǎng)和支持成分。標本接種后即計算時間,在通常室溫下或37°C培養(yǎng),均有增菌作用.增菌培養(yǎng)6小時后,即用劃線法移種到腸道選擇性診斷試劑上以分離致病菌。
本發(fā)明產(chǎn)品的制備方法是
I)、將胰蛋白胨、枸櫞酸鈉、去氧膽酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、氯化鈉、葡萄糖、甘露醇按比例加入蒸餾水中,再加熱溶解,矯正pH至7. O矯正pH至6. 8,用濾紙過濾;
2)、壓力蒸汽滅菌O. 70kgl5分鐘;
3)、無菌條件下,加入無菌小牛血清,分裝安培瓶,每瓶約5ml,存于冰箱中備用。
本發(fā)明具有以下優(yōu)點(I)所需接種量小,培養(yǎng)時間短,少量細菌即可迅速繁殖, 在通常室溫下或37°C培養(yǎng)5-6小時即可觀察結(jié)果;(2)不易出現(xiàn)假陽性或假陰性;(3)能破壞標本中存在的四環(huán)素、金霉素、土霉素、新霉素、多粘圃素及鏈霉素的抑圃作用。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步的詳細說明
按照下表所列數(shù)據(jù)(重量百分比% )及其所述步驟進行配置
配方一
胰蛋白胨1.8-2. 2枸櫞酸鈉O. 4-0. 5去氧膽酸鈉O. 04-0. 06磷酸二氫鉀O. 14-0. 16磷酸氫二鉀O. 38-0. 42氯化鈉O. 4-0. 5葡萄糖O. 10-0. 12甘露醇O. 15-0. 25小牛血清O. 4-0. 5蒸餾水加至100
配方二
胰蛋白胨1. 8-2. O枸櫞酸鈉O. 4-0. 45去氧膽酸鈉O. 04-0. 05磷酸二氫鉀O. 14-0. 15磷酸氫二鉀O. 38-0. 40氯化鈉O· 4-0. 45葡萄糖0.10-0.11甘露醇O. 15-0. 20小牛血清O. 4-0. 45蒸餾水加至100
權(quán)利要求
1.本發(fā)明涉及一種醫(yī)療機構(gòu)污水中致病痢疾桿菌快速診斷試劑,其特征在于具有如下的配方(組分及其重量百分比% ):胰蛋白胨1. 8-2. 2 ;枸櫞酸鈉O. 4-0. 5 ;去氧膽酸鈉O. 04-0. 06 ;磷酸二氫鉀O. 14-0. 16 ;磷酸氫二鉀O. 38-0. 42 ;氯化鈉O. 4-0. 5 ;葡萄糖O.10-0. 12 ;甘露醇O. 15-0. 25 ;小牛血清O. 4-0. 5 ;蒸餾水加至100ml。
2.—種權(quán)利要求1所述醫(yī)療機構(gòu)污水中致病痢疾桿菌快速診斷試劑,其特征在于具有如下制備方法1)、將胰蛋白胨、枸櫞酸鈉、去氧膽酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、氯化鈉、葡萄糖、甘露醇按比例加入蒸餾水中,再加熱溶解,矯正pH至7. O矯正pH至6. 8,用濾紙過濾;2)、壓力蒸汽滅菌O.70kgl5分鐘;3)、無菌條件下,加入無菌小牛血清,分裝安培瓶,每瓶約5ml,存于冰箱中備用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種醫(yī)療機構(gòu)污水中致病痢疾桿菌快速診斷試劑,用以供醫(yī)療機構(gòu)污水和糞便中快速診斷致病痢疾桿菌。具有接種量小,少量細菌即可迅速繁殖,在通常室溫下或37℃培養(yǎng)5-6小時即可觀察結(jié)果;不易出現(xiàn)假陽性和假陰性;能破壞標本中存在的抑菌物質(zhì),使細菌生長不受抑制。
文檔編號C12Q1/04GK103014119SQ201110280629
公開日2013年4月3日 申請日期2011年9月21日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月21日
發(fā)明者宋旭巖, 崔瑛 申請人:宋旭巖, 崔瑛