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      一種用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液的制作方法

      文檔序號:413131閱讀:842來源:國知局
      專利名稱:一種用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液的制作方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明涉及ー種用于禽蛋中沙門氏菌檢測的選擇性增菌培養(yǎng)液,更具體地說,本發(fā)明涉及ー種用于禽蛋中極低數(shù)量受亞致死性損傷沙門氏菌檢測的選擇性增菌培養(yǎng)液,屬于選擇性富集禽蛋中極低數(shù)量受亞致死損傷沙門氏菌的增菌培養(yǎng)液技術(shù)領(lǐng)域。
      背景技術(shù)
      沙門氏菌ewierica)是ー種全球性的人畜共患的食源性致病菌。全球毎年有2億人到13億人感染非傷寒沙門氏菌,其中估計有300萬人死亡。沙門氏菌菌型繁多,全球已經(jīng)發(fā)現(xiàn)2500多個菌型以上,其中鼠傷寒沙門氏菌和腸炎沙門氏菌對人類健康威脅最大。我國的禽蛋總產(chǎn)量居世界首位,而且雞蛋在我國食品消費中占有重要地位。雖然 蛋清中含有溶菌酶、卵轉(zhuǎn)鐵蛋白和堿性的環(huán)境能抑制微生物的生長,但是腸炎沙門氏菌的Ta/ガ基因卻能幫助克服這些抑菌物質(zhì),因此腸炎沙門氏菌是從雞蛋中分離出的最常見的菌型,因而雞蛋和蛋制品是腸炎沙門氏菌最普遍的傳播媒介。2010年美國由雞蛋感染腸炎沙門氏菌而引起近2000例的食物中毒。開發(fā)準(zhǔn)確并具有高靈敏度性的禽蛋中腸炎沙門氏菌的檢測方法,有助于控制沙門氏菌在人類食品安全中構(gòu)成的潛在威脅。由于食品進行冷藏、加熱、冷凍、高鹽、干燥等加工,能使食品中微生物受到亞致死性損傷,在這種狀態(tài)下的微生物將會變得對ー些物質(zhì)敏感。在GB中的食品微生物檢測過程中會用到選擇性增菌液和選擇性培養(yǎng)基,如用于沙門氏菌檢測的四硫磺酸鈉煌綠增菌液(TTB )、木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂(XLD ),這些選擇性增菌液和選擇性培養(yǎng)基中的膽鹽、煌綠等選擇性成分不利于亞致死細胞的生長。因此,為了克服選擇性增菌液對亞致死沙門氏菌的漏檢,GB中規(guī)定使用兩步增菌的過程,即采用非選擇性增菌與選擇性增菌。但是,兩步增菌過程需48小時,不利于快速檢測。目前國內(nèi)外的大多數(shù)研究一般使用人エ接種法制備樣品,其中的沙門氏菌往往較多,檢出較容易。但在實際生產(chǎn)和產(chǎn)品中,沙門氏菌感染食品時數(shù)量往往是很低的,一般認為的極低數(shù)量為I 10 cfu/50g (每50g樣品中I 10個沙門氏菌)。雖然目前開發(fā)了很多快速檢測方法,但是食品中的沙門氏菌常常數(shù)量極低且受亞致死性損傷,造成了漏檢的情況發(fā)生,因此增菌步驟是不可缺少的。目前尚未發(fā)現(xiàn)有針對極低數(shù)量亞致死損傷的沙門氏菌的一歩快速富集增菌培養(yǎng)液的報道,以及在實際食品樣品中的應(yīng)用。國家知識產(chǎn)權(quán)局于2009. 10. 28公開了一件申請?zhí)枮?00810093449. 1,名稱為“引起食物中毒沙門氏菌屬快檢試劑”的發(fā)明專利,該專利涉及ー種引起食物中毒沙門氏菌屬快檢試劑,特別是食源性鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、付傷寒甲、こ沙門氏菌的快檢試劑及其制備方法。該快檢試劑具有快速、準(zhǔn)確、靈敏度高等特點,較傳統(tǒng)方法更具有應(yīng)用價值,對指導(dǎo)臨床診斷和治療,防止濫用抗菌藥物具有重要意義。本發(fā)明是在增菌液中増加了特異性的沙門氏菌屬多價及單價血清,使檢測確診過程縮短至2-6小吋,增菌時能夠利用特異血清的血清凝集反應(yīng),鑒定的準(zhǔn)確率均在97%以上。檢測致病菌時耗時少、靈敏度高,準(zhǔn)確性強。上述專利其特征在于具有如下配方(克/每升蒸餾水)蛋白胨5. 0-10. O ;乳糖
      3.5-4. 5 ;磷酸氫ニ鈉4. 0-5. O ;磷酸ニ氫鈉5. 0-6. O ;復(fù)合生長因子10. 0-20. O ;亞硒酸氫鈉3. 5-4. 5 ;無菌沙門氏菌屬多價及單價血清10-20ml ;蒸餾水加至IOOOmL,調(diào)pH7. I。上述專利是ー種快速檢測試劑,其缺點之一是只針對健康的沙門氏菌進行增菌,沒有特別針對受亞致死性損傷的沙門氏菌的增菌,而生產(chǎn)中遇到的食品中的沙門氏菌常常處于受亞致死性損傷的情況,且沙門氏菌的數(shù)量通常極低;缺點ニ是沒有明確的對非目標(biāo)菌的抑制作用,不能有效避免非目標(biāo)造成的假陽性。國家知識產(chǎn)權(quán)局于2008. 5. 28公開了一件申請?zhí)枮?00710032778. 0,名稱為“沙門氏菌顯色培養(yǎng)基、檢測試劑盒及檢測方法”的發(fā)明專利,該專利涉及的一種沙門氏菌顯色培養(yǎng)基、檢測試劑盒及檢測方法,屬于食品微生物安全監(jiān)測領(lǐng)域。檢測試劑盒由加入了
      O.I O. 5g細菌特異性酶的混合顯色底物M-galactoside的顯色培養(yǎng)基與增菌液A緩沖蛋白胨水培養(yǎng)基、B四硫磺酸鈉煌綠增菌液組成;檢測時,對食品樣品進行前處理,先后利用增菌液A、B進行增菌培養(yǎng),最后將二次增菌液接種至顯色培養(yǎng)基上培養(yǎng),若出現(xiàn)光滑、略凸起、直徑I 3_、邊緣整齊的品紅色菌落,說明樣品存在沙門氏菌。所述的顯色培養(yǎng)基成本低廉,試劑盒配置簡單,檢測方法檢測靈敏度高,周期短、可操作性強、適用于處理大通量的樣本、易于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn),可以廣泛推廣應(yīng)用到食品衛(wèi)生、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。上述專利其特征在于配方為蛋白胨20 30g、酵母膏粉3 7g、氯化鈉4 7g、膽鹽 O. I O. 5g、瓊脂 12 15g、混合顯色底物 M-galactoside 0. 05 0. 95g、Na2C03
      0.02 0. 04g、選擇性添加劑0. 01 0. 05g。上述專利的增菌液缺點是使用的是國標(biāo)中的兩種增菌液,檢測周期長,容易漏 檢,無法對現(xiàn)實生產(chǎn)中極低數(shù)量的受亞致死性損傷的沙門氏菌進行增菌。

      發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明g在解決現(xiàn)有技術(shù)中用于禽蛋中沙門氏菌檢測的選擇性增菌液和選擇性培養(yǎng)基不利于亞致死性細胞的生長,從而使食品中極低數(shù)量的受亞致死性損傷的沙門氏菌出現(xiàn)漏檢的情況,同時現(xiàn)有的非選擇性和選擇性兩步法增菌過程需要48小時,耗費大量時間,不利于快速檢測。我們g在提供ー種用于禽蛋中極低數(shù)量受亞致死性損傷沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液,在達到具有選擇性、不便非目標(biāo)菌增長的同時,克服禽蛋蛋清對沙門氏菌的抑制作用,具有顯著的沙門氏菌增菌效果,避免禽蛋以及禽蛋制品中極低數(shù)量受亞致死性損傷沙門氏菌漏檢,且能夠使極低數(shù)量受亞致死性損傷沙門氏菌快速富集,并在ー個步驟內(nèi)快速檢出的目的。為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的,本發(fā)明的具體技術(shù)方案如下
      ー種用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液,其特征在于包括以下原料組分組成 按照IL所述增菌培養(yǎng)液中的含量計
      蛋白胨7 llg/L
      氯化鈉5 8g/L
      磷酸氫ニ鈉7 9g/L磷酸ニ氫鉀O. 5 lg/L
      煌綠6 8 mg/L
      牛膽鹽O. 5 lg/L
      萘唳酸10 14mg/L
      脫脂牛奶粉15 40g/L。本發(fā)明在上述基本技術(shù)方案的基礎(chǔ)上,其原料組分配比更優(yōu)選的為
      按照IL所述增菌培養(yǎng)液中的含量計
      蛋白胨10. Og/L
      氯化鈉5. Og/L
      磷酸氫ニ鈉9. Og/L
      磷酸ニ氫鉀I. 5g/L
      煌綠6.08mg/L
      牛膽鹽I. Og/L
      萘啶酸13.88mg/L
      脫脂牛奶粉20g/L。一種用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液的制備方法,其特征在干包括以下エ藝步驟
      A、基礎(chǔ)液配制
      將蛋白胨、氯化鈉、磷酸氫ニ鈉、磷酸ニ氫鉀、牛膽鹽、脫脂牛奶粉加入到蒸餾水中,攪拌均勻,煮沸溶解,再加蒸餾水調(diào)節(jié)PH值為7. O 7. 4,滅菌得到基礎(chǔ)液備用;
      B、萘啶酸溶液配制
      將萘啶酸充分溶解于O. 05mol/L的NaOH溶液,溶解后再加入O. 05mol/L的NaOH溶液定容得到萘啶酸溶液;
      C、煌綠溶液配制
      將煌綠充分溶解于蒸餾水中,溶解后再加入蒸餾水定容,滅菌后得到煌綠溶液備用;
      D、增菌培養(yǎng)液配制
      按照先后順序?qū)⒉襟EB得到的萘啶酸溶液、步驟C得到的煌綠溶液加入到步驟A得到的基礎(chǔ)液中,搖勻得到所述的用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液。在步驟A中所述的滅菌為在110 121°C下滅菌15 20min。在步驟C中所述的滅菌為將煌綠溶液存于暗處,自然滅菌至少I天。ー種禽蛋沙門氏菌的檢測方法,其特征在于包括以下步驟
      A、取蛋清、蛋黃、蛋殼分別加入到增菌培養(yǎng)液中;
      B、在36 42で下培養(yǎng)18 24h后,將樣品增菌培養(yǎng)液涂在木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂板(XLD )和固體培養(yǎng)基(TSAYE )上,計算非目標(biāo)菌;
      C、采用PCR擴增hilA基因,檢測樣品增菌培養(yǎng)液中的沙門氏菌。在步驟A中所述的蛋清與增菌培養(yǎng)液的體積比為1:9,蛋黃與增菌培養(yǎng)液的體積比為1:9,蛋殼加入到20 IOOml的增菌培養(yǎng)液中。本發(fā)明帶來的有益技術(shù)效果
      I、本發(fā)明為了解決現(xiàn)有技術(shù)中用于禽蛋中沙門氏菌檢測的選擇性增菌液和選擇性培養(yǎng)基不利于亞致死性細胞的生長,使得食品中極低數(shù)量的受亞致死性損傷的沙門氏菌出現(xiàn)漏檢的情況,同時現(xiàn)有的非選擇性和選擇性兩步法增菌過程需要48小時,耗費大量時間,不利于快速檢測的問題,提供了一種新的用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液配方。該配方是通過對增菌培養(yǎng)液組分以及配比的優(yōu)化和改進,其幾種組分和配比相互作用,使得該增菌培養(yǎng)液具有選擇性,不會使非目標(biāo)菌增長的同時,克服禽蛋蛋清對沙門氏菌的抑制作用,具有顯著的沙門氏菌增菌效果,避免禽蛋以及禽蛋制品中極低數(shù)量受亞致死性損傷沙門氏菌漏檢,且能夠使極低數(shù)量受亞致死性損傷沙門氏菌快速富集,并在ー個步驟快速檢出禽蛋中的極低數(shù)量受亞致死性損傷沙門氏菌。與現(xiàn)有技術(shù)中的兩步增菌,耗費48小時相比,采用本發(fā)明的增菌培養(yǎng)液,只需要一步增菌,用時24小吋,大大節(jié)約了檢測時間,提高了效率,在時間縮短的同時,本發(fā)明的增菌培養(yǎng)液選擇性的不會對非目標(biāo)菌進行增菌,排除了干擾,提高了檢測準(zhǔn)確度,進ー步的,本發(fā)明的增菌培養(yǎng)液能夠?qū)η莸笆称分袠O低數(shù)量(I 10 cfu/50g)的,且受到亞致死性損傷的沙門氏菌進行增菌,避免了常規(guī)增菌培養(yǎng)液無法對受到亞致死性損傷的沙門氏菌進行增菌造成的漏檢情況,提高了檢測質(zhì)量,保證了食品安全。
      2、本發(fā)明增菌培養(yǎng)液中由于加入了三種抑制劑,三種抑制劑相互配合能抑制非目標(biāo)菌在增菌培養(yǎng)液中的生長,煌綠、牛膽鹽、萘啶酸能抑制大腸桿菌、變形桿菌以及其他的部分革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌;促進劑脫脂牛奶粉能夠克服蛋清的抑制作用,對受到亞致死性損傷的沙門氏菌有提高復(fù)活率的幫助;且本發(fā)明通過響應(yīng)曲面優(yōu)化,確定了促進劑脫脂牛奶粉和三種抑制劑的最適濃度范圍,因此,通過加入促進劑脫脂牛奶粉提高亞致死沙門氏菌的復(fù)活率和克服蛋清的抑制作用,同時在不影響亞致死沙門氏菌復(fù)活的情況下,通過抑制劑來抑制非目標(biāo)菌的生長,簡化國標(biāo)中的兩步增菌步驟,達到對極低數(shù)量受亞致死性損傷沙門氏菌的檢出目的。另外,同樣通過響應(yīng)曲面優(yōu)化,在配方中配比范圍的基礎(chǔ)上,得到組分在增菌培養(yǎng)液中的最佳濃度,使得非目標(biāo)菌的抑制效果和受亞致死性損傷的沙門氏菌的促進效果達到最佳。3、本發(fā)明的配方采用常規(guī)的制備方法,以及常規(guī)的檢測方法就能達到本發(fā)明的發(fā)明目的,更優(yōu)選的,本發(fā)明提供了一種增菌培養(yǎng)液的制備方法和采用增菌培養(yǎng)液檢測禽蛋中沙門氏菌的方法,該制備方法具有操作簡單的優(yōu)點,該檢測方法具有特異性強,檢測靈敏度高,檢測時間短的優(yōu)點。


      本發(fā)明的圖I為實施例13中PCR擴增hilA基因檢測I 15號樣品結(jié)果;
      本發(fā)明的圖2為實施例13中PCR擴增Ai以基因檢測16 30號樣品結(jié)果。
      具體實施例方式實施例I
      ー種用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液,其特征在于包括以下原料組分組成 按照IL所述增菌培養(yǎng)液中的含量計
      蛋白胨7g/L
      氯化鈉5g/L磷酸氫ニ鈉7g/L
      磷酸ニ氫鉀O. 5g/L
      煌綠6 mg/L
      牛膽鹽O. 5g/L
      萘啶酸10mg/L
      脫脂牛奶粉15g/L。實施例2
      ー種用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液,其特征在于包括以下原料組分組成 按照IL所述增菌培養(yǎng)液中的含量計
      蛋白胨llg/L
      氯化鈉8g/L
      磷酸氫ニ鈉9g/L
      磷酸ニ氫鉀lg/L
      煌綠8 mg/L
      牛膽鹽lg/L
      萘啶酸14mg/L
      脫脂牛奶粉40g/L。實施例3
      ー種用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液,其特征在于包括以下原料組分組成 按照IL所述增菌培養(yǎng)液中的含量計
      蛋白胨9g/L
      氯化鈉6. 5g/L
      磷酸氫ニ鈉8g/L
      磷酸ニ氫鉀O. 75g/L
      煌綠7mg/L
      牛膽鹽O. 75g/L
      萘啶酸12mg/L
      脫脂牛奶粉27. 5g/L。實施例4
      ー種用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液,其特征在于包括以下原料組分組成 按照IL所述增菌培養(yǎng)液中的含量計
      蛋白胨8g/L
      氯化鈉7g/L
      磷酸氫ニ鈉8. 5g/L
      磷酸ニ氫鉀O. 8g/L
      煌綠6. 5mg/L
      牛膽鹽0.6g/L
      萘啶酸11.5mg/L
      脫脂牛奶粉33g/L。
      實施例5
      本發(fā)明最佳配比如下
      ー種用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液,其特征在于
      按照IL所述增菌培養(yǎng)液中的含量計
      蛋白胨10. Og/L
      氯化鈉5. Og/L
      磷酸氫ニ鈉9. Og/L
      磷酸ニ氫鉀I. 5g/L
      煌綠6.08mg/L
      牛膽鹽I. Og/L
      萘啶酸13.88mg/L
      脫脂牛奶粉20g/L。上述配比為通過響應(yīng)曲面優(yōu)化,在配方中配比范圍的基礎(chǔ)上,得到組分在增菌培養(yǎng)液中的最佳濃度,使得非目標(biāo)菌的抑制效果和受亞致死性損傷的沙門氏菌的促進效果達到最佳。實驗內(nèi)容
      I.材料與方法 I. I材料
      腸炎沙門氏菌(SahofleBa enterica serovar Enteritidis CVCC3377),菌株于含有20%甘油的TSBYE中于-40で保存,且使用吋,菌株于TSBYE中37で培養(yǎng)24 h,保存于4で以備使用;雞蛋購買于超市,并于4で保存;緩沖蛋白胨水(BPW)、木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂(XLD)含0. 6%酵母浸膏的胰酪胨大豆肉湯(TSBYE)購自廣東環(huán)凱微生物科技有限公司;牛膽鹽(BS)、萘啶酸(NA)、煌綠(BG)購自Sigma公司;脫脂牛奶粉(SM)購自O(shè)xid公司。I. 2 方法
      I.2. I基礎(chǔ)培養(yǎng)基的形成
      BPff是GB中增菌步驟中的第一歩使用的增菌緩沖液,其大部分成分為緩沖劑,能有效地克服食品引起劇烈的PH波動,保護受損的細胞和幫助其復(fù)活。因此BPW作為本發(fā)明的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,成分為蛋白胨10. O 8/し氯化鈉5.0 8/し磷酸氫ニ鈉9.0 8/し磷酸ニ氫鉀1.5
      g/しI. 2. 2單因子試驗
      為確定添加劑的種類和用量,分別將在4で放置40天的IO2 CFU/mL的沙門氏菌接種至含有不同添加劑成分的50 mL BPW中,以不含有添加劑成分的BPW作為空白對照。接種后在37で下靜置培養(yǎng)24 h后測量光密度OD54tl,含有SM成分的小組在37で靜置培養(yǎng)24h后,適當(dāng)稀釋,涂平板于XLD上,37で下培養(yǎng)24 h后進行菌落計數(shù),并計算抑制率。該實驗重復(fù)3次,每小組3個平行,結(jié)果見表I??紤]到促進劑對非目標(biāo)菌也有促進作用,促進劑SM使用較低濃度20 g/L,而FE對目標(biāo)菌的促進作用相對于SM較小,且FE價格昂貴,因此促進劑只使用SM。表I :不同抑制劑及促進劑對目標(biāo)菌生長的影響
      權(quán)利要求
      1.ー種用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液,其特征在于包括以下原料組分組成 按照IL所述增菌培養(yǎng)液中的含量計蛋白胨7 llg/L氯化鈉5 8g/L 磷酸氫ニ鈉7 9g/L 磷酸ニ氫鉀O. 5 lg/L煌綠6 8 mg/L 牛膽鹽O. 5 lg/L 萘唳酸10 14mg/L 脫脂牛奶粉15 40g/L。
      2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液,其特征在于包括以下原料組分組成 按照IL所述增菌培養(yǎng)液中的含量計蛋白胨10.0g/L氯化鈉5. Og/L 磷酸氫ニ鈉9. Og/L 磷酸ニ氫鉀I. 5g/L煌綠6.08mg/L牛膽鹽I. Og/L 萘啶酸13.88mg/L 脫脂牛奶粉20g/L。
      3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的ー種用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液,其特征在于所述用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液的制備方法包括以下エ藝步驟 A、基礎(chǔ)液配制 將蛋白胨、氯化鈉、磷酸氫ニ鈉、磷酸ニ氫鉀、牛膽鹽、脫脂牛奶粉加入到蒸餾水中,攪拌均勻,煮沸溶解,再加蒸餾水調(diào)節(jié)PH值為7. O 7. 4,滅菌得到基礎(chǔ)液備用; B、萘啶酸溶液配制 將萘啶酸充分溶解于O. 05mol/L的NaOH溶液,溶解后再加入O. 05mol/L的NaOH溶液定容得到萘啶酸溶液; C、煌綠溶液配制 將煌綠充分溶解于蒸餾水中,溶解后再加入蒸餾水定容,滅菌后得到煌綠溶液備用; D、增菌培養(yǎng)液配制 按照先后順序?qū)⒉襟EB得到的萘啶酸溶液、步驟C得到的煌綠溶液加入到步驟C得到的基礎(chǔ)液中,搖勻得到所述的用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液。
      4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的ー種用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液,其特征在于所述增菌培養(yǎng)液制備方法的步驟A中,滅菌是在110 121°C下滅菌15 20min。
      5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的ー種用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液,其特征在于所述增菌培養(yǎng)液制備方法的步驟C中,滅菌是將煌綠溶液存于暗處,自然滅菌至少I天。
      6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液,其特征在于采用增菌培養(yǎng)液檢測禽蛋中沙門氏菌的方法,包括以下步驟 A、取蛋清、蛋黃、蛋殼分別加入到增菌培養(yǎng)液中; B、在36 42で下培養(yǎng)18 24h后,將樣品增菌培養(yǎng)液涂在木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂板XLD和固體培養(yǎng)基TSAYE上,計算非目標(biāo)菌; C、采用PCR擴增hilA基因,檢測樣品增菌培養(yǎng)液中的沙門氏菌。
      7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的ー種用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液,其特征在于采用增菌培養(yǎng)液檢測禽蛋中沙門氏菌時,在步驟A中所述的蛋清與增菌培養(yǎng)液的體積比為1:9,蛋黃與增菌培養(yǎng)液的體積比為1:9,蛋殼加入到20 IOOml的增菌培養(yǎng)液中。
      全文摘要
      本發(fā)明涉及一種用于禽蛋中沙門氏菌檢測的增菌培養(yǎng)液,屬于選擇性富集禽蛋中極低數(shù)量受亞致死損傷沙門氏菌的增菌培養(yǎng)液技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明的增菌培養(yǎng)液包括以下原料組分組成按照1L所述增菌培養(yǎng)液中的含量計蛋白胨7~11g/L、氯化鈉5~8g/L、磷酸氫二鈉7~9g/L、磷酸二氫鉀0.5~1g/L、煌綠6~8mg/L、牛膽鹽0.5~1g/L、萘啶酸10~14mg/L、脫脂牛奶粉15~40g/L。本發(fā)明的增菌培養(yǎng)液是一種選擇性富集低數(shù)量受亞致死損傷沙門氏菌的增菌培養(yǎng)液,縮短食品中沙門氏菌檢測的增菌處理步驟的同時,克服漏檢樣品中低數(shù)量亞致死沙門氏菌的缺陷,提高了食品中沙門氏菌檢測的可靠性和準(zhǔn)確度。
      文檔編號C12R1/42GK102864204SQ20121032762
      公開日2013年1月9日 申請日期2012年9月7日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月7日
      發(fā)明者孫群, 李婉麗, 余洋, 祝國強, 鄧鶩遠, 馬沁沁, 溫文婷 申請人:四川大學(xué)
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