專利名稱：具有腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的減少作用的雙歧桿菌的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本申請發(fā)明涉及腸內(nèi)細(xì)菌的狀態(tài)的改善方法。更具體地，涉及減少腸內(nèi)細(xì)菌導(dǎo)致的作為腐敗氣味原因的吲哚系化合物的有用微生物的挑選和該挑選所得的微生物。
背景技術(shù)：
由于飲食生活的混亂、生活的不規(guī)則、壓力等，具有反復(fù)便秘、腹瀉，或腹?jié)q、產(chǎn)氣等癥狀的人不斷增多。這些癥狀被認(rèn)為受腸內(nèi)環(huán)境所影響，換言之，其原因在于腸內(nèi)菌群(群落)中腐敗菌成為優(yōu)勢。并且，腸內(nèi)菌群在厭氧條件下由色氨酸產(chǎn)生吲哚或其衍生物等腐敗氣味成分。對這種腸內(nèi)菌群與腐敗產(chǎn)物的產(chǎn)生的關(guān)系進行了大量研究(非專利文獻I)。另外，認(rèn)為吲哚通過腸內(nèi)腐敗菌而由色氨酸產(chǎn)生、并由腸道吸收后，在肝臟中被代 謝為吲哚酚，進而與硫酸結(jié)合，形成硫酸吲哚酚。認(rèn)為對健康人而言硫酸吲哚酚排泄至尿中，但對透析患者等而言則成為尿毒癥等合并癥的病因(非專利文獻2)。對于作為腸內(nèi)有害物質(zhì)的吲哚等的除去，例如，專利文獻I中使用具有吲哚減少能力的嗜熱雙歧桿菌(匕' 7 4 F' K夕f O Λ /寸一 7 4 9 Λ )。另外，專利文獻2中記載了將五層龍屬植物的提取物或微粉碎物與乳酸菌和/或雙歧桿菌并用來改善腸內(nèi)環(huán)境。進而，專利文獻3中記載了利用含有丙酸菌的組合物來促進腸道內(nèi)的雙歧桿菌的生長，防止放出惡臭氣體。另外，還報道了菊糖、低聚糖有助于改善腸內(nèi)菌群(非專利文獻3)。現(xiàn)有技術(shù)文獻 專利文獻
專利文獻I :日本特開2006-158216 專利文獻2 :日本特開2007-031345 專利文獻3 :日本特開2007-186529 非專利文獻
非專利文獻I :腸內(nèi)細(xì)菌學(xué)雜志第19卷169-177頁(2005)
非專利文獻2:透析會志24卷3號312-316頁(1991)
非專利文獻 3 :The Journal of Nutrition 129 (7Suppl) : 1438S-1441S (1999)。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明要解決的技術(shù)問題
已知人的活體內(nèi)(腸內(nèi))生成的腐敗物質(zhì)會促進癌癥發(fā)生、老化，認(rèn)為只要可積極地減少活體內(nèi)的腐敗物質(zhì)，即可有助于人的健康。因此首先，本申請發(fā)明中的課題在于，有效利用安全性高的有用微生物來有效地減少腸內(nèi)腐敗物質(zhì)。上述腐敗物質(zhì)主要在大腸內(nèi)生成時，作為大腸內(nèi)的優(yōu)勢微生物(菌種)的一例，有乳酸菌、雙歧桿菌(雙歧桿菌屬)。該雙歧桿菌自古以來作為在活體內(nèi)發(fā)揮有用功能的微生物而被用于食品，具有飲食經(jīng)驗的實際成績。因此，本申請的第I課題在于，由在人的活體內(nèi)(腸內(nèi))占優(yōu)勢的雙歧桿菌中挑選可以有效地減少腐敗物質(zhì)的微生物(菌株)。
然而，以往主要是利用體外的體系來尋找減少活體內(nèi)(腸內(nèi))生成的腐敗物質(zhì)的物質(zhì)或微生物。由于目前還不能在體外再現(xiàn)腸內(nèi)菌群，因而對是否能反映實際腸內(nèi)狀況而進行實驗存有疑問。因此，本申請發(fā)明的第2課題在于，提供合適的體外和體內(nèi)的體系來作為減少在活體內(nèi)(腸內(nèi))生成的腐敗物質(zhì)的物質(zhì)或微生物的作用效果的驗證或?qū)ふ殷w系。進而，本申請發(fā)明的第3課題在于，提供對透析患者等具有減少作為合并癥病因的硫酸吲哚酚在血清中的濃度的效果的微生物。用于解決技術(shù)問題的手段
作為安全性高的有用的微生物，本申請發(fā)明人基于本申請發(fā)明的篩選方法，從乳酸菌和雙歧桿菌中分離有效減少腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的菌株，從而完成了本申請發(fā)明。
作為減少在活體內(nèi)(腸內(nèi))生成的腐敗物質(zhì)的物質(zhì)或微生物的作用效果的驗證體系，本申請發(fā)明人研究了下述方法在體外進行篩選之際使用緩沖液再現(xiàn)菌體難以增殖的條件，評價腐敗物質(zhì)的減少效果(減少能力)。并且，本申請發(fā)明人確立了減少腸內(nèi)細(xì)菌產(chǎn)生的腐敗物質(zhì)的微生物(乳酸菌、雙歧桿菌等)的體外挑選方法和/或評價方法，該方法的特征在于，將反應(yīng)溶液設(shè)定(設(shè)計)為乳酸菌、雙歧桿菌基本不增殖的條件，并且為減少腐敗物質(zhì)所需的最低限的能量的葡萄糖量。另外，作為減少在活體內(nèi)(腸內(nèi))生成的腐敗物質(zhì)的物質(zhì)或微生物的作用效果的驗證體系，本申請發(fā)明人研究了在體內(nèi)進行篩選之際使用小鼠，由血清中測量硫酸吲哚酚。并且，本申請發(fā)明人確立了降低血清中的硫酸吲哚酚的產(chǎn)生的微生物(乳酸菌、雙歧桿菌等)的體內(nèi)挑選方法和/或評價方法，該方法的特征在于，將低聚果糖(FOS)和/或低聚半乳糖(GOS)以及色氨酸(L-色氨酸)添加至飼料(粉飼料)中飼養(yǎng)小鼠，評價血清中的硫酸吲哚酚的濃度。進而，為了挑選可有效減少腐敗物質(zhì)的微生物(菌株)，首先，本申請發(fā)明人著眼于通常在人的活體內(nèi)(腸內(nèi))占優(yōu)勢的雙歧桿菌，對短雙歧桿菌(Bifidobacteriumbreve)的32菌株、長雙歧桿菌(Bifidobacterium longum)的92菌株、青春雙歧桿菌(Bifidobacterium adolescenti)的72菌株的總計196菌株實施篩選，在體外進行評價，預(yù)挑選出9株作為安全性高的有用微生物。接著，為了驗證在活體內(nèi)減少腐敗物質(zhì)的作用、效果，對于上述挑選的9株實施動物實驗，進行體內(nèi)評價，挑選出吲哚減少作用強并確認(rèn)到血清中的硫酸吲哚酚的減少作用的短雙歧桿菌0LB6129，從而完成了本申請發(fā)明。另外，本申請發(fā)明中，包含藥物和食品，其中含有上述挑選的吲哚減少作用強、顯示血清中的硫酸吲哚酚的減少作用的雙歧桿菌作為有效成分。本說明書包含作為本申請優(yōu)選權(quán)基礎(chǔ)的日本專利申請2010-152962號的說明書和/或附圖中記載的內(nèi)容。發(fā)明效果
本申請發(fā)明的短雙歧桿菌(B. breve)是來源于人的菌株，在該菌株自身不增殖的體系中，實現(xiàn)了顯著減少吲哚和血清中的硫酸吲哚酚的優(yōu)異效果。另外，長期被食用的B. breve的安全性高，本發(fā)明的雙歧桿菌0LB6129也可以在食品領(lǐng)域、藥品領(lǐng)域廣泛適用或應(yīng)用。


[圖I]對小鼠給予短雙歧桿菌(活菌)引起的對血清中的硫酸吲哚酚的濃度的影響
[圖2]對小鼠給予長雙歧桿菌(活菌)引起的對血清中的硫酸吲哚酚的濃度的影響[圖3]對小鼠口服給予B. breve 0LB6129 (活菌)中的、B. breve 0LB6129 (活菌)的濃度引起的對血清中的硫酸吲哚酚的濃度的影響
[圖4]在TOS丙酸瓊脂培養(yǎng)基中檢測到的便中(Fecal)和盲腸內(nèi)容物(cecal)中的B.breve 0LB6129的菌落數(shù)
[圖5]對小鼠口服給予B. breve 0LB6129 (活菌)中的、有無添加FOS引起的對血清中的硫酸吲哚酚的濃度的影響
[圖6]在TOS丙酸瓊脂培養(yǎng)基中檢測到的便中(Fecal)中的B. breve 0LB6129的菌落數(shù)與有無添加FOS的關(guān)系。
具體實施例方式I.首先
已知人的活體內(nèi)(腸內(nèi))生成的腐敗物質(zhì)會促進癌癥發(fā)生、老化，認(rèn)為只要可積極地減少活體內(nèi)的腐敗物質(zhì)，即可有助于人的健康。作為主要在大腸內(nèi)生成的腐敗物質(zhì)，可以列舉苯酚、對甲酚、吲哚、糞臭素、氨等。這些腐敗物質(zhì)之中，特別是吲哚、糞臭素等是惡臭成分，另外還是有可能對健康帶來不良影響的成分，因而期望減少吲哚、糞臭素。作為大腸內(nèi)的優(yōu)勢微生物(菌種)的一例，有乳酸桿菌、雙歧桿菌(雙歧桿菌屬)。雙 歧桿菌自古以來作為在活體內(nèi)發(fā)揮有用功能的微生物而被用于食品。另外，雙歧桿菌被認(rèn)為具有整腸作用，因而還被用于整腸劑等，也有助于腸內(nèi)菌群的改善，認(rèn)為通過改善腸內(nèi)環(huán)境，對抑制腹瀉、防止皮膚粗糙、改善花粉病、免疫力的道教等也有效。2.用于驗證、尋找減少腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的微生物的作用效果的評價體系 2-1.減少腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的微生物的體外篩選或預(yù)篩選
為了使用微生物，在腸內(nèi)環(huán)境下減少腸內(nèi)腐敗物質(zhì)(在腸內(nèi)生成并產(chǎn)生惡臭成分等的物質(zhì))，重要的是該特定的微生物在腸內(nèi)是優(yōu)先存在的。即，作為這種微生物應(yīng)具備的性質(zhì)，要求對于適應(yīng)腸內(nèi)環(huán)境的條件的耐性。因此，理想的是適用符合腸內(nèi)環(huán)境中存在的微生物(菌體)的狀態(tài)(實際情況)的篩選方法、評價方法。因此，在體外篩選減少腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的物質(zhì)或微生物時，本申請發(fā)明人首先使用緩沖液來再現(xiàn)微生物難以增殖的條件，研究了腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的減少效果(減少能力)的評價方法。通過采用上述條件，可以挑選即使微生物不增殖，也能夠除去腐敗物質(zhì)的、在更接近腸內(nèi)環(huán)境的條件下優(yōu)異的微生物。例如，可以以設(shè)定對象微生物基本不增殖的條件、并且減少腐敗物質(zhì)所需的最低限的能量那樣的條件，來決定反應(yīng)溶液的成分、濃度。更具體地，對于作為能量源的培養(yǎng)基成分的配合量，例如，使葡萄糖、乳糖、果糖等的濃度比對象微生物的通常的培養(yǎng)條件低，并且作為可以除去腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的程度，可適用 O. 3 O. 7 (w/v) %。應(yīng)予說明，篩選(評價挑選)方法(體外試驗)中，例示了對葡萄糖之類的碳源的反應(yīng)溶液的濃度進行研究的結(jié)果，但即使是其它成分，也可以同樣決定反應(yīng)溶液的組成、濃度。2-2.減少腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的微生物的體內(nèi)篩選以前，未能實施動物實驗由體內(nèi)充分確認(rèn)血清中的硫酸吲哚酚的減少效果。血清中的硫酸吲哚酚的減少效果，雖然期待在腸內(nèi)發(fā)揮，但即使將微生物(菌體)給予至活體內(nèi)，也認(rèn)為在到達腸內(nèi)之前其大部分有可能死亡、或在到達腸內(nèi)之后其有可能不能穩(wěn)定維持(保持)。因此，本申請發(fā)明中，在將微生物給予至活體內(nèi)后，期待有助于其存活性、穩(wěn)定性等的提高而試著將低聚果糖(FOS)添加至飼料中時，可確認(rèn)到血清中的硫酸吲哚酚的減少效果。
另外，動物實驗中通常所使用的小鼠是幼齡的健康個體，因而活體內(nèi)的腐敗物質(zhì)會被抑制到極少量，多數(shù)情況會低于檢測限。因此，本申請發(fā)明中，在使用小鼠的動物實驗中，將在活體內(nèi)作為吲哚前體的色氨酸(L-色氨酸)添加至飼料(粉飼料)中，以嘗試提高在活體內(nèi)生成的吲哚的基線時，對于吲哚的基線，確認(rèn)到了顯著性上升。即，變得可以穩(wěn)定作為腐敗物質(zhì)的指標(biāo)(標(biāo)志物)的血清中的硫酸吲哚酚的濃度而確切地進行評價。并且，對于特定的菌株，變得能夠以與對照組比較的顯著性差異的形式來評價、確認(rèn)腐敗物質(zhì)的減少效果。更具體地，可以將低聚果糖(FOS)和/或低聚半乳糖(GOS)以及色氨酸(L-色氨酸)以規(guī)定的濃度添加至飼料(粉飼料)中來喂養(yǎng)通常的小鼠(動物實驗用)，評價血清中的硫酸吲哚酚的濃度。此時，作為低聚果糖(FOS)和/或低聚半乳糖(GOS)的總量的濃度，設(shè)定為O. 5 20 (w/v) %，優(yōu)選設(shè)定為O. 5 15 (w/v) %，更優(yōu)選設(shè)定為O. 5 10 (w/v) %。應(yīng)予說明，具體的實驗結(jié)果省略，但作為低聚果糖(FOS)的濃度設(shè)定為O. 5 (w/v)%時,作為糞便中的活菌數(shù)，確認(rèn)到了 B. breve 0LB6129的存活性顯著提高。另外，作為色氨酸的濃度，設(shè)定為I 4 (w/v) %,優(yōu)選設(shè)定為I. 5 3. 5 (w/v) %,更優(yōu)選設(shè)定為2 3 (w/v) %。由此，可以在體內(nèi)挑選和/或評價、或確認(rèn)使血清中的硫酸吲哚酚的產(chǎn)生降低的微生物(乳酸菌、雙歧桿菌等)，特別是雙歧桿菌(雙歧桿菌屬的微生物)。3.使腸內(nèi)腐敗物質(zhì)減少的微生物
作為使腸內(nèi)腐敗物質(zhì)減少的微生物，為了挑選能夠有效減少腐敗物質(zhì)的微生物(菌株)，本申請發(fā)明人以通常在人的活體內(nèi)(腸內(nèi))占優(yōu)勢的乳酸菌、雙歧桿菌、特別是雙歧桿菌為對象進行了研究。并且，作為雙歧桿菌，對于B. breve的32菌株、B. Iongum的92菌株、B. adolescentis的72菌株的總計196菌株實施篩選,在體外進行了評價。作為其結(jié)果，挑選出了 B. breve的6菌株與B. Iongum的3菌株的總計9菌株。進而，為了驗證在活體內(nèi)減少腐敗物質(zhì)的作用、效果，對上述挑選的9菌株實施動物實驗，在體內(nèi)進行了評價。作為其結(jié)果，挑選出了發(fā)揮腸內(nèi)的吲哚的減少效果的菌株。應(yīng)予說明，篩選得到的短雙歧桿菌0LB6129 (B. breve 0LB6129)在2010年5月26日保藏于獨立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所特許生物寄托中心(聯(lián)系地址郵編305-8566日本國茨城縣^ < Hf市東1-1-1 ο < (i'中心中央第6)，本微生物以保藏編號FERM BP-11257 進行保藏。4.含有減少腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的微生物的食品或藥品 4-1.含有減少腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的微生物的食品
本申請發(fā)明的減少腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的微生物(乳酸菌、雙歧桿菌等，優(yōu)選為B. breve0LB6129)可以添加至食品中。即，作為本申請發(fā)明的食品，可舉出添加有減少腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的微生物的任意食品，優(yōu)選可以舉出添加有減少腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的微生物的發(fā)酵乳制品或發(fā)酵乳飲料，進一步優(yōu)選可舉出添加有減少腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的微生物(B. breve 0LB6129)、以及低聚果糖(FOS)和/或低聚半乳糖(GOS)的發(fā)酵乳制品或發(fā)酵乳飲料。應(yīng)予說明，已知 GOS可以與 FOS相同地進行利用(http://www. nyusankin. or. jp/scientific/hosono_3.html)。另外,對于低聚果糖(FOS)和/或低聚半乳糖(GOS)的添加量，以總量的濃度計，可以設(shè)定為O. 5 20 (w/v) %,優(yōu)選設(shè)定為O. 5 15 (w/v) %,更優(yōu)選設(shè)定為O. 5 10 (w/
V) %。另外，含有本申請發(fā)明的減少腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的微生物(乳酸菌、雙歧桿菌等，優(yōu)選為B. breve 0LB6129)的食品可以作為腎臟透析患者用的用于預(yù)防或改善透析合并癥的健康保健食品(功能性食品)適用。 4-2.
含有本申請發(fā)明的減少腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的微生物(乳酸菌、雙歧桿菌等，優(yōu)選為B. breve0LB6129)的藥品可以作為腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的減少劑、或腎臟透析患者用的透析合并癥的預(yù)防劑或改善劑適用。進而，本申請發(fā)明的藥品還可作為腹?jié)q的改善劑適用。本申請發(fā)明的藥品可以制為散劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、溶液劑等適宜的劑型。本申請發(fā)明的藥品中可以含有低聚果糖(FOS)和/或低聚半乳糖(G0S)。應(yīng)予說明，以總量的濃度計，低聚果糖(FOS)和/或低聚半乳糖(GOS)的含量可以設(shè)定為O. 5 20 (w/v)%，優(yōu)選設(shè)定為O. 5 15 (w/v)%,更優(yōu)選設(shè)定為O. 5 10 (w/v)%。制劑化中，可以添加賦形劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑等為了制劑化而常用的輔助劑。作為賦形劑，例如有淀粉、乳糖、白糖、甲基纖維素、羧甲基纖維素、藻酸鈉、磷酸氫鈣、合成硅酸鋁、微晶纖維素、聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)、羥丙基淀粉(HPS)等。另外，作為粘合劑，例如有淀粉、微晶纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)、阿拉伯樹膠粉末、明膠、葡萄糖、白糖等的水溶液、或它們的水乙醇溶液等。并且，作為崩解劑，例如有淀粉、羧甲基纖維素、羧甲基纖維素鈣、微晶纖維素、羥丙基淀粉、磷酸鈣等。進而，作為潤滑劑，例如有巴西棕櫚蠟、輕質(zhì)無水硅酸、合成硅酸鋁、天然硅酸鋁、合成硅酸鎂、氫化油、氫化植物油衍生物(SteiOtex HM)、芝麻油、蜂蠟、氧化鈦、干燥氫氧化鋁凝膠硬脂酸、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、滑石、磷酸氫鈣、和十二烷基硫酸納等。本申請發(fā)明的藥品理想的是口服給予，對于雙歧桿菌，由于安全性得到確定，因而可以給予任意的量，例如，其給予量可以設(shè)為每I天給予雙歧桿菌10億個 5000億個，優(yōu)選為100億個 5000億個。
實施例[參考例I]具有腐敗物質(zhì)的減少作用的微生物的挑選方法“體外試驗”的條件設(shè)
定
首先，對于反應(yīng)溶液的組成，以雙歧桿菌基本不增殖、發(fā)揮吲哚(腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的指標(biāo))的減少效果、并可明確地評價該效果的方式來決定反應(yīng)溶液的組成。本次實驗中使用的反應(yīng)溶液中，例如，將葡萄糖設(shè)定為1.0 (w/v)%時，雙歧桿菌會過量增殖，不能充分再現(xiàn)腸內(nèi)的環(huán)境。即，由于雙歧桿菌等微生物(菌體)在腸內(nèi)基本不增殖，因而為了在接近腸內(nèi)環(huán)境的狀態(tài)下評價雙歧桿菌等實現(xiàn)的腐敗物質(zhì)的減少效果，應(yīng)當(dāng)設(shè)定雙歧桿菌基本不增殖的條件，以再現(xiàn)上述環(huán)境。因此，將葡萄糖設(shè)定為例如O. 7 (w/V) %以下,優(yōu)選設(shè)定為O. 6 (w/v) %以下,更優(yōu)選設(shè)定為O. 55 (w/v) %以下。
另外，對于本次實驗中使用的反應(yīng)溶液，應(yīng)當(dāng)設(shè)定雙歧桿菌基本不增殖而提供腐敗物質(zhì)的減少所需的最低限能量的條件，因而認(rèn)為原來將培養(yǎng)基成分作為底物配合是不合適的。另一方面，對于本次實驗中使用的反應(yīng)溶液，例如，將葡萄糖設(shè)定為O. I (w/v)%時，雙歧桿菌的活動(活性)降低，難以發(fā)揮吲哚的減少效果。這樣，雖然原本雙歧桿菌的每個菌種對吲哚的減少效果等變現(xiàn)出差異，但該差異變得難以體現(xiàn)，難以明確地評價其效果。因此，將葡萄糖設(shè)定為，例如，O. 3 (w/v) %以上，優(yōu)選O. 4 (w/v) %以上，更優(yōu)選O. 45 (w/v)%以上。另外,對于其它成分也相同地決定反應(yīng)溶液的組成。作為反應(yīng)溶液的組成，可以按照苯酚對甲酚吲哚糞臭素各20 yg.Bis-Tris O.1M、硫酸鎂(MgSO4) O. 75mM、葡萄糖0.5 (w/v) %來使用，pH為6. 5左右。[實施例I]具有腐敗物質(zhì)的減少作用的微生物的挑選“體外試驗”
對于B. breve的34菌株、B. Iongum的93菌株、B. adolescentis的72菌株的總計199菌株，進行靜置培養(yǎng)時，B. breve的2菌株、B. Iongum的I菌株中，生長極其遲緩。因此，以上述3菌株作為實驗對象,最終對于B. breve的32菌株、B. Iongum的92菌株、B.adolescentis的72菌株的合計196菌株進行了篩選(評價挑選)。將上述菌株(活菌)各I mg混懸于參考例I中決定的反應(yīng)溶液(pH :6. 5、苯酚對甲酚吲哚糞臭素各20 μ g、Bis-Tris 0. 1M、硫酸鎂(MgSO4) :0. 75mM、葡萄糖0. 5 (w/v)%)2ml中。并且，將該懸濁液(反應(yīng)溶液)在37°C靜置24h進行反應(yīng)后，離心分離，除去雙歧桿菌(菌體)，將其上清的PH調(diào)整至7。接著，將該上清用二乙醚分2次提取，將該提取液補足至5ml后，通過氣象色譜法(GC)對該溶液測定(檢測)吲哚、苯酚、對甲酚、糞臭素的濃度。應(yīng)予說明，氣象色譜法(GC)的分析條件如下所述。即，裝備有火焰離子化探測器的檢測器GC-2014 (Shimadzu),柱(尺寸):TC-I (GL Sciences Inc. ), I. D. =0. 25 mm,L=30 m, dF=0. 25 mm、柱溫60_17(TC (以 5°C /min 升高)，170-250°C (以 2(TC /min升高)、載氣氮、流速71. 3 ml/min、注射器溫度240°C、檢測器溫度250°C、注射體積I μ I。該結(jié)果示于表I (B. breve的32菌株)、表2 (B. Iongum的92菌株)、表3 (B.adolescentis 的 72 菌株)。應(yīng)予說明，整理編號以“JCM”開始的菌株保藏于下述的保藏機構(gòu)。保藏機構(gòu)名獨立行政法人理化學(xué)研究所八4才1J 7 — 7七> 夕一微生物材料開發(fā)室(聯(lián)系地址郵編351-0198日本國埼玉縣和光市広沢2-1、電話號碼048-467-9560)。[表 I]
權(quán)利要求
1.新型雙歧桿菌(短雙歧桿菌)0LB6129(FERM BP-11257)，其使腸內(nèi)腐敗物質(zhì)減少。
2.腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的減少劑，其以權(quán)利要求I所述的雙歧桿菌為有效成分。
3.權(quán)利要求2所述的腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的減少劑，其中，進一步含有低聚果糖(FOS)和/或低聚半乳糖(G0S)。
4.血清中的硫酸吲哚酚的減少劑，其以權(quán)利要求I所述的雙歧桿菌為有效成分。
5.權(quán)利要求4所述的血清中的硫酸吲哚酚的減少劑，其中，進一步含有低聚果糖(FOS)和/或低聚半乳糖(GOS)。
6.具有腸內(nèi)腐敗物質(zhì)的減少作用的食品，其以權(quán)利要求I所述的雙歧桿菌為有效成分。
7.具有硫酸吲哚酚的減少作用的食品，其以權(quán)利要求I所述的雙歧桿菌為有效成分。
8.將權(quán)利要求6或7所述的食品制為發(fā)酵乳制品或發(fā)酵乳飲料的食品。
9.權(quán)利要求6 8中任一項所述的食品，其中，進一步含有低聚果糖(FOS)和/或低聚半乳糖(GOS)。
10.使腸內(nèi)腐敗物質(zhì)減少的微生物的體外篩選方法，其特征在于，向反應(yīng)液添加的葡萄糖的濃度為微生物基本不增殖、并且提供腐敗物質(zhì)的減少所需的最低限的能量。
11.權(quán)利要求10所述的方法，其中，使葡萄糖的濃度為O.3 O. 7 (w/v)%0
12.使腸內(nèi)腐敗物質(zhì)減少的微生物的體內(nèi)篩選方法，其特征在于，將低聚果糖(FOS)和/或低聚半乳糖(G0S)、以及色氨酸(L-色氨酸)添加至飼料中，飼養(yǎng)小鼠，評價血清中的硫酸吲哚酚的濃度。
13.權(quán)利要求12所述的方法，其中，使低聚果糖(FOS)的濃度和/或低聚半乳糖(GOS)的濃度為O. 5 20 (w/v) %,以及使色氨酸的濃度為I 4 (w/v) %。
14.權(quán)利要求10 13中任一項所述的方法，其中，使微生物為乳酸菌和/或雙歧桿菌。
全文摘要
本發(fā)明的第1課題在于有效利用安全性高的有用微生物來有效減少腸內(nèi)腐敗物質(zhì)。本申請發(fā)明人著眼于通常在人的活體內(nèi)(腸內(nèi))占優(yōu)勢的雙歧桿菌而進行篩選，對吲哚的減少作用強、并確認(rèn)到血清中的硫酸吲哚酚的減少作用的菌株進行挑選，從而完成了本申請發(fā)明。
文檔編號A23L1/30GK102959075SQ20118003339
公開日2013年3月6日 申請日期2011年7月5日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月5日
發(fā)明者天藤公子 申請人:株式會社明治