專利名稱：酒糟中可發(fā)酵性淀粉發(fā)酵測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種酒糟中可發(fā)酵性淀粉發(fā)酵測(cè)定方法。
背景技術(shù)：
白酒酒糟是釀酒工業(yè)中的主要副產(chǎn)品，如果酒糟不及時(shí)加以處理，就會(huì)腐敗變質(zhì)，不僅浪費(fèi)了寶貴的資源，還會(huì)嚴(yán)重污染周圍環(huán)境，因而充分而有效的對(duì)酒糟加以綜合利用，既可以減輕環(huán)境污染，又可以節(jié)約糧食、降低成本，因此，酒糟的綜合利用對(duì)我國的資源開發(fā)和環(huán)境保護(hù)具有十分重要的意義。利用酒糟再發(fā)酵生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)白酒，通過技術(shù)手段進(jìn)一步利用酒糟中的可發(fā)酵性淀粉，降低糧耗，實(shí)現(xiàn)資源的循環(huán)利用，節(jié)約成本。酒糟中可發(fā)酵性淀粉的定義在合適溫度、PH值等的條件下，酒糟中能夠被淀粉酶水解為小分子的糊精或麥芽糖，然后被糖化酶糖化為可發(fā)酵性的糖類，如葡萄糖、果糖等，最后被酵母菌充分利用，發(fā)酵產(chǎn)生酒精和二氧化碳，放出一定生物熱量的淀粉。目前，酒糟中可發(fā)酵性淀粉含量的測(cè)定尚無國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)和企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，所以，酒廠的酒糟都沒有測(cè)定過其中的 可發(fā)酵性淀粉含量，不能夠準(zhǔn)確的評(píng)估酒糟的可利用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是提供一種測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確，可為酒糟的綜合利用提供理論依據(jù)的酒糟中可發(fā)酵性淀粉發(fā)酵測(cè)定方法。本發(fā)明的酒糟中可發(fā)酵性淀粉發(fā)酵測(cè)定方法，包括以下步驟
I、酵母活化，稱取I. Og活性干酵母，加入16ml、20g/L蔗糖溶液，溶液溫度38-40°C，搖勻，置于32°C恒溫箱內(nèi)活化I小時(shí)，備用。2、液化，每甑各取等量剛出甑的酒糟，相互混合均勻，稱取酒糟樣品質(zhì)量m=300-500g,置于放有濾紙的抽濾漏斗內(nèi)，用500ml水洗去可溶性糖類，控制壓力為-0. 05MPa - -0. 06MPa，真空抽濾掉水分，將殘留物移入IOOOml燒杯內(nèi)，并用IOOml水洗濾紙,洗液并入燒杯內(nèi)，再加入390-410ml水于燒杯內(nèi)，將燒杯置沸水浴上加熱15min，使淀粉糊化，放冷至60°C以下，加20ml、5g/L淀粉酶溶液，在55-60°C保溫lh，并同時(shí)攪拌，然后取I滴此液加I滴碘溶液，若顯藍(lán)色，再加熱糊化并加淀粉酶溶液，繼續(xù)保溫，直至加碘不顯藍(lán)色為止，加熱至沸，冷后移入1000 ml三角瓶中，并加水至刻度，混勻；
所述的淀粉酶為a -淀粉酶，酶活力大于或等于20000u/g。3、蒸煮，將裝有已液化好酒糟糊的三角瓶用棉塞和防水紙封口后，放入高壓蒸汽滅菌鍋，于壓力0. IMPa保壓lh，取出，冷卻至60°C。4、糖化，用硫酸溶液調(diào)整蒸煮液pH值至4. 3-4. 6，按每克酒糟加入150u_200u糖化酶，當(dāng)糖化酶活力為150000U /g，酒糟的量為500g，加入糖化酶的量為500X200 + 150000(g)=0. 67 (g)，攪勻，放入60°C恒溫箱內(nèi)，糖化60min，冷卻至30-35。。。5、發(fā)酵，將糖化液倒入500ml碘量瓶中，于碘量瓶中加入活性干酵母活化液
2.0ml，搖勻，蓋塞，將碘量瓶放入40°C恒溫箱內(nèi)發(fā)酵65小時(shí)。
6、蒸餾，用氫氧化鈉溶液中和發(fā)酵醪pH值至6. 0-7.0，將發(fā)酵醪液全部倒入IOOOml蒸餾燒瓶中，用IOOml水沖洗碘量瓶，并將洗液倒入蒸餾燒瓶中，加入消泡劑I滴_2滴，進(jìn)行蒸餾，用IOOml容量瓶，外加冰水浴，接收蒸餾液；當(dāng)蒸餾液至約95ml時(shí)，停止蒸餾，取下，待溫度平衡至室溫后，定容至100ml。7、測(cè)量酒精度，將定容后的餾出液全部倒入干燥的IOOml量筒中，靜置，待液中氣泡消失后，放入精密酒精計(jì)，靜置后，水平觀測(cè)與彎月面相切處的刻度示值，同時(shí)插入溫度計(jì)記錄溫度，根據(jù)測(cè)得的溫度和酒精示值，換算成20°C時(shí)的酒精度A。8、計(jì)算，酒糟中可發(fā)酵性淀粉含 量X= (1.76 * A1Vm * 100，其數(shù)值以％表示， X--IOOg酒糟中可發(fā)酵性淀粉的含量，單位為克；
I. 76--淀粉轉(zhuǎn)化成酒精的換算系數(shù)；
A1與餾出液在20°C時(shí)的酒精度A相對(duì)應(yīng)的酒精質(zhì)量百分比，單位為％ (w/w),查附表根據(jù)A可得A1 ；
m-稱取酒糟的質(zhì)量，單位為克。上述步驟中，除非另有規(guī)定，本方法中所用試劑均為分析純。酒糟從取樣到液化的時(shí)間控制在2小時(shí)之內(nèi)完成。糖化酶酶活力大于或等于50，000u/g。所述碘溶液稱取3. 6 g碘化鉀溶于20ml水中，加入I. 3 g碘，溶解后加水定容至 100mlo本發(fā)明的酒糟中可發(fā)酵性淀粉發(fā)酵測(cè)定方法，試樣經(jīng)去除可溶性糖后，淀粉用淀粉酶水解成糊精和小分子雙糖，再用糖化酶糖化成可發(fā)酵性的單糖，經(jīng)酵母發(fā)酵，將發(fā)酵醪進(jìn)行蒸餾，測(cè)量餾出液的酒精度，最后換算成可發(fā)酵性淀粉含量，該方法測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確，通過測(cè)定酒糟中的可發(fā)酵性淀粉，為酒糟的綜合利用提供理論依據(jù)。
具體實(shí)施例方式一種酒糟中可發(fā)酵性淀粉發(fā)酵測(cè)定方法，具體步驟如下
I、酵母活化稱取I. Og耐高溫活性干酵母(安琪酵母股份有限公司生產(chǎn))，加入16ml、20g/L蔗糖溶液，溶液溫度38-40°C，搖勻，置于32°C恒溫箱內(nèi)活化I小時(shí)，備用。2、稱取酒糟300g，置于放有濾紙的抽濾漏斗內(nèi)，用500ml水沖洗酒糟樣品，控制壓力為-0. 05MPa - -0. 06MPa，真空抽濾掉水分，將殘留物移入IOOOml燒杯內(nèi)，并用IOOml水洗濾紙,洗液并入燒杯內(nèi)，再加入400 ml水于燒杯內(nèi)，將燒杯置沸水浴上加熱15 min，使淀粉糊化，冷卻至60°C以下，加20ml、5g/L淀粉酶溶液，在55°C _60°C保溫lh，并同時(shí)攪拌，然后取I滴此液加I滴碘溶液，若顯藍(lán)色，再加熱糊化并加淀粉酶溶液，繼續(xù)保溫，直至加碘不顯藍(lán)色為止，300g酒糟的用淀粉酶溶液300ml，加熱至沸，冷后移入IOOOml三角瓶中，并加水至刻度。3、蒸煮，將裝有已液化好酒糟糊的三角瓶用棉塞和防水紙封口后，放入高壓蒸汽滅菌鍋，于壓力0. IMPa保壓lh，取出，冷卻至60°C。4、糖化，用10%的硫酸溶液調(diào)整蒸煮液pH值至4. 5-4. 6，加入糖化酶量0. 6g，攪勻，放入60°C恒溫箱內(nèi)，糖化60min，冷卻至35°C。5、發(fā)酵，將糖化液倒入IOOOml碘量瓶中，于碘量瓶中加入耐高溫活性干酵母活化液2. Oml，搖勻，蓋塞，將碘量瓶放入40°C恒溫箱內(nèi)發(fā)酵65小時(shí)。6、蒸餾，用4 mol/L的氫氧化鈉溶液中和發(fā)酵醪pH值至6. 5，將發(fā)酵醪液全部倒A IOOOml蒸餾燒瓶中，用IOOml水多次沖先碘量瓶，并將洗液倒入蒸餾燒瓶中，加入食用油1-2滴，進(jìn)行蒸餾，用IOOml容量瓶，外加冰水浴，接收蒸餾液；當(dāng)蒸餾液至約95ml時(shí)，停止蒸餾，取下；待溫度平衡至室溫后，定容至100ml。(7)、測(cè)量酒精度，將定容后的餾出液全部倒入潔凈、干燥的IOOml量筒中，靜置數(shù)分鐘，待液中氣泡消失后，放入洗凈、擦干的精密酒精計(jì)，靜置后，水平觀測(cè)與彎月面相切處的刻度示值，同時(shí)插入溫度計(jì)記錄溫度；根據(jù)測(cè)得的溫度和酒精示值，換算成20°C時(shí)的酒精度A。這里A=4. 5，查表A1=3. 5813。
權(quán)利要求
1. 一種酒糟中可發(fā)酵性淀粉發(fā)酵測(cè)定方法，其特征在于它包括以下步驟 (1)、酵母活化，稱取I.Og活性干酵母，加入16ml、20g/L蔗糖溶液，溶液溫度38-40°C，搖勻，置于32°C恒溫箱內(nèi)活化I小時(shí)，備用； (2)、液化，每甑各取等量剛出甑的酒糟，相互混合均勻，稱取酒糟樣品質(zhì)量m=300-500g,置于放有濾紙的抽濾漏斗內(nèi)，用500ml水洗去可溶性糖類，控制壓力為-0. 05MPa - -0. 06MPa，真空抽濾掉水分，將殘留物移入IOOOml燒杯內(nèi)，并用IOOml水洗濾紙,洗液并入燒杯內(nèi)，再加入390-410ml水于燒杯內(nèi)，將燒杯置沸水浴上加熱15min，使淀粉糊化，放冷至60°C以下，加20ml、5g/L淀粉酶溶液，在55-60°C保溫lh，并同時(shí)攪拌，然后取I滴此液加I滴碘溶液，若顯藍(lán)色，再加熱糊化并加淀粉酶溶液，繼續(xù)保溫，直至加碘不顯藍(lán)色為止，加熱至沸，冷后移入1000 ml三角瓶中，并加水至刻度，混勻； (3)、蒸煮，將裝有已液化好酒糟糊的三角瓶用棉塞和防水紙封口后，放入高壓蒸汽滅菌鍋，于壓力0. IMPa保壓lh，取出，冷卻至60°C ； (4)、糖化，用硫酸溶液調(diào)整蒸煮液pH值至4.3-4. 6，按每克酒糟加入150u-200u糖化酶，攪勻，放入60°C恒溫箱內(nèi)，糖化60min，冷卻至30-35°C ； (5)、發(fā)酵，將糖化液倒入500ml碘量瓶中，于碘量瓶中加入活性干酵母活化液2.Oml,搖勻，蓋塞，將碘量瓶放入400C恒溫箱內(nèi)發(fā)酵65小時(shí)。
(6)、蒸餾，用氫氧化鈉溶液中和發(fā)酵醪pH值至6.0-7. 0，將發(fā)酵醪液全部倒入IOOOml蒸餾燒瓶中，用IOOml水沖洗碘量瓶，并將洗液倒入蒸餾燒瓶中，加入消泡劑I滴-2滴，進(jìn)行蒸餾，用IOOml容量瓶，外加冰水浴，接收蒸餾液，當(dāng)蒸餾液至約95ml時(shí)，停止蒸餾，取下，待溫度平衡至室溫后，定容至IOOml ； (7)、測(cè)量酒精度，將定容后的餾出液全部倒入干燥的IOOml量筒中，靜置，待液中氣泡消失后，放入精密酒精計(jì)，靜置后，水平觀測(cè)與彎月面相切處的刻度示值，同時(shí)插入溫度計(jì)記錄溫度，根據(jù)測(cè)得的溫度和酒精示值，換算成20°C時(shí)的酒精度A。
(8)、計(jì)算，酒糟中可發(fā)酵性淀粉含量X=(1.76 * A1)/m * 100，其數(shù)值以％表示， X-IOOg酒糟中可發(fā)酵性淀粉的含量，單位為克； 1.76-淀粉轉(zhuǎn)化成酒精的換算系數(shù)； A1與餾出液在20°C時(shí)的酒精度A相對(duì)應(yīng)的酒精質(zhì)量百分比，根據(jù)A查表得A1 ； m—稱取酒糟的質(zhì)量。
2.如權(quán)利要求I所述的酒糟中可發(fā)酵性淀粉發(fā)酵測(cè)定方法，其特征在于所述的淀粉酶為a -淀粉酶，酶活力大于或等于20000u/g。
3.如權(quán)利要求I所述的酒糟中可發(fā)酵性淀粉發(fā)酵測(cè)定方法，其特征在于所述糖化酶的酶活力大于或等于50，000u/g。
4.如權(quán)利要求I所述的酒糟中可發(fā)酵性淀粉發(fā)酵測(cè)定方法，其特征在于所述碘溶液的制備方法，稱取3. 6 g碘化鉀溶于20ml水中，加入I. 3 g碘,溶解后加水定容至100ml。
全文摘要
一種酒糟中可發(fā)酵性淀粉發(fā)酵測(cè)定方法是，試樣經(jīng)去除可溶性糖后，淀粉用淀粉酶水解成糊精和小分子雙糖，再用糖化酶糖化成可發(fā)酵性的單糖，經(jīng)酵母發(fā)酵，將發(fā)酵醪進(jìn)行蒸餾，測(cè)量餾出液的酒精度，最后換算成可發(fā)酵性淀粉含量，該方法測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確，通過測(cè)定酒糟中的可發(fā)酵性淀粉，為酒糟的綜合利用提供理論依據(jù)。
文檔編號(hào)C12Q1/34GK102719515SQ20121021220
公開日2012年10月10日 申請(qǐng)日期2012年6月26日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月26日
發(fā)明者嚴(yán)偉, 劉建文, 吳生文, 廖昶, 陳飛 申請(qǐng)人:四特酒有限責(zé)任公司