專利名稱：一種含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料的制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬于益生菌飲品技術領域，涉及一種含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料的制備方法。
背景技術：
近年來，益生菌的研究日益深入且被廣泛應用于酸奶的生產(chǎn)。酸乳作為一種細菌發(fā)酵型乳制品，逐漸由高酸性向低酸性發(fā)展，人們普遍喜愛低酸、低脂、富含營養(yǎng)素、具有活 性的酸乳。所謂益生菌，是活的微生物，通過攝入充足的數(shù)量，對宿主產(chǎn)生一種或多種特殊且經(jīng)論證的功能性健康益處。將益生菌如乳酸桿菌和雙歧桿菌，加入到乳制品特別是酸奶中，能產(chǎn)生良好的療效。因此，益生菌的存活率，對于含益生菌的食品的銷路，是非常重要的。然而，由于益生菌的自身生長特性及周圍環(huán)境因素的影響，導致進入市場的產(chǎn)品中活菌含量很低。在澳大利亞和歐洲，專家通過測定不同品牌的酸奶中嗜酸乳桿菌和雙歧桿菌的存活率，發(fā)現(xiàn)多數(shù)酸奶中這些益生菌的含量都非常低，尤其是雙歧桿菌。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明解決的問題在于提供一種含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料的制備方法，通過微膠囊技術對雙歧桿菌進行保護，在一定范圍內(nèi)延長雙歧桿菌制劑及含有雙歧桿菌的產(chǎn)品的保存期。本發(fā)明是通過以下技術方案來實現(xiàn)一種含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料的制備方法，包括以下步驟I)將雙歧桿菌的菌懸液和含有益生元的海藻酸鈉溶液按照I :5 20的體積比例混合，并加入抗氧化劑其質(zhì)量分數(shù)為0. 05% 0. 09%,充分混均后得到雙歧桿菌菌膠液；所述的雙歧桿菌的菌懸液是將雙歧桿菌以I. OX IO11Cfumr1的濃度懸浮在質(zhì)量濃度為0. 85 0. 9%的無菌生理鹽水中；所述的含有益生元的海藻酸鈉溶液中益生元量的質(zhì)量濃度為3 9%，海藻酸鈉的質(zhì)量濃度為I 3% ；2)用壓力噴嘴將雙歧桿菌膠液擠壓入含有乳化劑體積分數(shù)為0. 2 L 0%的大豆油中，雙歧桿菌膠液與大豆油的體積比為I :4 7,充分攪拌,乳化5 20min,然后加入質(zhì)量濃度為I 5%的氯化鈣溶液，靜置20min以上；3)待靜置分層后，傾去上層大豆油，離心得到濕膠囊并用生理鹽水充分洗滌，得到雙歧桿菌微膠囊；4)將保加利亞乳桿菌L6菌液以體積比為3 7%的接種量接種于牛奶或牛奶奶復原乳中，在35 43°C下厭氧發(fā)酵5 18小時，得到發(fā)酵牛奶；5)以質(zhì)量份數(shù)計，將35 50份的發(fā)酵牛奶與5 10份的雙歧桿菌微膠囊，5 10份的濃縮果汁，5 10份的蔗糖，0. 01 0. 02份的牛磺酸，0. 001 0. 002份的維生素E，0.001 - 0. 002份的煙酰胺，0. 001 0. 002份的檸檬酸鋅，0. 15 I. 0份的穩(wěn)定劑和28 50份的水混合均勻，在35 45°C、IOlOMpa條件下均質(zhì)，得到含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料。所述的雙歧桿菌為兩歧雙歧桿菌、長雙歧桿菌或乳雙歧桿菌中的一種。所述的益生元為水蘇糖、低聚異麥芽糖、低聚木糖、低聚果糖、菊糖、低聚半乳糖等其中的一種或幾種。
所述的抗氧化劑為半胱氨酸鹽酸鹽、抗壞血酸、抗壞血酸鈉、異抗壞血酸、異抗壞血酸鈉中的兩種或兩種以上。所述含有益生元的海藻酸鈉溶液中還含有氯化鈉，其質(zhì)量濃度為0. 85 0. 9%。所述的雙歧桿菌為接種于MRS培養(yǎng)基經(jīng)過增殖培養(yǎng)所獲得的。所述的乳化劑為吐溫-80。所述的保加利亞乳桿菌L6在接種之前還進行以下活化I)將保加利亞乳桿菌L6的凍干菌粉接種于裝有滅菌羊奶復原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C厭氧培養(yǎng)10 14h，完成第一次活化；2)按體積分數(shù)計，取3 7%第一次活化的菌液，接種于裝有滅菌羊奶復原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C厭氧培養(yǎng)10 14h，完成第二次活化；3)按體積分數(shù)計，取3 7%第二次活化的菌液，接種于裝有滅菌羊奶復原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C厭氧培養(yǎng)10 14h，完成第三次活化。與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明具有以下有益的技術效果本發(fā)明提供的含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料的制備方法，通過微膠囊技術對雙歧桿菌進行保護，有利于延長雙歧桿菌制劑及含有雙歧桿菌的產(chǎn)品的保存期，在制備雙歧桿菌微膠囊的過程中將乳化法和擠壓法結(jié)合，采用壓力噴嘴將含有抗氧化劑的菌膠液霧化成小液滴噴入油中，比傳統(tǒng)的注射器擠壓法省時省力；由于加入了雙歧桿菌微膠囊，使得每毫升營養(yǎng)快線飲料中的活菌數(shù)在109 IO10CfumL-1且產(chǎn)品中活菌數(shù)下降很慢，室溫保存七個月后產(chǎn)品中得活菌數(shù)仍然能達到IO9CfumL'比直接加入雙歧桿菌菌粉的產(chǎn)品延長了五個月的貨架期，所以在飲用本產(chǎn)品后能使得大量的雙歧桿菌活菌進入腸道，發(fā)揮其益生作用。本發(fā)明還通過加入了除氧劑，解決了在制備微膠囊過程中因為雙歧桿菌與氧氣的接觸所受到的毒害，加入了除氧劑后其每克膠囊活菌數(shù)明顯提高可達到IOltl IO11 ;其活菌數(shù)顯著高于不加除氧劑的雙歧桿菌微膠囊。由于所制備的微膠囊含有雙歧桿菌益生元，當食用了這種雙歧桿菌微膠囊的產(chǎn)品，當微膠囊到達腸道后，在大量雙歧桿菌在腸道釋放的同時，益生元也會在腸道發(fā)揮其增殖作用，可以使腸道內(nèi)的雙歧桿菌活菌數(shù)迅速上升。進一步的，本發(fā)明提供的含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料的制備方法，在制備的雙歧桿菌微膠囊產(chǎn)品中加入了益生元和抗氧化劑，不但保護雙歧桿菌免受有害環(huán)境的毒害還促進了雙歧桿菌的增殖，在一定程度上提高了微膠囊內(nèi)雙歧桿菌的活菌數(shù)，使每克膠囊活菌數(shù)明顯提高可達到101° IO11CfumL'
具體實施例方式下面結(jié)合具體的實施例對本發(fā)明做進一步的詳細說明，所述是對本發(fā)明的解釋而不是限定。實施例I含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料的制備方法，包括以下步驟I)將0. 4g雙歧桿菌凍干菌粉接(兩歧雙歧桿菌)種于18mL MRS液體培養(yǎng)基(購買于青島高科園海博生物技術有限公司)中，在MRS液體培養(yǎng)基中添加占培養(yǎng)基體積0. 05%的半胱氨酸鹽酸鹽，在37°C培養(yǎng)條件下采用此MRS液體培養(yǎng)基活化三次，每次以5%的接種量轉(zhuǎn)接，其中前兩次均在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)20 24h，第三次在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)18h，然后離心(4000r，15min)棄去上清液得菌泥，將菌泥洗兩次滌后與0. 85 0. 9%無菌生理鹽水混合配制成濃度為I. OX IO11CfumL-1菌懸液以備使用。2)配制質(zhì)量濃度2%且含益生元質(zhì)量為5%的海藻酸鈉溶液，IlO0C，滅菌15min，所述的益生元為水蘇糖、低聚異麥芽糖、菊糖中的一種或幾種。3)配制抗氧化劑的濃溶液，過濾除菌以備使用。所述的抗氧化劑為半胱氨酸鹽酸鹽、抗壞血酸。4)將菌懸液和含有益生元的海藻酸鈉溶液按照I :8的體積比例混合，抗氧化劑按照菌膠液總質(zhì)量的0. 05%的添加量加入，并在旋渦混合儀上混合均勻得菌膠液。5)用壓力噴嘴將上述菌膠混合液逐滴滴入大豆油中(含0. 4%的吐溫-80)，菌膠液和大豆油的比例為I :4，用磁力攪拌器攪拌800rpm/min,乳化IOmin,然后快速加入濃度為2%的氯化鈣溶液，靜置30min。6)傾去上層大豆油，通過離心(1000r，5min)得到濕膠囊，用生理鹽水洗滌3次。7)將保加利亞乳桿菌L6以3%接種于牛奶或牛奶奶復原乳中，在37°C下厭氧發(fā)酵18小時，得到發(fā)酵牛奶；8)按質(zhì)量份數(shù)計，將35份的發(fā)酵牛奶與5份的雙歧桿菌微膠囊，5份的濃縮果汁，7份的蔗糖，0. 015份的牛磺酸，0. 0015份的維生素E，0. 0014份的煙酰胺，0. 0016份的檸檬酸鋅，0. 15份的穩(wěn)定劑及50份的水混合均勻，在37°C、l(T20Mpa條件下均質(zhì)，即制成產(chǎn)品。實施例2含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料的制備方法，包括以下步驟I)將0. 4g雙歧桿菌凍干菌粉(長雙歧桿菌)接種于18mL MRS液體培養(yǎng)基(購買于青島高科園海博生物技術有限公司)中，在MRS液體培養(yǎng)基中添加占培養(yǎng)基體積0. 05%的半胱氨酸鹽酸鹽，在37°C培養(yǎng)條件下采用此MRS液體培養(yǎng)基活化三次，每次以5%的接種量轉(zhuǎn)接，其中前兩次均在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)20 24h，第三次在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)18h，然后離心(4000r，15min)棄去上清液得菌泥，將菌泥洗兩次滌后與0. 85 0. 9%無菌生理鹽水混合配制成濃度為I. OX IO11CfumL-1菌懸液以備使用。2)配制濃度I. 5%且含益生元量為3%的海藻酸鈉溶液，110°C，滅菌15min。所述的益生元為低聚異麥芽糖、低聚木糖、低聚果糖、低聚半乳糖中的一種或兩種。所述的抗氧化劑為抗壞血酸、抗壞血酸鈉、異抗壞血酸、異抗壞血酸鈉中的兩種。3)制備抗氧化劑，配制抗氧化劑的濃溶液，過濾除菌以備使用。4)將菌懸液和含有益生元的海藻酸鈉溶液按照I :10的比例混合，抗氧化劑按照菌膠液總質(zhì)量的0. 03%的添加量加入，并在旋渦混合儀上混合均勻得菌膠液。5)用壓力噴嘴將上述菌膠混合液逐滴滴入大豆油中(含0. 4%的吐溫-80)，菌膠液和大豆油的比例為I :5，用磁力攪拌器攪拌800rpm/min,乳化15min,然后快速加入濃度為I. 5%的氯化鈣溶液，靜置30min。6)傾去上層大豆油,通過離心得到濕膠囊(1000r,5min),用生理鹽水洗漆3次。7)將保加利亞乳桿菌L6以3%接種于牛奶或牛奶奶復原乳中，在37°C下厭氧發(fā)酵18小時，得到發(fā)酵牛奶；8)按質(zhì)量份數(shù)計，將36份的發(fā)酵牛奶與6份的雙歧桿菌微膠囊，5份的濃縮果汁，5份的蔗糖，0. 01份的?；撬?，0. 001份的維生素E，0. 001份的煙酰胺，0. 001份的檸檬酸鋅，
0.15份的穩(wěn)定劑及28份的水混合均勻，在37°C、l(T20Mpa條件下均質(zhì)，即制成產(chǎn)品。實施例3
含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料的制備方法，包括以下步驟I)將0. 4g雙歧桿菌凍干菌粉(乳雙歧桿菌)接種于18mL MRS液體培養(yǎng)基(購買于青島高科園海博生物技術有限公司)中，在MRS液體培養(yǎng)基中添加占培養(yǎng)基體積0. 05%的半胱氨酸鹽酸鹽，在37°C培養(yǎng)條件下采用此MRS液體培養(yǎng)基活化三次，每次以3%的接種量轉(zhuǎn)接，其中前兩次均在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)20 24h，第三次在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)18h，然后離心(4000r，15min)棄去上清液得菌泥，將菌泥洗兩次滌后與0. 85 0. 9%無菌生理鹽水混合配制成濃度為I. OX IO11CfumL-1菌懸液以備使用。2)配制質(zhì)量濃度1%且含益生元量為5%的海藻酸鈉溶液，110°C，滅菌15min。所述的益生元為水蘇糖、低聚木糖、低聚果糖、菊糖中的一種或兩種。3)制備抗氧化劑，配制抗氧化劑的濃溶液，過濾除菌以備使用。所述的抗氧化劑為抗壞血酸鈉與異抗壞血酸鈉的混合。4)將菌懸液和含有益生元的海藻酸鈉溶液按照I :12的比例混合，抗氧化劑按照菌膠液總量的0. 03%的添加量加入，并在旋渦混合儀上混合均勻得菌膠液。5)用壓力噴嘴將上述菌膠混合液逐滴滴入大豆油中(含0. 4%的吐溫-80)，菌膠液和大豆油的比例為I :6，用磁力攪拌器攪拌800rpm/min,乳化IOmin,然后快速加入濃度為
1.5%的氯化鈣溶液，靜置30min。6)將保加利亞乳桿菌L6以3%接種于牛奶或牛奶奶復原乳中，在37°C下厭氧發(fā)酵18小時，得到發(fā)酵牛奶；7)按質(zhì)量份數(shù)計，將50份的發(fā)酵牛奶與5份的雙歧桿菌微膠囊，5份的濃縮果汁，7份的蔗糖，0. 02份的?；撬幔?. 002份的維生素E，0. 002份的煙酰胺，0. 002份的檸檬酸鋅，
0.5份的穩(wěn)定劑及45份的水混合均勻，在37°C、l(T20Mpa條件下均質(zhì)，即制成產(chǎn)品。實施例4含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料的制備方法，包括以下步驟I)將0.4g雙歧桿菌凍干菌粉接種于18mL MRS液體培養(yǎng)基(購買于青島高科園海博生物技術有限公司)中，在MRS液體培養(yǎng)基中添加占培養(yǎng)基體積0. 05%的半胱氨酸鹽酸鹽，在37°C培養(yǎng)條件下采用此MRS液體培養(yǎng)基活化三次，每次以5%的接種量轉(zhuǎn)接，其中前兩次均在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)20 24h，第三次在37°C培養(yǎng)條件下培養(yǎng)18h，然后離心(4000r, 15min)棄去上清液得菌泥，將菌泥洗兩次滌后與0. 85 0. 9%無菌生理鹽水混合配制成濃度為I. OX IO11Cfumr1菌懸液以備使用。2)配制濃度2. 5%且含益生元量為5%的海藻酸鈉溶液，110°C，滅菌15min ;所述的益生元為水蘇糖、低聚異麥芽糖、低聚半乳糖的混合。3)制備抗氧化劑，配制抗氧化劑的濃溶液，過濾除菌以備使用。所述的抗氧化劑為半胱氨酸鹽酸鹽、抗壞血酸、抗壞血酸鈉、異抗壞血酸、異抗壞血酸鈉中的兩種。4)將菌懸液和含有益生元的海藻酸鈉溶液按照I :10的比例混合，抗氧化劑按照菌膠液總量的0. 03%的添加量加入，并在旋渦混合儀上混合均勻得菌膠液。5)用壓力噴嘴將上述菌膠混合液逐滴滴入大豆油中(含0. 4%的吐溫-80)，菌膠液和大豆油的比例為I :4，用磁力攪拌器攪拌800rpm/min,乳化15min,然后快速加入濃度為
I.5%的氯化鈣溶液，靜置30min。6)傾去上層大豆油，通過離心得到濕膠囊(1000r，5min)，用生理鹽水洗滌3次。7)將保加利亞乳桿菌L6以3%接種于牛奶或牛奶奶復原乳中，在37°C下厭氧發(fā)酵18小時，得到發(fā)酵牛奶；8)按質(zhì)量份數(shù)計，將38份的發(fā)酵牛奶與10份的雙歧桿菌微膠囊，8份的濃縮果汁，8份的蔗糖，0. 015份的?；撬?，0. 0015份的維生素E，0. 0014份的煙酰胺，0. 0016份的檸檬酸鋅，0. 15份的穩(wěn)定劑及30份的水混合均勻，在37°C、l(T20Mpa條件下均質(zhì)，即制成產(chǎn)品。
權利要求
1.一種含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料的制備方法，其特征在于，包括以下步驟 1)將雙歧桿菌的菌懸液和含有益生元的海藻酸鈉溶液按照I:5 20的質(zhì)量比例混合，并加入抗氧化劑至其質(zhì)量分數(shù)為0. 01 0. 09%，充分混均后得到雙歧桿菌膠液； 所述的雙歧桿菌的菌懸液是將雙歧桿菌以0. I 5. OX IO11CfumL-1的濃度懸浮在質(zhì)量濃度為0. 85 0. 9%的無菌生理鹽水中； 所述的含有益生元的海藻酸鈉溶液中益生元量的質(zhì)量濃度為3 9%，海藻酸鈉的質(zhì)量濃度為I 3% ； 2)用壓力噴嘴將雙歧桿菌膠液擠壓入含有乳化劑體積分數(shù)為0.2 I. 0%的大豆油中，雙歧桿菌膠液與大豆油的體積比為I :4 7，充分攪拌，乳化5 20min，然后加入質(zhì)量濃度為I 5%的氯化鈣溶液，靜置20min以上； 3)待靜置分層后，傾去上層大豆油，離心得到濕膠囊并用生理鹽水充分洗滌，得到雙歧 桿菌微膠囊； 4)將保加利亞乳桿菌L6菌液以體積比為3 7%的接種量接種于牛奶或牛奶奶復原乳中，在35 43°C下厭氧發(fā)酵5 18小時，得到發(fā)酵牛奶； 5)以質(zhì)量份數(shù)計，將35 50份的發(fā)酵牛奶與5 10份的雙歧桿菌微膠囊，5 10份的濃縮果汁，5 10份的蔗糖，0. 01 0. 02份的?；撬幔?. 001 0. 002份的維生素E，0.001 - 0. 002份的煙酰胺，0. 001 0. 002份的檸檬酸鋅，0. 15 I. 0份的穩(wěn)定劑和28 50份的水混合均勻，在35 45°C、10 20Mpa條件下均質(zhì)，得到含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料。
2.如權利要求I所述的含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料的制備方法，其特征在于，所述的雙歧桿菌為兩歧雙歧桿菌、長雙歧桿菌或乳雙歧桿菌中的一種。
3.如權利要求I所述的含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料的制備方法，其特征在于，所述的益生元為水蘇糖、低聚異麥芽糖、低聚木糖、低聚果糖、菊糖、低聚半乳糖中的一種或幾種。
4.如權利要求I所述的含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料的制備方法，其特征在于，所述的抗氧化劑為半胱氨酸鹽酸鹽、抗壞血酸、抗壞血酸鈉、異抗壞血酸、異抗壞血酸鈉中的兩種或兩種以上。
5.如權利要求I所述的含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料的制備方法，其特征在于，所述含有益生元的海藻酸鈉溶液中還含有氯化鈉，其質(zhì)量濃度為0. 85 0. 9%。
6.如權利要求I所述的含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料的制備方法，其特征在于，所述的雙歧桿菌為接種于MRS培養(yǎng)基經(jīng)過增殖培養(yǎng)所獲得的。
7.如權利要求I所述的含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料的制備方法，其特征在于，所述的乳化劑為吐溫-80。
8.如權利要求I所述的含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料的制備方法，其特征在于，所述的保加利亞乳桿菌L6在接種之前還進行以下活化 1)將保加利亞乳桿菌L6的凍干菌粉接種于裝有滅菌羊奶復原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C厭氧培養(yǎng)10 14h,完成第一次活化； 2)按體積分數(shù)計，取3 7%第一次活化的菌液，接種于裝有滅菌羊奶復原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C厭氧培養(yǎng)10 14h，完成第二次活化； 3)按體積分數(shù)計，取3 7%第二次活化的菌液，接種于裝有滅菌羊奶復原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C厭氧培養(yǎng)10 14h， 完成第三次活化。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料的制備方法，以質(zhì)量份數(shù)計，將35～50份的發(fā)酵牛奶與5～10份的雙歧桿菌微膠囊，5～10份的濃縮果汁，5～10份的蔗糖，0.01～0.02份的?；撬幔?.001～0.002份的維生素E，0.001～0.002份的煙酰胺，0.001～0.002份的檸檬酸鋅，0.15～1.0份的穩(wěn)定劑和28～50份的水混合均勻，在35~45℃、10~20Mpa條件下均質(zhì)，得到含雙歧桿菌微膠囊的乳飲料。本發(fā)明通過微膠囊技術對雙歧桿菌進行保護，有利于延長雙歧桿菌制劑及含有雙歧桿菌的產(chǎn)品的保存期。
文檔編號A23C9/13GK102948479SQ201210470479
公開日2013年3月6日 申請日期2012年11月19日 優(yōu)先權日2012年11月19日
發(fā)明者陳合, 王野, 舒國偉 申請人:陜西科技大學