專利名稱：一種菌種保存方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及菌種保存方法，特別涉及一種菌種保存方法。
背景技術(shù)：
實(shí)驗(yàn)室和工廠菌種室對菌種常用的保藏法是斜面低溫保藏法，即將菌種接種在適宜的固體斜面培養(yǎng)基上，待菌充分生長后，棉塞部分用油紙包扎好，移至2-8°C的冰箱中保藏，其優(yōu)點(diǎn)是操作簡單，使用方便，能隨時檢查所保藏的菌株是否死亡、變異與污染雜菌等；但是其缺點(diǎn)是容易變異，因?yàn)榕囵B(yǎng)基與菌種同時處在2-8°C保存條件下，菌種仍會緩慢利用培養(yǎng)基殘留成分而緩慢生長，影響微生物的性狀；同時因菌種屢次傳代會使微生物的代謝改變，進(jìn)而影響微生物的性狀；貯存空間大，器皿保管困難；污染雜菌的機(jī)會較多
發(fā)明內(nèi)容
針對上述問題，本發(fā)明的目的在于提供一種菌種保存方法，該方法能實(shí)現(xiàn)菌種無需屢次傳代，保證菌種性狀穩(wěn)定，不易變異；并能夠縮小貯存空間，確保菌種保存環(huán)境安全可靠；減少或避免雜菌污染。有利于提高生產(chǎn)效率和質(zhì)量。為達(dá)到上述目的，本發(fā)明所提出的技術(shù)方案為一種菌種保存方法，其特征在于包括如下步驟
步驟I :將固體斜面培養(yǎng)基上生長成熟的菌種中滅菌洗脫液洗脫制成菌懸液；
步驟2 :過濾菌懸液去除培養(yǎng)基；
步驟3 :過濾后的菌懸液進(jìn)行冷凍管分裝；
步驟4 :將分裝后裝有菌懸液的菌種置于_75°C—-86°C下超低溫保存。進(jìn)一步，所述的滅菌洗脫液為滅菌甘油。進(jìn)一步，步驟2中所述的過濾為采用雙層無菌紗布過濾。優(yōu)選的，所述的滅菌甘油為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10-30%的滅菌甘油。進(jìn)一步，所述的冷凍管體積為l_60mL。優(yōu)選的，所述的冷凍管為PV材質(zhì)。采用上述技術(shù)方案，本發(fā)明所述的菌種保存方法，具有顯著優(yōu)點(diǎn)如下一是采用該發(fā)明保存方法，去除了培養(yǎng)基，避免了菌種在保存期內(nèi)有生長的營養(yǎng)條件，穩(wěn)定了菌種的性狀；二是采用該發(fā)明保存方法，對菌種采用了 10-30%的滅菌甘油作為保護(hù)劑保護(hù)，在確保菌種在保存期內(nèi)的存活穩(wěn)定性同時也確保了菌種的性狀；三是采用該發(fā)明保存方法，大大縮小了菌種的貯存空間，同時因其采用PV材質(zhì)冷凍管保存，不易造成破碎，使菌種保存安全可靠；四是采用該發(fā)明保存方法實(shí)現(xiàn)了每支分裝菌種的一次性使用，減少或避免發(fā)生雜菌污染尤其是交叉污染。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施方式
，對本發(fā)明做進(jìn)一步說明。
一種菌種保存方法，包括如下步驟
步驟I :將固體斜面培養(yǎng)基上生長成熟的菌種中滅菌洗脫液洗脫制成菌懸液；
步驟2 :過濾菌懸液去除培養(yǎng)基，過濾采用雙層無菌紗布過濾；
步驟3 :過濾后的菌懸液進(jìn)行l(wèi)-60ml冷凍管分裝；
步驟4 :將分裝后裝有菌懸液的菌種置于_75°C—-86°C下超低溫保存。進(jìn)一步，所述的滅菌洗脫液為滅菌甘油，優(yōu)選的，所述的滅菌甘油為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10-30%的滅菌甘油。進(jìn)一步，所述的冷凍管體積為l_60mL，優(yōu)選的，所述的冷凍管為PV材質(zhì)。上述菌種保存方法可以應(yīng)用于如金霉素、鹽霉素、枯草芽胞桿菌、大腸埃希氏菌、 金黃色葡萄球菌、滕黃微球菌、黑曲霉、白色念珠菌等幾乎所有菌類均可采用此種保存方法。如金霉素采用此種菌種保存方法對其主菌種和工作菌種進(jìn)行保存，主菌種在10年的保存期內(nèi)及工作菌種在180天的保存期內(nèi)能達(dá)到保持性狀穩(wěn)定、生產(chǎn)水平穩(wěn)定的效果。盡管結(jié)合優(yōu)選實(shí)施方案具體展示和介紹了本發(fā)明，但所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該明白，在不脫離所附權(quán)利要求書所限定的本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，在形式上和細(xì)節(jié)上對本發(fā)明做出各種變化，均為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1.一種菌種保存方法，其特征在于包括如下步驟 步驟I:將固體斜面培養(yǎng)基上生長成熟的菌種用滅菌洗脫液洗脫制成菌懸液； 步驟2 :過濾菌懸液去除培養(yǎng)基； 步驟3 :過濾后的菌懸液進(jìn)行冷凍管分裝； 步驟4 :將分裝后裝有菌懸液的菌種置于_75°C—-86°C下超低溫保存。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種菌種保存方法，其特征在于所述的滅菌洗脫液為滅菌甘油。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種菌種保存方法，其特征在于所述的過濾采用雙層無菌紗布過濾。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種菌種保存方法，其特征在于所述的滅菌甘油為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10-30%的滅菌甘油。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種菌種保存方法，其特征在于所述的冷凍管體積為l_60mLo
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種菌種保存方法，其特征在于所述的冷凍管為PV材質(zhì)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種菌種保存方法，其特征在于包括如下步驟步驟1將固體斜面培養(yǎng)基上生長成熟的菌種中滅菌洗脫液洗脫制成菌懸液；步驟2過濾菌懸液去除培養(yǎng)基；步驟3過濾后的菌懸液進(jìn)行冷凍管分裝；步驟4將分裝后裝有菌懸液的菌種置于-75℃～-86℃下超低溫保存。采用上述技術(shù)方案，本發(fā)明所述的菌種保存方法，具有顯著優(yōu)點(diǎn)如下該方法能實(shí)現(xiàn)菌種無需屢次傳代，保證菌種性狀穩(wěn)定，不易變異；并能夠縮小貯存空間，確保菌種保存環(huán)境安全可靠；減少或避免雜菌污染。有利于提高生產(chǎn)效率和質(zhì)量。
文檔編號C12N1/04GK102703323SQ20121023337
公開日2012年10月3日 申請日期2012年7月6日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月6日
發(fā)明者林貞 申請人:浦城正大生化有限公司