一種藤黃色單胞菌及其制備和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種藤黃色單胞菌及其應(yīng)用；藤黃色單胞菌（Luteimonas?sp.）HB-2CGMCC?No.6457已經(jīng)在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，保藏時(shí)間為2012年08月17日；該藤黃色單胞菌用于油藏驅(qū)油，將菌株在45℃條件下采用12m3工業(yè)發(fā)酵罐發(fā)酵48小時(shí)，發(fā)酵后的菌液按照1%的質(zhì)量濃度與質(zhì)量1%的營(yíng)養(yǎng)液從注水井注入到油藏中，注入量為0.07PV；原油粘度下降53%，提高采收率大于5.0%，投入產(chǎn)出比為1:6.4。
【專利說明】一種藤黃色單胞菌及其制備和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及微生物采油領(lǐng)域，具體涉及一株藤黃色單胞菌及其制備和在采油工程中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]微生物采油技術(shù)是通過將篩選的微生物同營(yíng)養(yǎng)液一同注入油藏，或者注入激活劑激活油藏中的內(nèi)源微生物，利用微生物在油藏中的有益活動(dòng)及其代謝產(chǎn)物與油藏中液相和固相的互相作用，改善原油的流動(dòng)性質(zhì)，從而提高原油采收率的綜合性技術(shù)。微生物采油技術(shù)經(jīng)過多年的發(fā)展，逐漸成為目前國(guó)內(nèi)外發(fā)展迅速的一項(xiàng)提高原油采收率技術(shù)，也是21世紀(jì)一項(xiàng)高新生物技術(shù)。
[0003]微生物采油機(jī)理主要有微生物自身對(duì)原油的降解及其代謝產(chǎn)物對(duì)原油的作用，微生物對(duì)原油的降解作用體現(xiàn)在微生物以石油為碳源，長(zhǎng)鏈烷烴被微生物降解為短鏈烷烴，從而增加原油流動(dòng)性；而代謝產(chǎn)物作用主要包括生物表面活性劑、有機(jī)酸、生物氣以及小分子的有機(jī)物，這些組分都能從一定程度上降低原油粘度，增加原油流動(dòng)性，從而啟動(dòng)提高采收率的作用。顯然，這里提高采收率作用效果的大小與微生物的種類和功能有很大關(guān)系。
[0004]中低溫稠油油藏由于原油本身粘度大，而且油藏溫度較低，結(jié)果導(dǎo)致原油流動(dòng)性非常差，常規(guī)注水開發(fā)效果不理想，通過篩選高效降粘菌種并用于低溫稠油油藏提高采收率研究具有重要意義。
[0005]根據(jù)查閱國(guó)內(nèi)外專利和文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，目前篩選出用于微生物驅(qū)油的菌種有黃單胞桿菌、惡臭假單胞菌、銅綠假單胞菌、地衣芽孢桿菌、嗜熱脫氮芽孢桿菌、腸桿菌、短芽孢桿菌、蠟狀芽孢桿菌、裂烴棒桿菌、野兔棒桿菌、酵母嗜石油桿菌、枯草桿菌、熱帶假絲酵母、球擬酵母、粘滯沙雷氏菌、陰溝腸桿菌、魯疫鏈球菌、梭形芽孢桿菌、波茨坦短芽孢桿菌、不動(dòng)桿菌、明串球菌。室內(nèi)研究表明，`這些菌株都具有一定降低的降低發(fā)酵液表面張力和油水界面張力，部分能夠降解原油，具有降低原油粘度的功能，但都有一定的局限性，比如對(duì)地層溫度，礦化度以及原油性質(zhì)的適應(yīng)性等方面，而且很少有經(jīng)過物模驅(qū)油實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)和現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用效果分析。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是:提供一株可有效降解高蠟及高膠質(zhì)原油，降低原油粘度并提高原油采收率一種藤黃色單胞菌及其制備和應(yīng)用。
[0007]本發(fā)明的技術(shù)方案是:本發(fā)明所提供的藤黃色單胞菌(Luteimonas sp.)HB-2CGMCC N0.6457已經(jīng)在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，地址:北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，保藏時(shí)間為2012年08月17曰。
[0008]藤黃色單胞菌(Luteimonas sp.)CGMCC N0.6457是從寶力格油井產(chǎn)出液中分離得到的，其菌落為淡黃色，圓形，表面光滑不透明，邊緣整齊，直徑為1.5mm。[0009]細(xì)胞呈桿狀，大小為0.5 μ mX 1.0-2.0 μ m,單個(gè)或成對(duì)排列。革蘭氏陰性，不生孢，產(chǎn)生β-聚羥基丁酸鹽顆粒。具體生理生化實(shí)驗(yàn)見表1。
[0010]表1藤黃色單胞菌部分生理生化特征
[0011]
【權(quán)利要求】
1.一種藤黃色單胞菌，其特征在于:藤黃色單胞菌(Luteimonas sp.)HB-2CGMCCN0.6457已經(jīng)在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，保藏時(shí)間為2012年08月17日。
2.—種權(quán)利要求1所述的藤黃色單胞菌的應(yīng)用，其特征在于:該藤黃色單胞菌用于油藏驅(qū)油，將菌株在45°C條件下采用12m3工業(yè)發(fā)酵罐發(fā)酵48小時(shí)，發(fā)酵后的菌液按照1%的質(zhì)量濃度與質(zhì)量1%的營(yíng)養(yǎng)液從注水井注入到油藏中，注入量為0.07PV。
3.—種權(quán)利要求1所述的藤黃色單胞菌的制備方法，其特征在于: (1)采樣和富集:從寶力格油田產(chǎn)出液及費(fèi)油坑中進(jìn)行取樣，然后采用以富集培養(yǎng)基進(jìn)行富集； 按重量百分比富集培養(yǎng)基組成為:葡萄糖2%，蛋白胨0.05%，酵母粉0.05%，尿素0.05%,硫酸銨0.05%,磷酸二氫鉀0.5%，7水硫酸鎂0.02%,氯化鈉0.01%,自來(lái)水配制； 制備富集培養(yǎng)基的工藝條件為:pH值6~8，115°C滅菌20分鐘，培養(yǎng)溫度為25-45° C，培養(yǎng)時(shí)間為8-48小時(shí)； (2)菌種的篩選和純化: 將質(zhì)量2%的混合菌液與質(zhì)量5%的寶力格混合油加入到富集培養(yǎng)基中，45°C條件下在搖床恒溫培養(yǎng)48小時(shí)，觀察原油的乳化情況并測(cè)量發(fā)酵液的表界面張力值，待原油能夠完全分散乳化并且發(fā)酵液表/界面張力值降低大于50%以上的樣品進(jìn)行下一步的分離純化，分離用培養(yǎng)基質(zhì)量:營(yíng)養(yǎng)瓊脂+5%脫纖維羊血；對(duì)分離純化的單菌株重復(fù)步驟(2)的實(shí)驗(yàn)，最終篩選出一株高效驅(qū)油菌種，經(jīng)16s rDNA序列分析并結(jié)合生理生化實(shí)驗(yàn)確定該菌株為藤黃色單胞菌屬。`
【文檔編號(hào)】C12N1/02GK103865820SQ201210528104
【公開日】2014年6月18日 申請(qǐng)日期:2012年12月10日 優(yōu)先權(quán)日:2012年12月10日
【發(fā)明者】董范, 柯從玉, 朱慶忠, 胡書寶, 吳剛, 宋社民, 王保華, 薄海江, 吳應(yīng)德 申請(qǐng)人:中國(guó)石油天然氣股份有限公司