專利名稱：一種具有排鎘功能的植物乳桿菌及其用途的制作方法
一種具有排鎘功能的植物乳桿菌及其用途技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域。更具體地，本發(fā)明涉及一種具有排鎘功能的植物乳桿菌，本發(fā)明還涉及所述植物乳桿菌的用途。
背景技術(shù)：
鎘是一種對人體健康極其有害的重金屬，在環(huán)境中非常穩(wěn)定，為已知的最易在體內(nèi)蓄積的毒物。鎘可溶于水，它與氧、氯、硫等元素生成無機化合物分布于自然界中，并被廣泛應(yīng)用于電鍍、電池、合金、顏料、塑料等的各個技術(shù)領(lǐng)域。隨著鎘在工業(yè)和生活中的應(yīng)用，其在水體和土壤中的含量逐年增加，繼而在一些植物或動物體內(nèi)蓄積(如鎘污染區(qū)的大米、煙草、貝殼類海鮮、動物肝腎臟等)，最終通過食物鏈在人體內(nèi)蓄積。鎘污染情況在亞洲國家尤為嚴重，1955年日本爆發(fā)了震驚世界的痛痛病事件，其病因就是由于神通川水域遭受鎘污染，導(dǎo)致居民食用的大米中鎘嚴重超標。在中國，每年由工業(yè)廢棄物排放到環(huán)境中 的鎘總量約680余噸，鎘已經(jīng)成為水源和耕地最主要的污染源之一。中國科學(xué)院地理科學(xué)與資源研究所環(huán)境修復(fù)研究中心主任陳同斌指出，中國受鎘污染的耕地達到8000萬畝左右，在一些污染嚴重的地區(qū)，稻田有效鎘含量甚至是國家允許值的26倍。2002年農(nóng)業(yè)部對全國市場稻米的抽查表明10%左右的市售大米鎘含量超標，2007年南京農(nóng)業(yè)大學(xué)潘根興教授和他的研究團隊在全國六個地區(qū)(華東、東北、華中、西南、華南和華北)縣級以上市場的抽樣調(diào)查再次證明了這一結(jié)果。鎘具有毒性強、潛伏期長的特點。1997年以來，美國毒性物質(zhì)與疾病登記署(ATSDR)和環(huán)境保護署(EPA) —直將鎘列為第六位危害人類健康的有毒物質(zhì)，其對人體的危害主要涉及到骨骼、腎臟、肝臟、呼吸系統(tǒng)、血液系統(tǒng)及生殖器官，另外鎘還是致癌物，在1993年即被國際抗癌聯(lián)盟列為IA級致癌物。急性鎘中毒導(dǎo)致人體出現(xiàn)咳嗽、胸悶、呼吸困難、惡心、嘔吐及腹痛等癥狀，攝入大劑量鎘甚至會由于急性肝損傷而導(dǎo)致死亡。慢性鎘中毒涉及腎損傷(蛋白尿、腎結(jié)石、慢性腎衰竭)、骨損傷(骨痛、骨質(zhì)疏松、骨軟化、自發(fā)性骨折)、生殖器官損傷(睪丸、卵巢損傷)及癌癥(肺癌、前列腺癌)。鎘進入人體后生物學(xué)半衰期長達10到30年，其隱蔽性和滯后性往往容易被人忽視。對于由鎘中毒引起的各種生理病癥，通常使用依地酸二鈉鈣、二巰基丁二酸鈉等螯合劑進行注射治療，以達到排鎘的目的，例如中國藥典第二版(2000年)記載了依地酸二鈉鈣作為鎘和鉛等重金屬中毒的解毒劑。然而，這些藥物都存在著一定的毒副作用。依地酸二鈉鈣是一種廣譜性絡(luò)合劑，具有較強的腎毒性，且用藥時會經(jīng)尿排出大量人體不可缺少的微量元素，例如鋅、銅、錳、鐵等，而這些元素與很多酶的活性有關(guān)，因此大量使用依地酸二鈉鈣會危及人的身體健康。二巰基丁二酸鈉可能導(dǎo)致消化系統(tǒng)功能紊亂，并造成頭痛、惡心、四肢酸痛等癥狀，同時必須在攝入鎘之后極短時間之內(nèi)給藥，否則不能得到良好的療效(Kojima，S.，Sugimura，et. al，“Effects of dithiocarbamates on testiculartoxicity in rats caused by acute exposure to cadmium，，，((Toxicology and appliedpharmacology)), 116，24-29 (1992))。
鑒于傳統(tǒng)治療方法存在的多種問題，針對鎘中毒尋找一種新的干預(yù)或治療方法顯得十分必要。乳酸菌是一類能夠使碳水化合物發(fā)酵并產(chǎn)生乳酸的細菌的統(tǒng)稱，廣泛存在于自然發(fā)酵乳制品、發(fā)酵植物食品，如泡菜、酸菜、青貯飼料以及人腸道中。長期科學(xué)研究結(jié)果表明，以乳酸菌為代表的益生菌是人體必不可少的且具有重要生理功能的有益菌，其主要生理功能有防治乳糖不耐癥、恢復(fù)人體腸道內(nèi)菌群平衡維護人體健康、抗腫瘤和預(yù)防癌癥作用、控制人體內(nèi)毒素水平、保護肝臟并增強肝臟的解毒等功能。乳酸菌作為一種食品級的微生物，不像螯合劑有嚴重的毒副作用，且已有報道表明其在體外對鎘、鉛等重金屬離子具有較好的吸附作用(Halttunen, T. , Collado, M. C. , et. al, “Combining strains of lacticacid bacteria may reduce their toxin and heavy metal removal efficiency fromaqueous solution”《Letters in Applied Microbiology)),46, 160-165 (2007)),因此很有潛力成為具有排鎘功能的新型保健食品。目前，一些專利或?qū)＠暾埼墨I涉及排鎘保健食品及其制備方法，例如CN1336208公開了一種由脫臭大蒜粉、醋粉、冰明粉等制成的保健食品，經(jīng)常食用可有效排除人體因空氣、水、農(nóng)藥污染而累積超標的鎘；CN1328845公開了一種由土茯苓、紅參、三七等配方制成 的中藥制劑，可有效治療和預(yù)防鎘中毒且長期服用無毒副作用。但是，目前涉及具有排鎘功能的乳酸菌專利申請文件不多，例如CN101153272公開了一種伯克霍爾德氏菌J62，它對鎘具有高耐受性，可應(yīng)用于環(huán)境工程技術(shù)領(lǐng)域中促進植物生長，強化植物富集重金屬鎘，提高植物提取修復(fù)效率。另外，CN101252943A公開了一些植物乳桿菌，它用于促進哺乳動物吸收鐵、鋅、韓、鎂離子。因此，篩選出一種具有對鎘具有優(yōu)良耐受和吸附能力的乳酸菌，并且證明它們在動物模型中具有良好的排鎘作用，同時研制這些乳酸菌實際的用途就顯得十分必要。本發(fā)明試圖進一步地挖掘益生菌的功能，開發(fā)具有更高保健價值的乳酸菌，為利用膳食策略緩解鎘中毒效應(yīng)開辟出新的途徑和解決方案。本發(fā)明人在總結(jié)現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上，通過大量實驗研究，終于完成了本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容[要解決的技術(shù)問題]本發(fā)明的目的是提供一種植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum) CCFM8610。本發(fā)明的另一個目的是提供所述植物乳桿菌CCFM8610的用途。[技術(shù)方案]本發(fā)明是通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)的。本發(fā)明涉及一種乳酸菌，利用形態(tài)特征、培養(yǎng)性狀和生理生化特征等微生物學(xué)特性對該乳酸菌鑒定為植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)CCFM8610,該菌株已于2012年5月3日在北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院3號中國科學(xué)院微生物研究所中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，其保藏號為CGMCC No. 6077。所述的植物乳桿菌CCFM8610具有下述性質(zhì)⑴具有耐酸性，在pH3. 0-9. O環(huán)境條件下生長良好，在pH2. 5環(huán)境下存活良好；⑵在體外含鎘培養(yǎng)基中培養(yǎng)，對鎘離子有良好的耐受能力；⑶在體外含鎘水溶液中孵育,對鎘離子有良好的吸附能力；
⑷具有降低鎘暴露小鼠體內(nèi)鎘含量和促進鎘暴露小鼠通過糞便排鎘的作用。本發(fā)明還涉及所述的植物乳桿菌CCFM8610在制備緩解鎘中毒的藥物組合物與發(fā)酵食品中的用途。根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選實施方式，所述的藥物組合物是由植物乳桿菌CCFM8610菌劑與在藥學(xué)上可接受的載體組成的。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，所述的植物乳桿菌CCFM8610菌劑是將含有所述植物乳桿菌CCFM8610的菌液通過常規(guī)冷凍干燥工藝制備或其它方法制備所得到的粉齊U，它含有106CFU/g以上的活性植物乳桿菌CCFM8610。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在藥學(xué)上可接受的載體是一種或多種選自在藥學(xué)上通常使用的填充劑、粘合劑、潤濕劑、崩解劑、潤滑劑或矯味劑的載體。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，所述的藥物組合物是顆粒劑、膠囊劑、片劑、丸劑或口服液劑型。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，所述的發(fā)酵食品是使用含有植物乳桿菌CCFM8610囷種的發(fā)酵劑生廣的乳制品、 制品與果蔬制品。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，所述的發(fā)酵劑是通過下述制備步驟得到的Α、培養(yǎng)基的制備使用以所述培養(yǎng)基總重量計87. 7%水將10%酶水解脫脂乳、O. 5%葡萄糖、I. 5%胰蛋白胨與O. 3%酵母浸膏溶解，然后調(diào)整其pH為6. 8，這樣得到所述的培養(yǎng)基;B、保護劑的制備使用水與保護劑原料混合制備得到含有100g/L脫脂奶粉、30mL/L甘油、100g/L麥芽糊精、150g/L海藻糖、10g/L L-谷氨酸鈉的保護劑；C、將植物乳桿菌CCFM8610菌種按照以所述培養(yǎng)基的重量計2_4%接種量接種到在溫度110-120°C下滅菌8-12min的所述培養(yǎng)基中，在溫度37°C下培養(yǎng)18h，用pH7. 2磷酸鹽緩沖液清洗2-4次，用所述保護劑重懸達到濃度101(lCFU/ml ;接著，讓該懸浮液在溫度37°C下預(yù)培養(yǎng)60min，再進行冷凍干燥得到所述的發(fā)酵劑。根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，所述的乳制品是牛奶、酸奶油或干酪；所述的豆制品是豆奶、豆豉或豆醬；所述的果蔬制品是黃瓜、胡蘿卜、甜菜、芹菜或圓白菜制品。
下面將更詳細地描述本發(fā)明。本發(fā)明涉及一種植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum) CCFM8610,該菌株已于2012年5月3日在北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院3號中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，其保藏號為CGMCC No. 6077。本發(fā)明人根據(jù)下述篩選標準，通過大量篩選實驗與分析驗證，從我國傳統(tǒng)食品，例如泡菜，發(fā)酵奶酒中篩選出的植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum) CCFM8610具有下述性質(zhì)⑴具有耐酸性，在pH3. 0-9. O環(huán)境條件下生長良好，在pH2. 5環(huán)境下存活良好；⑵在體外含鎘培養(yǎng)基中培養(yǎng)，對鎘離子有較好的耐受能力；⑶在體外含鎘水溶液中孵育，對鎘離子有良好的吸附能力； ⑷具有降低鎘暴露小鼠體內(nèi)鎘含量和促進鎘暴露小鼠通過糞便排鎘的作用。下面將詳細描述這些實驗與分析認證結(jié)果。I、具有耐酸性，在pH3. 0-9. O環(huán)境條件下生長良好，在pH2. 5環(huán)境下存活良好
將冷凍保存的本發(fā)明植物乳桿菌CCFM8610分別接種于MRS培養(yǎng)基(例如青島海博生物技術(shù)有限公司的產(chǎn)品)中，在溫度37°C下培養(yǎng)24h，再經(jīng)MRS培養(yǎng)液傳代培養(yǎng)2 3次后，取ImL植物乳桿菌CCFM8610培養(yǎng)液，分別接種于19mL不同pH值(3. 0-9. O)的MRS液體培養(yǎng)基中，在溫度37°C下培養(yǎng)24h，測定初始和培養(yǎng)結(jié)束后的0D_值，利用這個值測量在細菌培養(yǎng)液中的細胞濃度，從而估計細菌的生長情況。0D_值是采用分光光度法在波長600nm處測定的細菌培養(yǎng)液的吸光值，它通常用于表示在細菌培養(yǎng)液中細胞濃度，以確定液體培養(yǎng)物中細菌的生長情況。試驗結(jié)果證明植物乳桿菌CCFM8610在pH3. 0-9. O的環(huán)境中生長良好，因此得以進行后續(xù)實驗。采用與前面所述的同樣培養(yǎng)方式，用1.0mLpH7. 2PBS(磷酸鹽緩沖液)清洗菌體兩次，再用I. OmL pH7. 2磷酸鹽緩沖液重懸，其重懸乳桿菌菌體與9. OmL pH 2. 5人工胃液混合，然后在溫度37°C下進行培養(yǎng)，分別在開始(Oh)和3h時取樣，用MRS瓊脂培養(yǎng)基澆注培養(yǎng)進行平板菌落計數(shù)，測定活菌數(shù)并計算其存活率。存活率是在該培養(yǎng)液中在第3h時的活菌數(shù)對數(shù)值與在第Oh時活菌數(shù)對數(shù)值之比，以％表示。本發(fā)明篩選存活率在80%以上 的菌株進行后續(xù)研究。實驗結(jié)果表明，植物乳桿菌CCFM8610在pH2. 5的人工胃液環(huán)境中的存活率在90%以上。由此可見，植物乳桿菌CCFM8610具有耐酸性，在pH2. 5的環(huán)境下存活良好。2、在體外含鎘培養(yǎng)基中培養(yǎng)，對鎘離子有良好的耐受能力通過植物乳桿菌CCFM8610在不同鎘含量培養(yǎng)基中的生長曲線可以研究其在體外對鎘離子的耐受能力。在無菌條件下，向IL水中加入O. 3423g3CdS04 · 8H20,即得到濃度為150mg/L的鎘離子水溶液。使用這種鎘離子水溶液溶解MRS固體培養(yǎng)基干粉得到含150mg/L鎘離子的MRS液體培養(yǎng)基。同樣地，分別配制50mg/L、500mg/L鎘離子濃度的MRS液體培養(yǎng)基。按照以含鎘離子的MRS液體培養(yǎng)基重量計2%接種量將進入穩(wěn)定期的植物乳桿菌CCFM8610菌液接入所述含鎘離子的MRS液體培養(yǎng)基中。在其培養(yǎng)過程中，分別在0h、2h、4h、6h、8h、12h、16h、20h、24h時進行標準平板計數(shù)，從而得到如附圖I所示的植物乳桿菌CCFM8610生長曲線。附圖I的結(jié)果表明，本發(fā)明植物乳桿菌CCFM8610對鎘離子的具有良好的耐受能力。3、在體外含鎘水溶液中孵育，對鎘離子有良好的吸附能力在無菌條件下，按照耐酸性(在pH3. O能夠生長)的篩選標準，從我國傳統(tǒng)食品，例如泡菜，發(fā)酵奶酒中篩選出9株乳酸菌。對這9株乳酸菌進行純化和活化培養(yǎng)后，將上述菌株轉(zhuǎn)移至150mg/L鎘溶液中，使菌體最終濃度達到lg/L。將含有上述菌株的樣品在37°C下培養(yǎng)Ih,使用Beckman離心機以6000r/min離心20min,再用無菌水洗漆、離心一次。分離除去上清液，向得到的菌體中加入純硝酸，放入微波消解爐中消解20min，得到的消解液使用原子吸收光譜分析儀(Spectr AA 220，Varian，USA)測定鎘離子含量，以確定各菌株對鎘離子的吸附能力。這些測定結(jié)果列于附圖2中。附圖2清楚地表明，與其它試驗菌株相比，本發(fā)明植物乳桿菌CCFM8610對鎘離子的吸附量最大，因此，對鎘離子具有良好的吸附能力。4、具有降低鎘暴露小鼠組織內(nèi)鎘含量和促進鎘暴露小鼠通過糞便排鎘的作用。取20_25g健康雄性昆明小鼠60只，隨機分為3組，每組含小鼠20只陰性對照組，鎘暴露模型對照組與植物乳桿菌CCFM8610治療組。試驗第一天，陰性對照組灌胃O. 5mL普通飲用水；其余2組灌胃O. 5mL鎘濃度為3. 6mg/L的硫酸鎘溶液。第一次灌胃結(jié)束I小時后，陰性對照組和鎘暴露模型組灌胃O. 5mL脫脂乳，植物乳桿菌CCFM8610治療組灌喂O. 5mL按本說明書實施例3制備的濃度2. OX 109CFU/mLCCFM8610脫脂乳懸液。在第一次灌胃結(jié)束48小時后處死所有小鼠，分別取肝、腎，消化處理后采用上述原子吸收分光光度法測定組織中的鎘含量。這些測定結(jié)果列于附圖3中。在第一次灌胃結(jié)束后的4h，8h，12h，24h和48h分別采集小鼠的糞便，消化處理后測定糞便中的鎘含量。這些測定結(jié)果列于附圖4中。 通過對鎘暴露模型組(僅灌胃鎘)及植物乳桿菌CCFM8610組治療組(灌胃鎘后I小時灌胃CCFM8610)小鼠體內(nèi)肝臟、腎臟及糞便中的鎘含量的比較，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明植物乳桿菌CCFM8610能夠降低小鼠肝臟、腎臟、中的鎘含量，并促進小鼠通過糞便將鎘排出。本發(fā)明的植物乳桿菌CCFM8610具有下述生物學(xué)特性菌體特征呈革蘭氏染色陽性桿狀細菌，菌體約O. 9-1. 2 μ m寬，3-8 μ m長，不形成 芽孢，兩端呈鈍圓形，參見附圖5。菌落特征在MRS培養(yǎng)基上形成明顯的菌落，直徑在O. 3-2. 3mm之間，正面形態(tài)圓形，側(cè)面形態(tài)呈突起狀，邊緣整齊，乳白色，不透明，表面濕潤光滑，不產(chǎn)生色素，參見附圖6。生長特性該菌株的最低生長溫度為12°C，最高生長溫度為43°C，在溫度30_37°C下生長最佳，最高和最低初始生長pH為9. O和2. 5，最適生長初始pH為6. O ;本發(fā)明植物乳桿菌CCFM8610菌株的延遲期相對較短，4h左右開始進入對數(shù)生長期，16h就達到穩(wěn)定期。本發(fā)明植物乳桿菌保存方法所述植物乳桿菌CCFM8610原始菌種在溫度_75°C下以30%重量百分數(shù)的甘油懸液形式保存，或者在溫度4°C下以冷凍干燥菌粉的形式保存?zhèn)溆谩１景l(fā)明植物乳桿菌CCFM8610培養(yǎng)方法與培養(yǎng)條件在MRS培養(yǎng)基中在兼性厭氧條件與溫度37°C的條件下培養(yǎng)18-36h即可使用。本發(fā)明還涉及所述的植物乳桿菌CCFM8610在制備具有排鎘作用的藥物組合物與發(fā)酵食品中的用途。所述的藥物組合物是植物乳桿菌CCFM8610菌劑與在藥學(xué)上可接受的載體組成的。根據(jù)本發(fā)明，所述的植物乳桿菌CCFM8610菌劑是采用通常的冷凍干燥制備技術(shù)將含有所述的植物乳桿菌的菌液制成的凍干粉劑，或是采用其它方法如噴霧干燥法制備得到的粉劑。所述的植物乳桿菌CCFM8610菌劑含有106CFU/mL以上的活性植物乳桿菌CCFM8610。植物乳桿菌CCFM8610含量測定方法是本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員熟知的MRS平板菌落計數(shù)法。在所述的藥物組合物中，所述植物乳桿菌CCFM8610菌劑的量是所述藥物組合物重量的15-35%，優(yōu)選地是18-32%，更優(yōu)選地是20_30%。根據(jù)本發(fā)明，在藥學(xué)上可接受的載體應(yīng)該是指在藥學(xué)領(lǐng)域中的常規(guī)藥物載體，例如是一種或多種選自在藥學(xué)上通常使用的填充劑、粘合劑、潤濕劑、崩解劑、潤滑劑或矯味劑的載體。根據(jù)本發(fā)明，所述的填充劑應(yīng)該理解是用來增加片劑重量和體積而便于壓片的輔料稀釋劑；或者應(yīng)該理解是用以吸收原料中多余液體成分的輔料吸收劑。所述的填充劑選自淀粉、蔗糖、乳糖、硫酸鈣或微晶纖維素。優(yōu)選地，所述的填充劑選自淀粉、蔗糖或微晶纖維素。更優(yōu)選地，所述的填充劑選自淀粉或微晶纖維素。根據(jù)本發(fā)明，所述的潤濕劑應(yīng)該理解是藥物本身無粘性，但可潤濕其藥物原輔料并誘發(fā)其粘性而制成顆粒的液體。所述的潤濕劑選自水、乙醇、淀粉或糖漿。
優(yōu)選地，所述的潤濕劑選自水、乙醇或淀粉。本發(fā)明使用潤濕劑的量是以所述藥物組合物總重量計O. 1-3. 0%。根據(jù)本發(fā)明，所述的粘合劑應(yīng)該理解是當原料藥物本身無粘性或粘性不足時，需加入粘性物質(zhì)以便于制粒，這種粘性物質(zhì)稱為粘合劑。所述的粘合劑選自纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠或聚乙烯吡咯烷酮。優(yōu)選地，所述的粘合劑選自纖維素衍生物、明膠或聚乙烯吡咯烷酮。更優(yōu)選地，所述的粘合劑選自明膠或聚乙烯吡咯烷酮。本發(fā)明使用粘合劑的量是以所述藥物組合物總重量計O. 5-5. 0%。根據(jù)本發(fā)明，所述的崩解劑應(yīng)該理解是一種能夠加入片劑中而促進其片劑在胃腸液中快速崩解成細小粒子的輔料。人們知道，片劑經(jīng)過壓縮后的硬度大，如果其中不含有可以促進崩解作用的輔料，它在胃腸道中崩解很慢，影響療效。所述的崩解劑選自羧甲基淀粉鈉、羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素、瓊脂、碳酸鈣或碳酸氫鈉。優(yōu)選地，所述的崩解劑選自羧甲基淀粉鈉、羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素、瓊脂或碳酸氫鈉。更優(yōu)選地，所述的崩解劑選自羧甲基淀粉鈉、羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素或碳酸氫鈉。本發(fā)明使用崩解劑的量是以所述藥物組合物總重量計5. 0-15. 0%。根據(jù)本發(fā)明，所述的潤滑劑應(yīng)該理解是一種有利于提高片劑在制粒過程中的流動性，防止片劑材料粘附在制片機模子上，有利于片劑脫模的化學(xué)物質(zhì)。所述的潤滑劑選自滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、微粉硅膠或聚乙二醇。優(yōu)選地，所述的潤滑劑選自滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂或聚乙二醇。更優(yōu)選地，所述的潤滑劑選自滑石粉或硬脂酸鈣。本發(fā)明使用潤滑劑的量是以所述藥物組合物總重量計O. 5-3. 0%。根據(jù)本發(fā)明，所述的矯味劑應(yīng)該理解是在藥品中用以改善或屏蔽藥物不良氣味和味道，使病人難以覺察藥物強烈苦味或其它異味，例如辛辣、刺激等的藥用輔料。所述的矯味劑例如選自單糖漿、蔗糖、卵磷脂、橙皮糖漿或櫻桃糖漿的甜味劑；檸檬、茴香或薄荷油的芳香劑；海藻酸鈉、阿拉伯膠、明膠、甲基纖維素或羧甲基纖維素鈉的膠漿劑；檸檬酸、酒石酸與碳酸氫鈉混合物的泡騰劑。優(yōu)選地，所述的矯味劑選自單糖漿、蔗糖、橙皮糖漿或櫻桃糖漿的甜味劑；檸檬或薄荷油的芳香劑；海藻酸鈉、阿拉伯膠、明膠或羧甲基纖維素鈉的膠漿劑；酒石酸與碳酸氫鈉混合物的泡騰劑。更優(yōu)選地，所述的矯味劑選自蔗糖、橙皮糖漿或櫻桃糖漿的甜味劑；檸檬油芳香劑；海藻酸鈉或阿拉伯膠的膠漿劑；酒石酸與碳酸氫鈉混合物的泡騰劑。本發(fā)明使用矯味劑的量是以所述藥物組合物總重量計O. 5%-2. 0%。本發(fā)明的植物乳桿菌CCFM8610菌劑可以與在藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑組合制成各種劑型，例如顆粒劑、膠囊劑、片劑、丸劑或口服液，其中在藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑可以根據(jù)不同劑型進行選擇，所使用的這些載體或賦形劑及其用量對于制藥技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員都是容易確定的，也是顯而易見的。在本發(fā)明中，采用制藥技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員熟知的普遍使用的方法和設(shè)備制備本發(fā)明藥物顆粒劑、膠囊劑、片劑、丸劑或口服液。 所述的“劑型”一般應(yīng)該理解是適用于人的單劑量藥物形式，單個劑型含有為達到所需藥量的預(yù)定活性物質(zhì)，例如本發(fā)明的植物乳桿菌CCFM8610菌劑。在本發(fā)明中，所述的發(fā)酵食品是使用含有植物乳桿菌CCFM8610菌種的發(fā)酵劑生廣的乳制品、 制品與果蔬制品。。所述發(fā)酵劑的制備方法如下Α、培養(yǎng)基的制備使用以所述培養(yǎng)基總重量計87. 7%水將10%酶水解脫脂乳、O. 5%葡萄糖、I. 5%胰蛋白胨與O. 3%酵母浸膏溶解，然后調(diào)整其pH為6. 8，這樣得到所述的培養(yǎng)基;B、保護劑的制備使用水與保護劑原料制備得到含有100g/L脫脂奶粉、30mL/L甘油、100g/L麥芽糊精、150g/L海藻糖、10g/L L-谷氨酸鈉的保護劑；C、植物乳桿菌CCFM8610按照以所述培養(yǎng)基的重量計2_4%接種量接種到在溫度110-120°C下滅菌8-12min的所述培養(yǎng)基中，然后在溫度37°C下培養(yǎng)18h，用pH7. 2磷酸鹽緩沖液清洗2-4次，用所述保護劑重懸達到濃度101(lCFU/ml ;接著，讓該懸浮液在溫度37°C下預(yù)培養(yǎng)60min，再采用凍干法制成所述的發(fā)酵劑。所述的乳制品是牛奶、酸奶油或干酪。在本發(fā)明中，所述的牛奶應(yīng)該理解是牛乳、馬乳或還原乳。所述的還原乳是用以還原乳總重量計10-15%奶粉與85-90%軟化水配制的。所述的奶粉是目前市場上廣泛銷售的
口
廣BH ο所述的酸奶油是稀奶油經(jīng)乳酸菌發(fā)酵制成的奶油。酸奶油比甜奶油有更多的優(yōu)越性，香味更濃郁，奶油產(chǎn)量也更高；另外由于乳酸菌抑制了有害微生物，所以消毒殺菌后再次污染微生物的風險也較低。所述的干酪是由牛奶經(jīng)發(fā)酵制成的一種營養(yǎng)價值很高的食品。所述的豆制品是豆奶、豆豉或豆醬。它們都是我國的傳統(tǒng)食品或調(diào)味品。所述的果蔬制品是黃瓜、胡蘿卜、甜菜、芹菜或圓白菜制品。在生產(chǎn)乳制品、豆制品與果蔬制品時，按照下述方法使用本發(fā)明的植物乳桿菌CCFM8610菌劑發(fā)酵劑通常，在生產(chǎn)乳制品、豆制品和果蔬制品的常規(guī)生產(chǎn)過程中，把本發(fā)明的植物乳桿菌CCFM8610菌劑發(fā)酵劑按照常規(guī)使用量接種到待處理的原料中，在能夠使所述植物乳桿菌CCFM8610繁殖的溫度、壓力下進行發(fā)酵或存活，其代謝產(chǎn)物使發(fā)酵制品具有一定的酸度、香味等優(yōu)異特性，同時使產(chǎn)品延長了保藏時間，改善了產(chǎn)品營養(yǎng)價值和消化性。[有益效果]本發(fā)明的植物乳桿菌CCFM8610具有耐酸性，在體外對鎘離子有良好的耐受和吸附能力，可降低小鼠肝臟和腎臟中的鎘含量，并促進小鼠通過糞便將鎘排出體外。所述的植物乳桿菌CCFM8610可用于制備具有排鎘功能的藥物組合物與發(fā)酵食品，具有非常廣泛的應(yīng)用前景。

圖I是植物乳桿菌CCFM8610于含起始濃度為50mg/L，150mg/L, 500mg/L的鎘離子培養(yǎng)基中的生長曲線；圖2是9株乳酸菌對鎘離子的吸附情況。 其中CCFM8610, CCFM8614和CCFM8661為植物乳桿菌。CCFM8761為羅伊氏乳桿菌。CCFM8004為保加利亞乳桿菌。CCFM8602為加氏乳桿菌。LGG為鼠李糖乳桿菌。CCFM8622為兩歧雙歧桿菌。CCFM8147為德氏乳桿菌。圖3是植物乳桿菌CCFM8610對鎘暴露小鼠肝臟和腎臟中鎘水平的降低作用；
a,b, c表示不同字母所代表的組別都存在顯著性差異(P〈0. 05)。圖4是植物乳桿菌CCFM8610促進小鼠通過糞便排鎘的作用；a，b表示不同字母所代表的組別都存在顯著性差異(p〈0. 05)。圖5是植物乳桿菌CCFM8610的菌體形態(tài)(1000X )。圖6是植物乳桿菌CCFM8610的菌落形態(tài)。
具體實施方式實施例I :植物乳桿菌CCFM8610對鎘離子的耐受能力實驗在無菌條件下，向IL水中加入O. 3423g 3CdS04 · 8H20，得到150mg/L的鎘離子水溶液。使用這種鎘離子水溶液溶解MRS培養(yǎng)基固體配料，得到含150mg/L鎘離子的MRS液體培養(yǎng)基。MRS培養(yǎng)基是本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員熟知的培養(yǎng)基，它含有胰蛋白胨、酵母浸膏、葡萄糖、醋酸鈉、檸檬酸二銨、吐溫80、硫酸鎂、硫酸錳，pH 6. 2 6. 4。以與前面描述的同樣方式配制含有50mg/L與500mg/L鎘離子濃度的MRS液體培養(yǎng)基。將進入穩(wěn)定期的植物乳桿菌CCFM8610按照以含鎘的MRS液體培養(yǎng)基重量計2%接種量接種于所述的含鎘MRS液體培養(yǎng)基中，在37 °C條件下進行培養(yǎng)，分別在Oh、2h、4h、6h、8h、12h、16h、20h、24h時取樣，進行標準平板計數(shù)，得到如附圖I所示的植物乳桿菌CCFM8610生長曲線。另外，將ImL所述的菌液接入不含鎘的MRS液體培養(yǎng)基中，在同樣條件下進行培養(yǎng)并計數(shù)，其結(jié)果作為空白對照結(jié)果，這些試驗結(jié)果也列于附圖I中。由附圖I可以看出，在三個不同鎘離子濃度下，植物乳桿菌CCFM8610雖然在開始時生長受到抑制，但隨后其生長量迅速增加。24h時，CCFM8610在50mg/L與150mg/L鎘離子濃度中的生長量已經(jīng)接近了空白對照組。因此，其結(jié)果表明植物乳桿菌CCFM8610對鎘離子具有良好的耐受能力。實施例2 :植物乳桿菌CCFM8610對鎘離子的吸附能力實驗
按照耐酸性(在pH3. O環(huán)境中能夠生長)的篩選標準，從我國傳統(tǒng)食品，例如泡菜，發(fā)酵奶酒中篩選出9株乳酸菌，將這9株乳酸菌在無菌條件下使用MRS培養(yǎng)基進行純化和活化。將這些活化菌液振蕩均勻，以轉(zhuǎn)速6000r/min進行離心15min。得到的菌體轉(zhuǎn)移到裝有150mg/L鎘離子濃度溶液的容器中，而空白組則轉(zhuǎn)移到去離子水中。根據(jù)菌體質(zhì)量確定藍蓋瓶中液體的體積，使菌體的最終濃度達到lg/L。將以上樣品于溫度37°C下培養(yǎng)lh。使用Beckman離心機以轉(zhuǎn)速6000r/min離心20min,再用無菌水洗漆、離心一次。分離除去上清液，向得到的菌體中加入純硝酸，放入微波消解爐中消解20min，得到的消解液使用本申請說明書描述的原子吸收光譜分析儀與方法測定鎘離子含量，以確定不同菌株吸附鎘離子的能力。其試驗結(jié)果如附圖2所示。由附圖2可以看出，不同的菌種對鎘離子的吸附能力差異較大。其中植物乳桿菌CCFM8610的吸附能力最強，可吸附10. 92mg/g鎘離子，而德氏 乳桿菌CCFM8147對鎘離子的吸附能力較差，只能吸附3. 22mg/g的鎘離子，其吸附能力遠低于本發(fā)明的植物乳桿菌CCFM8610。實施例3 :植物乳桿菌CCFM8610灌喂小鼠的耐受劑量實驗將植物乳桿菌CCFM8610凍干菌粉重懸于脫脂乳中，制成濃度為2. OX 109cfu/mL的懸液。取約20g健康雄性昆明小鼠10只，每日給予該濃度懸液灌胃一次，觀察一周，記錄死亡和體重情況。這些試驗結(jié)果列于表I中。這些結(jié)果表明，喂食濃度2. OX 109cfu/mL的植物乳桿菌CCFM8610未對小鼠造成明顯影響，體重明顯上升，無死亡現(xiàn)象產(chǎn)生。小鼠外觀無明顯病
理癥狀。表I :喂食濃度2. OX 109cfu/mL的植物乳桿菌CCFM8610對小鼠體重的變化情況
時間(天) I_2_3_4_5_6_7
體—I (g) 22.3土2.9 22.9±1.3 23.1±2.2 23.2±2.1 23.6±0.9 24.6±1.1 25.0土1.2 死 I -fn-------注_:小鼠無死亡實施例4 :植物乳桿菌CCFM8610對鎘暴露小鼠肝臟和腎臟中鎘水平的降低作用取20_25g健康雄性昆明小鼠60只，隨機分為3組，每組含小鼠20只陰性對照組，鎘暴露模型對照組與植物乳桿菌CCFM8610治療組。試驗第一天，陰性對照組灌胃O. 5mL普通飲用水；其余2組灌胃O. 5mL鎘濃度為3. 6mg/L的硫酸鎘溶液。第一次灌胃結(jié)束I小時后，陰性對照組和鎘暴露模型組灌胃O. 5mL脫脂乳，植物乳桿菌CCFM8610治療組灌喂O. 5mL按本說明書實施例3制備的濃度2. OX 109CFU/mL CCFM8610脫脂乳懸液。在第一次灌胃結(jié)束48小時后處死所有小鼠，分別取肝臟和腎臟，消化處理后采用本申請說明書描述的原子吸收分光光度法測定組織中的鎘含量。這些試驗結(jié)果如附圖3所示。通過對鎘暴露模型組(僅灌胃鎘)及植物乳桿菌CCFM8610組治療組(灌胃鎘后I小時灌胃CCFM8610)小鼠體內(nèi)肝臟和腎臟中的鎘含量的比較可以發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的植物乳桿菌CCFM8610治療組中小鼠肝臟和腎臟中的鎘含量均比陰性對照組高，但低于鎘暴露模型對照組。肝臟和腎臟是鎘攻擊機體的靶器官，也是鎘最易在機體中蓄積的兩個器官。在鎘暴露后一小時內(nèi)灌胃CCFM8610可使小鼠肝臟和腎臟中的鎘含量明顯降低，均具有顯著性(P〈0. 05),這也說明植物乳桿菌CCFM8610確實具有降低鎘暴露小鼠體內(nèi)鎘含量的作用。實施例2已經(jīng)表明植物乳桿菌CCFM8610對鎘離子有較強的吸附能力，CCFM8610進入機體后可能迅速吸附鎘離子，從而阻止鎘離子被腸道吸收進入血液和組織。實施例5 :植物乳桿菌CCFM8610促進鎘暴露小鼠通過糞便排鎘的作用取20_25g健康雄性昆明小鼠60只，隨機分為3組，每組含小鼠20只陰性對照組，鎘暴露模型對照組與植物乳桿菌CCFM8610治療組。試驗第一天，陰性對照組灌胃O. 5mL普通飲用水；其余2組灌胃O. 5mL鎘濃度為3. 6mg/L的硫酸鎘溶液。第一次灌胃結(jié)束I小時后，陰性對照組和鎘暴露模型組灌胃O. 5mL脫脂乳，植物乳桿菌CCFM8610治療組灌喂O. 5mL按本說明書實施例3制備的濃度2. OX 109CFU/mL CCFM8610脫脂乳懸液。在第一次灌胃結(jié) 束后的4h，8h，12h，24h和48h分別采集小鼠的糞便，消化處理后采用本申請說明書描述的原子吸收分光光度法測定糞便中的鎘含量。這些試驗結(jié)果如附圖4所示，陰性對照組糞便中無法檢測到鎘，因此在圖中沒有顯示。通過對鎘暴露模型組(僅灌胃鎘)及植物乳桿菌CCFM8610組治療組(灌胃鎘后I小時灌胃CCFM8610)小鼠不同時間段糞便中的鎘含量比較可以發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的植物乳桿菌CCFM8610治療組中的小鼠在8h，12h及24h糞便中的鎘含量均比鎘暴露模型組要高，且具有顯著性(P〈0. 05)，這也說明植物乳桿菌CCFM8610確實具有促進鎘暴露小鼠排鎘的作用。實施例2已經(jīng)表明植物乳桿菌CCFM8610對鎘離子有較強的吸附能力，CCFM8610進入機體后可能迅速吸附鎘離子，并通過糞便排出體外，從而達到排鎘的效果。以上這些動物實驗表明，本發(fā)明植物乳桿菌CCFM8610能夠促進小鼠通過糞便排鎘，并顯著降低鎘暴露小鼠組織內(nèi)的鎘含量。應(yīng)用實施例I :利用本發(fā)明植物乳桿菌CCFM8610制造含該菌的牛乳按照下述步驟制備發(fā)酵劑A、培養(yǎng)基的制備使用以所述培養(yǎng)基總重量計87. 7%水將10%酶水解脫脂乳、O. 5%葡萄糖、I. 5%胰蛋白胨與O. 3%酵母浸膏溶解，然后調(diào)整其pH為6. 8，這樣得到所述的培養(yǎng)基；所述的酶水解脫脂乳、葡萄糖、胰蛋白胨與酵母浸膏都是目前市場上銷售的產(chǎn)品。B、保護劑的制備使用水與保護劑原料制備得到含有100g/L脫脂奶粉、30mL/L甘油、100g/L麥芽糊精、150g/L海藻糖、10g/L L-谷氨酸鈉的保護劑。C、植物乳桿菌CCFM8610按照以所述培養(yǎng)基的重量計3%接種量接種到在溫度110-120°C下滅菌8-12min的所述培養(yǎng)基中，然后在溫度37°C下培養(yǎng)18h，用pH7. 2磷酸鹽緩沖液清洗3次，用所述保護劑重懸達到濃度101(lCFU/ml ;接著，讓該懸浮液在溫度37°C下預(yù)培養(yǎng)60min，再采用凍干法制成所述的發(fā)酵劑。將原料乳脫脂奶在95°C熱殺菌20min，然后冷卻至4°C，再加入上述制備的植物乳桿菌CCFM8610發(fā)酵劑，使其濃度達到106CFU/ml以上，在4°C下冷藏保存，于是得到含本發(fā)明植物乳桿菌CCFM8610活菌的牛乳。應(yīng)用實施例2 :利用本發(fā)明植物乳桿菌CCFM8610制造含該菌的豆奶采用軟水浸泡大豆，在溫度80°C下浸泡2h，再去除大豆皮。接著，浙去浸泡水，再加沸水磨漿，并在高于80°C的溫度條件下保溫12min。得到的漿料用150目篩網(wǎng)過濾，接著進行離心分離，得到的離心液即為粗豆奶，再將它加熱到溫度140-150°C，然后將熱粗豆奶迅速導(dǎo)入真空冷卻室進行抽真空，所述粗豆奶中的異味物質(zhì)隨著水蒸汽迅速排出。經(jīng)過真空脫氣后，將其溫度降至約37°C，再接入本發(fā)明的植物乳桿菌CCFM8610工作發(fā)酵劑，使其濃度達到106CFU/ml以上，在溫度4°C下冷藏保存，于是得到含本發(fā)明植物乳桿菌CCFM8610活菌的豆奶。應(yīng)用實施例3 :利用本發(fā)明植物乳桿菌CCFM8610制造含該菌的果蔬飲料選用新鮮蔬菜洗凈后榨汁，接著進行高溫瞬間滅菌，在溫度140°C下高溫熱殺菌2秒后，立即降溫到溫度約37°C，再接入本發(fā)明制備的植物乳桿菌CCFM8610菌劑發(fā)酵齊U，使其濃度達到106CFU/mL以上，在溫度4°C下冷藏保存，于是得到含本發(fā)明植物乳桿菌CCFM8610活菌的果蔬飲料。應(yīng)用實施例4 :制備含有本發(fā)明植物乳桿菌CCFM8610的膠囊制品
將本發(fā)明的植物乳桿菌CCFM8610在MRS培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h，在溫度4°C與4000r/min的條件下離心20min，用pH7. 2磷酸鹽緩沖液沖洗兩次，使用脫脂乳重懸菌體使最終菌體濃度達到2 X 101(lCFU/mL。將菌懸液加入到3重量％海藻酸鈉溶液中，充分攪拌，使得細胞均勻地分散于海藻酸鈉溶液中，然后將此混合液擠壓到2重量％氯化鈣溶液中形成膠粒，靜止固化30min，過濾收集膠粒，將收集得到的膠粒進行冷凍干燥48h，得到含本發(fā)明植物乳桿菌CCFM8610的粉劑，把這種粉劑裝入到在目前市場上銷售的藥用膠囊中，得到所述的膠囊制品。應(yīng)用實施例5 :使用本發(fā)明植物乳桿菌CCFM8610制備用于生產(chǎn)乳制品、豆制品以及果蔬制品的發(fā)酵劑將植物乳桿菌CCFM8610按照以所述培養(yǎng)基重量計3%接種量接種于115°C溫度下滅菌IOmin的培養(yǎng)基中，該培養(yǎng)基由以該培養(yǎng)基總重量計10%酶水解脫脂乳、O. 5%葡萄糖、I. 5%胰蛋白胨、O. 3%酵母浸膏和余量水組成，pH6. 8。然后，讓接種植物乳桿菌CCFM8610的培養(yǎng)基在溫度37°C下培養(yǎng)18h，用pH7. 2磷酸鹽緩沖液清洗兩次，再用保護劑重懸達到濃度1010CFU/ml。所述的保護劑含有100g/L脫脂奶粉、30mL/L甘油、100g/L麥芽糊精、150g/L海藻糖與10g/L L-谷氨酸鈉。接著，讓該懸浮液在溫度37°C下預(yù)培養(yǎng)60min，再進行冷凍干燥，得到所述的乳制品、豆制品以及果蔬制品的發(fā)酵劑。應(yīng)用實施例6 :利用本發(fā)明植物乳桿菌CCFM8610制備發(fā)酵乳鮮奶加糖溶解后，在溫度65°C與20MPa條件下進行均質(zhì)，然后在溫度95°C下保溫殺菌5min，再將溫度降到溫度35°C，加入本發(fā)明植物乳桿菌CCFM8610、商業(yè)干粉發(fā)酵劑保加利亞乳桿菌和商業(yè)干粉發(fā)酵劑嗜熱鏈球菌組成的混合菌，它們的質(zhì)量比例為1: 1: 1，所述混合菌的接種量為鮮奶重量的0. 03%，混勻，在溫度35°C下保溫發(fā)酵，凝乳后，在溫度4°C下冷藏24h，得到所述的發(fā)酵乳。應(yīng)用實施例7 :利用本發(fā)明植物乳桿菌CCFM8610制備片劑分別稱取采用冷凍干燥方法制備的本發(fā)明植物乳桿菌CCFM8610菌粉制劑25. 7重量份、淀粉55. O重量份、纖維素衍生物4. 5重量份、羧甲基淀粉鈉12. O重量份、滑石粉0. 8重量份、蔗糖I. O重量份與水I. O重量份，混合，采用常規(guī)方法制成濕顆粒，然后使用中南制藥機械廠生產(chǎn)的壓片機進行壓片，然后使用青州市益康中藥機械有限公司生產(chǎn)的小型藥物 干燥機中進行干燥，再包裝得到本發(fā)明的片劑。
權(quán)利要求
1.一種植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)CCFM8610,該菌株已于 2012 年 5 月 3日在北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院3號中國科學(xué)院微生物研究所中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，其保藏號為CGMCC No. 6077。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的植物乳桿菌CCFM8610，其特征在于它具有下述性質(zhì) ⑴具有耐酸性，在PH3. 0-9. O環(huán)境條件下生長良好，在pH2. 5環(huán)境下存活良好； (2)在體外含鎘培養(yǎng)基中培養(yǎng)，對鎘離子有良好的耐受能力； ⑶在體外含鎘水溶液中孵育，對鎘離子有良好的吸附能力； ⑷具有降低鎘暴露小鼠體內(nèi)鎘含量和促進鎘暴露小鼠通過糞便排鎘的作用。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的植物乳桿菌CCFM8610在制備具有排鎘功能的藥物組合物與發(fā)酵食品中的用途。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于所述的藥物組合物是由植物乳桿菌CCFM8610菌劑與在藥學(xué)上可接受的載體組成的。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用途，其特征在于所述的植物乳桿菌CCFM8610菌劑是將含有所述植物乳桿菌CCFM8610的菌液通過常規(guī)冷凍干燥工藝制備或其它工藝制備所得到的粉齊U，它含有106CFU/g以上的活性植物乳桿菌CCFM8610。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用途，其特征在于在藥學(xué)上可接受的載體是一種或多種選自在藥學(xué)上通常使用的填充劑、粘合劑、潤濕劑、崩解劑、潤滑劑或矯味劑的載體。
7.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的用途，其特征在于所述的藥物組合物是顆粒劑、膠囊劑、片劑、丸劑或口服液劑型。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于所述的發(fā)酵食品是使用含有植物乳桿菌CCFM8610囷種的發(fā)酵劑生廣的乳制品、 制品與果蔬制品。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于所述的發(fā)酵劑是通過下述制備步驟得到的 Α、培養(yǎng)基的制備使用以所述培養(yǎng)基總重量計87. 7%的水將10%酶水解脫脂乳、O. 5%葡萄糖、I. 5%胰蛋白胨與O. 3%酵母浸膏溶解，然后調(diào)整其pH為6. 8，這樣得到所述的培養(yǎng)基; B、保護劑的制備使用水與保護劑原料混合制備得到含有100g/L脫脂奶粉、30mL/L甘油、100g/L麥芽糊精、150g/L海藻糖、10g/L L-谷氨酸鈉的保護劑； C、植物乳桿菌CCFM8610菌種按照以所述培養(yǎng)基的重量計2-4%接種量接種到在溫度110-120°C下滅菌8-12min的所述培養(yǎng)基中，然后在溫度37°C下培養(yǎng)18h，用pH7. 2磷酸鹽緩沖液清洗2-4次，用所述的保護劑重懸達到濃度101(lCFU/ml ;接著，讓該懸浮液在溫度37°C下預(yù)培養(yǎng)60min，再進行冷凍干燥得到所述的發(fā)酵劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的用途，其特征在于所述的乳制品是牛奶、酸奶油或干酪；所述的豆制品是豆奶、豆豉或豆醬；所述的果蔬制品是黃瓜、胡蘿卜、甜菜、芹菜或圓白菜制品O
全文摘要
本發(fā)明涉及一種具有排鎘功能的植物乳桿菌及其用途。本發(fā)明的植物乳桿菌CCFM8610具有耐酸性，在體外對鎘離子有良好的耐受能力和吸附能力，能降低鎘暴露小鼠肝臟和腎臟中的鎘含量，并具有促進鎘暴露小鼠通過糞便排鎘的作用。所述的植物乳桿菌CCFM8610用于具有排鎘功能的藥物組合物與發(fā)酵食品，具有非常廣泛的應(yīng)用前景。
文檔編號C12R1/25GK102827796SQ20121032212
公開日2012年12月19日 申請日期2012年9月3日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月3日 公開號201210322124.發(fā)明者陳衛(wèi), 田豐偉, 翟齊嘯, 王剛, 劉小鳴, 張秋香, 范大明, 趙建新, 張灝 申請人:江南大學(xué)