一種鹿角膠的制備方法及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了以鹿托盤熬制鹿角膠方法和鹿角膠對肥胖的作用。其特征是以鮮該鹿角膠充分保留了鹿托盤中的營養(yǎng)物質(zhì)，該鹿角膠加入到藥品食品中能起到抑制胰脂肪酶活性的作用，可用于抗肥胖的藥品中應(yīng)用。該鹿角膠能夠有效的抑制胰脂肪酶的活性，從而使食物脂肪的吸收受到抑制而達(dá)到抗肥胖的作用，適合藥品食品應(yīng)用。該物質(zhì)可應(yīng)用于預(yù)防及治療肥胖類疾病。
【專利說明】一種鹿角膠的制備方法及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種鹿角膠的制備方法及其在抗肥胖方面的應(yīng)用。
[0002]肥胖是一種確定為體內(nèi)脂肪過量的慢性病。對于全世界肥胖癥人口的快速增長，世界衛(wèi)生組織(WHO)已將肥胖病確定為全球的流行病。在全世界，5億多人的體重超重，SP體重指數(shù)(BMI)為30及以上者。目前肥胖病人口的增長在人類歷史上首次超過了患營養(yǎng)不良和傳染病的人數(shù)。在我國的發(fā)病率為10% — 20%，在經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)國家發(fā)病率高達(dá)20% —30%或更高。在歐洲某些地區(qū)，年齡在55 — 64歲的人群中，約70%的女性和超過70%的男性為肥胖病人或體重過重者。
[0003]隨著社會生產(chǎn)力的進(jìn)步和發(fā)展，物質(zhì)越來越豐富，人們?nèi)粘Ｉ钏降玫礁纳?，尤其是在飲食方面[I]。居民膳食結(jié)構(gòu)和生活習(xí)慣發(fā)生了很大的變化，隨之而來的是糖尿病、高血壓、血脂異常等慢性疾病的發(fā)病率急劇增加[2]。肥胖作為一種疾病，同時也是許多慢性疾病的重要危險因素，比如，II型糖尿病、心血管病、骨關(guān)節(jié)病、高血壓、免疫功能受損等[3-5]。隨著體重的增加，患病的概率也在上升。世界衛(wèi)生組織已宣布肥胖是最大的全球成年人慢性疾病。肥胖的發(fā)生率在發(fā)達(dá)國家中明顯地增長。而在不發(fā)達(dá)國家中目前增長的比率也很高，美國肥胖的流行比例最高，有35%的人口確定為肥胖。至少有9700萬美國人，為超重或肥胖，從I960年以來這個數(shù)字在持續(xù)增長，趨勢不會減慢。在歐洲，英國是肥胖增長率最高的國家之一，為18%。緊接著是法國和德國，在全世界總共有2.5億以上的人口遭受肥胖。而且，肥胖與死亡率和發(fā)病率有關(guān)，僅在美國每年它就能夠引起300，000多人死亡。超重的人不僅在生理上而且在心理上都會受到不利影響，所以隨著肥胖患者的增加，肥胖已日益受到人們的重視[6]。
[0004]市場上銷售的減肥藥種類繁多，最著名的是Servier公司的左旋酚氟拉明，1996年上市后引起媒體的關(guān)組并帶來巨大銷售額，后因報告有嚴(yán)重的副作用(心臟閥門問題和初期的肺部高血壓)，該藥在1997年9月被撤銷。1997年，美國食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)鹽酸西布曲明上市，該藥可通過其次級(Ml)和初級(M2)胺類代謝產(chǎn)物抑制去甲腎上腺素、多巴胺和5-羥色胺的再攝取，增加飽食感。2001年在我國進(jìn)行的西步曲明上市前臨床驗(yàn)證結(jié)果顯示:經(jīng)過24周的治療，患者體重可降低(6.52±3.95 ) kg,并能夠顯著降低空腹和餐后Ih血糖。但大量臨床研究發(fā)現(xiàn)，服用此類藥物較易出現(xiàn)頭痛、頭暈、口干、口苦、便秘和失眠等不良反應(yīng)，特別是關(guān)于西布曲明對心血管事件的影響一直存有爭議。2010 年，SCOUTs ( Sibutramine Cardiovascular Outcomes Trial)公布了其研究結(jié)果，這是納入患者最多、研究時間最長的有關(guān)西步曲明心血管安全性的隨機(jī)雙盲安慰劑對照研究，近10000例患者納入本研究，平均隨訪3-4年，它評價了已經(jīng)存在心血管高危因素的肥胖癥患者使用西步曲明減重對心血管問題的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與安慰劑組相比，西步曲明組患者主要終點(diǎn)事件停復(fù)蘇等)的風(fēng)險增加了 16%，并由此推斷體重下降并未降低心血管疾病的風(fēng)險。鑒于此結(jié)果，西步曲明被宣布撤市，我國食品藥品監(jiān)督管理局也在2010年底宣布停止西步曲明的生產(chǎn)和臨床使用[7]。
[0005]立莫納班是第1個選擇性大麻素受體I阻斷劑，能夠通過抑制食欲并增加外周脂肪組織脂聯(lián)素mRNA的表達(dá)來改善肥胖相關(guān)的胰島素抵抗等，被認(rèn)為是具有良好臨床應(yīng)用前景的減重藥物，但由于其中樞神經(jīng)系統(tǒng)的不良反應(yīng)，如抑郁和自殺傾向等，始終未能在美國和中國獲準(zhǔn)入市，僅從2006年起在56個歐洲等國家上市，并于2009年撤市。
[0006]由于這些藥品有著的嚴(yán)重副作用，包括涉及到主動脈閥門泄漏和二尖瓣閥門泄漏的心臟閥門損壞。其它更嚴(yán)重的副作用包括呼吸短促，頭暈眼花和死亡，這些副作用的嚴(yán)重性，已促使在2000年歐洲委員會決定從2001年4月開始在歐盟禁止銷售食欲抑制劑藥物。這已明顯地減少了世界范圍對抗肥胖藥物的接受。
[0007]新的觀點(diǎn)認(rèn)為，肥胖是一種有著復(fù)雜病理生理原因并需要長期用藥才能適當(dāng)控制的慢性疾病，這樣就為新藥帶來安全性問題。關(guān)于目前減肥藥不對癥的問題，有關(guān)專家認(rèn)為主要是這些藥無助于多數(shù)病人長期減肥，而且僅有少數(shù)病人從其原來的體重減了 5% —10%。毫不奇怪，肥胖藥的研究與開發(fā)愈來愈強(qiáng)大，目前在開發(fā)中的抗肥胖制劑就有200多種，但多數(shù)都處在早期階段。所以，開發(fā)出一種安全和真正有效的減肥藥將會得到巨大的回報。根據(jù)抗肥胖藥研究專家的觀點(diǎn)，從減肥藥市場的發(fā)展來看，減肥藥有著較大的發(fā)展空間，并且需要多種減肥藥。
[0008]由于減肥藥物越來越多的出現(xiàn)毒副作用的問題，人們也在尋找能代替藥物的天然健康的產(chǎn)品，所以市面出現(xiàn)的一些減肥茶等產(chǎn)品，但此類產(chǎn)品減肥的效果不是很理想。人們對減肥產(chǎn)品的需求迫切，本研究旨在應(yīng)用天然藥物生產(chǎn)無毒副作用的減肥產(chǎn)品，達(dá)到讓人們輕松減肥，健康瘦身的目的。
[0009]鹿角為鹿科動物馬鹿或梅花鹿已骨化的角或鋸茸后翌年春季脫落的角基，分別習(xí)稱馬鹿角、梅花鹿角、鹿角脫盤。歸肝腎經(jīng)；溫腎陽，強(qiáng)筋骨，行血消腫；用于陽痿遺精，腰脊冷痛，陰疽瘡瘍，乳癰初起，淤血腫痛[8]?，F(xiàn)代研究證明，鹿角中膠質(zhì)25%，磷酸鈣50%-60%，碳酸鈣及氮化物。另含氨基酸等營養(yǎng)成分。鹿角膠始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，名為“白膠”，列為上品[8]。鹿角膠的應(yīng)用有2000多年的歷史，其主要氨基酸應(yīng)為L -羥脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸和L -脯氨酸，其中羥脯氨酸為膠原蛋白主要組成成分[9、10]。中醫(yī)用之補(bǔ)益氣血、滋腎生精；主治腎氣不足、陽痿羸瘦、精血虛虧、神倦目昏、腰膝無力、婦女血閉不妊、子宮虛冷、崩漏帶下等癥[11]。
[0010]鹿角膠的現(xiàn)代研究應(yīng)用
現(xiàn)代研究證明，鹿角膠為鹿角加水煎熬濃縮而成的固體膠，呈黃棕色，上部有黃白色泡沫層，質(zhì)脆，易碎，斷面光亮。其性溫，味微甜，有補(bǔ)腎陽、生精血、托瘡生肌的作用，適合腎陽不足、畏寒肢冷、陽痿早泄、腰酸腿軟者服用，也可用于咯血、尿血、月經(jīng)過多、偏于虛寒，以及陰疽內(nèi)陷等病證[15]。
[0011]近年來，鹿角膠由于具有溫補(bǔ)肝腎、益精養(yǎng)血的功效，被廣泛應(yīng)用于各類藥品中，有文獻(xiàn)報道，鹿角膠鈣顆粒劑，以鹿角粉制成顆粒劑，具有補(bǔ)鈣，溫腎陽，強(qiáng)筋骨等功效[16]。采用白茅根、鹿角膠為基本方加味治療，在臨床上觀察研究，證明取得了一定的療效[17]，鹿角膠在婦科臨床上也有一定的應(yīng)用，。適用于腎陽不足，精血虧虛，虛勞羸瘦，吐血尿血之偏于虛寒者，以及陰疽內(nèi)陷等癥，婦人血閉無子，胎動不安，崩中不止。陰虛火旺忌用。[18]鹿角膠是一味兼具滋陰補(bǔ)陽功效的中藥，滋而不膩，溫而不燥，故亦常在調(diào)補(bǔ)氣血陰陽，止血熄風(fēng)中配伍應(yīng)用，優(yōu)于在滋陰中加入附、桂等溫燥藥。[19]臨床應(yīng)用鹿角膠治療血小板減少癥、白細(xì)胞減少癥、再生障礙性貧血等，能使血象及臨床癥狀獲得不同程度的好轉(zhuǎn)，治療體質(zhì)虛弱、畏寒肢冷及慢性循環(huán)障礙，可使血壓上升，體力恢復(fù)。
[0012]近年來，鹿角膠配伍小柴胡湯，辨證治療艾滋病以低熱不退、畏寒肢冷為主證者，可明顯改善臨床癥狀，對控制艾滋病發(fā)展有一定的療效。
[0013]鹿角膠為助陽之品，雖有甘溫之潤之特點(diǎn)，但久用或應(yīng)用不應(yīng)當(dāng)常會導(dǎo)致陽升風(fēng)動，易傷陰動血，故陰虛陽亢、血分有熱及胃火熾盛、外感熱病均應(yīng)忌用，且多以開火或黃酒溶代或入丸散、膏劑[20]。
[0014]鹿角膠的藥理研究:性激素樣作用:鹿角膠給大鼠灌胃，可顯著縮短電刺激誘發(fā)陰莖勃起的潛伏期限，對雄性大鼠精液囊和前列腺有明顯的增重作用，并對雄鼠交配能力有增強(qiáng)趨勢。[21]
鹿角膠的補(bǔ)血功效:鹿角膠給貧血小鼠灌胃，可明顯增加血紅蛋白含量，對紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血球壓積有不同程度的提高趨勢。[22]
鹿角膠的抗疲勞，增強(qiáng)機(jī)體免疫能力:鹿角膠可顯著提高鼠持續(xù)游時間，有明顯抗疲勞作用。
[0015]有實(shí)驗(yàn)證實(shí)鹿角膠溶液能夠降低胃黏膜損傷程度，減少潰瘍，實(shí)驗(yàn)通過肉眼觀察，并測量損傷指 數(shù)，可見鹿角膠組大鼠胃黏膜充血、水腫、壞死、糜爛程度明顯減輕，與無水乙醇組差異有顯著性(P〈0.01)，與氫氧化鋁組無明顯差異(P>0.05)。實(shí)驗(yàn)提示鹿角
膠溶液對強(qiáng)烈的胃黏膜損傷劑-無水乙醇造成的大白鼠胃黏膜損傷，能夠降低胃黏膜
損傷指數(shù)，增強(qiáng)胃黏膜屏障，具有顯著的保護(hù)作用[23]。
[0016]鹿角膠是臨床常用的補(bǔ)益之品，具有補(bǔ)腎陽、益精血之功效，廣泛用于腎虛及氣血虛寒證。臨床配伍得當(dāng)，可起沉疴于指間?，F(xiàn)代實(shí)驗(yàn)研究為臨床應(yīng)用提供了新的依據(jù)。
[0017]近年來治療肥胖的各種新方法中有許多是通過抑制胰脂肪酶的活性從而抑制膳食中甘油三酯的吸收。主要原因在于膳食中的甘油三酯大多只有經(jīng)過食道中脂肪酶作用，降解為甘油二酯、單甘油酯、甘油和脂肪酸后才被人體吸收，而在這些脂肪酶中，胰脂肪酶負(fù)責(zé)50 %~70 %膳食脂肪類物質(zhì)的分解和消化。因此有效抑制胰脂肪酶活性，就可達(dá)到減少脂肪吸收、控制和治療肥胖之目的[24]。
[0018]胰脂肪酶是人類消化脂肪的主要酶。胰脂肪酶由胰腺所分泌，至少有三種形式。①甘油一酯水解酶，在膽鹽和表面活化劑的作用下，能水解在水油界面上的多種不溶性的甘油酯；②膽固醇酯酶，能水解二級醇和膽固醇酯；③脂肪酶，可水解水溶性酯類。它是胃腸道內(nèi)主要的脂肪分解酶。由胰腺腺泡細(xì)胞分泌。在有膽鹽存在時活性增加，分解脂肪為甘油和脂肪酸。最適pH為7~9。應(yīng)用胰脂肪酶抑制劑可有效抑制胰脂肪酶對脂肪的分解催化作用，達(dá)到減少脂肪吸收、控制和治療肥胖的目的。同單一地調(diào)整飲食結(jié)構(gòu)減肥相t匕，脂肪酶抑制劑除了可減輕體重，還對一些肥胖并發(fā)癥如高血壓、高膽固醇和糖尿病有明顯的改善作用[25]。
[0019]鹿角膠的抗肥胖作用尚未見有文獻(xiàn)報告，本專利為鹿角膠的抗肥胖作用提供了依據(jù)。

【發(fā)明內(nèi)容】
[0020]本發(fā)明提供了一種具有抗肥胖作用的鹿角膠的制備方法。該種鹿角膠具有顯著的抑制胰脂肪酶的作用。它具有能夠抑制體重增加，起到預(yù)防和治療肥胖疾病的作用。
[0021 ] 本發(fā)明提供了一種鹿角膠的制備方法，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。
[0022]本發(fā)明公開了鹿角膠在抗肥胖藥品食品中的應(yīng)用。
[0023]本發(fā)明可以用在抗肥胖類藥品食品可接受的載體中。
[0024]本發(fā)明的鹿角膠具有抗肥胖作用，鹿角膠能夠有效的抑制胰脂肪酶的活性，從而使食物脂肪的吸收受到抑制而達(dá)到抗肥胖的作用。本發(fā)明所提供的鹿角膠可以在抗肥胖藥品食品中應(yīng)用。
[0025]本發(fā)明提供了鹿角膠的制備方法，其特征在于:
選取1000g鹿托盤樣品(未粉碎)，加入3倍蒸餾水，放入高壓鍋中進(jìn)行提取，每次30min，一天提取8次，提取3天，直至水變清為止。過濾，合并濾液。將濾液濃縮至30(T500ml，放涼，將膠切成Icm3的小塊，放入凍干機(jī)中凍干3天，即得鹿角膠。
[0026]本發(fā)明鹿角膠的抗肥胖作用，其特征在于:
該鹿角膠充分保留 了鹿托盤中的營養(yǎng)物質(zhì)，該鹿角膠加入到藥品食品中能起到抑制胰脂肪酶活性的作用，可用于抗肥胖的藥品中應(yīng)用。該鹿角膠能夠有效的抑制胰脂肪酶的活性，從而使食物脂肪的吸收受到抑制而達(dá)到抗肥胖的作用，適合藥品食品應(yīng)用。
[0027]本發(fā)明的積極效果在于:
應(yīng)用鹿托盤熬制成的鹿角膠，使得鹿角膠中含有鹿托盤的有效成分。該鹿角膠具有抗肥胖的作用，可以在藥品食品的制備中起到抗肥胖的作用。該鹿角膠有能夠有效的抑制胰脂肪酶的活性的作用，應(yīng)用在藥品食品中具有使食物脂肪的吸收受到抑制而達(dá)到抗肥胖的作用。
[0028]實(shí)驗(yàn)例一鹿角膠的制備方法
選取1000g鹿托盤樣品(未粉碎)，加入3倍蒸餾水，放入高壓鍋中進(jìn)行提取，每次30min，一天提取8次，提取3天，直至水變清為止。過濾，合并濾液。將濾液濃縮至30(T500ml，放涼，將膠切成Icm3的小塊，放入凍干機(jī)中凍干3天，即得鹿角膠。
[0029]
實(shí)驗(yàn)例二鹿角膠對胰脂肪酶的抑制實(shí)驗(yàn)
1、實(shí)驗(yàn)材料
N-三(羥甲基)甲基-2-氨基乙磺酸，氫氧化鈉，氯仿，正庚烷，甲醇，硝酸銅，三乙醇胺，氯化鈉，羥基苯甲醚，浴銅靈，三油酸甘油酯，磷脂酰膽堿，牛黃膽酸鈉，豬胰脂肪酶，
胰脂肪酶抑制率的測定
2、溶液的配制
2.1 TES緩沖鹽的配制
取0.005ml的N-三(羥甲基)甲基-2-氨基乙磺酸(溶于50ml 0.lmol/L)的NaCl溶液中，制成0.lmol/L的TES緩沖鹽，用NaOH調(diào)PH值至7.0。
[0030]2.2氯仿正庚烷混合液(溶液二)
分別取氯仿(三氯甲烷)、正庚烷49ml混勻加入2ml甲醇。
[0031]2.3銅試劑的配制(溶劑三)
分別取硝酸銅2.42g,氫氧化鈉0.48g，三乙醇胺2.94ml，加三重水200ml，再加入66g的氯化鈉用磁力攪拌器振搖混勻而成。
[0032]2.4羥基苯甲醚溶液(溶劑四)
取0.05g羥基苯甲醚溶于100ml氯仿混勻，再加0.1g浴銅靈。
[0033]2.5脂肪乳液
取0.087ml三油酸甘油酯，IOmg磷脂酰膽堿，5mg牛黃膽酸鈉溶于9mlTES緩沖鹽，超聲使其溶解
2.6酶液的配制 用三重水配成lmg/ml
2.7樣品用TES緩沖液分別配成濃度為0.5mg/ml, lmg/ml, 2mg/ml.3.實(shí)驗(yàn)過程 空白組
脂肪乳液(0.1ml) +三重水(0.05ml)+TES緩沖液(0.1ml) — 37°C水溶加熱30min —加入溶劑二 3ml —振搖IOmin —離心IOmin (2000*g)—移除上層液一加入溶劑三Iml —振搖IOmin —離心IOmin (2000*g)—吸取上層液一加入溶劑四1.5ml —在480nm處測定吸光度酶組
脂肪乳液(0.1ml) +酶(0.05ml)+TES緩沖液(0.1ml) — 37°C水溶加熱30min —加入溶劑二 3ml —振搖IOmin —離心IOmin (2000*g)—移除上層液一加入溶劑三Iml —振搖IOmin —離心IOmin (2000*g)—吸取上層液一加入溶劑四1.5ml —在480nm處測定吸光度
樣品組
脂肪乳液(0.1ml) +酶(0.05ml) +樣品溶液(0.1ml) — 37°C水溶加熱30min —加入溶劑二 3ml —振搖IOmin —離心IOmin (2000*g)—移除上層液一加入溶劑三Iml —振搖IOmin —離心IOmin (2000*g)—吸取上層液一加入溶劑四1.5ml —在480nm處測定吸光度
4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
【權(quán)利要求】
1.一種具有抗肥胖作用的鹿角膠的制備方法 具體方法:選取1000g鹿托盤樣品(未粉碎)，加入3倍蒸餾水，放入高壓鍋中進(jìn)行提取，每次30min，一天提取8次，提取3天，直至水變清為止，過濾，合并濾液，將濾液濃縮至30(T500ml，放涼，將膠切成lcm3的小塊，放入凍干機(jī)中凍干3天，即得鹿角膠。
2.根據(jù)權(quán)利要求1，所得的鹿角膠具有抗肥胖的作用。
3.根據(jù)權(quán)利要求1，所得的鹿角膠可用于制作預(yù)防或治療肥胖的藥物或健康食品。
4.根據(jù)權(quán)利要求1，所得的鹿角膠可以制成鹿角膏，鹿角膠軟糖，鹿角膠飲料，鹿角膠巧克力等具有抗肥胖作用的健康功能性`食品。
【文檔編號】A23L2/38GK103768098SQ201210408029
【公開日】2014年5月7日 申請日期:2012年10月23日 優(yōu)先權(quán)日:2012年10月23日
【發(fā)明者】鄭毅男, 高暢, 張傳奇, 王全凱 申請人:鄭毅男