專利名稱：一種適用于酶法快速檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種適用于酶法快速檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥含量的裝置。
技術(shù)背景
傳統(tǒng)的氣相色譜法和高效液相色譜法檢測氰戊菊酯農(nóng)藥濃度雖靈敏度高、準(zhǔn)確性強(qiáng)，但由于操作步驟復(fù)雜、檢測耗時長、設(shè)備昂貴且對技術(shù)人員要求較高等缺點(diǎn)，不能滿足現(xiàn)場快速檢測的需求。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的為了解決上述的技術(shù)問題提出了一種適用于酶法快速檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的裝置。
本發(fā)明的技術(shù)原理酶法檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥的原理是以氰戊菊酯農(nóng)藥作為底物，在堿性環(huán)境下通過酶活力為0. 5U/ml的雞肝酯酶催化氰戊菊酯農(nóng)藥水解，生成羧酸和醇類物質(zhì)，其原理示意圖為水解產(chǎn)物羧酸會釋放出H+，引起反應(yīng)體系中pH的下降，反應(yīng)過程中用一定濃度的堿液滴定保持體系PH恒定，用反應(yīng)開始aiiin內(nèi)單位時間消耗的堿液量表征農(nóng)藥水解的初速度 v，通過事先建立的農(nóng)藥水解初速度與農(nóng)藥含量之間的關(guān)系曲線，便可定量測得氰戊菊酯農(nóng)藥含量。為滿足上述酶法檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的需要，提出了如下適用于該酶法檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度所用的裝置，即一種適用于酶法快速檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的裝置。
本發(fā)明的技術(shù)方案食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的酶分析的原理，以加標(biāo)的果蔬汁作為待測樣液，在堿性環(huán)境下通過酶活力為0. 5U/ml的雞肝酯酶催化樣液中的氰戊菊酯農(nóng)藥水解，生成羧酸和醇類物質(zhì)，羧酸釋放出H+引起反應(yīng)體系中pH下降，反應(yīng)過程中用一定濃度的堿液滴定保持體系 PH恒定，用反應(yīng)開始aiiin內(nèi)單位時間消耗的堿液量表征農(nóng)藥水解的初速度v，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線便可定量測得樣液中氰戊菊酯農(nóng)藥含量。
一種適用于酶法快速檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的裝置，它由反應(yīng)單元和檢測單元組成。
反應(yīng)單元包括酶反應(yīng)器和磁力攪拌器，酶反應(yīng)器固定于磁力攪拌器上，所述的酶反應(yīng)器設(shè)有夾套；檢測單元由PH傳感器、pH計(jì)、帶刻度的用于pH-stat法注入堿液的堿式滴定管以及低溫恒溫槽組成；酶反應(yīng)器的頂蓋上分別開兩個小孔，一只小孔的上方連接帶刻度的堿式滴液管，另一只小孔連接PH傳感器，pH傳感器的一端插入酶反應(yīng)器中，另一端通過導(dǎo)線與pH計(jì)連接，在酶反應(yīng)器的夾套壁上開有2個口，該2個口的高度不同，2個口分別通過導(dǎo)管與低溫恒溫槽的側(cè)壁上的進(jìn)出口相連，構(gòu)成酶反應(yīng)器的恒溫循環(huán)回路； 另外，所述的檢測單元還包括用于計(jì)時的秒表。
上述的一種適用于酶法快速檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的裝置用于食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的檢測。
利用上述的一種適用于酶法快速檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的裝置進(jìn)行食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的酶法分析，包括如下步驟1)將雙蒸水20ml置于50ml酶反應(yīng)器中，加入一定濃度的待測樣液，控制反應(yīng)溫度 55°C，磁力攪拌器攪拌5分鐘；2)向步驟1)酶反應(yīng)器中加入NaOH溶液，調(diào)整pH至8.0，記錄此時堿式滴定管的刻度值為Vtl作為初始刻度；3)向步驟2)酶反應(yīng)器中加入已稀釋的0.5U/ml的雞肝酯酶液0. 1ml，反應(yīng)開始，同時秒表開始計(jì)時；4)當(dāng)步驟3)酶反應(yīng)器中pH下降0.1時，開始用NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液快速滴進(jìn)酶反應(yīng)器，使反應(yīng)時pH —直恒定在8. 0 ；5)反應(yīng)120s后終止，記錄堿式滴定管的終止刻度V1,并計(jì)算滴定量V=V1-Vtl；6)求出NaOH溶液在120s內(nèi)的反應(yīng)速度v=V/t=(V1-V0) /t ；7)令y=l/v，其中ν為步驟6)中所述的反應(yīng)速度，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線，在關(guān)系曲線的y坐標(biāo)上找到對應(yīng)值χ ；所述的標(biāo)準(zhǔn)曲線是通過檢測不同濃度的氰戊菊酯標(biāo)準(zhǔn)液的水解反應(yīng)速度，將氰戊菊酯標(biāo)準(zhǔn)液濃度的倒數(shù)作為橫坐標(biāo)χ，反應(yīng)速度的倒數(shù)為縱坐標(biāo)y，最終擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線 y=0. 0723x+0. 1393，其中y表示反應(yīng)速度的倒數(shù)，χ表示氰戊菊酯標(biāo)準(zhǔn)液濃度的倒數(shù)。
8)所求的氰戊菊酯農(nóng)藥的濃度Ν=1/χ。
本發(fā)明的技術(shù)效果本發(fā)明的一種適用于酶法快速檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的裝置，通過檢測酶催化氰戊菊酯農(nóng)藥水解的反應(yīng)速度來測定樣品中的農(nóng)藥濃度，本裝置操作步驟簡單、快速，全程檢測用時不超過30分鐘，從而降低了檢測成本，提高了酶法快速檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的實(shí)用性。
另外，本發(fā)明的一種適用于酶法快速檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的裝置適用于快速檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥的濃度。


圖1、一種適用于酶法快速檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的裝置原理示意圖。
具體實(shí)施方式
下面通過實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)一步闡述，但并不限制本發(fā)明。
實(shí)施例1一種適用于酶法快速檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的裝置，其工作原理示意圖如圖1 所示，包括反應(yīng)單元和檢測單元兩部分；反應(yīng)單元部分包括用于酶催化待測樣液水解反應(yīng)的酶反應(yīng)器1和磁力攪拌器2，酶反應(yīng)器1固定于磁力攪拌器2上，所述的酶反應(yīng)器設(shè)有夾套；檢測單元部分由伸入酶反應(yīng)器里的PH傳感器4、pH計(jì)5、固定于酶反應(yīng)器上方的用于 pH-stat法注入堿液的堿式滴定管3、以及低溫恒溫槽6、秒表7組成；在酶反應(yīng)器1的頂蓋上分別開兩個小孔，一只小孔的上方連接帶刻度的堿式滴液管3， 另一只小孔連接PH傳感器4，pH傳感器4的一端插入酶反應(yīng)器1中的待測液體中，另一端通過導(dǎo)線與PH計(jì)5連接，在酶反應(yīng)器1的夾套壁上開有2個口，該2個口的高度不同，2個口分別通過導(dǎo)管與低溫恒溫槽6的側(cè)壁上的進(jìn)出口相連，構(gòu)成酶反應(yīng)器1的恒溫循環(huán)回路；應(yīng)用實(shí)施例1應(yīng)用實(shí)施例1中所述的一種適用于酶法快速檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的裝置對雞毛菜進(jìn)行氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的檢測，其具體包括如下步驟(1)、開啟低溫恒溫槽6，注入定量蒸餾水，設(shè)置固定溫度，使蒸餾水以恒定溫度通過導(dǎo)管與酶反應(yīng)器1構(gòu)成恒溫傳輸回路，待測樣液進(jìn)入酶反應(yīng)器1之前，酶反應(yīng)器1應(yīng)達(dá)到預(yù)先設(shè)定的溫度；(2)、待測樣品的預(yù)處理取20g雞毛菜，切碎剁碎，加標(biāo)，加20ml提取液(10%的丙酮乙醇1 :1混合液)，勻漿、均質(zhì)，過濾，最終得到待測樣液；(3)、將步驟(2)所得的待測樣液與0.Iml酶活力為0. 5U/ml的雞肝酯酶一同注入酶反應(yīng)器1中，此時通過堿式滴定管3滴入0. 002mol/L的NaOH溶液將pH調(diào)至8. 0，反應(yīng)開始時按下秒表7計(jì)時，同時記錄此時堿式滴定管3的刻度值為Vtl作為初始刻度，酶反應(yīng)器3中發(fā)生酶催化水解反應(yīng)，由于酶催化氰戊菊酯水解反應(yīng)產(chǎn)生羧酸，會導(dǎo)致酶反應(yīng)器3中反應(yīng)體系PH值下降，因此在一定反應(yīng)時間內(nèi)通過堿式滴定管3滴入堿液保持pH恒定，反應(yīng)aiiin 后停止計(jì)時，同時記錄堿式滴定管3的終止刻度V1,并計(jì)算堿液用量V=V1-Vtl ；(4)、用求得的堿液用量與反應(yīng)時間比表示酶催化氰戊菊酯農(nóng)藥水解的反應(yīng)速度v=V/ t= (V1-V0)A ；(5)、令y=l/v，其中ν為步驟(4)所求的反應(yīng)速度，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線，在關(guān)系曲線的y坐標(biāo)上找到對應(yīng)值χ并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到雞毛菜中所含氰戊菊酯農(nóng)藥的濃度，具體見表1。
所述的標(biāo)準(zhǔn)曲線是通過檢測不同濃度的氰戊菊酯標(biāo)準(zhǔn)液的水解反應(yīng)速度，將氰戊菊酯標(biāo)準(zhǔn)液濃度的倒數(shù)作為橫坐標(biāo)，反應(yīng)速度的倒數(shù)為縱坐標(biāo)，最終擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線 y=0. 0723x+0. 1393，其中y表示反應(yīng)速度的倒數(shù)，χ表示氰戊菊酯標(biāo)準(zhǔn)液濃度的倒數(shù)。
表1、雞毛菜中所含氰戊菊酯農(nóng)藥的濃度
權(quán)利要求
1.一種適用于酶法快速檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的裝置，其特征在于它由反應(yīng)單元和檢測單元組成；反應(yīng)單元包括酶反應(yīng)器和磁力攪拌器，酶反應(yīng)器固定于磁力攪拌器上，所述的酶反應(yīng)器設(shè)有夾套；檢測單元由PH傳感器、PH計(jì)、帶刻度的堿式滴定管以及低溫恒溫槽組成；酶反應(yīng)器的頂蓋上分別開兩個小孔，一只小孔的上方連接帶刻度的堿式滴液管，另一只小孔連接PH傳感器，pH傳感器的一端插入酶反應(yīng)器中，另一端通過導(dǎo)線與pH計(jì)連接，在酶反應(yīng)器的夾套壁上開有2個口，該2個口的高度不同，2個口分別通過導(dǎo)管與低溫恒溫槽的側(cè)壁上的進(jìn)出口相連，構(gòu)成酶反應(yīng)器的恒溫循環(huán)回路。
2.如權(quán)利要求1所述的一種適用于酶法快速檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的裝置，其特征在于所述的檢測單元還包括用于計(jì)時的秒表。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種適用于酶法快速檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的裝置，由反應(yīng)單元和檢測單元組成，反應(yīng)單元包括用于酶反應(yīng)器和磁力攪拌器，檢測單元由伸入酶反應(yīng)器里的pH傳感器、pH計(jì)、固定于酶反應(yīng)器上方的堿式滴定管、以及低溫恒溫槽組成。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是操作步驟簡單、快速，降低了檢測成本，提高了酶法快速檢測食品中氰戊菊酯農(nóng)藥濃度的實(shí)用性。
文檔編號C12Q1/44GK102492617SQ20111037217
公開日2012年6月13日 申請日期2011年11月22日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月22日
發(fā)明者于勁松, 徐斐, 曹慧, 王豐, 趙潔, 高武 申請人:上海理工大學(xué)