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      花生耐鹽相關(guān)基因Rab7及其在提高耐鹽性中的應(yīng)用的制作方法

      文檔序號(hào):409322閱讀:507來(lái)源:國(guó)知局
      專利名稱:花生耐鹽相關(guān)基因Rab7及其在提高耐鹽性中的應(yīng)用的制作方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及花生耐鹽相關(guān)基因及其在提高耐鹽性中的應(yīng)用。
      背景技術(shù)
      花生是重要的油料作物和經(jīng)濟(jì)作物,在我國(guó)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)乃至整個(gè)國(guó)民經(jīng)濟(jì)中具有重要地位。鹽脅迫抑制了花生的生長(zhǎng),導(dǎo)致植株萎蔫、莢果增大減緩、小果顯著增多、產(chǎn)量降低,同時(shí)使莢果品質(zhì)變劣,商品價(jià)值明顯降低。隨著環(huán)境的不斷惡化,培育具有耐鹽性的作物新品種已成為廣大育種家研究的主要目標(biāo)之一。當(dāng)前發(fā)展迅速的基因工程技術(shù)為植物遺傳改良提供了新的途徑,利用在鹽脅迫應(yīng)答中起重要作用的基因進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化是獲得耐鹽新種質(zhì)的重要手段。因此,發(fā)掘重要的耐鹽基因資源,將為花生的耐鹽遺傳改良奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。Rab蛋白是小GTP結(jié)合蛋白家族最大的亞族,作為囊泡運(yùn)輸?shù)姆肿娱_(kāi)關(guān),它不斷在 GDP和GTP結(jié)合狀態(tài)之間轉(zhuǎn)換,在囊泡的形成、轉(zhuǎn)運(yùn)、粘附和融合過(guò)程中起著重要作用。Rab 蛋白不僅調(diào)節(jié)著激酶的活性,而且進(jìn)一步影響細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化和凋亡,它調(diào)節(jié)著植物的生長(zhǎng)發(fā)育、形態(tài)建成,參與植物對(duì)細(xì)菌病原應(yīng)答中抗菌化合物的極性分泌過(guò)程。當(dāng)植物受外界因子如干旱、鹽堿、病害脅迫時(shí),也有許多Rab蛋白被誘導(dǎo)表達(dá)。在Rab亞家族中,Rab7蛋白主要調(diào)節(jié)早期內(nèi)體-晚期內(nèi)體-溶酶體和液泡的物質(zhì)運(yùn)輸,它能將高鹽離子運(yùn)輸?shù)揭号葜胁⑴懦鲶w外,減少鹽離子對(duì)植物體的損傷,它還能清除逆境脅迫產(chǎn)生的活性氧,保護(hù)和修復(fù)內(nèi)膜系統(tǒng),提高植物的抗逆性。但目前在花生中還未見(jiàn)沿^7基因克隆及其功能研究的報(bào)道。

      發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明提供了花生耐鹽相關(guān)基因及其在耐鹽性中的應(yīng)用,本發(fā)明通過(guò)將基因分別轉(zhuǎn)入花生和大腸桿菌中,可以顯著提高它們的耐鹽性。為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的,本發(fā)明采用下述技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)
      花生耐鹽相關(guān)基因其序列表如SEQ ID No: I所示。所述基因有7個(gè)外顯子,分別對(duì)應(yīng)的堿基為173-225,554-580,743-842, 1611-1757,1860-1940,2099-2244,3167-3249??寺∷龌ㄉ虻囊锩Q與序列如下
      Pl:5- TGCTTTGATTTGAGGAGGAC-3 ;
      P2 5- ATATCTCAGCATTCACAACC -3,
      所述Pl和P2分別與沿^7基因第1-20堿基、第3235-3254堿基對(duì)應(yīng)。本發(fā)明還提供了含有所述的花生耐鹽相關(guān)基因的載體。本發(fā)明還提供了所述的花生耐鹽相關(guān)基因編碼的氨基酸序列如SEQ ID No:2所示,所述氨基酸序列中有GTP結(jié)合結(jié)構(gòu)域/水解結(jié)構(gòu)域。
      本發(fā)明還提供了所述的花生耐鹽相關(guān)基因必沿^7在提高耐鹽性的應(yīng)用,所述花生基因可提聞花生和大腸桿囷的耐鹽性。將花生基因在花生中超量表達(dá),花生轉(zhuǎn)基因幼苗的耐鹽濃度為12%。 NaCl。將花生基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌,表達(dá)產(chǎn)物為23KDa,大腸桿菌的耐鹽濃度為15% NaCl。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和積極效果是
      I、本發(fā)明從花生中克隆了基因(測(cè)序結(jié)果表明該基因有7個(gè)外顯子,分別對(duì)
      應(yīng)的堿基為 173-225,554-580,743-842,1611-1757,1860-1940,2099-2244,3167-3249 ; 氨基酸序列中有GTP結(jié)合結(jié)構(gòu)域/水解結(jié)構(gòu)域,分別對(duì)應(yīng)的氨基酸殘基為15-22,62-66, 124-128,156-160。2、轉(zhuǎn)必沿^7基因花生植株形態(tài)發(fā)育正常,轉(zhuǎn)基因花生苗抗12%。NaCl的脅迫;本發(fā)明將基因在花生過(guò)量表達(dá)可顯著提高其耐鹽性。基因轉(zhuǎn)化大腸桿菌,重組菌可以抗15% NaCl的脅迫。4、轉(zhuǎn)化體系非常有效。在較短的時(shí)間內(nèi)可以獲得大量抗性苗,這是獲得大量轉(zhuǎn)基因苗并從中篩選出耐鹽性明顯提高的轉(zhuǎn)基因植株的重要前提。結(jié)合附圖閱讀本發(fā)明的具體實(shí)施方式
      后,本發(fā)明的其他特點(diǎn)和優(yōu)點(diǎn)將變得更加清



      圖I是本發(fā)明中花生遺傳轉(zhuǎn)化,a:共培養(yǎng)3d的子葉外植體;b:培養(yǎng)2w的子葉外植體;c:添加100 mg /L卡那霉素培養(yǎng)基上篩選的抗性芽(培養(yǎng)4w);d: 150 mg /L卡那霉素培養(yǎng)基上篩選的抗性苗(培養(yǎng)6w)。圖2是本發(fā)明中T1轉(zhuǎn)基因植株葉片經(jīng)200 mM的NaCl處理后的結(jié)果,
      a:未轉(zhuǎn)化植株(WT)和轉(zhuǎn)化植株(T)的葉片經(jīng)水(對(duì)照)處理7d后的結(jié)果;
      b:未轉(zhuǎn)化植株和轉(zhuǎn)化植株的葉片經(jīng)200 mM的NaCl處理7d后的結(jié)果;
      c:未轉(zhuǎn)化植株和轉(zhuǎn)化植株的葉片經(jīng)200 mM的NaCl處理后的葉綠素含量的變化。圖3是本發(fā)明中T1轉(zhuǎn)基因植株經(jīng)12%。的NaCl處理后的結(jié)果,a:處理前;b: 12%。 的NaCl處理7d后。圖4是本發(fā)明中用IPTG誘導(dǎo)AWfeV基因在大腸桿菌中表達(dá),M:蛋白marker ;1: 對(duì)照 BL21(pET28a)誘導(dǎo) 8h ;2-4: BL21 (pET28a-^Ma/ 7)誘導(dǎo) 8h。箭頭指誘導(dǎo)的 AhRab7蛋白。圖5是本發(fā)明中pET28a-AWfe67經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后在鹽溶液的生長(zhǎng)情況,a:對(duì)照 BL21(pET28a)在不同濃度鹽溶液的生長(zhǎng)情況;b: BL21 (pET28a-^M^7)在不同濃度鹽溶液的生長(zhǎng)情況;c: PET28a和pET28a-AWfe67在15%鹽溶液的生長(zhǎng)情況(*Ρ〈(λ 05,** Ρ<0. 01)。
      具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式
      對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明。
      實(shí)施例I :花生沿^7基因及其在提高花生耐鹽性中的應(yīng)用一、實(shí)驗(yàn)材料
      I.基因、菌種與水稻品種
      本發(fā)明克隆了花生沿^7基因沿^7),大腸桿菌0冊(cè)(!由青島農(nóng)業(yè)大學(xué)遺傳研究室實(shí)驗(yàn)室保存、根癌農(nóng)桿菌菌株EHA105 (購(gòu)自北京天恩澤基因科技有限公司),轉(zhuǎn)基因的受體材料為花生品種“徐州68-4”(青島農(nóng)業(yè)大學(xué)遺傳研究室實(shí)驗(yàn)室提供)。2.植物培養(yǎng)基花生轉(zhuǎn)化中采用的培養(yǎng)基有
      基本培養(yǎng)基為MS無(wú)機(jī)鹽+B5有機(jī)成分(簡(jiǎn)稱MSB5),添加3%蔗糖、O. 8%瓊脂,pH=5. 8, 在121°C、105Kpa條件下滅菌20min ;
      SM 誘導(dǎo)培養(yǎng)基MSB5+5 mg/L BAP +1. 5 mg/L 2,4_D ;
      SEM芽伸長(zhǎng)培養(yǎng)基MSB5+5 mg/L BAP。二、實(shí)驗(yàn)方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明包括以下具體實(shí)驗(yàn)步驟
      I、AhRab 7基因植物表達(dá)載體的構(gòu)建
      (I)擴(kuò)增基因
      克隆所述花生基因的引物名稱與序列如下
      Pl (5- TGCTTTGATTTGAGGAGGAC-3) (SEQ ID No:4);
      P2 (5- ATATCTCAGCATTCACAACC -3) (SEQ ID No:5),
      Pl和P2分別與必沿基因第1-20堿基、第3235-3254堿基對(duì)應(yīng)。花生品種“徐州68-4”由青島農(nóng)業(yè)大學(xué)遺傳研究室實(shí)驗(yàn)室提供,通過(guò)RT-PCR擴(kuò)增了 基因的編碼區(qū)(其序列表如SEQ ID No:3所示)。P3 (5-GGTACCCATGCCTTCCAGAAGAAGAAC-3) Qipnl) (SEQ ID No:6);
      P4 (5-GAGCTCATCTCAGCATTCACAACCTGT-3) {Sacl) (SEQ ID No:7);
      上述引物序列分別與基因第1-20堿基、第3235-3254堿基對(duì)應(yīng)。將基因克隆后,測(cè)序結(jié)果表明該基因有7個(gè)外顯子,分別對(duì)應(yīng)的堿基為 173-225,554-580,743-842,1611-1757,1860-1940,2099-2244,3167-3249 ;該基因編碼產(chǎn)生的氨基酸序列中有GTP結(jié)合結(jié)構(gòu)域/水解結(jié)構(gòu)域,分別對(duì)應(yīng)的氨基酸殘基為15-22, 62-66,124-128,156-160。(2) AWfeM基因與克隆載體PUC18及植物表達(dá)載體pBI121的連接
      回收PCR產(chǎn)物,并在T4 DNA連接酶作用下與克隆載體pUC18 (購(gòu)買于TaKaRa)進(jìn)行連接,連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5ci獲得了抗氨芐青霉素的菌落。提取重組質(zhì)粒,用和 feci進(jìn)行雙酶切,回收含基因的酶切片段,并克隆到植物表達(dá)載體pBI121的對(duì)應(yīng)酶切位點(diǎn)中,獲得該基因的植物表達(dá)載體pBI 121-AWfe辦7。3、將表達(dá)載體轉(zhuǎn)化花生,包括以下步驟
      a、農(nóng)桿菌重組菌株的制備、活化及菌液制備將PBI121-AW&67重組質(zhì)粒利用液氮凍融法轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌菌株EHA105感受態(tài)細(xì)胞,篩選出含有重組質(zhì)粒的重組菌株。挑取重組菌株單菌落,接種到Y(jié)EB (利福平50mg/L,卡那霉素50mg/L)液體培養(yǎng)基中,28°C、180rpm培養(yǎng)至0D600=0. 5 O. 8時(shí),取2mL菌液轉(zhuǎn)移到50mL YEB (利福平50mg/L,卡那霉素50mg/L)培養(yǎng)基中,培養(yǎng)到0D600=0. 6 O. 8。將菌液于5000rpm離心15min后,用相同體積的液體MSB5 懸浮備用。b、花生胚小葉外植體的分離選取飽滿的花生種子,在70%酒精中浸泡lmin,O. 1% 升汞浸泡20min,無(wú)菌水沖洗4-6次。去種皮和胚軸,將每片子葉縱向切成2半。C、農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化切好的外植體浸于已備好的農(nóng)桿菌菌液中,28°C、 90rpm溫和震蕩侵染lOmin,用無(wú)菌濾紙將殘留菌液吸干,接入SM誘導(dǎo)培養(yǎng)基上在暗中共培養(yǎng)3d。轉(zhuǎn)移到添加250 mg/L頭孢霉素的SIM誘導(dǎo)培養(yǎng)基,將外植體切口端嵌入培養(yǎng)基, 培養(yǎng)2w左右,誘導(dǎo)叢生芽,培養(yǎng)條件光強(qiáng)為1500-20001x、光照12h、溫度為26°C ±1°C。將形成叢生芽的外植體轉(zhuǎn)移外到250 mg/L頭孢霉素、100 mg/L卡那霉素的SEM培養(yǎng)基上篩選抗性芽,培養(yǎng)2w,培養(yǎng)條件光強(qiáng)為1500-20001x、光照12h、溫度為26°C ±1°C。培養(yǎng)2w后,切下不定芽部分轉(zhuǎn)移到250 mg/L頭孢霉素、150 mg/L卡那霉素的SEM 培養(yǎng)基上,進(jìn)行抗性芽的篩選及誘導(dǎo)芽伸長(zhǎng),培養(yǎng)4w左右,期間繼代培養(yǎng)2-3次(如圖I所示)。4、轉(zhuǎn)基因植株的PCR檢測(cè)
      提取再生植株的基因組DNA,利用上述載體序列和基因序列設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR 擴(kuò)增。PCR 反應(yīng)程序?yàn)?5°C、5min ;95 °C、50s,56 °C、50s,72 °C、I min,30 個(gè)循環(huán);72°C、 IOmin0轉(zhuǎn)基因植株P(guān)CR陽(yáng)性率達(dá)到20. 1%。5、轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性植株的嫁接移栽
      以12-15d苗齡的“花育23”無(wú)菌實(shí)生苗為砧木,切除距子葉節(jié)約2cm以上的主莖部分,用手術(shù)刀將砧木上端垂直劈開(kāi),切口深約0.5-lcm。當(dāng)Ttl代轉(zhuǎn)基因植株幼苗長(zhǎng)到約 2-3cm時(shí),從芽叢基部切下再生小苗做接穗,下端切成長(zhǎng)約0.5-lcm的V形傷口,切口平整。將接穗插入砧木中,使砧木和接穗的形成層緊密接觸,然后用封口膜纏繞接口,松緊適度。將嫁接苗置于MSB5培養(yǎng)基中無(wú)菌培養(yǎng)3-4d ;然后移栽于滅菌的育苗基質(zhì)中(包括蛭石、 草炭土和珍珠巖)進(jìn)行馴化3w,之后移栽到田間。轉(zhuǎn)基因植株在田間生長(zhǎng)情況表現(xiàn)正常。6、T1代轉(zhuǎn)基因植株耐鹽性篩選
      取T1代種子,進(jìn)行催芽壯苗處理獲得T1代幼苗。處理方法是先在37°C條件下催芽 3d ;出完芽后進(jìn)行壯苗,在24°C,14h光照/ IOh黑暗的條件下培養(yǎng)15d。取T1代幼苗葉片, 浸在200mM的NaCl溶液中處理lw,以未轉(zhuǎn)基因的徐州68_4幼苗葉片為對(duì)照。對(duì)照葉片萎蔫變黃,葉綠素含量下降明顯;部分轉(zhuǎn)基因植株葉片較綠,葉綠素含量變化不大(如圖2所示)。為進(jìn)一步分析轉(zhuǎn)基因植株的耐鹽性,將得到的T1代幼苗先用3-5%。的NaCl溶液處理,逐漸提高NaCl溶液濃度,最后用12%。的NaCl溶液處理,進(jìn)行耐鹽性篩選時(shí)以未轉(zhuǎn)基因的徐州68-4為對(duì)照。有3個(gè)獨(dú)立來(lái)源的轉(zhuǎn)植株幼苗在12%。的NaCl溶液處理下生長(zhǎng)基本正常,而對(duì)照植株萎蔫(如圖3所示),所以這3個(gè)轉(zhuǎn)基因植株的抗鹽濃度為12%。或以上。實(shí)施例2、花生沿^7基因在提高大腸桿菌耐鹽性中的應(yīng)用一、實(shí)驗(yàn)材料
      I、菌種與水稻品種
      大腸桿菌BL21、大腸桿菌菌株pET-28a由青島農(nóng)業(yè)大學(xué)遺傳研究室實(shí)驗(yàn)室保存。2、植物培養(yǎng)基采用的培養(yǎng)基為L(zhǎng)B培養(yǎng)基。二、實(shí)驗(yàn)方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明包括以下具體實(shí)驗(yàn)步驟
      I、AhRab 7基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建
      以攜帶AWfeA7基因的pUC18重組的質(zhì)粒為模板,通過(guò)PCR擴(kuò)增AhRab7基因,所用引物

      P5 (5-CATATGATGCCTTCCAGAAGAAGAAC-3) (JVde I ) (SEQ ID No:8);
      P6 (5-AAGCTTTCATCTCAGCATTCACAACCTGT-3) Qlind III) (SEQ ID No:9);
      回收PCR產(chǎn)物,并在T4 DNA連接酶作用下與克隆載體pUC18進(jìn)行連接,連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5ci獲得了抗氨芐青霉素的菌落。提取重組質(zhì)粒,用I和//i/7dIII進(jìn)行雙酶切,回收含AWfeM基因的酶切片段,并克隆到原核表達(dá)載體pET-28a的對(duì)應(yīng)位點(diǎn)中,獲得該基因的原核表達(dá)載體pET-28a- AARab7ο2、AWfeV基因在大腸桿菌中的誘導(dǎo)表達(dá)
      挑取攜帶pET-28a-AWfe67的單菌落接種于含lOOPg/mL卡那霉素的液體LB培養(yǎng)基中, 37°C搖床250rpm培養(yǎng)16h,按I 30的比例轉(zhuǎn)接過(guò)夜菌液(約340μ )轉(zhuǎn)到IOmL含100μδ/ mL卡那霉素的液體LB培養(yǎng)基中,37°C搖床250rpm活化2_3h。當(dāng)菌液0D600達(dá)到O. 6-0. 8 時(shí),加入IOOmM IPTG使終濃度達(dá)ImM,于37°C搖床250rpm誘導(dǎo)培養(yǎng)8h。含pET_28a的大腸桿菌BL21在IPTG誘導(dǎo)8h后的產(chǎn)物作為對(duì)照。取誘導(dǎo)后的菌夜I. 5mL, 12000rpm離心 2min,棄上清加入60μ 磷酸緩沖液以充分懸浮菌體,加入等體積的上樣緩沖液混勻,室溫放置5min,100 °C煮沸5min后冷卻至室溫,12000rpm離心2min,取分離物在5%的濃縮膠、 12%的分離膠上進(jìn)行SDS-PAGE分析。pET-28a-AWfe67重組菌經(jīng)誘導(dǎo)后,得到了大小約為 23KDa的特異條帶產(chǎn)物,而對(duì)照pET-28a經(jīng)誘導(dǎo)后沒(méi)有這條條帶(如圖4所示)。3、pET-28a-^M^7重組菌的耐鹽性測(cè)定
      按I :100取經(jīng)IPTG誘導(dǎo)的重組菌和對(duì)照菌株,將其分別置于IOmL含0、1. 5%、3. 5%、 5. 5%、7· 5%、10· 0%、12· 5%和15. 0% NaCl的液體LB中(含lOOPg/mL卡那霉素),分別取培養(yǎng) 0h、lh、2h、3h、4h、5h的培養(yǎng)物于600nm測(cè)其吸光度,重復(fù)3次,根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果繪制其生長(zhǎng)曲線,實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。pET-28a-AWfe67重組菌在15% NaCl溶液中還能生長(zhǎng),而對(duì)照菌的生長(zhǎng)受到嚴(yán)重抑制(如圖5所示)。以上實(shí)施例僅用以說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案,而非對(duì)其進(jìn)行限制;盡管參照前述實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說(shuō)明,對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō),依然可以對(duì)前述實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改,或者對(duì)其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換;而這些修改或替換,并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離本發(fā)明所要求保護(hù)的技術(shù)方案的精神和范圍。
      權(quán)利要求
      1.花生耐鹽相關(guān)基因沿^7,其序列表如SEQID No: I所示。
      2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的花生耐鹽相關(guān)基因沿^7,其特征在于所述沿^7基因有7個(gè)外顯子,分別對(duì)應(yīng)的堿基為 173-225,554-580,743-842,1611-1757,1860-1940,2099-2244, 3167-3249。
      3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的花生耐鹽相關(guān)基因沿^7,其特征在于克隆所述花生基因的引物名稱與序列如下Pl:5- TGCTTTGATTTGAGGAGGAC-3 ;P2 :5- ATATCTCAGCATTCACAACC -3,所述Pl和P2分別與沿^7基因第1-20堿基、第3235-3254堿基對(duì)應(yīng)。
      4.含有權(quán)利要求I所述的花生耐鹽相關(guān)基因沿^7的載體。
      5.權(quán)利要求I所述的花生耐鹽相關(guān)基因沿^7編碼產(chǎn)生的氨基酸序列如SEQID No:2 所示,所述氨基酸序列中有GTP結(jié)合結(jié)構(gòu)域/水解結(jié)構(gòu)域。
      6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的花生耐鹽相關(guān)基因沿^7在提高耐鹽性中的應(yīng)用。
      7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的花生耐鹽相關(guān)基因在提高耐鹽性中的應(yīng)用,其特征在于所述花生基因可提聞花生和大腸桿囷的耐鹽性。
      8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的花生耐鹽相關(guān)基因在提高耐鹽性中的應(yīng)用,其特征在于將花生沿^7基因在花生中超量表達(dá),花生轉(zhuǎn)基因幼苗的耐鹽濃度為12%。NaCl。
      9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的花生耐鹽相關(guān)基因在提高耐鹽性中的應(yīng)用,其特征在于將花生沿^7基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌,表達(dá)產(chǎn)物為23KDa,大腸桿菌的耐鹽濃度為15% NaCl。
      全文摘要
      本發(fā)明提供了一種花生耐鹽相關(guān)基因Rab7(AhRab7)及其編碼產(chǎn)生的Rab7(RabG3f)蛋白,該蛋白與擬南芥中AtRabG3f氨基酸序列相似性為92%。將該基因在花生中超量表達(dá)后,得到耐鹽能力顯著提高的轉(zhuǎn)基因植株。此基因在大腸桿菌中表達(dá)后,重組菌耐鹽能力顯著增強(qiáng)。將本發(fā)明的AhRab7基因超量表達(dá)可顯著提高花生和大腸桿菌對(duì)高鹽脅迫的耐受性,且對(duì)花生的正常生長(zhǎng)和經(jīng)濟(jì)性狀沒(méi)有明顯的影響。本發(fā)明的蛋白及其編碼基因?qū)τ谥参锬望}機(jī)制的研究,以及提高植物的耐鹽性和相關(guān)性狀的改良具有重要的理論及實(shí)際意義,將在植物的耐鹽基因工程改良中發(fā)揮重要作用,應(yīng)用前景廣闊。
      文檔編號(hào)C12N1/21GK102604967SQ201210083410
      公開(kāi)日2012年7月25日 申請(qǐng)日期2012年3月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月27日
      發(fā)明者喬利仙, 李 瑞, 王晶珊, 鄭春花, 郭寶太, 隋炯明 申請(qǐng)人:青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
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