專利名稱：一種低聚糖和大豆肽乳酸菌保健飲料及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種低聚糖和大豆肽乳酸菌保健飲料及其制備方法。
背景技術(shù)：
對人體健康有益的叫益生菌，以乳酸菌、雙歧桿菌等為代表，對人體健康有害的叫有害菌，以大腸桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭狀芽胞桿菌等為代表。益生菌是一個龐大的菌群，有害菌也是一個不小的菌群，當益生菌占優(yōu)勢時(占總數(shù)的80%以上)，人體則保持健康狀態(tài)，否則處于亞健康或非健康狀態(tài)。長期科學研究結(jié)果表明，以乳酸菌為代表的益生菌是人體必不可少的且具有重要生理功能的有益菌，它們數(shù)量的多和少，直接影響到人的健康與否，直接影響到人的壽命長短，科學家長期研究的結(jié)果證明，研究表明乳酸菌能夠促進蛋白質(zhì)、單糖及鈣、鎂等營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，產(chǎn)生維生素B族維生素等大量有益物質(zhì)，使腸道菌群的構(gòu)成發(fā)生有益變化，改善人體胃腸道功能，恢復人體腸道內(nèi)菌群平衡，形成抗菌生物屏障，維護人體健康，抑制腐敗菌的繁殖，消解腐敗菌產(chǎn)生的毒素，清除腸道垃圾并且能夠抑制膽固醇吸收，起到降血脂、降血壓作用。另外乳酸菌還有免疫調(diào)節(jié)作用，能夠增強人體免疫力和抵抗力，抗腫瘤、預防癌癥作用以及控制人體內(nèi)毒素水平，保護肝臟并增強肝臟的解毒、排毒的功能。雙歧桿菌是定居于腸道的有益細菌，通過抑制病原菌和腐敗菌的生長來維持人體微生態(tài)和腸管的平衡狀態(tài)。正常情況下，雙岐菌進入人胃里面幾乎全部都被胃酸殺死，而雙歧因子低聚木糖是聚合糖類中增殖雙歧桿菌功能最強的品種之一，它的功效性是其他聚合糖類的近20倍，人體胃腸道內(nèi)沒有水解低聚木糖的酶，所以其可直接進入大腸內(nèi)優(yōu)先為雙歧桿菌所利用，促進雙歧桿菌增殖同時產(chǎn)生多種有機酸。降低腸道PH值，抑制有害菌生長， 使益生菌在腸道大量增殖，達到保健功效。血清白蛋白(又名卵蛋白酶解物)是人體血漿中的一種功能大分子蛋白質(zhì)，是維持血漿滲透壓、增加血容量，提供平衡氨基酸的重要成分，是人體不可或缺的營養(yǎng)物質(zhì)。大豆低聚肽和人血清白蛋白的氨基酸組成比例非常相似，具有人體必需的9種氨基酸，分子量極小，是目前最優(yōu)秀的蛋白質(zhì)，可代替白蛋白進行一系列的生理活動。作為功能性活性肽大豆低聚肽與其他多肽類物質(zhì)一樣具有相應的物理化學特點，如低粘度、溶解性好、活性高等。除此之外還具有以下一些特征I、優(yōu)于人血漿白蛋白和胎盤白蛋白制劑，大豆低聚肽可避免污染，口服方便。2、易消化、易吸收3、低抗原性經(jīng)證明，大豆低聚肽在體內(nèi)產(chǎn)生生物學效應時，并不會引起身體的過敏反應，對對于嬰幼兒、中老年人、孕婦、病后恢復及腸胃功能障礙患者具有顯著的應用價值。大豆低聚肽的作用表現(xiàn)在(I)對肝臟具有恢復作用(2) 營養(yǎng)調(diào)節(jié)作用大豆低聚肽有人體所需的20種氨基酸包括非必需氨基酸，可補充機體所需要的各種氨基酸(3)調(diào)節(jié)免疫大豆低聚肽可促進免疫組織的功能恢復，恢復胸腺、脾、淋巴等功能，提高集體抗病能力(4)促進食物中的核酸的吸收?，F(xiàn)有技術(shù)中，缺少一種 含有低聚糖和乳酸菌等的保健飲料。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種低聚糖和大豆肽乳酸菌保健飲料及其制備方法。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案一種低聚糖和大豆肽乳酸菌保健飲料，所說的低聚糖和大豆肽乳酸菌保健飲料是按以下方法制成的(I)種子液的制備將鼠李糖乳桿菌、干酪乳桿菌、嗜酸乳桿菌、嗜熱鏈球菌分別接種于種子培養(yǎng)基中，37°C培養(yǎng)12h-16h即作為種子液；(2)發(fā)酵培養(yǎng)基的配 置分別稱取下列重量份的鹿糖I份、大豆低聚肽1-2份、 木糖醇2. 5-3. 5份、低聚異麥芽糖2-3份和低聚木糖2份，分別加入水中溶解，最后水補至 100份，然后加入O. 2份的穩(wěn)定劑，邊加入邊充分攪拌使其溶解，pH調(diào)至6. 2-6. 5，115°C滅菌 25min ；(3)將種子液按接種量為鼠李糖乳桿菌干酪乳桿菌嗜酸乳桿菌嗜熱鏈球菌 = 1:1:1: (1.5-2. O)接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，總接種量為2-3%，37°C靜置培養(yǎng)24-28小時；(4)將發(fā)酵后的口服液，放入4°C冷庫中靜置8-12小時，然后進行均質(zhì)(60mpa的高壓均質(zhì)機)處理，灌裝即得。優(yōu)選的，步驟⑵中配比為鹿糖I份、大豆低聚肽2份、木糖醇3份、低聚異麥芽糖2份和低聚木糖2份。所述穩(wěn)定劑為O. 05份CMC和O. 15份黃原膠。所述種子培養(yǎng)基為液體MRS培養(yǎng)基。所述種子培養(yǎng)基的配置分別稱取牛肉膏10g，蛋白胨10g，酵母膏5g，葡萄糖20g， 乙酸鈉5g，檸檬酸二銨2g，吐溫80 O. lg，硫酸鎂O. 58g，硫酸錳O. 28g，加如蒸餾水中并加熱溶解，用蒸餾水補至IOOOml調(diào)節(jié)pH值6. 0-6. 5，用高壓鍋在121°C滅菌20min。該保健飲料的酸度為85T-95T。一種低聚糖和大豆肽乳酸菌保健飲料的制備方法，其步驟如下(I)種子液的制備將鼠李糖乳桿菌、干酪乳桿菌、嗜酸乳桿菌、嗜熱鏈球菌分別接種于種子培養(yǎng)基中，37°C培養(yǎng)12h-16h即作為種子液；(2)發(fā)酵培養(yǎng)基的配置分別稱取下列重量份的鹿糖I份、大豆低聚肽1-2份、 木糖醇2. 5-3. 5份、低聚異麥芽糖2-3份和低聚木糖2份，分別加入水中溶解，最后水補至 100份，然后加入O. 2份的穩(wěn)定劑，邊加入邊充分攪拌使其溶解，pH調(diào)至6. 2-6. 5，115°C滅菌 25min ；(3)將種子液按接種量為鼠李糖乳桿菌干酪乳桿菌嗜酸乳桿菌嗜熱鏈球菌 = 1:1:1: (1.5-2. O)接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，總接種量為2-3%，37°C靜置培養(yǎng)24-28小時；(4)將發(fā)酵后的口服液，放入4°C冷庫中靜置8-12小時，然后進行均質(zhì)(60mpa的高壓均質(zhì)機)處理，灌裝即得。
優(yōu)選的，步驟⑵中配比為鹿糖I份、大豆低聚肽2份、木糖醇3份、低聚異麥芽糖2份和低聚木糖2份。
所述穩(wěn)定劑為O. 05份CMC和O. 15份黃原膠。所述種子培養(yǎng)基為液體MRS培養(yǎng)基。所述種子培養(yǎng)基的配置分別稱取牛肉膏10g，蛋白胨10g，酵母膏5g，葡萄糖20g， 乙酸鈉5g，檸檬酸二銨2g，吐溫80 O. lg，硫酸鎂O. 58g，硫酸錳O. 28g，加如蒸餾水中并加熱溶解，用蒸餾水補至IOOOml調(diào)節(jié)pH值6. 0-6. 5，用高壓鍋在121°C滅菌20min。本發(fā)明的有益效果是，本實驗研究出來的口服液既具有低聚木糖、低聚異麥芽糖等雙歧因子(促進體內(nèi)雙歧桿菌的生長，改善腸道)，又含有大量的乳酸菌等有益菌，能夠補充體內(nèi)有益菌，促進體內(nèi)有益菌的繁殖，維持身體健康。大豆低聚肽具有營養(yǎng)全、易消化的特點，對于腸道改善和免疫力的提高也具有很大的作用，另外乳酸菌在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的乳酸，一些酯類、氨基酸以及將多肽部分分解為游離的氨基酸，不僅改善了口味，而進一步提高飲料品質(zhì)，而且使這些有益成分更容易被人體吸收。因此本產(chǎn)品老少皆宜，尤其對于腸胃功能障礙患者及免疫力低下人群有很大改善作用。


圖I是四種菌在單獨在發(fā)酵培養(yǎng)基的生長狀況；圖2是不同接種量菌體生長狀況；圖3是不同接種量飲料的感官評分；圖4是不同培養(yǎng)時間的感官評分和酸度；圖5是不同冷藏時間的評分。
具體實施例方式下面通過具體實例對本發(fā)明進行進一步的闡述，應該說明的是，下述說明僅是為了解釋本發(fā)明，并不對其內(nèi)容進行限定。實施例I材料和方法I. I主要材料與試劑
鼠李糖乳桿菌中科院微生物所
干酪乳桿菌山東大學菌種室提供
嗜酸乳桿菌山東大學菌種室提供
嗜熱鏈球菌山東大學菌種室提供
大豆多肽中食都慶山東生物技術(shù)有限公司
低聚異麥芽糖山東禹城保齡寶公司
低聚木糖山東禹城龍力公司
木糖醇山東禹城龍力公司
MRS培養(yǎng)基實驗室自己配置
I. 2主要實驗儀器
超凈臺氨基酸 分析儀恒溫培養(yǎng)箱滅菌鍋滴定管HPLC分析天平2制備方法一種低聚糖和大豆肽乳酸菌保健飲料，所說的低聚糖和大豆肽乳酸菌保健飲料是按以下方法制成的。(I)種子培養(yǎng)基的配置分別稱取牛肉膏10g，蛋白胨10g，酵母膏5g，葡萄糖20g， 乙酸鈉5g，檸檬酸二銨2g，吐溫80 O. lg，硫酸鎂O. 58g，硫酸錳O. 28g，加如蒸餾水中并加熱溶解，用蒸餾水補至IOOOml調(diào)節(jié)pH值6. 5左右，用高壓鍋在121°C滅菌20min。(2)種子液的制備取新鮮的厭氧罐培養(yǎng)的含菌的斜面(鼠李糖乳桿菌，干酪乳桿菌，嗜酸乳桿菌，嗜熱鏈球菌)，輕輕挑取幾環(huán)分別接種于液體MRS培養(yǎng)基中，37°C培養(yǎng)12h 即可作為種子液。(3)發(fā)酵培養(yǎng)基的配置分別稱取大豆低聚肽20g，低聚木糖20g，低聚異麥芽糖 20g,木糖醇30g,鹿糖IOg,分別加入水中溶解,最后水補至1000ml,然后分別加入O. 5gCMC 和I. 5g黃原膠，邊加入邊充分攪拌使其溶解，pH調(diào)至6. 5左右，115°C滅菌25min。(4)將種子液(總接種量為2% )鼠李糖乳桿菌干酪乳桿菌嗜酸乳桿菌嗜熱鏈球菌(I : I : I : 1.5)接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，37°C靜置培養(yǎng)24小時。(5) a、取一 5ml的發(fā)酵液加入含45ml無菌水的三角瓶中(含玻璃珠)，振蕩半個小時，然后進行梯度稀釋，涂布于MRS固體培養(yǎng)基中，37°C厭氧罐中培養(yǎng)12-16小時，測定發(fā)酵液活菌數(shù)。b、取5ml發(fā)酵液于IOOml三角瓶中，加入20ml水并加幾滴酚酞，用O. Imol的標準氫氧化鈉溶液滴定，測定其酸度指標。(6)將發(fā)酵后的口服液，放入4°C冷庫中靜置8小時，然后進行均質(zhì)(60mpa的高壓均質(zhì)機)處理。(7)灌裝，采用120ml瓶子，每瓶灌裝100ml。3、結(jié)果與討論3. I接種量的確定3. I. I單個培養(yǎng)四種菌的生長狀況分別取干酪乳桿菌、嗜酸乳桿菌、鼠李糖乳桿菌、嗜熱鏈球菌4種單個菌種的種子液分別接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，觀察各種菌的生長情況。由圖I可見干酪、嗜酸乳桿菌以及鼠李糖乳桿菌生長較快生長期幾乎同步，而嗜熱鏈球菌生長較慢，因此可考慮加大嗜熱鏈球菌的接種量。由圖中可以看出，可以實現(xiàn)發(fā)明目的的方案配比范圍為為干酪乳桿菌嗜酸乳桿菌鼠李糖乳桿菌嗜熱鏈球菌= 1:1:1: (I. 5-2. O)的進行發(fā)酵。優(yōu)選方案為I : I : I : 1.5。3. I. 2不同接種量對于飲料品質(zhì)的影響然后根據(jù)各種菌的生長情況，采用不同的總接種量接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中進行發(fā)酵培養(yǎng)，采用平板菌落計數(shù)方法和分光光度測定各種菌的生長情況。按照干酪乳桿菌嗜酸乳桿菌鼠李糖乳桿菌嗜熱鏈球菌=I I I 1.5 進行發(fā)酵，接種量分別為和5%，觀察不同接種量對于飲料品質(zhì)的影響。如圖2和圖3，在2-4%接種量的情況下，菌體重量變化不大。1%菌體總量較少， 且飲料總體偏甜，糖并沒有利用完全且產(chǎn)酸量小。3%接種量情況下菌體生長較快16小時即達到最大生長量，4%接種量12-14h達到最大生長量，但是由于菌體生長較快，培養(yǎng)基色澤欠佳，口感偏酸且有澀味，2%接種量情況下菌體生長較快，色澤比較好，口感較好，因此選用2% -3%作為接種量，最優(yōu)接種量為2%。3. 2不同培養(yǎng)時間的影響將種子液接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，分別培養(yǎng)12h、18h、24h、28h、30h、36h，分別測定其
酸度等以及口感、感官等參數(shù)。由圖4可以看出培養(yǎng)時間較短飲料酸度低，偏甜，培養(yǎng)時間長飲料酸度高、澀味濃，口感不好，培養(yǎng)24h和28小時感官評分和酸度都較接近且比較高，因此發(fā)酵時間為 24-28小時,最優(yōu)發(fā)酵時間為24小時。3. 3不同冷藏時間的影響分別將飲料成品在4°C冷藏0h、8h、16h、24h、36h、48h、96h，研究不同冷藏時間對
飲料品質(zhì)的影響。由圖5可以看出，冷藏時間對于感官的影響不大，剛開始感官上升，可能為冷藏后飲料中有機酸、醇類以及各種氨基酸等相互作用使其口感更好。3. 4飲料中游離氨基酸的測定分別取飲料成品5ml,5000rpm離心IOmin,利用氨基酸分析儀,分析測定飲料中各
種游離氨基酸的量。表I發(fā)酵前后17種游離氨基酸對比(mg/100ml)
權(quán)利要求
1.一種低聚糖和大豆肽乳酸菌保健飲料，所說的低聚糖和大豆肽乳酸菌保健飲料是按以下方法制成的(1)種子液的制備將鼠李糖乳桿菌、干酪乳桿菌、嗜酸乳桿菌、嗜熱鏈球菌分別接種于種子培養(yǎng)基中，37°c培養(yǎng)12h-16h即作為種子液；(2)發(fā)酵培養(yǎng)基的配置分別稱取下列重量份的蔗糖I份、大豆低聚肽1-2份、木糖醇2. 5-3. 5份、低聚異麥芽糖2-3份和低聚木糖2份，分別加入水中溶解，最后水補至100 份，然后加入O. 2份的穩(wěn)定劑，邊加入邊充分攪拌使其溶解，pH調(diào)至6. 2-6. 5，115°C滅菌 25min ；(3)將種子液按接種量為鼠李糖乳桿菌干酪乳桿菌嗜酸乳桿菌嗜熱鏈球菌 =1:1:1: (I. 5-2. O)接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，總接種量為2-3%，37°C靜置培養(yǎng)24-28小時；(4)將發(fā)酵后的口服液，放入4°C冷庫中靜置8-12小時，然后進行均質(zhì)處理，灌裝即得。
2.如權(quán)利要求I所述的低聚糖和大豆肽乳酸菌保健飲料，其特征是，步驟(2)中配比為蔗糖I份、大豆低聚肽2份、木糖醇3份、低聚異麥芽糖2份和低聚木糖2份。
3.如權(quán)利要求I所述的低聚糖和大豆肽乳酸菌保健飲料，其特征是，所述穩(wěn)定劑為O.05份CMC和O. 15份黃原膠。
4.如權(quán)利要求I所述的低聚糖和大豆肽乳酸菌保健飲料，其特征是，所述種子培養(yǎng)基為液體MRS培養(yǎng)基。
5.如權(quán)利要求I所述的低聚糖和大豆肽乳酸菌保健飲料，其特征是，所述種子培養(yǎng)基的配置分別稱取牛肉膏10g，蛋白胨10 g，酵母膏5 g，葡萄糖20 g，乙酸鈉5g，檸檬酸二銨2g，吐溫80 O. Ig,硫酸鎂O. 58g，硫酸錳0.28 g，加如蒸餾水中并加熱溶解，用蒸餾水補至IOOOml調(diào)節(jié)pH值6. 0-6. 5，用高壓鍋在121°C滅菌20min。
6.如權(quán)利要求I所述的低聚糖和大豆肽乳酸菌保健飲料，其特征是，該保健飲料的酸度為 85T — 95T。
7.一種低聚糖和大豆肽乳酸菌保健飲料的制備方法，其步驟如下(1)種子液的制備將鼠李糖乳桿菌、干酪乳桿菌、嗜酸乳桿菌、嗜熱鏈球菌分別接種于種子培養(yǎng)基中，37°C培養(yǎng)12h-16h即作為種子液；(2)發(fā)酵培養(yǎng)基的配置分別稱取下列重量份的蔗糖I份、大豆低聚肽1-2份、木糖醇2. 5-3. 5份、低聚異麥芽糖2-3份和低聚木糖2份，分別加入水中溶解，最后水補至100 份，然后加入O. 2份的穩(wěn)定劑，邊加入邊充分攪拌使其溶解，pH調(diào)至6. 2-6. 5，115°C滅菌 25min ；(3)將種子液按接種量為鼠李糖乳桿菌干酪乳桿菌嗜酸乳桿菌嗜熱鏈球菌 =1:1:1: (I. 5-2. O)接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，總接種量為2-3%，37°C靜置培養(yǎng)24-28小時；(4)將發(fā)酵后的口服液，放入4°C冷庫中靜置8-12小時，然后進行均質(zhì)處理，灌裝即得。
8.如權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征是，步驟(2)中配比為蔗糖I份、大豆低聚肽 2份、木糖醇3份、低聚異麥芽糖2份和低聚木糖2份。
9.如權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征是，所述種子培養(yǎng)基為液體MRS培養(yǎng)基。
10.如權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征是，所述穩(wěn)定劑為O.05份CMC和O. 15份黃原膠。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種低聚糖和大豆肽乳酸菌保健飲料及其制備方法，所說的保健飲料是按以下方法制成的(1)種子液的制備將鼠李糖乳桿菌、干酪乳桿菌、嗜酸乳桿菌、嗜熱鏈球菌培養(yǎng)作為種子液；(2)發(fā)酵培養(yǎng)基的配置稱取蔗糖、大豆低聚肽、木糖醇、低聚異麥芽糖和低聚木糖，加入水中溶解，然后加入穩(wěn)定劑，溶解后pH調(diào)至6.2-6.5，滅菌；(3)將種子液接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，靜置培養(yǎng)24-28小時；(4)將發(fā)酵后的口服液，放入4℃冷庫中靜置8-12小時，然后進行均質(zhì)處理，灌裝即得。本發(fā)明的口服液既具有低聚木糖、低聚異麥芽糖等雙歧因子，又含有大量的乳酸菌等有益菌，能夠促進體內(nèi)有益菌的繁殖，維持身體健康，且對腸道改善和免疫力的提高具有很大的作用。
文檔編號A23L1/29GK102613654SQ201210128418
公開日2012年8月1日 申請日期2012年4月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月27日
發(fā)明者劉博 , 張海林, 張長鎧, 李德舜 申請人:山東大學