專利名稱：一種改良淋球菌培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及體外診斷試劑領(lǐng)域，特別涉及一種改良淋球菌培養(yǎng)基。背景技術(shù)：
淋病(Gonorrhea)是淋菌性尿道炎的簡(jiǎn)稱，是由淋病奈瑟菌(Neisseriagonorrhoeae)所引起的泌尿生殖系統(tǒng)化膿性炎癥，主要通過(guò)性交傳染，是目前世界范圍內(nèi)流行異常廣泛的性傳播疾??；該病可感染尿道、子宮頸內(nèi)膜、也可侵犯直腸、眼結(jié)膜和咽部。女性可發(fā)生前庭大腺炎、子宮內(nèi)膜炎、輸卵管炎、盆腔炎；男性可發(fā)生附睪炎和前列腺炎；造成不孕或不育；并可經(jīng)血行播散，引起菌血癥、關(guān)節(jié)炎、心內(nèi)膜炎、腦膜炎、肝炎等。在許多過(guò)國(guó)家和地區(qū)，淋病的患病率一直居于各種性傳播疾病的首位，淋球菌培養(yǎng)法是WHO推薦的診斷淋病的“金標(biāo)準(zhǔn)”，培養(yǎng)質(zhì)量的關(guān)鍵之一是淋球菌培養(yǎng)基的性能，由于淋球菌的營(yíng)養(yǎng)要求較復(fù)雜，所用的培養(yǎng)基中應(yīng)含有動(dòng)物蛋白及細(xì)菌生長(zhǎng)所需的各種因子。目前國(guó)外常用的培養(yǎng)基有Thayer-Martin(T-M)培養(yǎng)基、NewYork City(NYC)培養(yǎng)基和Martin-Lewis(ML)培養(yǎng)基等；國(guó)內(nèi)常用的是血液瓊脂或巧克力瓊脂培養(yǎng)基，這些培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分不能很好的滿足淋球菌的生長(zhǎng)需要，培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)，菌落較小，不容易檢出。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為了彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種配制簡(jiǎn)單、檢出率高的改良淋球菌培養(yǎng)基。本發(fā)明是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的
一種改良淋球菌培養(yǎng)基，組分包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基、抗凝羊血、抑菌劑、生長(zhǎng)因子及添加劑，各組分由以下重量份數(shù)的原料配制而成
(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基胰蛋白胨3.(Γ5. O份，蛋白際胨3. (Γ5. O份，多價(jià)蛋白胨8. (Γ12. O份，酵母浸膏I. 0 2· O份，玉米淀粉2. 0 3· O份，Nacl 14. 0 16· O份，Κ2ΗΡ043· 0 5· O份，ΚΗ2Ρ042· 0 3· O 份，瓊脂 14. 0 16· O 份；
(2)抗凝羊血10 15份；
(3)抑菌劑萬(wàn)古霉素0.003、. 005份，制霉菌素0. 125、. 175份，多粘菌素0. 0075 0. 015份，三甲氧芐二氨嘧啶0. 005 0. 010份；
(4)生長(zhǎng)因子促生長(zhǎng)液3份；
(5)添加劑淋球菌增菌劑0.Γ0. 2份、胎牛血清8 16份；
其余為去離子水，共計(jì)10000份。其優(yōu)選的各組分的重量份數(shù)配比為
(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基胰蛋白胨4.O份，蛋白際胨4. O份，多價(jià)蛋白胨10. O份，酵母浸膏I. 5份，玉米淀粉 2. 5 份，Nacl 15. O 份，Κ2ΗΡ044· O 份，ΚΗ2Ρ042· 5 份，瓊脂 15. O 份;
(2)抗凝羊血12.5份；
(3)抑菌劑萬(wàn)古霉素0.004份，制霉菌素0. 150份，多粘菌素0.01075份，三甲氧芐二氨嘧啶0. 0075份；
(4)生長(zhǎng)因子促生長(zhǎng)液3份；(5)添加劑淋球菌增菌劑O. 15份、胎牛血清12份；
其余為去離子水，共計(jì)10000份。所述促生長(zhǎng)液包括胱氨酸、精氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、絲氨酸、異亮氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、次黃嘌呤和尿嘧啶。鑒于淋球菌的營(yíng)養(yǎng)要求較復(fù)雜，本發(fā)明所用的培養(yǎng)基中應(yīng)含有動(dòng)物蛋白及細(xì)菌生長(zhǎng)所需的各種因子，并且需要在5% 二氧化碳環(huán)境中培養(yǎng)。與傳統(tǒng)的淋球菌培養(yǎng)基相比較，本發(fā)明的培養(yǎng)基以淋球菌生長(zhǎng)基礎(chǔ)培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，還富含抗凝羊血，添加了萬(wàn)古霉素，制霉菌素，多粘菌素和三甲氧芐二氨嘧啶四種抗生素，特別添加了淋球菌生長(zhǎng)必須的生長(zhǎng)因子，如谷氨酸，半胱氨酸，胱氨酸等以及淋球菌增菌劑，使得本改良淋球菌培養(yǎng)基與其它類別的培養(yǎng)基相比營(yíng)養(yǎng)豐富，選擇性強(qiáng)，配制簡(jiǎn)單，培養(yǎng)用時(shí)短，準(zhǔn)確性高。本發(fā)明在基礎(chǔ)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加了多種抗生素，更好的抑制雜菌生長(zhǎng)，增強(qiáng)選擇性，提高檢出率，適合醫(yī)療單位分離培養(yǎng)淋病奈瑟氏菌時(shí)一次性使用，營(yíng)養(yǎng)豐富，性能優(yōu)良，既克服了目前市場(chǎng)上現(xiàn)有淋球菌培養(yǎng)基的缺點(diǎn)，又提高了檢出率，培養(yǎng)時(shí)間短，提高了臨床工作效率，操作簡(jiǎn)單，適合各級(jí)醫(yī)院使用。具體實(shí)施例方式
實(shí)施例I:以以下重量份數(shù)的組分為原料制備培養(yǎng)基
(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基胰蛋白胨3g，蛋白際胨3.Og,多價(jià)蛋白胨8. 0g，酵母浸膏I. 0g，玉米淀粉 2. 0g, Nacl 14. 0g, K2HP043. 0g, ΚΗ2Ρ042· Og,瓊脂 14. Og ；
(2)抗凝羊血10ml；
(3)抑菌劑萬(wàn)古霉素0.003g，制霉菌素O. 125g，多粘菌素O. 0075g，三甲氧芐二氨嘧啶 O. 005g ；
(4)生長(zhǎng)因子促生長(zhǎng)液(胱氨酸、精氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、絲氨酸、異亮氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、次黃嘌呤、尿嘌呤)3ml ；
(5)添加劑淋球菌增菌劑O.lg，胎牛血清8ml ；
其余為去離子水，共計(jì)IOkg ；
實(shí)施例2 :以以下重量份數(shù)的組分為原料制備培養(yǎng)基
(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基胰蛋白胨4.Og,蛋白際胨4. Og,多價(jià)蛋白胨10. Og,酵母浸膏I. 5g,玉米淀粉 2. 5g，Nacl 15. 0g, Κ2ΗΡ044· 0g, KH2PO4 2. 5g，瓊脂 15. Og ；
(2)抗凝羊血12.5ml ；
(3)抑菌劑萬(wàn)古霉素0.004g，制霉菌素O. 150g，多粘菌素0.01075g，三甲氧芐二氨嘧Pg O. 0075g ；
(4)生長(zhǎng)因子促生長(zhǎng)液(胱氨酸、精氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、絲氨酸、異亮氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、次黃嘌呤、尿嘌呤)3ml ；
(5)添加劑淋球菌增菌劑O.15g，胎牛血清12ml ；
其余為去離子水，共計(jì)10kg。實(shí)施例3 :以以下重量份數(shù)的組分為原料制備培養(yǎng)基
(I)基礎(chǔ)培養(yǎng)基胰蛋白胨5. 0g，蛋白際胨5. Og,多價(jià)蛋白胨12. 0g，酵母浸膏2. 0g，玉米淀粉 3. 0g, Nacl 16. 0g, K2HP045. 0g, KH2PO4 3. Og,瓊脂 16. Og ；(2)抗凝羊血15ml；
(3)抑菌劑萬(wàn)古霉素0.005g，制霉菌素O. 175g，多粘菌素0.015g，三甲氧芐二氨嘧啶
O.OlOg ；
(4)生長(zhǎng)因子促生長(zhǎng)液(胱氨酸、精氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、絲氨酸、異亮氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、次黃嘌呤、尿嘌呤)3ml ；
(5)添加劑淋球菌增菌劑O.2g，胎牛血清16ml ；
其余為去離子水，共計(jì)10kg。
權(quán)利要求
1.一種改良淋球菌培養(yǎng)基，組分包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基、抗凝羊血、抑菌劑、生長(zhǎng)因子及添加劑，其特征為，各組分由以下重量份數(shù)的原料配制而成(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基胰蛋白胨3. (Γ5.0份，蛋白際胨3. (Γ5. O份，多價(jià)蛋白胨8. (Γ12. O份，酵母浸膏I. (Γ2. O份，玉米淀粉2. 0 3. O份，Nacl 14. 0 16· O 份，Κ2ΗΡ043· 0 5· O 份，ΚΗ2Ρ042· 0 3· O 份，瓊脂 14. 0 16· O 份；(2)抗凝羊血10 15份；(3)抑菌劑:萬(wàn)古霉素0. 003 O. 005份，制霉菌素O. 125 O. 175份，多粘菌素O. 0075 O. 015份，三甲氧芐二氨嘧啶O. 005 O. 010份；(4)生長(zhǎng)因子促生長(zhǎng)液3份；(5)添加劑淋球菌增菌劑O. Γ0. 2份、胎牛血清8 16份；其余為去離子水，共計(jì)10000份。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的改良淋球菌培養(yǎng)基，其特征為，各組分由以下重量份數(shù)的原料配制而成(I)基礎(chǔ)培養(yǎng)基胰蛋白胨4. O份，蛋白際胨4. O份，多價(jià)蛋白胨10. O份，酵母浸膏 I. 5 份，玉米淀粉 2. 5 份，Nacl 15. O 份，Κ2ΗΡ044· O 份，ΚΗ2Ρ042· 5 份，瓊脂 15. O 份；(2)抗凝羊血12. 5份；(3)抑菌劑萬(wàn)古霉素0. 004份，制霉菌素O. 150份，多粘菌素O. 01075份，三甲氧芐二氨嘧啶O. 0075份；(4)生長(zhǎng)因子促生長(zhǎng)液3份；(5)添加劑淋球菌增菌劑O. 15份、胎牛血清12份；其余為去離子水，共計(jì)10000份。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的改良淋球菌培養(yǎng)基，其特征在于所述促生長(zhǎng)液包括胱氨酸、精氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、絲氨酸、異亮氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、次黃嘌呤和尿嘧啶。
全文摘要
本發(fā)明涉及體外診斷試劑領(lǐng)域，特別公開了一種改良淋球菌培養(yǎng)基。該改良淋球菌培養(yǎng)基以淋球菌生長(zhǎng)基礎(chǔ)培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，還富含抗凝羊血，添加了萬(wàn)古霉素，制霉菌素，多粘菌素和三甲氧芐二氨嘧啶四種抗生素，特別添加了淋球菌生長(zhǎng)必須的生長(zhǎng)因子，如谷氨酸，半胱氨酸，胱氨酸等以及淋球菌增菌劑，使得本改良淋球菌培養(yǎng)基與其它類別的培養(yǎng)基相比具備下列特點(diǎn)營(yíng)養(yǎng)豐富，選擇性強(qiáng)，配制簡(jiǎn)單，培養(yǎng)用時(shí)短，準(zhǔn)確性高。
文檔編號(hào)C12Q1/04GK102925533SQ20121047610
公開日2013年2月13日 申請(qǐng)日期2012年11月22日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月22日
發(fā)明者寧春華, 聶暉, 孟俊華, 霍雨艷, 崔蘭蘭, 李福川, 陳玉芹, 譚坤 申請(qǐng)人:濟(jì)南百博生物技術(shù)有限責(zé)任公司