專利名稱：食品化妝品企業(yè)污水中致病菌快檢試劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種食品化妝品企業(yè)污水中致病菌快檢試劑，用于快速檢測(cè)污水中是否有痢疾桿菌、沙門氏桿菌等致病菌存在，鑒別污水是否達(dá)到消毒衛(wèi)生安全，利用培養(yǎng)試驗(yàn)鑒別細(xì)菌的種類和消毒效果。監(jiān)督鑒別診斷的關(guān)鍵在于準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)便。而細(xì)菌接種量大小，會(huì)直接影響檢測(cè)結(jié)果。往往需要將樣本通過不同方法進(jìn)行增菌培養(yǎng)，來進(jìn)行細(xì)菌種類的鑒別，這是目前微生物實(shí)驗(yàn)室最常用的手段。由于目前培養(yǎng)條件的應(yīng)用范圍所限，供污水痢疾桿菌、沙門氏桿菌等致病菌增菌培養(yǎng)的診斷試劑沒有特效的，存在所需接種量大、培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)、易出現(xiàn)假陽性或假陰性等問題。隨著生物研究的進(jìn)展，國(guó)內(nèi)外對(duì)細(xì)菌鑒別的增菌診斷試劑的研究也在不斷的發(fā)展中。生物工作者一直希望能有一種能克服上述不足的快速檢驗(yàn)食品化妝品企業(yè)污水中致病菌快檢試劑，使食品化妝品企業(yè)污水廢水排放達(dá)到國(guó)家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。
背景技術(shù)：
食品化妝品企業(yè)污水的病原微生物主要有:病原性細(xì)菌，腸道病毒、蠕蟲卵和原蟲四類。具體包括沙門氏菌屬、痢疾桿菌、霍亂弧菌、致病性大腸桿菌、傳染性肝炎病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、柯薩基病毒、蛔蟲卵、鉤蟲卵、血吸蟲卵、阿米巴原蟲。我國(guó)大多數(shù)食品化妝品企業(yè)污水中細(xì)菌總數(shù)每毫升達(dá)幾百萬至幾千萬個(gè)，其中大腸菌群數(shù)每毫升污水大多在20萬個(gè)以上，腸道致病菌檢出率達(dá)30% 100%，食品化妝品企業(yè)每天排出成百上千噸廢水，這些廢水如不及時(shí)處理，通過市政污水管道進(jìn)入污水處理廠后，造成處理后水的質(zhì)量下降，影響人民身體健康。而對(duì)于這些最危險(xiǎn)的多種疾病的潛在傳染源，只有通過污水處理，從污水中檢驗(yàn)出，才可被發(fā)現(xiàn)和制止。防治食品化妝品企業(yè)污水廢水污染是廢水防治的首要目標(biāo)。具體而言，就是要使食品化妝品企業(yè)污水廢水排放達(dá)到國(guó)家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。消毒是用來抵抗各種方法處理后殘留細(xì)菌污染物的最后防御手段，氯氧消毒是目前最先進(jìn)的消毒手段。氧系消毒劑具有殺菌快速、徹底、廣譜等特點(diǎn)。氯系消毒劑是最常用的消毒劑，在防止水傳播疾病中起重要作用。氯投加到不含有機(jī)物的純凈水中后，很快就形成冷氯酸，冷氯酸殺滅大腸桿菌只需幾分鐘，但殺滅某些病毒卻要一個(gè)小時(shí)；如水中存在有機(jī)物，氯會(huì)與這些物質(zhì)起反應(yīng)，除非投氯量大，否則水中不會(huì)出現(xiàn)游離氯。消毒劑必須與細(xì)菌有效接觸才能殺滅細(xì)菌，為了保證最佳效果的殺菌，要有一定的接觸時(shí)間，良好的混合是提聞殺菌效率的必要條件之一。氯氧消毒劑兼具各種消毒劑的優(yōu)點(diǎn)，具有互補(bǔ)和協(xié)同作用，其殺菌速度、效率、廣譜性是任何一 種單一型消毒劑所無法比擬的。當(dāng)混合消毒劑投加到水體中后，強(qiáng)氧化性的C102和03最先發(fā)生作用，它們首先和水中的還原性物質(zhì)(有機(jī)物)反應(yīng)，既消除了處理中可能產(chǎn)生的氯代有機(jī)物，又為混合消毒劑高效地發(fā)揮殺菌作用掃除了障礙。接觸反應(yīng)完成以后余氯的存在是影響消毒效果及持續(xù)殺菌能力的主要因素。余氯不足達(dá)不到預(yù)定的消毒目的，余氯量太高，造成消毒劑的浪費(fèi)。消毒效果的鑒定是檢測(cè)消毒后的污水，有無致病性的痢疾桿菌、沙門氏桿菌等致病菌存在，而痢疾桿菌、沙門氏桿菌的診斷往往需要3-4天的培養(yǎng)時(shí)間，給污水處理工作帶來很大不便。本發(fā)明的目的在于提供一種能克服已有鑒別診斷試劑不足的快速檢驗(yàn)食品化妝品企業(yè)污水中致病菌快檢試劑。與其它同類診斷試劑相比具備下列特點(diǎn):所需接種量小，少量細(xì)菌即可迅速繁殖，在通常室溫下或37°C培養(yǎng)5-6小時(shí)即可觀察結(jié)果；不易出現(xiàn)假陽性和假陰性；能破壞標(biāo)本中存在的抑菌物質(zhì)，使細(xì)菌生長(zhǎng)不受抑制。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的要點(diǎn)在于選擇合適的組分，并進(jìn)行合理混配，經(jīng)加溫、溶解、混合、冷卻、分裝、高溫滅菌等工藝而成。本發(fā)明選擇的配方如下(組分及其重量百分比％ ):酵母膏1.0-2.0;甘氨酸1.0-2.0 ;硫代硫酸鈉2.0-3.0 ;胰蛋白胨1.8-2.2 ;枸櫞酸鈉0.4-0.5 ;去氧膽酸鈉
0.04-0.06 ;磷酸二氫鉀0.14-0.16 ;磷酸氫二鉀0.38-0.42 ;氯化鈉0.4-0.5 ;葡萄糖
0.10-0.12 ;甘露醇0.15-0.25 ;小牛血清0.4-0.5 ;蒸餾水加至100ml。本診斷試劑含有枸櫞酸鈉和去氧膽酸鈉，對(duì)革蘭氏陰性菌有抑制作用，大腸桿菌，綠膿桿菌及變形桿菌，在接種6小時(shí)內(nèi)生長(zhǎng)緩慢，而痢疾桿菌可相對(duì)地得到增殖.氯化鈉用于調(diào)整滲透壓；磷酸二氫鉀用于調(diào)節(jié)pH。胰蛋白胨、小牛血清、葡萄糖、甘露醇是診斷試劑中的營(yíng)養(yǎng)和支持成分。甘氨酸、硫代硫酸鈉為中和劑。標(biāo)本接種后即計(jì)算時(shí)間，在通常室溫下或37°C培養(yǎng)，均有增菌作用.增菌培養(yǎng)6小時(shí)后，即用劃線法移種到腸道選擇性診斷試劑上以分離致病菌。本發(fā)明產(chǎn)品的制備方法是:I)、將酵母膏、甘 氨酸、硫代硫酸鈉、胰蛋白胨、枸櫞酸鈉、去氧膽酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、氯化鈉、葡萄糖、甘露醇按比例加入蒸餾水中，再加熱溶解，矯正PH至7.0矯正pH至6.8,用濾紙過濾；2)、壓力蒸汽滅菌0.70kgl5分鐘；3)、無菌條件下，加入無菌小牛血清，分裝安培瓶，每瓶約5ml，存于冰箱中備用。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn):(I)食品化妝品企業(yè)污水中致病菌快檢試劑所需接種量小，培養(yǎng)時(shí)間短，少量細(xì)菌即可迅速繁殖，在通常室溫下或37°C培養(yǎng)5-6小時(shí)即可觀察結(jié)果；(2)不易出現(xiàn)假陽性或假陰性；(3)能破壞標(biāo)本中存在的殘存消毒劑的抑菌作用。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明:按照下表所列數(shù)據(jù)(重量百分比％ )及其所述步驟進(jìn)行配置:
配方一:酵母膏1.0-2.0;甘氨酸1.0-2.0;硫代硫酸鈉2.0-3.0;胰蛋白胨1.8-2.2;枸櫞酸鈉0.4-0.5；去氧膽酸鈉0.04-0.06;磷酸二氫鉀0.14-0.16;磷酸氫二鉀0.38-0.42;氯化鈉0.4-0.5；葡萄糖0.10-0.12；廿露醇0.15-0.25；小牛血清0.4-0.5；蒸餾水加至100ml。
配方二:酵母膏1.0-1.5; H氨酸1.0-1.8;硫代硫酸鈉2.0-2.5;胰蛋白胨1.8-2.0;枸橡酸鈉0.4-0.5；去氧膽酸鈉0.05-0.06；磷酸二氫鉀0.15-0.16；磷酸氫二鉀0.4-0.42；氯化鈉0.4-0.5;葡萄糖0.11-0.12;甘露醇0.2-0.25;小牛血清0.4-0.5;蒸餾水加至100ml。
權(quán)利要求
1.本發(fā)明涉及一種食品化妝品企業(yè)污水中致病菌快檢試劑，其特征在于具有如下的配方(組分及其重量百分比％ ):酵母膏1.0-2.0 ;甘氨酸1.0-2.0 ;硫代硫酸鈉2.0-3.0 ；胰蛋白胨1.8-2.2 ;枸櫞酸鈉0.4-0.5 ;去氧膽酸鈉0.04-0.06 ;磷酸二氫鉀0.14-0.16 ;磷酸氫二鉀0.38-0.42 ;氯化鈉0.4-0.5 ;葡萄糖0.10-0.12 ;甘露醇0.15-0.25 ;小牛血清0.4-0.5 ;蒸懼水加至IOOmlo
2.—種權(quán)利要求1所 述一種食品化妝品企業(yè)污水中致病菌快檢試劑，其特征在于具有如下的制備工藝: 1)、將酵母膏、甘氨酸、硫代硫酸鈉、胰蛋白胨、枸櫞酸鈉、去氧膽酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、氯化鈉、葡萄糖、甘露醇按比例加入蒸餾水中，再加熱溶解，矯正pH至7.0矯正pH至6.8,用濾紙過濾； 2)、壓力蒸汽滅菌0.70kgl5分鐘； 3)、無菌條件下，加入無菌小牛血清，分裝安培瓶，每瓶約5ml，存于冰箱中備用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種食品化妝品企業(yè)污水中致病菌快檢試劑，用于快速檢測(cè)污水中是否有痢疾桿菌、沙門氏桿菌等致病菌存在，鑒別污水是否達(dá)到消毒衛(wèi)生安全，利用培養(yǎng)試驗(yàn)鑒別細(xì)菌的種類和消毒效果。具有以下優(yōu)點(diǎn)(1)食品化妝品企業(yè)污水中致病菌快檢試劑所需接種量小，培養(yǎng)時(shí)間短，少量細(xì)菌即可迅速繁殖，在通常室溫下或37℃培養(yǎng)5-6小時(shí)即可觀察結(jié)果；(2)不易出現(xiàn)假陽性或假陰性；(3)能破壞標(biāo)本中存在的殘存消毒劑的抑菌作用。
文檔編號(hào)C12R1/01GK103194522SQ20121000163
公開日2013年7月10日 申請(qǐng)日期2012年1月5日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月5日
發(fā)明者曲劍英, 王偉棟, 丁宗博 申請(qǐng)人:曲劍英, 王偉棟, 丁宗博