專利名稱：溫度和pH對(duì)UNC-51激酶活性的影響機(jī)制的發(fā)現(xiàn)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
:本發(fā)明屬于生物化學(xué)領(lǐng)域，首次發(fā)現(xiàn)了溫度和pH能夠影響UNC-51激酶的活性，從而影響其主要底物細(xì)胞骨架的功能。
背景技術(shù)：
:由于溫度(例如，細(xì)胞的恒溫培養(yǎng)和體溫)和pH對(duì)各種酶的活性有多種多樣的影響，因而對(duì)細(xì)胞和生命體的影響是重大的，對(duì)但其分子機(jī)制是不清楚的。本研究首次證實(shí)了溫度和PH對(duì)UNC-51激酶活性的基本影響，從而首次提供了溫度(如過(guò)熱)和pH對(duì)細(xì)胞骨架動(dòng)態(tài)及細(xì)胞形態(tài)影響的基本分子模式
發(fā)明內(nèi)容
:(I)溫度對(duì)UNC-51激酶活性的基本影響如圖1所示，從攝氏10度到50度，UNC-51激酶的自我磷酸化活性和反應(yīng)溫度呈拋物線狀關(guān)系，在30攝氏度達(dá)到很高活性。這意味著溫度通過(guò)對(duì)UNC-51激酶活性的影響可影響細(xì)胞骨架的動(dòng)態(tài)變化，進(jìn)而影響身體和生命的構(gòu)造和機(jī)能。提供了溫度(如過(guò)熱)對(duì)細(xì)胞骨架動(dòng)態(tài)及細(xì)胞形態(tài)影響的基本分子模式。⑵pH對(duì)UNC-51激酶活性的基本影響如圖2所示，從pH3.8到pH9.0, UNC-51激酶的自我磷酸化活性和反應(yīng)液pH基本上呈拋物線狀關(guān)系，在PH5.4達(dá)到很高活性。這意味著pH通過(guò)對(duì)UNC-51激酶活性的影響可影響細(xì)胞骨架的動(dòng)態(tài)變化，進(jìn)而影響身體和生命的構(gòu)造和機(jī)能。如圖3所示，提供了 pH對(duì)細(xì)胞骨架動(dòng)態(tài)及細(xì)胞形態(tài)影響的基本分子模式。


:圖1溫度對(duì)UNC-51激酶活性的基本影響圖2pH對(duì)UNC-51激酶活性的基本影響圖3溫度和pH通過(guò)對(duì)UNC-51激酶活性的影響來(lái)影響細(xì)胞骨架的動(dòng)態(tài)變化，進(jìn)而影響生命的構(gòu)造機(jī)能的模式
具體實(shí)施方式
:I在不同溫度下的激酶活性測(cè)定在含有50 μ M末端放射性表記的腺苷三磷酸[Y -32Pl-ATP的Ifepes激酶緩沖反應(yīng)液(ρΗ7.4)中，在不同溫度下進(jìn)行了 UNC-51蛋白激酶的自我磷酸化反應(yīng)。用6.5%的SDS-PAGE和X-線膠片放射自顯影法分析測(cè)定了激酶活性。2在不同pH下的激酶活性測(cè)定在含有50 μ M末端放射性表記的腺苷三磷酸[Y -32P] -ATP的Hepes激酶緩沖反應(yīng)液(有不同的pH)中，進(jìn)行了 UNC-51蛋白激酶的自我磷酸化反應(yīng)。用6.5%的SDS-PAGE和X-線膠片 放射自顯影法分析測(cè)定了激酶活性。
權(quán)利要求
1.溫度(例如，細(xì)胞的恒溫培養(yǎng)和體溫)和PH對(duì)各種酶的活性有多種多樣的影響，因而對(duì)細(xì)胞和生命體的影響是重大的。本研究首次證實(shí)了溫度和PH對(duì)UNC-51激酶活性的基本影響，從而首次提供了溫度(如過(guò)熱)和PH對(duì)細(xì)胞骨架動(dòng)態(tài)及細(xì)胞形態(tài)影響的基本分子模式。其關(guān)鍵發(fā)現(xiàn)為:溫度對(duì)UNC-51激酶活性的基本影響:從攝氏10度到50度，UNC-51激酶的自我磷酸化活性和反應(yīng)溫度呈拋物線狀關(guān)系，在30攝氏度達(dá)到很高活性；這意味著溫度通過(guò)對(duì)UNC-51激酶活性的影響可影響細(xì)胞骨架的動(dòng)態(tài)變化，進(jìn)而影響身體和生命的構(gòu)造和機(jī)能；提出了溫度對(duì)細(xì)胞骨架動(dòng)態(tài)及細(xì)胞形態(tài)影響的基本分子模式。
2.pH對(duì)UNC-51激酶活性的基本影響:從pH3.8到pH9.0, UNC-51激酶的自我磷酸化活性和反應(yīng)液pH基本上呈拋物線狀關(guān)系，在pH5.4達(dá)到很高活性；這意味著pH通過(guò)對(duì)UNC-51激酶活性的影響可影響細(xì)胞骨架的動(dòng)態(tài)變化，進(jìn)而影響身體和生命的構(gòu)造和機(jī)能；提出了PH對(duì)細(xì)胞骨架動(dòng)態(tài)及細(xì)胞形態(tài)影響的基本分子模式。
3.上記二項(xiàng)要求的技術(shù)原理在生命科學(xué)，腦科學(xué)，腫瘤科學(xué)，計(jì)算機(jī)科學(xué)，宇宙科學(xué)，交通科學(xué)，醫(yī)學(xué)，藥學(xué)和制藥 學(xué)，中藥科學(xué)，各種疾病的治療法，醫(yī)療技術(shù)以及所有其他方面的應(yīng)用和推廣。
全文摘要
溫度(例如，細(xì)胞的恒溫培養(yǎng)和體溫)和pH對(duì)各種酶的活性有多種多樣的影響，因而對(duì)細(xì)胞和生命體的影響是重大的。本研究首次證實(shí)了溫度和pH對(duì)UNC-51激酶活性的基本影響，從而首次提供了溫度和pH對(duì)細(xì)胞骨架動(dòng)態(tài)及細(xì)胞形態(tài)影響的基本分子模式。關(guān)于溫度的影響，從攝氏10度到50度，UNC-51激酶的自我磷酸化活性和反應(yīng)溫度呈拋物線狀關(guān)系，在30攝氏度達(dá)到很高活性。關(guān)于pH的影響，從pH3.8到pH9.0，UNC-51激酶的自我磷酸化活性和反應(yīng)液pH基本上呈拋物線狀關(guān)系，在pH5.4達(dá)到很高活性。這意味著溫度和pH通過(guò)對(duì)UNC-51激酶活性的影響可影響細(xì)胞骨架的動(dòng)態(tài)變化，進(jìn)而影響身體和生命的構(gòu)造和機(jī)能。首次提出了溫度和pH對(duì)細(xì)胞骨架動(dòng)態(tài)及細(xì)胞形態(tài)影響的基本分子模式。
文檔編號(hào)C12Q1/48GK103160566SQ20111040774
公開日2013年6月19日 申請(qǐng)日期2011年12月9日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月9日
發(fā)明者田懷澤, 李素云, 田華希 申請(qǐng)人:彩虹天健康科技研究(北京)有限責(zé)任公司