專利名稱:一種用于結(jié)核桿菌目視檢測(cè)引物組及其試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及ー種生物檢測(cè)試劑的研發(fā),更具體涉及ー種用于結(jié)核桿菌目視檢測(cè)引物組及其試劑盒,屬于分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。。
背景技術(shù):
結(jié)核病(Tuberculosis,TB)是由結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)引起的ー種慢性人畜共患病,能夠感染人和多種哺乳動(dòng)物以及禽類。其中導(dǎo)致人類感染的結(jié)核菌大多數(shù)是人結(jié)核分枝桿菌,也有10%以上是由牛分枝桿菌引起的。各個(gè)器官都可被侵犯,但以肺器官被侵染為多見(jiàn)。其病理特征是在多種組織器官中形成肉芽腫和干酪樣、鈣化結(jié)節(jié)病變。
據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)報(bào)告,目前全球已有20億人感染結(jié)核菌,現(xiàn)有活動(dòng)性肺結(jié)核患者約2000萬(wàn),毎年新發(fā)病800-1000萬(wàn),每年約有300萬(wàn)人死于結(jié)核病,毎年死于結(jié)核病的成年人多于艾滋病,瘧疾和熱帶病死亡人數(shù)的總和。據(jù)WHO估算,到2005年全球結(jié)核病新病例將達(dá)1020萬(wàn)例。全球90%的結(jié)核病在發(fā)展中國(guó)家,中國(guó)結(jié)核病患者數(shù)居世界第ニ,僅次于印度。結(jié)核桿菌不僅感染人,也感染許多動(dòng)物(見(jiàn)表I)尤其是奶牛。這對(duì)以奶牛業(yè)為主的發(fā)達(dá)國(guó)家造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。盡管ー些國(guó)家已有效地控制或消滅了此病,但在有些國(guó)家和地區(qū)仍呈地區(qū)性散發(fā)和流行。我國(guó)結(jié)核病疫情嚴(yán)重,且分布較廣。表I各種不同結(jié)核桿菌對(duì)人和動(dòng)物的致病性
權(quán)利要求
1.用于結(jié)核桿菌目視檢測(cè)引物組,引物針對(duì)結(jié)核分支桿菌的FadB4基因設(shè)計(jì),共包括4條,引物序列如下 引物名稱引物序列(5’-3 )F3TTCCCGGACGCACTGCB3GCTCGGGCGACAATACCGFIPTCGAACCACTCCGGCGATCTC-TAACCCGTGGCCGTTACCBIPCCGGATAACAGCCAAGTGCGT-CGACTTCGGCCATGCC
2.包含權(quán)利要求I所述的用于結(jié)核桿菌目視檢測(cè)引物組的試劑盒,所述試劑盒中任選包括,dNTPs, Bst DNA 聚合酶,SYBR Green I 染料。
3.權(quán)利要求2所述的試劑盒在PCR擴(kuò)增中的應(yīng)用。
4.權(quán)利要求2所述的試劑盒在檢測(cè)人結(jié)核分枝桿菌標(biāo)準(zhǔn)株H37Rv、弱毒株H37Ra、卡介苗BCG、牛分枝桿菌、龜分枝桿菌、禽分枝桿菌基因組以及大腸桿菌、蠟樣芽孢桿菌、綠膿桿菌、變形桿菌、金黃色葡萄球菌、棒狀桿菌、李氏桿菌和/或布魯氏菌S19中的應(yīng)用。
5.權(quán)利要求2所述的試劑盒在食品檢測(cè)中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種用于結(jié)核桿菌目視檢測(cè)引物組及其試劑盒,本發(fā)明的結(jié)核桿菌引物組及其試劑盒可直接目視檢測(cè)結(jié)核桿菌基因組結(jié)果,可以用于從痰樣中鑒別診斷結(jié)核分支桿菌。適應(yīng)于臨床結(jié)核樣本的檢測(cè),為臨床結(jié)核病患者的診斷提供輔助。
文檔編號(hào)C12R1/32GK102776275SQ20121013311
公開(kāi)日2012年11月14日 申請(qǐng)日期2012年5月3日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月3日
發(fā)明者喬軍, 孫志華, 張?jiān)? 張輝, 曹旭東, 王勇, 陳創(chuàng)夫 申請(qǐng)人:石河子大學(xué)