專利名稱：一種用于制備生物柴油的固載脂肪酶催化劑及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于制備生物柴油的固載脂肪酶催化劑、其制備方法及利用其制備生物柴油的方法，具體涉及一種固載在海泡石上的脂肪酶催化劑、其制備方法及利用所述催化劑制備生物柴油的方法，屬于生物柴油制備領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
根據(jù)1992年美國生物柴油協(xié)會(huì)(National Biodiesel Borad, NBB)給出的定義，生物柴油(Biodiesel)是指以植物、動(dòng)物油脂等可再生生物資源生產(chǎn)的可用于壓燃式發(fā)動(dòng)機(jī)的清潔替代燃油。隨著石油資源逐漸枯竭與環(huán)境的惡化，生物柴油作為石油燃料的替代物，具有基本不含硫和芳烴、能量密度高、十六烷值高、潤滑性能好、儲(chǔ)運(yùn)安全、抗爆性好、燃燒充分、能生物降解、無毒等優(yōu)良性能，是一種具有很大發(fā)展?jié)摿Φ沫h(huán)境友好的大宗生物基液體燃料。 生物柴油的制備方法有物理法和化學(xué)法。物理法操作簡單,但物理法得到的產(chǎn)品在使用過程中會(huì)發(fā)生不同程度的燒結(jié)(如發(fā)動(dòng)機(jī)噴嘴)、活塞環(huán)卡死和積碳等問題?；瘜W(xué)法主要包括熱裂解法和酯交換法。其中，熱裂解法得到的產(chǎn)品質(zhì)量較好，但是制備工藝條件苛亥Ij (如高溫)，反應(yīng)難以控制，產(chǎn)物組分復(fù)雜，設(shè)備和操作成本高，因而沒有得到廣泛的應(yīng)用。而酯交換法是動(dòng)植物油脂與短鏈醇進(jìn)行酯交換反應(yīng)，生成相對(duì)分子質(zhì)量小的脂肪酸酯(即生物柴油)。而酯交換法制備生物柴油的方法又可分為化學(xué)催化法、酶催化法和超臨界法。化學(xué)催化法主要有酸催化和堿催化，其中酸催化對(duì)原料的適應(yīng)性廣，但傳統(tǒng)酸催化工藝對(duì)設(shè)備腐蝕嚴(yán)重，反應(yīng)速率慢、能耗大、收率低；而新技術(shù)中的固體酸催化反應(yīng)雖然解決了對(duì)設(shè)備的腐蝕問題，但活性偏低，反應(yīng)速率較慢。而堿催化雖然較酸催化活性高、反應(yīng)速率高、且不腐蝕設(shè)備，但對(duì)于原料的要求高，只能使用脂肪酸和水含量低的原料。超臨界法制備生物柴油的反應(yīng)速率非常高、對(duì)原料的適應(yīng)性強(qiáng)、環(huán)境友好、反應(yīng)速率快、轉(zhuǎn)化率高，但是其反應(yīng)條件苛刻，需要高溫高壓下進(jìn)行，對(duì)設(shè)備的要求比較高。酶催化法制備生物柴油是指用脂肪酶為催化劑，將醇與植物油進(jìn)行酯交換反應(yīng)生成脂肪酸酯的過程。酶催化法具有油脂原料適用性廣、反應(yīng)條件溫和(30-40°C)、醇用量小、脂肪酸酯收率較高、產(chǎn)品易于收集和無污染等優(yōu)點(diǎn)。但由于很多酶對(duì)水的依賴性強(qiáng)，且生物柴油酯交換過程的醇體系對(duì)酶的活性也有一定的影響，導(dǎo)致酶的催化壽命較短，限制了酶法制備生物柴油的發(fā)展。為了解決酶的流失，降低酶的催化成本，固載化酶受到了關(guān)注，如用高嶺土負(fù)載月旨肪酶(Production of biodiesel fuel from triglycerides and alcohol usingimmobilized lipase. Iso M，Chen B，Eguchi M，et al. Journal of Molecular CatalysisB:Enzymatic, 2001, 16:53-58);鄧?yán)瘸晒Φ貜募俳z酵母發(fā)酵液中提取出了假絲酵母脂肪酶，將其固定到紡織品上，應(yīng)用到廢棄油脂及食用油的酯交換反應(yīng)中，在有機(jī)溶劑存在的情況下，成功地制取出了性能合格的生物柴油產(chǎn)品(脂肪酶催化合成生物柴油的研究，鄧?yán)龋锕こ虒W(xué)報(bào)，2003，19 (I) :97-101) ;Shah 等將 Chromobacterium viscosum 固載在Delite-545 上，在 40°C反應(yīng) 8h 得到 71% 的得率(Shan S，Sharma S，Gupta M N. Biodieselpreparation by Lipase-Catalyzed transesterification of Jatropha oil. Energy andFuels, 2004, 18 (I) : 154-159);用硅基MCF材料固載脂肪酶(硅基MCF材料固載脂肪酶轉(zhuǎn)化餐飲廢油產(chǎn)生物柴油，申渝，化工學(xué)報(bào)，2012，63 (6))等。酶法制備生物柴油的反應(yīng)條件溫和，但是由于酶的價(jià)格昂貴，造成成本較高；而且酶的反應(yīng)條件苛刻、容易失活，重復(fù)利用次數(shù)低。因此，如何開發(fā)一種能夠多次重復(fù)利用、成本較低、活性較穩(wěn)定的用于制備生物柴油的脂肪酶催化劑，是本領(lǐng)域亟待解決的一個(gè)技術(shù)問題。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的之一在于提供一種能夠多次重復(fù)利用、成本較低、活性較穩(wěn)定的用于制備生物柴油的脂肪酶催化劑，尤其是一種制備生物柴油的固載脂肪酶催化劑，具體為將脂肪酶固載在海泡石上。 海泡石是一種天然纖維狀含水的鎂硅酸鹽粘土礦物，在其結(jié)構(gòu)單元中，硅氧四面體與鎂氧八面體相互交替，具有層狀和鏈狀結(jié)構(gòu)的過渡型特征，其理想結(jié)構(gòu)式可表示為Si12O30Mg8 · (OH)4(H2O)4 · 8H20。海泡石的特殊結(jié)構(gòu)決定了它具有良好的物化性能(即吸附性、流變性及催化性能)及價(jià)格低廉等優(yōu)點(diǎn)，因而應(yīng)用前景十分廣泛。海泡石作為一種多孔型無機(jī)高分子物質(zhì)，由于其具有巨大的比表面自由能，可以吸附或覆蓋各類催化劑單質(zhì)或化合物。這些單質(zhì)和化合物可以進(jìn)入海泡石通道內(nèi)部，這一點(diǎn)是SiO2和Al2O3無法比擬的。其次，海泡石由于自身存在許多堿性中心[MgO6]和酸性中心[SiO4],反應(yīng)物分子被吸附后，易極化變形為活化絡(luò)合物，從而可促進(jìn)反應(yīng)的發(fā)生。因此，海泡石本身擁有一定的催化作用。在實(shí)際應(yīng)用中，海泡石可以和催化劑一起產(chǎn)生協(xié)同催化作用，提高催化效果。再次，可以采取特殊的改性方法，如采用酸改性后的方法，可以使海泡石孔徑或纖維長度與具體的催化劑相適應(yīng)。在制備特定類型催化劑方面，傳統(tǒng)載體所不具備的這一優(yōu)越性，為我們探索新的制備方法提供了更大的空間。另外，海泡石載體催化劑以其活性高、選擇性好并有一定的耐熱性和抗毒性而表現(xiàn)出優(yōu)越的實(shí)用性能。本發(fā)明將脂肪酶催化劑固載在海泡石上，結(jié)合了海泡石良好的吸附性、流變性和催化性能，與脂肪酶結(jié)合后起到了協(xié)同增效的作用，使得固載在海泡石上的脂肪酶活性穩(wěn)定，且能夠重復(fù)利用。優(yōu)選地，本發(fā)明所述海泡石為酸改性處理的海泡石，即本發(fā)明所述固載脂肪酶催化劑為固載在酸改性處理的海泡石上的脂肪酶催化劑。其中，所述酸改性處理的海泡石中的酸優(yōu)選自鹽酸、硫酸或硝酸中的任意I種或至少2種的組合，所述組合例如鹽酸/硫酸、硝酸/鹽酸、鹽酸/硫酸/硝酸等，進(jìn)一步優(yōu)選自鹽酸和/或硫酸，進(jìn)一步優(yōu)選鹽酸。天然海泡石自身酸性極弱，對(duì)海泡石進(jìn)行酸改性為用不同的陽離子取代海泡石骨架中的鎂離子。由于Mg2+是一弱堿，遇弱酸會(huì)生成沉淀而沉積于海泡石的微孔結(jié)構(gòu)中，故目前處理酸均為強(qiáng)酸(如HN03、H2SO4及HCl等)。不同強(qiáng)酸對(duì)海泡石的處理機(jī)理相同，均為H+取代骨架中的Mg2+。海泡石經(jīng)酸處理其Si-O-Mg-O-Si鍵變成了兩個(gè)Si-O-H鍵，即出現(xiàn)了“撇開”狀態(tài)的結(jié)構(gòu)，此時(shí)內(nèi)部通道被連通，故比表面積增大。曾用鹽酸對(duì)海泡石進(jìn)行處理，以考察酸對(duì)海泡石結(jié)構(gòu)的影響，結(jié)果表明，酸處理使海泡石比表面積得到極大的提高，孔徑由微孔(<2nm)發(fā)展為2-5nm的中孔(海泡石的酸性和性能研究I.改性歷程和改性產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)，蔣文斌等，石油學(xué)報(bào)，1994，10(1) :29-35)。由于海泡石經(jīng)過酸化，其比表面積增大，本發(fā)明進(jìn)一步將脂肪酶固載在酸改性的海泡石上，能夠使固載脂肪酶催化劑獲得更加穩(wěn)定的活性，耐酸、耐堿、耐高溫性能均得到了提高，且可以重復(fù)利用，靈活修飾，從而降低了成本。本發(fā)明的目的之二是提供一種前述固載在海泡石上的脂肪酶催化劑的制備方法，所述方法包括如下步驟(I)對(duì)海泡石進(jìn)行酸改性處理；(2)將脂肪酶固載化在步驟(I)得到的酸改性處理后的海泡石上。 優(yōu)選地，步驟(I)所述的對(duì)海泡石進(jìn)行酸改性處理包括如下步驟(Ia)將海泡石置于酸中浸泡；( lb)將浸泡后的海泡石洗滌，過濾，烘干，粉碎，灼燒。優(yōu)選地，步驟(Ia)所述酸選自鹽酸、硫酸或硝酸中的任意I種或至少2種的組合，優(yōu)選鹽酸和/或硫酸，進(jìn)一步優(yōu)選鹽酸。本發(fā)明將海泡石置于酸中浸泡的目的是用酸中的H+取代骨架中的Mg2+，打開Si-O-Mg-O-Si鍵變成了兩個(gè)Si-O-H鍵，連通海泡石內(nèi)部通道，增大比表面積。優(yōu)選地，所述酸的濃度優(yōu)選為O. l_6mol/L,例如 O. 2mol/L、0. 45mol/L、l. 2mol/L、
2.6mol/L、3. 61mol/L、4. 52mol/L、5. 68mol/L、5. 84mol/L 等，進(jìn)一步優(yōu)選為 0. 4-2. 8mol/L。本發(fā)明所述酸的濃度> 6mol/L時(shí)，濃度過高，操作不便，且容易與Si發(fā)生副反應(yīng)，影響海泡石的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，不利于后續(xù)脂肪酶負(fù)載的穩(wěn)定性；而當(dāng)酸的濃度< O. lmol/L時(shí)，濃度過低，與Mg2+的反應(yīng)緩慢，且容易造成資源浪費(fèi)。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，本發(fā)明步驟(Ia)所述酸選自濃度為O. l-6mol/L的鹽酸，優(yōu)選濃度為O. 4-2. 8mol/L的鹽酸。優(yōu)選地，步驟(Ia)所述海泡石與酸的比例為每克海泡石加入8_70mL的酸，例如每克海泡石加入的酸的量為 8. 2mL、9. 2mL、15mL、22mL、30. 5mL、39mL、43mL、50. 7mL、55mL、60. 4mL、67mL、69. 2mL等，優(yōu)選每克海泡石加入10_25mL的酸。當(dāng)每克海泡石加入的酸的量
<SmL時(shí)，H+量較少，不足以全部取代海泡石中的Mg2+，造成海泡石資源的浪費(fèi)；當(dāng)每克海泡石加入的酸的量> 70mL時(shí)，由于Mg2+已經(jīng)基本被H+取代，多余的H+造成浪費(fèi)。優(yōu)選地，步驟(Ia)所述浸泡溫度為30_90°C，例如浸泡溫度為31°C、34. 2°C、38°C、45°C、52°C、59. 3°C、64°C、76°C、82°C、86· 8°C、89°C等，優(yōu)選 35_75°C;浸泡時(shí)間為 12_30h，例如浸泡時(shí)間為 12. 3h、12. 9h、13. 6h、15. 8h、17. 2h、20. 3h、24h、27h、28. lh、28. 8h、29h、29. 6h等，優(yōu)選13-25h。優(yōu)選地，步驟(lb)所述洗滌為用水洗滌，所述水選自去離子水和/或蒸餾水；所述灼燒溫度優(yōu)選為 220-280°C，例如 225°C、238°C、251°C、268°C、274°C、277°C等，進(jìn)一步優(yōu)選230-2500C，特別優(yōu)選 240°C。本發(fā)明所述的對(duì)海泡石進(jìn)行酸改性處理的步驟和各步驟的操作條件，并不僅限于上述的條件，上述的各操作只是本發(fā)明的優(yōu)選條件和步驟，能夠滿足將海泡石酸性處理的實(shí)驗(yàn)條件均可用于本發(fā)明。作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，本發(fā)明步驟(I)所述的對(duì)海泡石進(jìn)行酸改性處理包括如下步驟在30_90°C下，向海泡石中加入濃度為O. 4-2. 8mol/L的鹽酸，鹽酸加入量為10-25mL/每克海泡石，浸泡12-30h ;然后用蒸餾水洗滌，過濾，烘干，粉碎，在240°C下高溫灼燒，得到酸改性后的海泡石。優(yōu)選地，本發(fā)明步驟(2)所述的脂肪酶固載化包括如下步驟(2a)將脂肪酶溶于緩沖溶液，混合，得到脂肪酶溶液；(2b)向脂肪酶溶液中加入步驟(I)得到的酸改性處理的海泡石，混合，進(jìn)行固載化反應(yīng); (2c)將反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行清洗，過濾，干燥，得到固載在海泡石上的固載脂肪酶；所得固載脂肪酶常溫保存。步驟(2a)所述緩沖液的目的是為了維持脂肪酶的正常pH值和正常生理環(huán)境，起到保證脂肪酶活性的作用，緩沖液的選擇是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的操作。優(yōu)選地，本發(fā)明步驟(2a)所述緩沖溶液為磷酸鹽緩沖溶液，優(yōu)選pH為6. 8-7，濃度為O. 04-0. 05mol/L的磷酸鹽緩沖溶液，例如磷酸緩沖液的pH為6. 81,6. 87,6. 90,6. 96等，濃度為O. 041mol/L、
O.044mol/L、0. 046mol/L、0. 048mol/L 等。本發(fā)明步驟(2a)所述緩沖溶液特別優(yōu)選pH為7，濃度為O. 05mol/L的磷酸鹽緩沖溶液。優(yōu)選地，本發(fā)明步驟(2a)所述緩沖溶液中脂肪酶的添加比例為每IOOmL緩沖溶液中，添加600-1000mg脂肪酶，例如每IOOmL緩沖溶液中，添加脂肪酶的量為605mg、624mg、654mg、680mg、699mg、715mg、750mg、785mg、830mg、860mg、885mg、914mg、945mg、987mg 等，優(yōu)選每IOOmL緩沖溶液中，添加800mg脂肪酶。當(dāng)每IOOmL緩沖溶液中，添加脂肪酶的量
<600mg時(shí)，得到的固載脂肪酶催化劑的催化效率低，重復(fù)利用性也不好；而當(dāng)每IOOmL緩沖溶液中，添加脂肪酶的量> IOOOmg時(shí)，脂肪酶容易流失，且固載不穩(wěn)定，造成浪費(fèi)。優(yōu)選地，步驟(2a)所述混合自離心混合、震蕩混合或攪拌混合中的任意I種或至少2種的組合，優(yōu)選離心混合，進(jìn)一步優(yōu)選在2000-3000r/min的條件下離心混合，例如離心混合的轉(zhuǎn)速為 2100r/min、2500r/min、2700r/min、2900r/min 等，特別優(yōu)選在 2400r/min 的條件下離心混合。優(yōu)選地，步驟(2b)所述海泡石的加入量為每IOOmL脂肪酶溶液加入3_7g步驟(I)得到的酸改性處理的海泡石，例如每IOOmL脂肪酶溶液加入步驟(I)得到的酸改性處理的海泡石的質(zhì)量為3. 2g、4. lg、4. 9g、5. 8g、6. 2g、6. 8g等；優(yōu)選每IOOmL脂肪酶溶液加入4g步驟(I)得到的酸改性處理的海泡石。優(yōu)選地，步驟(2b)所述混合選自離心混合、震蕩混合或攪拌混合中的任意I種或至少2種的組合，所述組合例如震蕩混合/攪拌混合等，優(yōu)選震蕩混合。優(yōu)選地，步驟(2b)所述固載化反應(yīng)的時(shí)間為5_9h，例如5. 2h、5. 8h、6. 3h、6. 9h、
7.5h、8. lh、8. 8h 等，優(yōu)選 5_7h，進(jìn)一步優(yōu)選 6h。優(yōu)選地，步驟(2c)所述清洗為用緩沖液清洗，所述緩沖液可以與步驟(2a)中的緩沖液相同，也可以與步驟(2a)中的緩沖液不同，本發(fā)明不做限定；優(yōu)選與步驟(2a)中的緩沖液相同，即用步驟(2a)所述緩沖液進(jìn)行沖洗。同樣的，本發(fā)明所述的脂肪酶固載化的步驟和各步驟的操作條件，并不僅限于上述的條件，上述的各操作只是本發(fā)明的優(yōu)選條件和步驟，能夠滿足將脂肪酶固載化在海泡石或酸改性處理的海泡石上的實(shí)驗(yàn)條件均可用于本發(fā)明。作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，本發(fā)明步驟(2)所述的脂肪酶固載化包括如下步驟將400mg脂肪酶溶于50mL濃度為O. 05mol/L, pH為7的磷酸鹽緩沖溶液中，在2400r/min的條件下進(jìn)行離心；取IOOmL酶液,加入4g已改性的海泡石載體；在室溫下振蕩混合物；反應(yīng)6h后，用大量緩沖液清洗過濾，干燥后于常溫下保存。在本優(yōu)選實(shí)施方式中，最后所述的“用大量緩沖液清洗過濾”中的“大量”，雖然不是一個(gè)確定的量，但是清洗步驟的目的是將反應(yīng)后為固載在海泡石上的殘余脂肪酶、或者其他雜質(zhì)清洗下來，是本領(lǐng)域技術(shù)人員完全能夠明了的操作，對(duì)于“大量”也是能夠清楚把 握的，此處不做具體的限定，典型但非限制性的實(shí)例有所述清洗用的緩沖液的質(zhì)量為海泡石質(zhì)量的10-50倍、10-30倍、20-60倍等。本發(fā)明的目的之三在于提供一種酶催化法制備生物柴油的方法。酶催化法制備生物柴油的方法，本領(lǐng)域已經(jīng)做了一定的研究。目前，酶法制備生物柴油一般使用固定化脂肪酶間歇催化油脂合成生物柴油，主要步驟就是將甲醇和植物油混合，在脂肪酶催化劑存在下，進(jìn)行反應(yīng)，其中甲醇分三次加入反應(yīng)中，制備得到生物柴油。本發(fā)明提供的酶催化法制備生物柴油的方法的特點(diǎn)在于選用固載在海泡石上的脂肪酶催化劑作為催化劑，對(duì)甲醇和植物油的反應(yīng)進(jìn)行催化；優(yōu)選用固載在酸改性的海泡石上的脂肪酶催化劑作為催化劑，對(duì)甲醇和植物油的反應(yīng)進(jìn)行催化。優(yōu)選地，所述在酶催化法制備生物柴油的方法中，以植物油的質(zhì)量為100wt%計(jì)算，固載在海泡石上的脂肪酶催化劑的用量為O. 8-10wt%,例如O. 88wt%、O. 95wt%、
I.42wt%> I. 89wt%、2. 03wt%、2. 7wt%、4. 5wt%、6. 8wt%、7. 5wt%、8. 41wt%、9. 24wt%、9. 7wt% 等，優(yōu)選 l-8wt%。關(guān)于本發(fā)明所述的酶催化法制備生物柴油的過程中，制備原料是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，典型但非限制性的實(shí)例有大豆油、菜籽油、蓖麻油、花生油、玉米油或廢油脂中的任意I種或至少2種的組合。優(yōu)選地，本發(fā)明所述的酶催化法制備生物柴油的方法包括如下步驟(I)向反應(yīng)容器中加入植物油、甲醇和權(quán)利要求I或2所述的固載脂肪酶催化劑；(II)進(jìn)行酶催化反應(yīng)；(III)步驟(II)結(jié)束后，抽濾回收脂肪酶；濾液蒸餾，回收甲醇，剩余部分分液濾出甘油，最后剩下的即為生物柴油。其中，優(yōu)選地，步驟(I)所述植物油和甲醇加入總量的摩爾比為1:2_1:5，例如1:2. 2,1:2. 9,1:3. 1,1:3. 7,1:4,1:4. 5,1:4. 9等，優(yōu)選1:3 ;所述甲醇優(yōu)選分三次加入反應(yīng)容器，加入頻率為每22-26h加入I次，例如每22. 5h加入I次，共加入3次；優(yōu)選每24h加入一次；每23. 2h加入I次，共加入3次；優(yōu)選每24h加入一次；每24. 5h加入I次，共加入3次；每25. 8h加入I次，共加入3次；優(yōu)選每24h加入一次。在本發(fā)明中，植物油和甲醇加入總量的摩爾比的計(jì)算為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的技能，計(jì)算步驟為(植物油的質(zhì)量/植物油的平均分子量):(甲醇的質(zhì)量/甲醇的分子量)。其中，甲醇的分子量為32. 04，甲醇的質(zhì)量可以直接稱量；植物油的質(zhì)量也可以通過直接稱量得到，而植物油的平均分子量可由皂化值(SV)和酸值(AV)計(jì)算得到，皂化值的測定可參照GB-9104. 2-88，酸值的測定 可參照GB9104. 3_88，平均分子量的計(jì)算式為M= (56. I X 1000 X 3) / (SV-AV)；關(guān)于植物油的平均分子量的計(jì)算，很多現(xiàn)有文獻(xiàn)也都有涉及，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以自行查閱，例如文獻(xiàn)“植物油制備生物柴油，鄔國英，江蘇石油化工學(xué)院學(xué)報(bào)，2002年9月，14 (3)典型但非限制性的實(shí)例有對(duì)于大豆油，本發(fā)明認(rèn)為平均分子量為880，則IOOg大豆油與IOg甲醇的摩爾比的計(jì)算式為(100/880) : (10/32. 04);而對(duì)于潲水油，本發(fā)明認(rèn)為潲水油的分子量為920。優(yōu)選地，本發(fā)明步驟(II)所述反應(yīng)溫度30-40°C，例如31°C、33°C、36. 3°C、37°C、39°C>39. 5°C等；總反應(yīng)時(shí)間66-78h，優(yōu)選72小時(shí)。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果I、本發(fā)明是采用海泡石固載脂肪酶，尤其是采用酸改性后的海泡石固載脂肪酶作為催化劑，脂肪酶催化劑的用量少；反應(yīng)結(jié)束后固載脂肪酶催化劑可重復(fù)利用，重復(fù)利用次數(shù)高達(dá)10次，雖然固載脂肪酶催化劑的活性略有下降，但植物油轉(zhuǎn)化為生物柴油的轉(zhuǎn)化率仍可以達(dá)到90%以上。2、經(jīng)固載化的脂肪酶，耐酸堿性能和耐熱性能較原酶明顯提高；其最適pH由7. 5變?yōu)?. 6，最適溫度由30°C變?yōu)?5°C。3、對(duì)于酸處理過的海泡石固載脂肪酶，在水解速率上要比沒處理的海泡石固載脂肪酶效果要好。4、本發(fā)明提供的生物柴油的制備方法，反應(yīng)活性高，反應(yīng)速度快，反應(yīng)條件相對(duì)溫和，可以在常壓及相對(duì)低的溫度下進(jìn)行，從而可以降低反應(yīng)能耗，降低成本；反應(yīng)在常壓下進(jìn)行，降低了對(duì)反應(yīng)裝置的要求，并且催化劑無腐蝕性，也降低了設(shè)備耐腐蝕要求，節(jié)省投資費(fèi)用。5、本發(fā)明提供的固載脂肪酶催化劑催化劑穩(wěn)定性好，用量少，催化劑可以重復(fù)循環(huán)使用，生產(chǎn)過程環(huán)境友好；操作方法簡單，易于操作，反應(yīng)時(shí)間短，收率高對(duì)設(shè)備腐蝕小，既可以減少能源，又可以降低成本。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明給出的區(qū)間值，并非數(shù)學(xué)概念的精確端值，而試驗(yàn)選擇有協(xié)當(dāng)區(qū)間，適當(dāng)偏離端值并非不可以。以下結(jié)合若干個(gè)具體實(shí)施例，示例性說明及幫助進(jìn)一步理解本發(fā)明，但實(shí)施例具體細(xì)節(jié)僅是為了說明本發(fā)明，并不代表本發(fā)明構(gòu)思下全部技術(shù)方案，因此不應(yīng)理解為對(duì)本發(fā)明總的技術(shù)方案限定，一些在技術(shù)人員看來，不偏離發(fā)明構(gòu)思的非實(shí)質(zhì)性改動(dòng)，例如以具有相同或相似技術(shù)效果的技術(shù)特征簡單改變或替換，均屬本發(fā)明保護(hù)范圍。本發(fā)明實(shí)施例中所述脂肪酶為SUKALIP脂肪酶，購自蘇柯漢(濰坊)生物工程有限公司。本發(fā)明所述脂肪酶并不限于SUKALIP脂肪酶，任何一種現(xiàn)有的或新技術(shù)中的脂肪酶均可用于本發(fā)明。實(shí)施例I :—種固載脂肪酶催化劑的制備方法，包括如下步驟(I)鹽酸改性海泡石a、在30°C溫度下，向IOg海泡石中加入IOOmL濃度為O. 4mol/L的鹽酸，浸泡12h ；b、用蒸餾水洗滌，過濾，烘干，粉碎，在240°C下高溫灼燒，得到鹽酸改性后的海泡
O(2)脂肪酶固載化
a、將400mg脂肪酶溶于50mL磷酸鹽緩沖溶液(O. 05mol/L, pH7)中，離心(2400r/min),取IOOmL酶液；加入4g步驟(I)中已改性的海泡石載體；在室溫下振蕩混合物；反應(yīng)6h后，用大量緩沖液清洗過濾，干燥后得到固載化脂肪酶。利用制備得到的固載化脂肪酶催化劑制備生物柴油(3)在O. 25L反應(yīng)器中，加入大豆油和甲醇(摩爾比1:3)，甲醇分三次加入，加入制備得到的酸改性海泡石固載化脂肪酶，加入量為3w%(以大豆油的質(zhì)量為100 %計(jì))，在35°〇下反應(yīng)72小時(shí)，產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化率可以達(dá)到96. 1%。實(shí)施例2 一種固載脂肪酶催化劑的制備方法，包括如下步驟(I)鹽酸改性海泡石a、在30°C溫度下，向IOg海泡石中加入150mL濃度為O. 4mol/L的鹽酸，浸泡12h ；b、用蒸餾水洗滌，過濾，烘干，粉碎，在240°C下高溫灼燒，得到鹽酸改性后的海泡
O(2)脂肪酶固載化將400mg脂肪酶溶于50mL磷酸鹽緩沖溶液(O. 05mol/L, pH7)中，離心(2400r/min),取IOOmL酶液,加入4g步驟(I)中已改性的海泡石載體；在室溫下振蕩混合物；反應(yīng)6h后，用大量緩沖液清洗過濾，干燥后得到固定化脂肪酶。利用制備得到的固載化脂肪酶催化劑制備生物柴油(3)在O. 25L反應(yīng)器中，加入菜籽油和甲醇(摩爾比1:3)，甲醇分三次加入，上述固定化脂肪酶加入量為3w% (以菜籽油的質(zhì)量為100 %計(jì))，在30°C下反應(yīng)72小時(shí)，產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率達(dá)到95. 7%。實(shí)施例3 一種固載脂肪酶催化劑的制備方法，包括如下步驟(I)鹽酸改性海泡石a、在50°C溫度下，向IOg海泡石中加入200mL濃度為I. 2mol/L的鹽酸，浸泡12h ；b、用蒸餾水洗滌，過濾，烘干，粉碎，在240°C下高溫灼燒，得到鹽酸改性后的海泡
O(2)脂肪酶固載化將400mg脂肪酶溶于50mL磷酸鹽緩沖溶液(O. 05mol/L, pH7)中，離心(2400r/min),取IOOmL酶液,加入4g步驟(I)中已改性的海泡石載體；在室溫下振蕩混合物；反應(yīng)6h后，用大量緩沖液清洗過濾，干燥后得到固定化脂肪酶。
利用制備得到的固載化脂肪酶催化劑制備生物柴油(3)在O. 25L反應(yīng)器中，加入蓖麻油和甲醇(摩爾比1:3)，甲醇分三次加入，上述固定化脂肪酶加入量為4w% (以蓖麻油的質(zhì)量為100 %計(jì))，在40°C下反應(yīng)72小時(shí)，產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率達(dá)到95. 3%ο實(shí)施例4 一種固載脂肪酶催化劑的制備方法，包括如下步驟(I)鹽酸改性海泡石a、在50°C溫度下，向IOg海泡石中加入250mL濃度為I. 2mol/L的鹽酸，浸泡18h ；b、用蒸餾水洗滌，過濾，烘干，粉碎，在240°C下高溫灼燒，得到鹽酸改性后的海泡
O(2)脂肪酶固載化將400mg脂肪酶溶于50mL磷酸鹽緩沖溶液(0.05mol/L，pH7)中，離心(2400r/min),取IOOmL酶液,加入4g步驟(I)中已改性的海泡石載體；在室溫下振蕩混合物；反應(yīng)6h后，用大量緩沖液清洗過濾，干燥后得到固定化脂肪酶。利用制備得到的固載化脂肪酶催化劑制備生物柴油(3)在O. 25L反應(yīng)器中，加入玉米油和甲醇(摩爾比1:3)，甲醇分三次加入，上述固定化脂肪酶加入量為8w% (以玉米油的質(zhì)量為100 %計(jì))，在35°C下反應(yīng)72小時(shí)，產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率達(dá)到96. 5%。實(shí)施例5 一種固載脂肪酶催化劑的制備方法，包括如下步驟(I)鹽酸改性海泡石a、在70°C溫度下，向IOg海泡石中加入150mL濃度為2. Omol/L的鹽酸，浸泡18h ；b、用蒸餾水洗滌，過濾，烘干，粉碎，在240 V下高溫灼燒，得到鹽酸改性后的海泡
O(2)脂肪酶固載化將400mg脂肪酶溶于50mL磷酸鹽緩沖溶液(0.05mol/L，pH7)中，離心(2400r/min),取IOOmL酶液,加入4g步驟(I)中已改性的海泡石載體；在室溫下振蕩混合物；反應(yīng)6h后，用大量緩沖液清洗過濾，干燥后得到固定化脂肪酶。利用制備得到的固載化脂肪酶催化劑制備生物柴油(3)在O. 25L反應(yīng)器中，加入花生油和甲醇(摩爾質(zhì)量比1:3)，甲醇分三次加入，上述固定化脂肪酶加入量為8w% (以花生油的質(zhì)量為100 %計(jì))，在30°C下反應(yīng)小72時(shí)，產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率達(dá)到97. 5%。實(shí)施例6一種固載脂肪酶催化劑的制備方法，包括如下步驟(I)鹽酸改性海泡石a、在70°C溫度下，向IOg海泡石中加入150mL濃度為2. 8mol/L的鹽酸，浸泡18h ；b、用蒸餾水洗滌，過濾，烘干，粉碎，在240°C下高溫灼燒，得到鹽酸改性后的海泡
O(2)脂肪酶固載化
將400mg脂肪酶溶于50mL磷酸鹽緩沖溶液(0.05mol/L，pH7)中，離心(2400r/min),取IOOmL酶液,加入4g步驟(I)中已改性的海泡石載體；在室溫下振蕩混合物；反應(yīng)6h后，用大量緩沖液清洗過濾，干燥后得到固定化脂肪酶。利用制備得到的固載化脂肪酶催化劑制備生物柴油(3)在O. 25L反應(yīng)器中，加入精制處理后的潲水油和甲醇(摩爾比1:3)，甲醇分三次加入，上述固定化脂肪酶加入量為6w% (以潲水油的質(zhì)量為100w%計(jì))，在30°C下反應(yīng)72小時(shí)，產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率分別達(dá)到97. 2%。實(shí)施例7一種固載脂肪酶催化劑的制備方法，包括如下步驟(I)鹽酸改性海泡石
a、在70°C溫度下，向IOg海泡石中加入250mL濃度為2. Omol/L的鹽酸，浸泡18h;b、用蒸餾水洗滌，過濾，烘干，粉碎，在240°C下高溫灼燒，得到鹽酸改性后的海泡
O(2)脂肪酶固載化將400mg脂肪酶溶于50mL磷酸鹽緩沖溶液(0.05mol/L，pH7)中，離心(2400r/min),取IOOmL酶液,加入4g步驟(I)中已改性的海泡石載體；在室溫下振蕩混合物；反應(yīng)6h后，用大量緩沖液清洗過濾，干燥后得到固定化脂肪酶。利用制備得到的固載化脂肪酶催化劑制備生物柴油(3)在O. 25L反應(yīng)器中，加入菜籽油和甲醇(摩爾比1:3)，甲醇分三次加入，上述固定化脂肪酶加入量為6w% (以菜籽油的質(zhì)量為100 %計(jì))，在35°C下反應(yīng)72小時(shí)，產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率分別為95. 9%。實(shí)施例8:一種固載脂肪酶催化劑的制備方法，包括如下步驟(I)鹽酸改性海泡石a、在90°C溫度下，向IOg海泡石中加入250mL濃度為2. 8mol/L的鹽酸，浸泡30h;b、用蒸餾水洗滌，過濾，烘干，粉碎，在240°C下高溫灼燒，得到鹽酸改性后的海泡
O(2)脂肪酶固載化將400mg脂肪酶溶于50mL磷酸鹽緩沖溶液(0.05mol/L，pH7)中，離心(2400r/min),取IOOmL酶液,加入4g步驟(I)中已改性的海泡石載體；在室溫下振蕩混合物；反應(yīng)6h后，用大量緩沖液清洗過濾，干燥后得到固定化脂肪酶。利用制備得到的固載化脂肪酶催化劑制備生物柴油(3)在O. 25L反應(yīng)器中，加入蓖麻油和甲醇(摩爾比1:3)，甲醇分三次加入，上述固定化脂肪酶加入量為6w% (以蓖麻油的質(zhì)量為100 %計(jì))，在30°C下反應(yīng)72小時(shí)，產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率分別為96. 7%。實(shí)施例9:考察酸改性海泡石固載脂肪酶催化劑的重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果，除以下不同外，其余與上述實(shí)例I相同考察催化劑重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果，催化劑I
步驟(la):30°C下海泡石的質(zhì)量(g)與鹽酸加入量(mL)之比1:10，濃度為O. 4mol/L鹽酸改性12h ；將催化劑I重復(fù)催化大豆油和甲醇，其產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化率依次為95. 2%,94. 3%,94. 4%、
94.3%, 93. 2%, 92. 7%, 92. 8%, 90. 6%, 90. 0%、90· 1% ；催化劑2步驟(la):90°C下海泡石的質(zhì)量(g)與鹽酸加入量(mL)之比1:25，濃度為2. 8mol/L鹽酸改性30h ；將催化劑2重復(fù)催化大豆油和甲醇，其產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化率依次為95. 7%,95. 3%,96. 4%、
95.3%, 94. 6%, 92. 2%, 92. 1%、90· 8%, 90. 1%、90· 0%。

由此可以看出，本發(fā)明所提供的固載化脂肪酶經(jīng)過10次重復(fù)性催化大豆油和甲醇，其產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化率依然能夠達(dá)到90%以上。實(shí)施例10一種固載脂肪酶催化劑的制備方法，包括如下步驟(I)鹽酸改性海泡石a、在82°C溫度下，向IOg海泡石中加入80mL濃度為6mol/L的硝酸，浸泡21h ;b、用蒸餾水洗滌，過濾，烘干，粉碎，在220°C下高溫灼燒，得到鹽酸改性后的海泡
O(2)脂肪酶固載化將300mg脂肪酶溶于50mL磷酸鹽緩沖溶液(O. 04mol/L, pH6. 8)中，離心(2000r/min),取IOOmL酶液,加入7g步驟(I)中已改性的海泡石載體；在室溫下振蕩混合物；反應(yīng)5h后，用大量緩沖液清洗過濾，干燥后得到固定化脂肪酶。利用制備得到的固載化脂肪酶催化劑制備生物柴油(3)在O. 25L反應(yīng)器中，加入蓖麻油和甲醇(摩爾比1:2)，甲醇分三次加入，上述固定化脂肪酶加入量為O. 8w% (以蓖麻油的質(zhì)量為100 %計(jì))，在40°C下反應(yīng)66小時(shí)，產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率分別為97. 1%。實(shí)施例11一種固載脂肪酶催化劑的制備方法，包括如下步驟(I)鹽酸改性海泡石a、在73 °C溫度下，向IOg海泡石中加入700mL濃度為O. lmol/L的硫酸，浸泡
16.5h ；b、用蒸餾水洗滌，過濾，烘干，粉碎，在280°C下高溫灼燒，得到鹽酸改性后的海泡
O(2)脂肪酶固載化將500mg脂肪酶溶于50mL磷酸鹽緩沖溶液(O. 043mol/L,pH6. 9)中，離心(3000r/min),取IOOmL酶液,加入3g步驟(I)中已改性的海泡石載體；在室溫下振蕩混合物；反應(yīng)9h后，用大量緩沖液清洗過濾，干燥后得到固定化脂肪酶。利用制備得到的固載化脂肪酶催化劑制備生物柴油(3)在O. 25L反應(yīng)器中，加入蓖麻油和甲醇(摩爾比1:5)，甲醇分三次加入，上述固定化脂肪酶加入量為10w% (以蓖麻油的質(zhì)量為100 %計(jì))，在30°C下反應(yīng)78小時(shí)，產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率分別為98. 5%。實(shí)施例12一種固載脂肪酶催化劑的制備方法，包括如下步驟(I)脂肪酶固載化將500mg脂肪酶溶于50mL磷酸鹽緩沖溶液(O. 043mol/L,pH6. 9)中，離心(3000r/min)，取IOOmL酶液，加入3g海泡石載體；在室溫下振蕩混合物；反應(yīng)9h后，用大量緩沖液清洗過濾，干燥后得到固定化脂肪酶。利用制備得到的固載化脂肪酶催化劑制備生物柴油(2)在O. 25L反應(yīng)器中，加入蓖麻油和甲醇(摩爾比1:5)，甲醇分三次加入，上述固定化脂肪酶加入量為10w% (以蓖麻油的質(zhì)量為100 %計(jì))，在30°C下反應(yīng)78小時(shí)，產(chǎn)物轉(zhuǎn) 化率分別為72. 5%。申請(qǐng)人:聲明，本發(fā)明通過上述實(shí)施例來說明本發(fā)明的詳細(xì)工藝設(shè)備和工藝流程，但本發(fā)明并不局限于上述詳細(xì)工藝設(shè)備和工藝流程，即不意味著本發(fā)明必須依賴上述詳細(xì)工藝設(shè)備和工藝流程才能實(shí)施。所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該明了，對(duì)本發(fā)明的任何改進(jìn)，對(duì)本發(fā)明產(chǎn)品各原料的等效替換及輔助成分的添加、具體方式的選擇等，均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍和公開范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種制備生物柴油的固載脂肪酶催化劑，其特征在于，所述催化劑為將脂肪酶固載在海泡石上。
2.如權(quán)利要求I所述的固載脂肪酶催化劑，其特征在于，所述海泡石為酸改性處理的海泡石；所述酸優(yōu)選自鹽酸、硫酸或硝酸中的任意I種或至少2種的組合，進(jìn)一步優(yōu)選自鹽酸和/或硫酸，進(jìn)一步優(yōu)選鹽酸。
3.—種如權(quán)利要求I或2所述的固載脂肪酶催化劑的制備方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟 (I)對(duì)海泡石進(jìn)行酸改性處理； (2 )將脂肪酶固載化在步驟(I)得到的酸改性處理后的海泡石上。
4.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟(I)所述的對(duì)海泡石進(jìn)行酸改性處理包括如下步驟 (Ia)將海泡石置于酸中浸泡； (Ib)將浸泡后的海泡石洗滌，過濾，烘干，粉碎，灼燒。
5.如權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟(Ia)所述酸選自鹽酸、硫酸或硝酸中的任意I種或至少2種的組合，優(yōu)選鹽酸和/或硫酸，進(jìn)一步優(yōu)選鹽酸；所述酸的濃度優(yōu)選為 O. l_6mol/L，進(jìn)一步優(yōu)選為 O. 4-2. 8mol/L ； 進(jìn)一步優(yōu)選地，步驟(Ia)所述酸選自濃度為O. l-6mol/L的鹽酸，優(yōu)選濃度為O. 4-2. 8mol/L 的鹽酸； 優(yōu)選地，步驟(Ia)所述海泡石與酸的比例為每克海泡石加入8-70mL的酸,優(yōu)選每克海泡石加入10-25mL的酸； 優(yōu)選地，步驟(Ia)所述浸泡溫度為30-90°C，優(yōu)選35-75°C ;浸泡時(shí)間為12_30h，優(yōu)選13-25h ； 優(yōu)選地，步驟(Ib)所述洗滌為用水洗滌，所述水選自去離子水和/或蒸餾水；所述灼燒溫度優(yōu)選為220-280°C，進(jìn)一步優(yōu)選230-250°C，特別優(yōu)選240°C。
6.如權(quán)利要求4或5所述的制備方法，其特征在于，步驟(I)所述的對(duì)海泡石進(jìn)行酸改性處理包括如下步驟 在30-90°C下，向海泡石中加入濃度為O. Γ2. 8mol/L的鹽酸，鹽酸加入量為10_25mL/每克海泡石，浸泡12-30h ;然后用蒸餾水洗滌，過濾，烘干，粉碎，在240°C下高溫灼燒，得到酸改性后的海泡石。
7.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述的脂肪酶固載化包括如下步驟 (2a)將脂肪酶溶于緩沖溶液，混合，得到脂肪酶溶液； (2b)向脂肪酶溶液中加入步驟(I)得到的酸改性處理的海泡石，混合，進(jìn)行固載化反應(yīng)； (2c)將反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行清洗，過濾，干燥，得到固載在海泡石上的固載脂肪酶；所得固載脂肪酶常溫保存； 優(yōu)選地，步驟(2a)所述緩沖溶液為磷酸鹽緩沖溶液，優(yōu)選pH為6. 8-7，濃度為O.04-0. 05mol/L的磷酸鹽緩沖溶液，進(jìn)一步優(yōu)選pH為7，濃度為O. 05mol/L的磷酸鹽緩沖溶液；優(yōu)選地，步驟(2a)所述緩沖溶液中脂肪酶的添加比例為每IOOmL緩沖溶液中，添加600-1000mg脂肪酶，優(yōu)選每IOOmL緩沖溶液中，添加800mg脂肪酶； 優(yōu)選地，步驟(2a)所述混合自離心混合、震蕩混合或攪拌混合中的任意I種或至少2種的組合，優(yōu)選離心混合，進(jìn)一步優(yōu)選在2000-3000r/min的條件下離心混合,特別優(yōu)選在2400r/min的條件下離心混合； 優(yōu)選地，步驟(2b)所述海泡石的加入量為每IOOmL脂肪酶溶液加入3-7g步驟(I)得到的酸改性處理的海泡石，優(yōu)選每IOOmL脂肪酶溶液加入4g步驟(I)得到的酸改性處理的海泡石； 優(yōu)選地，步驟(2b)所述混合選自離心混合、震蕩混合或攪拌混合中的任意I種或至少2種的組合，優(yōu)選震蕩混合； 優(yōu)選地，步驟(2b)所述固載化反應(yīng)的時(shí)間為5-9h，優(yōu)選5-7h，進(jìn)一步優(yōu)選6h ； 優(yōu)選地，步驟(2c)所述清洗為用緩沖液清洗，優(yōu)選用步驟(2a)所述緩沖液進(jìn)行沖洗。
8.如權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述的脂肪酶固載化包括如下步驟 將400mg脂肪酶溶于50mL濃度為O. 05mol/L,pH為7的磷酸鹽緩沖溶液中，在2400r/min的條件下進(jìn)行離心；取IOOmL酶液，加入4g已改性的海泡石載體；在室溫下振蕩混合物；反應(yīng)6h后，用大量緩沖液清洗過濾，干燥后于常溫下保存。
9.一種酶催化法制備生物柴油的方法，為甲醇和植物油在脂肪酶催化劑存在下進(jìn)行反應(yīng)，制備生物柴油，其特征在于，所述脂肪酶催化劑為如權(quán)利要求I或2所述的固載在海泡石上的脂肪酶催化劑；優(yōu)選所述脂肪酶催化劑為如權(quán)利要求2所述的固載在酸改性的海泡石上的脂肪酶催化劑； 優(yōu)選地，所述方法中，以植物油的質(zhì)量為100wt%計(jì)算，固載在海泡石上的脂肪酶催化劑的用量為O. 8-10wt%，優(yōu)選I 8wt% ； 優(yōu)選地，所述方法包括如下步驟 (I)向反應(yīng)容器中加入植物油、甲醇和權(quán)利要求I或2所述的固載脂肪酶催化劑； (II)進(jìn)行酶催化反應(yīng)； (III)步驟(II)結(jié)束后，抽濾回收脂肪酶；濾液蒸餾，回收甲醇，剩余部分分液濾出甘油，最后剩下的即為生物柴油； 其中，優(yōu)選地，步驟(I)所述植物油和甲醇加入總量的摩爾比為1:2-1:5，優(yōu)選1:3 ;所述甲醇優(yōu)選分三次加入反應(yīng)容器，加入頻率為每22-26h加入I次，優(yōu)選每24h加入一次； 優(yōu)選地，步驟(II)所述反應(yīng)溫度30-40°C ;總反應(yīng)時(shí)間66-78h，優(yōu)選72小時(shí)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種固載在海泡石上的脂肪酶催化劑、其制備方法及利用所述催化劑制備生物柴油的方法，屬于生物柴油制備領(lǐng)域。本發(fā)明提供的固載脂肪酶催化劑用量少，且可重復(fù)利用次數(shù)高達(dá)10次，且制備生物柴油的反應(yīng)活性高，反應(yīng)速度快，反應(yīng)條件相對(duì)溫和，可以在常壓及相對(duì)低的溫度下進(jìn)行，能夠降低反應(yīng)能耗，降低成本，同時(shí)，生產(chǎn)過程環(huán)境友好，操作過程簡單，對(duì)設(shè)備腐蝕小。
文檔編號(hào)C12N11/14GK102827825SQ201210309958
公開日2012年12月19日 申請(qǐng)日期2012年8月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月28日
發(fā)明者李為民, 浦國佳, 李建防, 李志鵬, 張湘輝 申請(qǐng)人:連云港正豐生物能源有限公司, 常州大學(xué)