專利名稱：增加必需氨基酸的低蛋白嬰兒配方奶的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于嬰兒營養(yǎng)及其必需支鏈氨基酸含量的領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
認(rèn)識到(早產(chǎn))嬰兒對必需氨基酸的需要是重要的，因為過量或不足的攝入均可能導(dǎo)致長期的病態(tài)，例如肥胖(Singhal et al. (2002) Am JClin Nutr 75 :993-9)或者生長欠佳和神經(jīng)發(fā)育受損的后果(Stephens etal (2009) Pediatrics 2009;123:1337-43)。支鏈氨基酸(BCAA)亮氨酸(Leu)、異亮氨酸(Ile)和纈氨酸(Val)占體內(nèi)蛋白質(zhì)中飲食必需氨基酸的35% -40%,占骨骼肌總氨基酸的14%。嬰兒營養(yǎng)一直使用母乳制定，母乳被認(rèn)為是最理想的組成。但是，由于用于嬰兒營養(yǎng)品生產(chǎn)的蛋白質(zhì)源的不同氨基酸組 成，其蛋白質(zhì)水平普遍高于母乳中的蛋白質(zhì)水平，以確保BCAA的充足攝入。現(xiàn)在越來越清楚，由嬰兒攝取的早期營養(yǎng)對嬰兒期及以后的生活均有代謝效應(yīng)，即代謝印跡。例如WO 2008/054200公開了代謝印跡是規(guī)劃未來健康時的一種重要機制并且特別地設(shè)計食物以通過給予低蛋白飲食來阻止以后生活中的肥胖。因此，飲食中蛋白質(zhì)太高或太低對嬰兒均是有害的。但是，足月嬰兒和早產(chǎn)嬰兒對必需氨基酸的精確需要量是未知的。

發(fā)明內(nèi)容
歷史上，已經(jīng)使用描述性的或粗的測量值，像生長和氮平衡來研究氨基酸需求。尚未使用穩(wěn)定同位素技術(shù)來進行研究以測量恰當(dāng)?shù)啬c內(nèi)喂養(yǎng)嬰兒的必需氨基酸需要量。本發(fā)明人因此通過使用這項優(yōu)選技術(shù)研究了腸內(nèi)喂養(yǎng)嬰兒的必需氨基酸需要量，以便測定營養(yǎng)組合物中所述氨基酸的最佳比例并且測定所述三種必需的BCAA纈氨酸、異亮氨酸和亮氨酸的絕對需要量。現(xiàn)在這些研究的結(jié)果根本上顛覆了已知的氨基酸需要量的觀念。這與具有低蛋白質(zhì)濃度旨在預(yù)防嬰兒中有害代謝印跡效應(yīng)的配方奶尤其相關(guān)。本發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)纈氨酸需要量，其目前設(shè)定在87mg/kg/天，應(yīng)該在100-175mg/kg/天，優(yōu)選的范圍為110_160mg/kg/天。對于異亮氨酸和亮氨酸，本發(fā)明人也已經(jīng)確定了了其需要量增加。對于異亮氨酸，已發(fā)現(xiàn)其為100-160mg/kg/天，優(yōu)選地在105-150mg/kg/天，而目前的推薦為88mg/kg/天。由于亮氨酸需要量似乎與目前推薦值相當(dāng)，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)的最突出的結(jié)論是必須改變這三種必需支鏈氨基酸的比例。優(yōu)選地，Leu He Val的重量比為(I. 1-1. 5) (O. 9-1. I) 1.0，而不是目前推薦的1.9 1.0 I. O的Leu He Val重量比。因此，在一個實施方案中，本發(fā)明涉及一種包括蛋白質(zhì)、可消化的碳水化合物和脂肪的營養(yǎng)組合物，其中所述蛋白質(zhì)包括所述的氨基酸——亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸，其中亮氨酸異亮氨酸纈氨酸的重量比為(I. 1-1. 5) (O. 9-1. I) 1.0。優(yōu)選地，所述Leu He Val 的重量比為(I. 3-1. 5) (O. 9-1. I) 1.0，優(yōu)選為(I. 3-1. 5) (O. 9-1. O) 1.0，優(yōu)選為在I. 3 I. O L O 和 L 5 O. 9 I. O 之間。
因此本發(fā)明的一種優(yōu)選的組合物包括，每IOOml中，40_120mg纈氨酸，優(yōu)選為55-120mg繳氨酸，優(yōu)選為70-1 IOmg繳氨酸；40-120mg異亮氨酸，優(yōu)選為55-1 IOmg異亮氨酸，優(yōu)選為70-100mg異亮氨酸；以及70-180mg亮氨酸，優(yōu)選為90_170mg亮氨酸。本發(fā)明的組合物意在用于0-36個月的嬰兒。當(dāng)具有優(yōu)選的能量含量每100ml60-70kcal時，本發(fā)明的一種優(yōu)選的組合物包括，90-180mg繳氨酸/IOOkcal所述總組合物,優(yōu)選地100_150mg繳氨酸/lOOkcal,優(yōu)選地105_121mg纟顏氨酸/IOOkcal ;90-180mg異亮氨酸/IOOkcal所述總組合物，優(yōu)選地95-170mg異亮氨酸/IOOkcal,優(yōu)選地100-150mg異亮氨酸/IOOkcal ；和120-260mg亮氨酸/IOOkcal所述總組合物，優(yōu)選地120_180mg亮氨酸/IOOkcal,優(yōu)選地130-160mg亮氨酸/IOOkcal。優(yōu)選地，所述亮氨酸異亮氨酸纈氨酸的重量比為(I. 3-1. 5) (0. 9-1. I) I. O。包括上述范圍的氨基酸的組合物優(yōu)選地用于嬰兒的腸內(nèi)或腸胃外喂養(yǎng)。具體地，所述組合物用于阻止嬰兒在嬰兒期或其以后生活中的肥胖，同時在所述嬰兒主要依靠所述組合物來攝入蛋白質(zhì)的時期維持最佳生長。
具體實施方式

蛋白質(zhì)含量本發(fā)明所使用的術(shù)語“蛋白質(zhì)含量”可以由氮含量計算，使用公式氮含量X6.25。所述氮含量可以根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)程序來測量。嬰兒本發(fā)明的術(shù)語“嬰兒”意指年齡在0-36個月，優(yōu)選為0-18個月，甚至更優(yōu)選為0-6個月的人。所述嬰兒越小，則所述嬰兒就更加依賴所述嬰兒配方奶以攝入蛋白質(zhì)。因此，所述配方奶優(yōu)選地供給小于12個月的年齡組的嬰兒或由于消化問題或過敏而依靠所述嬰兒配方奶以攝入蛋白質(zhì)的嬰兒。早產(chǎn)嬰兒和/或小于胎齡兒早產(chǎn)嬰兒是指在標(biāo)準(zhǔn)懷孕期完成前，在母親懷孕37周時或37周之前出生的嬰兒，即從母親最后一次月經(jīng)期的開始起37周時或37周之前。小于胎齡兒(SGA infant)是出生體重在該胎齡體重的第十個百分位以下的嬰兒。他們通常是受到宮內(nèi)生長限制(IUGR)。早產(chǎn)嬰兒和/或SGA嬰兒包括低出生體重嬰兒(LBWinfant)、極低出生體重嬰兒(VLBW infant)和超低出生體重嬰兒(ELBW infant)。LBW嬰兒定義為體重低于2500g的嬰兒。VLBW嬰兒為體重低于1500g的嬰兒，ELBW嬰兒為體重低于IOOOg的嬰兒。嬰兒配方奶是包括蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物和微量營養(yǎng)素(例如維生素和礦物質(zhì))的完全營養(yǎng)的配方奶。優(yōu)選地，所述嬰兒配方奶包括膳食纖維、核苷酸和脂肪酸花生四烯酸(ARA)和二十二碳六烯酸(DHA)。所述術(shù)語嬰兒配方奶排除母乳。好的營養(yǎng)對于早產(chǎn)嬰兒和足月出生嬰兒的最佳生長和發(fā)育是必需的。蛋白質(zhì)是充足營養(yǎng)的重要成分，因為它可以提供關(guān)鍵蛋白質(zhì)合成和生長所需要的必需氨基酸。在生命早期營養(yǎng)尤其重要，因為在生命最初4周內(nèi)的蛋白質(zhì)攝入可以對以后的認(rèn)知功能和血壓具有主要影響。兒童中肥胖的發(fā)病率和嚴(yán)重程度的驚人增長已經(jīng)進一步引起了對嬰兒期喂養(yǎng)方式的關(guān)注。在生命最初1-2年內(nèi)高的早期體重增加與以后的有害健康后果相關(guān)，所述有害健康后果例如血壓上升、超重和身體脂肪積貯增加、和糖尿病風(fēng)險增加。相比母乳喂養(yǎng)的兒童，嬰兒配方奶喂養(yǎng)的嬰兒中較高的蛋白質(zhì)攝入可能起了作用，因為配方奶喂養(yǎng)的兒童在I歲年齡時達到更高的體重和體重身高比。降低嬰兒食物中蛋白質(zhì)含量可能是一個可以有助于降低這些有害效應(yīng)的策略。好的蛋白質(zhì)質(zhì)量，即營養(yǎng)上可用的氨基酸的正確量變得更關(guān)鍵。經(jīng)典地9種氨基酸被認(rèn)為是膳食必需的；如果這些氨基酸沒有以正確的比例給予，蛋白質(zhì)合成將會減少。所述必需氨基酸的需要量已經(jīng)由若干不同方法測定。歷史上，已經(jīng)使用過描述性的或粗的測量值，像生長和氮平衡。尚未使用穩(wěn)定的同位素技術(shù)來進行研究以測量恰當(dāng)?shù)啬c內(nèi)喂養(yǎng)嬰兒必需氨基酸需要量的研究。對于例如新生兒這樣的脆弱人群，長期維持缺陷的膳食是不能接受的。Brunton et al. (1998) Curr Opin Clin Nutr Metab Care, I (5) :ρ· 449-53確認(rèn)了一種在嬰兒和兒童中使用指示氨基酸氧化(IAAO)技術(shù)的微創(chuàng)方案。該方案最近已用于在健康學(xué)齡兒童中測定總的支鏈氨基酸需要量。兒童中的需要量評估與成人中的評估類似，這表明實驗方法得出的值主要反映維持的需要量，不考慮所有生長需要?！?-6個月嬰兒目前的推薦量是基于人乳中的氨基酸含量，這可能是不充足的，因為母乳喂養(yǎng)的嬰兒有相當(dāng)不定的乳攝入并且母乳喂養(yǎng)的嬰兒自己在很大程度上可以調(diào)節(jié)他們需要的攝入量。歐洲食品安全局(EFSA)法規(guī)要求嬰兒配方奶每IOOkcal含有88mg纈氨酸、92mg異亮氨酸和167mg亮氨酸,且每IOOml配方奶最低60kcal最高70kcal,即每IOOml配方奶中含有52. 5-62. Omg繳氨酸、55-64. 9mg異亮氨酸和100_118mg亮氨酸。根據(jù)本發(fā)明所述這些范圍是不充足的。根據(jù)本發(fā)明，所述嬰兒配方奶中總蛋白質(zhì)含量優(yōu)選為，以所述組合物的總熱量計，
I.3-1. 9g蛋白質(zhì)/IOOkcal,甚至更優(yōu)選為I. 3-1. 8g蛋白質(zhì)/IOOkcal,得到的嬰兒配方奶包括5. 2% -7. 6%的蛋白質(zhì)。一種優(yōu)選的組合物每IOOkcal熱量包括90_180mg纈氨酸、90-180mg異亮氨酸和每IOOkcal熱量包括130_260mg亮氨酸。對于基于氨基酸或蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的組合物，本發(fā)明的優(yōu)選的范圍是每IOOkcal熱量105-120mg纈氨酸、100-120mg異亮氨酸和每IOOkcal熱量130-160mg異亮氨酸，因為這是與實驗測定的平均氨基酸需要量(見實施例1-2)最接近的范圍。對于基于非水解(完整的)蛋白質(zhì)的組合物，這些后面的窄范圍優(yōu)選約低10%,優(yōu)選地低10% -20%。因此在一個實施方案中，對于基于非水解(完整的)蛋白質(zhì)的組合物，本發(fā)明的優(yōu)選的范圍是每IOOkcal熱量105-120mg纈氨酸、100-120mg異亮氨酸和每IOOkcal熱量130_160mg異亮氨酸。在本發(fā)明另一個優(yōu)選的實施方案中，一種營養(yǎng)組合物包括脂類、蛋白質(zhì)和可消化的碳水化合物成分，其中為制造營養(yǎng)組合物，所述蛋白質(zhì)成分提供總熱量的5. 0% -7.6%,所述脂類成分提供總熱量的35% _55%，所述可消化的碳水化合物成分提供總熱量的30% -60%,并且其中所述組合物每IOOml包括,40-1 IOmg纟顏氨酸,優(yōu)選為40_70mg纟顏氨酸，和40-110mg異亮氨酸。優(yōu)選地，所述亮氨酸纈氨酸的重量比在I. I I. O到I. 5 I. O范圍內(nèi)，更優(yōu)選地在I. 3 I. O到I. 5 1.0范圍內(nèi)，并且所述異亮氨酸纈氨酸的重量比在O. 9 I. O到I. I I. O范圍內(nèi)，優(yōu)選為約I. O I. 0，這意味著異亮氨酸和纈氨酸的量不一定必須精確地相同，但是在第二位小數(shù)的四舍五入界限內(nèi)。因此，優(yōu)選地，所述亮氨酸異亮氨酸纈氨酸的重量比在(I. 1-1. 5) (O. 9-1. I) I. O范圍內(nèi)，優(yōu)選地在(I. 1-1. 5) : I. O : I. O 范圍內(nèi)。優(yōu)選地，本發(fā)明所述組合物用于喂養(yǎng)主要依靠本發(fā)明所述組合物以攝入蛋白質(zhì)的嬰兒。這些嬰兒的年齡范圍優(yōu)選為0-36個月，優(yōu)選為0-18個月，甚至更優(yōu)選為0-6個月。通過使用基于水解蛋白或氨基酸的配方奶，所述組合物還可以用于患有(多種)食物過敏的嬰兒，所述食物過敏正常地會限制所述嬰兒對完整蛋白質(zhì)的攝入。另外，所述組合物可以用于疾病(如苯丙酮尿癥(PKU)、槭糖尿病(MSUD)或酪氨酸血癥(tyrosinaemia))的膳食治療。通常，給嬰兒喂食150ml嬰兒配方奶/kg體重/天。優(yōu)選地，使用這種喂養(yǎng)方案，嬰兒攝取了本發(fā)明確立的亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸的量。因此，在一個實施方案中，本發(fā)明涉及嬰兒配方奶用于喂養(yǎng)嬰兒的非醫(yī)療用途，或用于喂養(yǎng)嬰兒的非醫(yī)療方法，該方法包括給予一種嬰兒配方奶，其中所述嬰兒配方奶包括以(I. 1-1.5) (0.9-1. I) I. O比例提供亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸的蛋白質(zhì)，并且在給嬰兒喂食150ml所述營養(yǎng)組合物/kg體重/天時，所述嬰兒配方奶提供100_175mg纈氨酸/kg體重/天，和100-160mg異亮氨酸/kg體重/天。蛋白質(zhì)
以所述組合物的總熱量計，蛋白質(zhì)優(yōu)選地以低于8%的量存在于所述組合物中。以總熱量計，優(yōu)選地所述營養(yǎng)組合物包括5. 0% -8. O %的蛋白質(zhì)，更優(yōu)選5. 5% -8. 0%，甚至更優(yōu)選5. 7% -7. 6%的蛋白質(zhì)。所述組合物的總熱量計為所述組合物的脂肪、蛋白質(zhì)和可消化的碳水化合物釋放的熱量的總和熱量。低蛋白濃度確保較低的胰島素反應(yīng)，因而防止嬰兒體內(nèi)脂肪細(xì)胞，尤其是內(nèi)臟脂肪細(xì)胞的增殖。所述營養(yǎng)組合物的蛋白濃度是通過蛋白質(zhì)、多肽和游離氨基酸的和確定的。所述蛋白濃度是通過測定氮的量，將其乘以因子6. 25而確定的。I克蛋白質(zhì)相當(dāng)于4kcal。以干重計,所述組合物優(yōu)選地包括少于12wt. %蛋白質(zhì)，更優(yōu)選地包括6-llwt. %蛋白質(zhì)，甚至更優(yōu)選地包括7-10wt. %蛋白質(zhì)。以即飲的或重溶粉末得到的液體產(chǎn)品計，所述組合物優(yōu)選地包括少于I. 5g蛋白質(zhì)/100ml,更優(yōu)選
O.8-1. 35g 蛋白質(zhì) /IOOml0優(yōu)選地，所述蛋白質(zhì)源的選擇方式是，滿足必需氨基酸含量的最小需要量并確保良好生長。因此基于牛乳蛋白的蛋白質(zhì)源(例如乳清、酪蛋白及其混合物)和基于大豆的蛋白質(zhì)是優(yōu)選的。在使用乳清蛋白的情況下，所述蛋白質(zhì)源優(yōu)選地是基于酸乳清或甜乳清、乳清蛋白分離物或其混合物，并且可以包括α-乳白蛋白和β_乳球蛋白。更優(yōu)選地，所述蛋白質(zhì)源是基于酸乳清或已經(jīng)去除酪蛋白糖巨肽(caseino-glyco-macropeptide, CGMP)的甜乳清。從甜乳清中去除CGMP或使用酸乳清有利地降低了蘇氨酸含量。優(yōu)選地，使用富含α-乳白蛋白的乳清蛋白以便優(yōu)化氨基酸譜。使用具有更接近人乳的優(yōu)化氨基酸譜的蛋白質(zhì)源使得能夠以低的蛋白質(zhì)濃度提供所有必需氨基酸并且仍然確保良好生長，所述低的蛋白質(zhì)濃度以由蛋白質(zhì)、脂肪和可消化的碳水化合物提供的總能量含量計在8%以下，優(yōu)選地以所述總能量含量計在5. 5%到8. O %之間。為確保可以達到低水平的總蛋白質(zhì)，本發(fā)明所述的營養(yǎng)組合物優(yōu)選地包括這樣一種蛋白質(zhì)來源，其中亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸的總和提供總氨基酸含量的至少20wt%。如果使用改性的甜乳清作為蛋白質(zhì)來源，則優(yōu)選地補充以總蛋白質(zhì)計0. l-3wt. %的量的游離精氨酸和/或0. 1-1. 5wt. %的量的游離組氨酸。所述蛋白質(zhì)可以是完整蛋白或水解蛋白或完整蛋白與水解蛋白的混合物，但是完整蛋白通常是優(yōu)選的。優(yōu)選地，所述組合物包括水解酪蛋白和/或水解乳清蛋白。已發(fā)現(xiàn)，與給予包括完整酪蛋白和完整乳清蛋白的組合物相比，給予其中蛋白質(zhì)包括水解酪蛋白和水解乳清的組合物導(dǎo)致了胰島素和葡萄糖的飯后水平降低。在配方奶喂養(yǎng)的嬰兒中胰島素和葡萄糖水平的增加指示了一種形式的胰島素不敏感和/或抗性。以蛋白質(zhì)干重計，本發(fā)明組合物優(yōu)選地包括至少25wt. %的鏈長為2-30個氨基酸的肽。鏈長為2-30個氨基酸的月太的量例如可以按照 de Freitaset al, (1993), J. Agric. Food Chem. 41 :1432-1438 描述的來測定。本發(fā)明組合物可以包括酪蛋白水解產(chǎn)物，或本發(fā)明組合物可以包括乳清蛋白水解產(chǎn)物，或本發(fā)明組合物可以包括酪蛋白水解產(chǎn)物和乳清蛋白水解產(chǎn)物。本發(fā)明組合物優(yōu)選地包括酪蛋白水解產(chǎn)物和乳清蛋白水解產(chǎn)物，因為牛酪蛋白的氨基酸組成與人乳蛋白中發(fā)現(xiàn)的氨基酸組成更相似，而乳清蛋白更容易消化，并且乳清蛋白在人乳中占較大比例。以蛋白質(zhì)的總重量計，本發(fā)明組合物優(yōu)選地包括至少50wt. %,優(yōu)選地至少80wt. 最優(yōu)選地約IOOwt. %的蛋白水解產(chǎn)物。所述組合物優(yōu)選地包括蛋白質(zhì)水解度在5% -25%，更優(yōu)選地在7. 5% -21%，最優(yōu)選地在10% -20%的蛋白質(zhì)。水解度定義為已被酶促水解作用切斷的肽鍵的百分?jǐn)?shù)，100%是存在的全部可能肽鍵均被切斷。制備水解產(chǎn)物的適合方式記載于W001/41581。當(dāng)使用基于氨基酸的蛋白質(zhì)源時，可以更好地預(yù)測有多少氨基酸實際上為嬰兒可 用的。因此，本發(fā)明的一種優(yōu)選的組合物包括氨基酸作為蛋白質(zhì)源。在本發(fā)明組合物的一個實施方案中，所述蛋白質(zhì)基本上由游離氨基酸組成。一個優(yōu)選的實施方案顯示在實施例3中。膳食纖維兒童中糞便微生物群組成的早期差異可以預(yù)測超重(Kalliomaki etal. (2008)AmJ Clin Nutr 87(3) :534-538)。作者證實，在生命的第一年中影響微生物群數(shù)量和質(zhì)量的雙歧桿菌屬(Bifidobacterium spp)在正常體重的7歲兒童中的數(shù)目要高于發(fā)育超重的兒童。不受理論限制，本發(fā)明人相信除低的蛋白質(zhì)攝入外，使用能夠刺激雙歧菌群的膳食纖維將會對嬰兒中的肥胖的防止或治療有額外的效果。所述膳食纖維選自可以刺激雙歧桿菌屬生長的纖維。優(yōu)選地，非消化性低聚糖具有2到60的聚合度。優(yōu)選地，所述非消化性低聚糖選自低聚果糖(包括菊糖)、低聚半乳糖(包括反式低聚半乳糖)、低聚葡萄糖(包括低聚龍膽糖、低聚黑曲霉糖和環(huán)糊精低聚糖)、低聚阿拉伯糖、低聚甘露糖、低聚木糖、低聚巖藻糖、低聚阿拉伯半乳糖、低聚葡萄甘露糖、低聚半乳甘露糖、包括低聚糖的唾液酸和糖醛酸低聚糖。優(yōu)選地，所述本發(fā)明組合物包括低聚果糖、低聚半乳糖和/或半乳糖醛酸低聚糖，更優(yōu)選地低聚半乳糖，最優(yōu)選地β鍵連接的低聚半乳糖。在一個優(yōu)選的實施方案中，所述組合物包括β鍵連接的低聚半乳糖和低聚果糖的混合物，更優(yōu)選地重量比為20-2 1，更優(yōu)選12-7 I。優(yōu)選地，所述本發(fā)明組合物包括聚合度為2-10的低聚半乳糖和/或聚合度為2-60的低聚果糖。優(yōu)選地，所述低聚半乳糖選自β鍵連接的低聚半乳糖、反式低聚半乳糖、低聚半乳糖、乳糖-N-四糖(LNT)、乳糖-N-新四糖(neo-LNT)、巖藻糖乳糖、巖藻糖基化的 LNT 和巖藻糖基化的 neo-LNT。例如有以 Vivinal (Borculo Domo Ingredients,Netherlands)商標(biāo)銷售的β鍵連接的低聚半乳糖。優(yōu)選地，所述低聚半乳糖的糖是 連接的，因為這也是人乳中低聚半乳糖的情況。低聚果糖是包括β鍵連接的果糖單元鏈的ND0，其聚合度或平均聚合度為2-250，更優(yōu)選為10-100。低聚果糖包括菊糖、果聚糖和/或多聚果糖的混合型。一種尤其優(yōu)選的低聚果糖是菊糖。適合用于所述組合物的低聚果糖也已經(jīng)是市售的，例如Raftiline HP(Orafti)。糖醛酸低聚糖優(yōu)選地從果膠降解產(chǎn)物中獲得，更優(yōu)選為從蘋果果膠、甜菜果膠和/或柑橘果膠中獲得。優(yōu)選地，所述組合物包括的β鍵連接的低聚半乳糖低聚果糖糖醛酸低聚糖的重量比為20-2 I 1-3，更優(yōu)選為12-7 I 1-2。優(yōu)選地，所述組合物包括80mg到2g非消化性低聚糖/100ml,更優(yōu)選150mg到
I.50g,甚至更優(yōu)選300mg到lg。以干重計,所述組合物優(yōu)選地包括O. 25wt. %到5. 5wt. %,更優(yōu)選地O. 5wt. %到4wt. %，甚至更優(yōu)選地I. 5wt. %到3wt. %的非消化性低聚糖。較低量的非消化性低聚糖在刺激微生物群中的有益細(xì)菌方面不太有效，然而太高的量會導(dǎo)致胃脹和腹部不適的副作用。已經(jīng)完成一項確定對配方奶喂養(yǎng)嬰兒中雙歧菌群的刺激的研究，顯示與只有一種
膳食纖維的配方奶相比，低聚半乳糖和長鏈菊糖在組合給予時其具有更高的促雙歧桿菌效應(yīng)。給予9-10個月齡的嬰兒500ml配方奶/天，持續(xù)I個月，所述配方奶包括I. 2gβ-低聚半乳糖加上長鏈菊糖(組Α)。對照組接受沒有低聚半乳糖和長鏈菊糖的配方奶(組B)?？偣?38個兒童參加所述研究。通過FISH分析檢查這段時間前后的糞便菌群。在干預(yù)時間后，組A中的雙歧桿菌/總細(xì)菌的比例顯著地高于組B。因此本發(fā)明的一種優(yōu)選的組合物包括β-低聚半乳糖和長鏈菊糖的組合。脂肪如上所說明的，所述嬰兒配方奶的蛋白質(zhì)含量對嬰兒的脂質(zhì)代謝和脂肪沉積有效果。并且，已經(jīng)證實嬰兒配方奶中脂肪的脂質(zhì)組成對肥胖，尤其是軀干性肥胖或內(nèi)臟肥胖的預(yù)防有重要的影響，例如參見W02008/054208。所述術(shù)語“內(nèi)臟肥胖”是指內(nèi)臟脂肪量增加的病癥。所述術(shù)語內(nèi)臟肥胖還稱為軀干性肥胖。內(nèi)臟肥胖一般是由過多的內(nèi)臟脂肪量(累積)引起的。與位于皮膚下面的皮下脂肪和散布于骨骼肌中的肌肉內(nèi)脂肪不同，內(nèi)臟脂肪，還稱為器官脂肪、腹內(nèi)脂肪、腹膜脂肪或軀干脂肪，通常位于腹膜腔內(nèi)。內(nèi)臟脂肪包括腸系膜脂肪、腎周脂肪和腹膜后脂肪。在W02008/054208中公開的在先研究證實，中鏈脂肪酸(MCFA)有助于降低以后生活的脂肪量。因此，除了本發(fā)明權(quán)利要求中的具體蛋白質(zhì)和氨基酸含量之外，所述組合物有利地包括MCFA。當(dāng)使用包括⑴比例在2到6之間的LA/ALA和(ii)低LA含量(以總脂肪酸計
<14.5% )和任選地LC-PUFA(尤其是DHA)的營養(yǎng)組合物時，具體地證實了對內(nèi)臟脂肪沉積的效果。該組合物導(dǎo)致了以后生活中內(nèi)臟肥胖的降低。因此，一種優(yōu)選的營養(yǎng)組合物包括蛋白質(zhì)、可消化的碳水化合物和脂肪，其中所述蛋白質(zhì)包括亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸，所述亮氨酸異亮氨酸纈氨酸的比例范圍為(I. 1-1.5) (0.9-1. I) 1.0;并且所述脂肪包括比例在2到6之間的亞油酸和α亞油酸，并且以總脂肪酸計，所述亞油酸含量少于14. 5wt. %。優(yōu)選地，該組合物可以用于嬰兒的腸內(nèi)喂養(yǎng)以預(yù)防以后生活中的肥胖。應(yīng)用所述本發(fā)明營養(yǎng)組合物有利地被早產(chǎn)嬰兒或小于胎齡兒攝取或被給予早產(chǎn)嬰兒或小于胎齡兒，并因此意在用于早產(chǎn)嬰兒或小于胎齡兒的腸內(nèi)或腸胃外治療。本發(fā)明營養(yǎng)組合物及其優(yōu)選地其中蛋白質(zhì)基本上由游離氨基酸組成的形式還可有利地用于患有選自PKU,MSUD和酪氨酸血癥的代謝疾病的嬰兒的治療，或用于患有食物過敏的嬰兒的治療。優(yōu)選地，本發(fā)明營養(yǎng)組合物有利地被0-36個月優(yōu)選0-24個月的嬰兒攝取，或被給予0-36個月優(yōu)選0-24個月的嬰兒。本發(fā)明還涉及本發(fā)明營養(yǎng)組合物用于制備藥物的用途，其中所述藥物用于治療a)年齡在0-24個月的嬰兒和/或b)早產(chǎn)嬰兒或c)小于胎齡兒或d)患有選自PKU、MSUD和酪氨酸血癥的代謝疾病的嬰兒或e)患有食物過敏的嬰兒。在一個優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明涉及本發(fā)明營養(yǎng)組合物用于制造預(yù)防以后生活中肥胖的藥物的用途。 本發(fā)明還涉及本發(fā)明營養(yǎng)組合物用于制造用于喂養(yǎng)年齡范圍在0-36個月的嬰兒的組合物的非醫(yī)療用途。本發(fā)明還涉及一種嬰兒配方奶用于喂養(yǎng)嬰兒的非醫(yī)療用途，其中所述嬰兒配方奶包括以(I. 1-1.5) (O. 9-1. I) 1.0的比例提供亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸的蛋白質(zhì)，并且當(dāng)嬰兒被喂食150ml所述營養(yǎng)組合物/kg體重/天時，所述嬰兒配方奶提供100到175mg繳氨酸/kg體重/天，和100到160mg異亮氨酸/kg體重/天。實施例實施例I.嬰兒的纈氨酸和異亮氨酸需要量實驗設(shè)計足月男嬰(η = 28)登記加入該研究。他們的胎齡為37_43周，出生體重多于2500g，并且他們的出生后年齡為· 28天。使用IAAO技術(shù)(Zello et al. (1993)Am J Physiol 264 :E677_85)測定纈氨酸的需要量，并在一個單獨的實驗中測定異亮氨酸的需要量。該方法使用當(dāng)一種必需氨基酸受限制時會被氧化的指示劑，因為不儲存氨基酸，氨基酸必須在合并到蛋白質(zhì)中或氧化之間分配。如果所檢測的氨基酸在膳食中缺乏，這將限制蛋白質(zhì)合成并且所述指示劑氨基酸將被氧化。如果所述要檢測氨基酸的膳食攝入增加，所述指示劑的氧化將降低直到滿足所述要檢測氨基酸的需要量。當(dāng)攝入滿足了需要量時，蛋白質(zhì)合成以最佳能力發(fā)生，并且所有其他必需氨基酸的氧化降解到達平穩(wěn)階段。要檢測的氨基酸的需要量由這個分界點鑒定。在該研究期間，受試者被隨機分配以接受5到236mg/kg/天的纈氨酸分級攝入或5到216mg/kg/天的異亮氨酸分級攝入。在適應(yīng)所述研究用膳食24小時后，獲得基線呼吸樣本并且開始示蹤劑方案。每天在所述示蹤劑方案之前和結(jié)束時稱重受試者，并在研究當(dāng)日測量頭圍。研究用配方奶本發(fā)明人使用一種與正規(guī)的Neocate相同的研究用配方奶，Neocate是一種基于氨基酸的配方奶，設(shè)計用來滿足嬰兒的氨基酸需要量(SHS，Liverpool, UK)，但是沒有所要檢測的氨基酸并且苯丙氨酸的量降低。纈氨酸的量獨立地按照L-纈氨酸的形式調(diào)整。異亮氨酸的量獨立地以L-異亮氨酸的形式調(diào)整。在適應(yīng)時間和[13C]碳酸氫鹽注入期間，補充L-苯丙氨酸以在整個研究期間獲得穩(wěn)定的166mg/kg/d的總攝入量。為使所述配方奶含氮量相等，本發(fā)明人獨立地加入了 L-丙氨酸。因為苯丙氨酸用作指示劑并且在氧化發(fā)生前苯丙氨酸會被羥基化為酪氨酸，酪氨酸攝入被確信高于目前的要求。過于受限的酪氨酸攝入可能會降低呼出空氣中13C標(biāo)記的回收。為使喂食對[13C]碳酸氫鹽平穩(wěn)階段的作用最小，在[13C]碳酸氫鹽注入期間給予持續(xù)的滴液喂食。為使受試者的不適最小，在[I-13C]苯丙氨酸注入期間他們可以每小時喝一瓶。示蹤劑方案在研究日受試者接受最初的(15 μ mol/(kg),持續(xù)的(10 μ mol/(kg · h))的[13C]碳酸氫鹽(滅菌無熱原，99% 13C同位素原子超額百分?jǐn)?shù)(APE);劍橋同位素，沃本，MA)的腸內(nèi)注入3小時以定量個體的CO2產(chǎn)生量。在注入經(jīng)標(biāo)記的碳酸氫鈉后，直接由注入泵通過鼻胃管進行最初的(30 μ mol/(kg),持續(xù)的(30 μ mol/(kg · h)) [I-13C]苯丙氨酸(99% 13CAPE;劍橋同位素，沃本，MA)腸內(nèi)注入5小時。帶有示蹤劑的注射器在注入之前和之后稱重以測定研究期間給予的示蹤劑的精確量。樣本收集在適應(yīng)日使用直接采樣方法在前8位患者中收集呼吸樣本以測定獲得穩(wěn)定背景富集所需要的時間，對該方法的描述見于Van der Schooret al. (2004)Pediatr Res 55:50-4。在研究日在開始示蹤劑注入前15和5分鐘獲得基線樣本。實驗中，在[13C]碳酸氫鹽注入的同位素穩(wěn)定狀態(tài)開始I. 75小時后，每10分鐘收集兩份13C富集的呼吸樣本；并且在[1」3C]苯丙氨酸注入的同位素穩(wěn)定狀態(tài)開始3小時后，每15分鐘收集兩份13C富集的呼吸樣本。
分析和計算呼出空氣中的13CO2同位素富集是由同位素比值質(zhì)譜法(ABCA ；EuropeScientific, Van Loenen Instruments,萊頓,荷蘭)測量的并且表示為基線之上的同位素原子超額百分?jǐn)?shù)(APE)。穩(wěn)定狀態(tài)定義為三個或三個以上的斜率不為O的連續(xù)點(P
<O. 05) ο 按照在先的描述(Riedijket al. (2005) Pediatr Res 58 :861-4)對每個嬰兒計算估計的身體CO2產(chǎn)生量(πιπιοΙ/Ο^·!!))。[I-13C]苯丙氨酸的分步氧化比率使用如下方程式計算苯丙氨酸的分步氧化(％) = [IEphe X iB]/[iPHE x IEb]x 100%其中 IEphe 是在[I-13C]苯丙氨酸注入(APE)期間呼出空氣中的13C同位素富集，iB是[13C]碳酸氫鹽的注入率(μ mol/(kg · h))，iPHE 是[I-13C]苯丙氨酸的注入率(μ mol/(kg · h))，IEb 是在[13C]碳酸氫鹽注入期間呼出空氣中的13C同位素富集(van der Schoor et al. (2004)Gut 53:38-43)。統(tǒng)計分析描述性數(shù)據(jù)表示為均值土SD。當(dāng)斜率的線性因子沒有顯著地不同于O時(P · 0.05)，就達到了 [I-13C]苯丙氨酸期間呼出氣息中13CO2的穩(wěn)定狀態(tài)。纈氨酸需要量是通過在分步氧化(fractional oxidation)上應(yīng)用兩階段線性回歸交叉模型(Ball andBayley(1984)J Nutr 114 :1741-6 ;Seber GAF. Linear Regression Analysis. New York John Wiley, 1977)來確定的。攝入的安全水平(95%置信區(qū)間以上)是使用Fieller’s定理(Seber GAF. Ibid.)確定的。所有統(tǒng)計分析均使用SPSS完成(SPSS版本15. 0，芝加哥，伊利諾伊州，美國)。結(jié)果
所有的受試者在[13C]碳酸氫鹽和[I-13C]苯丙氨酸注入時達到了同位素穩(wěn)定狀態(tài)(到達平穩(wěn)階段)，這是由平穩(wěn)階段時任何兩個數(shù)據(jù)點之間沒有顯著的斜率而確定的。繳氨酸攝入和分步氧化之間的Spearmen’ s秩相關(guān)系數(shù)是O. 63 (p = O. 000)。使用兩階段回歸分析，并且以所述纈氨酸攝入作為獨立變量，以所述[i-13c]苯丙氨酸示蹤劑的分步氧化作為因變量，測定的分界點為110mg/kg/d。通過95%置信區(qū)間以上所測定的安全人口攝入為164. 6mg/kg/d。異亮氨酸攝入和分步氧化之間的Spearmen’s秩相關(guān)系數(shù)是O. 74 (p = O. 000)。從以所述異亮氨酸攝入作為獨立變量，以所述[i-13c]苯丙氨酸示蹤劑的分步氧化作為因變量的兩階段回歸分析中，可以確定分界點為105mg/kg/d。按照95%以上的置信區(qū)間所確定的人口安全攝入量為152mg/kg/d。實施例2.嬰兒的亮氨酸需要量按照與實施例I相同的方法，測定了嬰兒的亮氨酸需要量?！ぷ阍履袐?η = 33)登記加入該研究。他們的胎齡為37_43周，出生體重大于2500g，他們的出生后年齡為· 28天。結(jié)果所有的受試者在[13C]碳酸氫鹽和[I-13C]苯丙氨酸注入時達到了同位素穩(wěn)定狀態(tài)(到達平穩(wěn)階段)，這是由平穩(wěn)階段時任何兩個數(shù)據(jù)點之間沒有顯著的斜率而確定的。使用兩階段回歸分析，以所述亮氨酸攝入作為獨立變量，以所述[I-13C]苯丙氨酸示蹤劑的分步氧化作為因變量，確定的分界點為140mg/kg/d。按照95%以上置信區(qū)間所確定的安全人口攝入量為245mg/kg/d。實施例3.適合治療過敏嬰兒的基于氨基酸的營養(yǎng)物
權(quán)利要求
1.一種包括蛋白質(zhì)、可消化的碳水化合物和脂肪的營養(yǎng)組合物，其中所述蛋白質(zhì)包括氨基酸亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸，亮氨酸異亮氨酸纈氨酸的重量比例為(I. 1-1. 5) (O. 9-1. I) I. O。
2.如權(quán)利要求I所述的營養(yǎng)組合物，其中所述亮氨酸異亮氨酸纈氨酸的重量比例為(I. 3-1. 5) (O. 9-1. I) I. O。
3.如權(quán)利要求I或2所述的營養(yǎng)組合物，其中亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸的總和提供總 氨基酸含量的至少20wt%。
4.如前述權(quán)利要求的任一項所述的營養(yǎng)組合物，其中所述蛋白質(zhì)包括120到180mg亮氨酸/IOOkcal總組合物,90到180mg異亮氨酸/IOOkcal總組合物，以及90到180mg繳氨酸/IOOkcal總組合物。
5.如權(quán)利要求4所述的營養(yǎng)組合物，其中所述蛋白質(zhì)包括130到160mg亮氨酸/IOOkcal總組合物，100到120mg異亮氨酸/IOOkcal總組合物，以及105到12Img纟顏氨酸/IOOkcal總組合物。
6.如前述權(quán)利要求的任一項所述的營養(yǎng)組合物，其中以所述組合物的總熱量計所述蛋白質(zhì)占5%到8%。
7.如前述權(quán)利要求的任一項所述的營養(yǎng)組合物，還包括至少一種雙歧桿菌生長膳食纖維，該膳食纖維選自β鍵連接的低聚半乳糖、反式低聚半乳糖、低聚半乳糖、乳糖-N-四糖(LNT)、乳糖-N-新四糖(neo-LNT)、巖藻糖乳糖、巖藻糖基化的LNT、巖藻糖基化的neo-LNT和低聚木糖。
8.如前述權(quán)利要求的任一項所述的營養(yǎng)組合物，還包括至少一種選自ARA、DHA和EPA的 I3UFA。
9.如前述權(quán)利要求的任一項所述的營養(yǎng)組合物，其中所述蛋白質(zhì)基本上由游離氨基酸組成。
10.如前述權(quán)利要求的任一項所述的營養(yǎng)組合物，其中所述總蛋白質(zhì)含量為I.3到I. 9g蛋白質(zhì)/IOOkcal,優(yōu)選為I. 3到I. 8g蛋白質(zhì)/IOOkcal0
11.如前述權(quán)利要求的任一項所述的營養(yǎng)組合物，用于早產(chǎn)嬰兒或小于胎齡兒的腸內(nèi)或腸胃外治療。
12.如權(quán)利要求9所述的營養(yǎng)組合物，用于患有選自PKU、MSUD和酪氨酸血癥的代謝疾病的嬰兒的治療，或用于患有食物過敏的嬰兒的治療。
13.如權(quán)利要求1-11任一項所述的營養(yǎng)組合物用于制造治療以下的藥物的用途 a.年齡在0-24個月的嬰兒；和/或 b.早產(chǎn)嬰兒；或 c.小于胎齡兒；或 d.患有選自PKU、MSUD和酪氨酸血癥的代謝疾病的嬰兒； 或 e.患有食物過敏的嬰兒。
14.如權(quán)利要求1-11任一項所述的營養(yǎng)組合物用于制造預(yù)防以后生活中的肥胖的藥物的用途。
15.如權(quán)利要求1-11任一項所述的營養(yǎng)組合物，用于制造喂養(yǎng)年齡范圍在0-36個月的嬰兒的組合物的非醫(yī)療用途。
16.一種嬰兒配方奶的用于喂養(yǎng)嬰兒的非醫(yī)學(xué)用途，其中所述嬰兒配方奶包括以(I. 1-1.5) (O. 9-1. I) 1.0的比例提供亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸的蛋白質(zhì)，并且當(dāng)以150ml所述營養(yǎng)組合物/kg體重/天喂養(yǎng)嬰兒時，所述嬰兒配方奶提供100到175mg纈氨酸Ag體重/天,和100到160mg異亮氨酸/kg體重/天。
全文摘要
本發(fā)明涉及嬰兒配方奶中必需支鏈氨基酸亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸的改進的配重。
文檔編號A23L1/29GK102892309SQ201180024804
公開日2013年1月23日 申請日期2011年3月25日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月26日
發(fā)明者J·B·范古德弗, E·M·范德比克, M·阿布拉哈姆瑟-伯克維爾德, G·貝姆 申請人:N·V·努特里奇亞