專利名稱：一種制備牡蠣活性成份的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于食品生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種牡蠣活性成份的制備方法。
背景技術(shù)：
牡蠣又稱蠔、海蠣子等，是一種常見的海洋貝類動(dòng)物，屬軟體動(dòng)物門，瓣鰓綱(Lamellibranchia),牡販科(Ostreidae),牡販屬。世界沿海各國(guó)幾乎都產(chǎn)。牡販肉質(zhì)鮮嫩，營(yíng)養(yǎng)豐富，是一種營(yíng)養(yǎng)價(jià)值極高的食品?，F(xiàn)代研究表明，牡蠣肉中含有豐富的糖原、蛋白質(zhì)、氨基酸、人體必需的微量元素、維生素和較多的具有重要生理活性的不飽和脂肪酸。當(dāng)前，國(guó)外除了將牡蠣作為海味直接食用外，尚開發(fā)研制了大量以牡蠣提取物為主要成分的食品、保健品和藥品，這些產(chǎn)品不僅具有相當(dāng)?shù)臓I(yíng)養(yǎng)或治療價(jià)值，而且也具有極高的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。牡蠣中豐富的生物活性成分，為其在食品和醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用提供了巨大的支持。如何保護(hù)和合理利用牡蠣資源，開發(fā)新型牡蠣營(yíng)養(yǎng)功能食品和醫(yī)藥品，促進(jìn)牡蠣資源的可持續(xù)開發(fā)和利用，是未來牡蠣制品開發(fā)的方向。牡蠣提取物中的脂肪酸主要是正十四、十六、十八碳酸和二十烯酸等多不飽和脂肪酸，其中 EPA(eicosapentaenoic, 二十碳五稀酸)和 DHA(docosahexaenoic, 二十二碳六烯酸)含量較高，作為生物體的調(diào)節(jié)因子，EPA和DHA可降低血清LDL膽固醇(壞的膽固醇)及三甘油酯(中性油脂)，對(duì)心血管疾病諸如高血壓、血栓癥、心肌梗塞、狹心癥等心臟疾病有預(yù)防和治療作用，可促進(jìn)學(xué)習(xí)腦力、記憶力并防止老化、老人癡呆癥等。目前關(guān)于從牡蠣中提取EPA、DHA的研究報(bào)道還很少。糖原是廣泛存在于動(dòng)物內(nèi)的多糖。糖原大量貯藏于肝臟，也存在于肌肉中，尤其是在一些水產(chǎn)的軟體動(dòng)物體內(nèi)。植物界菌類，細(xì)菌、酵母等也含有糖原。牡蠣中糖原含量約為7%，牡蠣糖原可直接被機(jī)體吸收，從而減輕胰腺負(fù)擔(dān)，因此對(duì)糖尿病的防治十分有效，研究表明，從牡蠣中提取的多糖具有明顯的降血壓，抗凝血，抗血栓，提高肌體的免疫功能和抗白細(xì)胞下降等作用；牡蠣中所含的糖原物能有效地使皮膚細(xì)胞再生，預(yù)防皺紋出現(xiàn)及阻止紫外線造成的皮膚損傷。牡蠣肉中蛋白質(zhì)含量很高，并且氨基酸組成完善，為優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)；牡蠣肽是牡蠣蛋白水解的中間產(chǎn)物，牡蠣肽具有良好的水溶性，較好的酸、熱穩(wěn)定性。作為一種世界性的海產(chǎn)經(jīng)濟(jì)貝類，牡蠣的收獲季節(jié)比較集中，生鮮牡蠣易變質(zhì)腐敗，長(zhǎng)期保存和遠(yuǎn)程運(yùn)輸都有一定的困難，因此，對(duì)牡蠣進(jìn)行深加工，提高產(chǎn)品的附加值，意義重大。當(dāng)前，在牡蠣精深加工中對(duì)牡蠣肽、牡蠣糖原、牡蠣不飽和脂肪酸的研究都已經(jīng)有零散的報(bào)道，但都沒有從產(chǎn)業(yè)化的角度對(duì)牡蠣這些主要成份的綜合、一體化開發(fā)進(jìn)行深入研究。由于對(duì)牡蠣主要活性成份沒有進(jìn)行綜合、一體化利用，造成嚴(yán)重的資源浪費(fèi)。因此，建立合適的牡蠣活性成份綜合、一體化制備方法非常必要。中國(guó)專利申請(qǐng)200310112802.3，公開了一種從牡蠣肉同步提取糖原和肽粉的方法，但該方法僅提取兩種活性成份。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一種制備牡蠣活性成分的方法，以同一批新鮮牡蠣為材料，依次提取牡蠣中不飽和脂肪酸、糖原、肽等有效成份。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的制備方法包括:一種制備牡蠣活性成份的方法，依次包括以下步驟:(I)以新鮮牡蠣為材料，用超臨界萃取不飽和脂肪酸，獲得不飽和脂肪酸和牡蠣渣；(2)以步驟(I)超臨界萃取不飽和脂肪酸后的牡蠣渣為材料，用蒸煮和酒精沉淀提取糖原，獲得糖原和牡蠣殘?jiān)?3)以步驟⑵提取糖原后的牡蠣殘?jiān)鼮椴牧希妹阜ㄋ饽迪牭鞍字苽淠迪犽?。具體地，首先將牡蠣放入冷凍干燥機(jī)中真空凍干，使物料含水量達(dá)到3%以下，再用粉碎機(jī)粉碎至10目，然后進(jìn)行超臨界萃取不飽和脂肪酸。萃取溫度為30-50°C、萃取壓力為25-45Mpa、CO2流量為15_30L/h，用超臨界CO2萃取設(shè)備萃取牡蠣不飽和脂肪酸45-80min，之后在分離溫度為35°C和分離壓力為SMpa的條件下分離出不飽和脂肪酸，并收集牡蠣渣；將經(jīng)超臨界萃取方法萃取后的牡蠣渣，加入1-3倍體積的純水，然后采用超聲波破碎儀(功率為50-80W)進(jìn)行破碎，再用熱水蒸煮20-30min，離心，得上清液和牡蠣殘?jiān)脻舛葹?0-90%的乙醇處理上清液，離心，得沉淀，將沉淀干燥后即得糖原；將經(jīng)蒸煮和酒精沉淀提取糖原后的牡蠣殘?jiān)铀芙?，在PH4-9、溫度為40-80°C下，用木瓜蛋白酶進(jìn)行攪拌酶解反應(yīng)，控制水解度(DH)為30-50%，反應(yīng)結(jié)束后滅酶活(90-120°C )、離心，得酶解液，酶解液經(jīng)噴霧干燥，獲得牡蠣肽粉末。上述方法所獲得的牡蠣不飽和脂肪酸、牡蠣糖原和肽可制成口服液、膠囊、沖劑或片劑。可作為功能性食品配料用于保健食品或普通食品配方中。根據(jù)本發(fā)明的方法可獲得有益的效果:本發(fā)明以同一批新鮮牡蠣為原材料，依次用超臨界萃取、蒸煮和酒精沉淀和酶法水解制備牡蠣中的活性成分，其中采用超臨界萃取方法提取牡蠣不飽和脂肪酸，排除了氧化和見光反應(yīng)的可能性，得率高，質(zhì)量好；同時(shí)對(duì)超臨界萃取后的牡蠣渣，利用蒸煮和酒精沉淀提取糖原，得率高，簡(jiǎn)便易行，利于工業(yè)化生產(chǎn)；然后利用酶法水解牡蠣蛋白制備牡蠣肽，比傳統(tǒng)的酸法和自溶法產(chǎn)量高，產(chǎn)品的相對(duì)分子量易于控制，對(duì)牡蠣原料的綜合利用率高，且操作一體化，流程簡(jiǎn)單，是一種高效的綜合性開發(fā)方法，可實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。此外，過去的技術(shù)都是直接從牡蠣肉中提取分離牡蠣糖原，本發(fā)明是首次從經(jīng)超臨界萃取后的牡蠣渣中，提取分離牡蠣糖原；通過應(yīng)用超聲波破碎，有效地提高了牡蠣糖原的得率。
具體實(shí)施例方式本品牡販為近江牡販Ostrea rivularis Gould。實(shí)驗(yàn)所用儀器:超臨界萃取儀(SFX-260D，美國(guó)ISC0)，氣相色譜儀(美國(guó)惠普公司)，旋轉(zhuǎn)真空蒸發(fā)儀(天津玻璃儀器廠)，722型分光光度計(jì)(上海精密科學(xué)儀器有限公司廣品)木瓜蛋白酶(食品級(jí))。實(shí)施例1取新鮮牡蠣在冷凍干燥機(jī)中真空凍干，使物料含水量達(dá)到3%以下。之后用粉碎機(jī)粉碎至10目，打開超臨界萃取設(shè)備，設(shè)定萃取溫度為35°c，往萃取釜中加入50g物料。待萃取溫度達(dá)到設(shè)定值后，控制萃取壓力為35Mpa、CO2流量為20L/h的條件下萃取牡蠣不飽和脂肪酸60min，之后在分離溫度為35°C和分離壓力為SMpa的條件下分離出不飽和脂肪酸。從萃取釜中取出萃取脂肪酸后的牡蠣渣，加入2倍體積的純水，然后采用兩種方法進(jìn)行糖原的提取分離:①不采用超聲波破碎儀進(jìn)行破碎，②采用超聲波破碎儀進(jìn)行破碎，功率為80W,時(shí)間為20min ;然后加入1/2體積水蒸煮30min，使糖原完全溶出，冷卻，離心20min。將上清液用濃度為90%的酒精處理上清液，再離心取其沉淀，將沉淀干燥后即得糖原產(chǎn)品。采用蒽酮比色法測(cè)定糖原含量。結(jié)果對(duì)比如下表所示:
權(quán)利要求
1.一種制備牡蠣活性成份的方法，依次包括以下步驟: (1)以新鮮牡蠣為材料，用超臨界萃取不飽和脂肪酸，獲得不飽和脂肪酸和牡蠣渣； (2)以步驟(I)超臨界萃取不飽和脂肪酸后的牡蠣渣為材料，用蒸煮和酒精沉淀提取糖原，獲得糖原和牡蠣殘?jiān)? (3)以步驟(2)提取糖原后的牡蠣殘?jiān)鼮椴牧?，用酶法水解牡蠣蛋白制備牡蠣肽?br> 2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中: 步驟(I)之前，進(jìn)一步包括將牡蠣放入冷凍干燥機(jī)中真空凍干，使物料含水量達(dá)到3%以下，然后用粉碎機(jī)粉碎至10目的步驟。
步驟(I)所述的超臨近萃取不飽和脂肪酸包括:在萃取溫度為30-50°C、萃取壓力為25-45Mpa、CO2流量為15_30L/h下，用超臨界CO2萃取設(shè)備萃取牡蠣不飽和脂肪酸45-80min，之后在分離溫度為35°C和分離壓力為SMpa的條件下分離出不飽和脂肪酸，并收集牡蠣渣； 步驟(2)所述的提取糖原包括:將步驟(I)的牡蠣渣，加入1-3倍體積的純水，然后采用功率為50-80W的超聲波破碎儀進(jìn)行破碎，再用熱水蒸煮20-30min ;離心，得上清液和牡蠣殘?jiān)?；用濃度?0-90%的乙醇處理上清液，離心，得沉淀；將沉淀干燥后獲得糖原； 步驟(3)所述的制備牡蠣肽包括:將步驟(2)獲得的牡蠣殘?jiān)铀芙?，在PH4-9、溫度為40-80°C下，用木瓜蛋白酶進(jìn)行攪拌酶解反應(yīng)；控制水解度為30-50%，反應(yīng)結(jié)束后于90-120°C滅酶活、離心，得酶解液；酶解液經(jīng)噴霧干燥，獲得牡蠣肽粉末。
3.如權(quán)利要求1至2中任一項(xiàng)所述的方法制備的牡蠣活性成分在制備保健食品或普通食品中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種牡蠣活性成份的綜合制備方法，涉及從一批牡蠣中同時(shí)分離制備不飽和脂肪酸、糖原和肽等三種牡蠣活性物質(zhì)，所獲得的不飽和脂肪酸、糖原和肽可制成口服液、膠囊、沖劑或片劑；提供了將所獲得的牡蠣不飽和脂肪酸、糖原和肽等三種牡蠣活性物質(zhì)作為功能性食品配料用于保健食品或普通食品中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A23L1/33GK103099248SQ20111035441
公開日2013年5月15日 申請(qǐng)日期2011年11月10日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月10日
發(fā)明者王兵, 馮漢林, 張麗娟, 朱丹, 黃傳貴, 陳紅, 康暉 申請(qǐng)人:深圳海王藥業(yè)有限公司