一種酶解人參的制備及其在化妝品、食品中的用途
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種酶解人參的制作工藝，具體地說是采用纖維素酶與β-淀粉酶相結合的方法增加人參中精氨酸單糖苷（AF）、精氨酸雙糖苷（AFG）的含量，是一種新的人參加工品，同時還公開了酶解人參在保肝、抗紫外防輻射及抗疲勞的功效，本發(fā)明的酶解人參可應用于化妝品及食品中。屬于中藥加工技術，屬保健食品、化妝品應用領域。
【專利說明】一種酶解人參的制備及其在化妝品、食品中的用途
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種酶解人參的制作工藝，具體地說是采用纖維素酶與β-淀粉酶相結合的方法增加人參中精氨酸單糖苷(AF)、精氨酸雙糖苷(AFG)的含量，是一種新的人參加工品，同時還公開了酶解人參在保肝、抗紫外防輻射及抗疲勞的功效，本專利發(fā)明的酶解人參可應用于化妝品及食品中。屬于中藥加工技術，屬保健食品、化妝品應用領域。
【背景技術】
[0002]精氨酸衍生物AF與AFG是人參中的精氨酸與還原糖(葡萄糖、麥芽糖)反應的產(chǎn)物，是梅拉德反應的中間產(chǎn)物，于上個世紀末首先在紅參中發(fā)現(xiàn)并鑒定的【1，2】。藥理學研究表明【3】氨基酸衍生物AF、AFG具有改善皮膚質地、延緩皮膚衰老，抑制TNF-α產(chǎn)生，抑制環(huán)氧合酶2，抗衰老，促進I /IV型膠原蛋白的產(chǎn)生，轉谷氨酰胺酶激活的作用，并且能促進透明質酸和NO產(chǎn)生。酶解人參是人參的一種加工品，其中氨基酸衍生物AF、AFG的含量較未酶解人參高。在酶解過程中加入了纖維素酶，纖維素酶能夠分解植物的細胞壁使更多的有效物質溶出【4】,酶解人參中人參總阜苷的含量也較未酶解人參多,現(xiàn)代藥理表明人參阜苷具有抗氧化、美白、抗衰老的作用。β -淀粉酶(1，4-a-D-glucan maltohydrolase,EC3.2.1.2)是一種外切型糖化酶，作用于淀粉時，能從α-1，4糖苷鍵的非還原性末端順次切下一個麥芽糖單位，產(chǎn)生麥芽糖及大分子的界限糊精【5】。淀粉酶分解直鏈淀粉的主要產(chǎn)物是麥芽糖，分解支鏈淀粉的產(chǎn)物主要是麥芽糖和大分子的β -界限糊精，這為酶解人參中AFG的增加提供了物質基礎。
[0003]目前通過人參酶解增加還原糖，使AF、AFG的含量增加的研究較少，本發(fā)明公開了一種制備酶解人參的加工工藝及酶解人參保肝、防紫外抗輻射和抗疲勞等作用，及其在化妝品、保健食品中的應用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明公開了一種酶解法制備的人參，酶解人參中AF、AFG及人參總皂苷含量均較未酶解人參高。
[0005]本發(fā)明公開了酶解人參在化妝品、保健食品中的應用。
[0006]本發(fā)明公開的酶解法制備的人參，是通過以下方法制備的:
1)取一定量人參粉末(80目)，調(diào)節(jié)料液比1:10~1:20,ph5~5.5，按400:1~500:1加入纖維素酶，酶解2~3h，100°C滅活；
2)調(diào)節(jié)ρΗ5.2~5.8，按40g~50g: ?μL(50萬u/mL)加入β -淀粉酶，酶解24~36h后高溫滅活，將酶解后的人參粉末70°C烘干，即得。
[0007]本發(fā)明所述的酶解人參在保肝食品中的應用。
[0008]本發(fā)明所述的酶解人參在抗紫外輻射化妝品中的應用。
[0009]本發(fā)明所述的酶解人參在抗疲勞食品中的應用。
[0010]本發(fā)明與人參相比其積極效果在于:采用纖維素酶與β-淀粉酶共同酶解相結合的方法所制備出的酶解人參，不僅增加了人參皂苷的量，而且大幅度增加了精氨酸衍生物AF與AFG的量。具有保肝、抗紫外防輻射及抗疲勞等作用，可用于化妝品及保健食品領域。本發(fā)明操作方法簡單，可行，適用于大批量的工業(yè)化生產(chǎn)。
[0011]以下采用高效液相法對酶解人參進行質量評定。
[0012]實驗例I
本發(fā)明工藝制備酶解人參中精氨酸衍生物AF、AFG的分析
1.1實驗材料和方法
1.1.1實驗材料
人參采自琿春地區(qū)五年生鮮人參；酶解人參采用人參粉末為原料按本發(fā)明工藝制作；AF、AFG標品為本實驗室自制，純度>98% ;異硫氰酸苯酯(PITC)及三乙胺(TEA)，色譜純，以上均為美國艾杰爾公司提供；色譜級正己烷，天津市光復精細化工研究所；色譜甲醇和色譜乙腈，美國Tedia ;其他常規(guī)化學試劑(分析純)，北京化工廠。
[0013]1.1.2實驗方法
1.1.2.1 HPLC-UV 分析條件
Shimadzu LC-20A高效液相色譜儀 (SPD-20A紫外檢測器，LC-20AT泵，CT0-10AS VP柱溫箱，LC-solution工作站)日本島津公司。KQ-250DB型超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司)；Venusi1-AA氨基酸分析專用柱(5 μ m,4.6_X 250mm),柱溫40°C ;檢測波長254nm ；流動相A:醋酸鈉緩沖溶液(pH6.5)-乙腈溶液；流動相B:乙腈-水(體積比為4:1)溶液；線性梯度洗脫程序:0.0min, 0%B ；4min, 3%B ；16min, 10%B ;流速 1.0mL/min。
[0014]1.1.2.2對照品溶液的制備與衍生
準確稱取AF標準品0.015g水溶解定容至10mL，取ImL置于2mL離心管中，加入三乙胺乙腈溶液100 μ L，異硫氰酸苯酯乙腈溶液50 μ L，混勻，室溫放置lh，然后加入正己烷400 μ L,振搖后放置IOmin,取下層溶液,0.2 μ m濾膜過濾,取20 μ L進行色譜分析。
[0015]準確稱取AFG標準品0.015g水溶解定容至10mL，取ImL置于2mL離心管中，以下衍生步驟同上，室溫放置lh，然后加入正己烷400 μ L，振搖后放置lOmin，取下層溶液，
0.2 μ m濾膜過濾，取20 μ L進行色譜分析。
[0016]1.1.2.3樣品溶液的制備與衍生
準確稱取人參、酶解人參粉末(40目)1.0g，分別加入20mL甲醇浸泡過夜，過濾，殘渣加入20mL水,(250W, IOOkHZ)提取3次,每次30min,過濾,合并濾液,低壓旋轉濃縮至干,蒸懼水水溶解移至IOmL容量瓶中，定容。分別用移液器取ImL加入2mL離心管內(nèi)，分別加入三乙胺乙腈溶液100 μ L、異硫氰酸苯酯乙腈溶液100μ L，混勻，室溫放置lh，然后加入正己烷400 μ L,振搖均勻放置IOmin,取下層溶液,0.2 μ m濾膜過濾,取20 μ L進樣分析(η=3)。
[0017]1.2 HPLC-UV 分析結果
結果從人參及酶解人參中精氨酸衍生物AF及AFG的HPLC-UV(見附圖1、附圖2)可知，與人參比較，酶解人參中精氨酸衍生物AF與AFG分別增加了 2.3%,84.5%。
[0018]實驗例2
本發(fā)明制備酶解人參中總皂苷含量的檢測
2.1實驗材料和方法2.1.1實驗材料
人參采自琿春地區(qū)五年生鮮人參；酶解人參采用人參粉末為原料按本發(fā)明工藝制作;標準品人參皂苷Rbl、Rb2、Re、Rd、Re、Rf、Rg1, Rb3購自中國藥品生物制品檢定所；色譜乙腈，美國Tedia ；Shimadzu LC-20A高效液相色譜儀(SH)-20A紫外檢測器，LC-20AT泵，CTO-1OAS VP柱溫箱，LC-solution工作站)，日本島津公司
2.1.2實驗方法
2.1.2.1待測試樣品的制備
分別準確稱取人參、酶解后的人參粉末(過80目篩)各1.0g，置于具塞錐形瓶中，加入50mL甲醇，超聲提取(250W，IOOkHZ)提取2次，每次30min，過濾，合并濾液，減壓濃縮，并用甲醇定容至25mL容量瓶中，搖勻，過0.2 μ m濾膜，待HPLC-UV測定。
[0019]2.1.2.2 HPLC分析條件的建立
依利特Hypersil 0DS2 (4.6 mmX250 mm, 5 μ m)色譜柱；流動相:乙腈與水梯度洗脫，0-24min, 18.5-22% 乙腈;24_26min，26-32% 乙腈;30_50min, 32-33.5% 乙腈；50_55min，33.5-38% 乙腈;55-65min，38-40%。流速 lmL/min;檢測波長:203nm ;柱溫:30°C ;進樣量20 μ L0
[0020]2.2實驗結果
人參及酶解人參中皂苷含量結果見表1，其常規(guī)人參總皂苷分別為16.7mg/g、19.3mg/
go人參及酶解人參HPLC-UV圖(見附圖3、4)
表1人參及酶解人.參中人參阜苷含量 _
【權利要求】
1.一種利用纖維素酶與淀粉酶相結合的酶解人參制備工藝，包括以下步驟: 1)取一定量人參粉末(80目)，調(diào)節(jié)料液比1:10~1:20,pH5~5.5，按400:1~500:1加入纖維素酶，酶解2~3h，100°C滅活。 2)調(diào)節(jié)pH5.2~5.8，按40g~50g: ?μL (50萬u/ml) β -淀粉酶，酶解24~36h后高溫滅活，將酶解后的人參粉末70°C烘干，即得。
2.權利要求1所述的方法制備的酶解人參具有保肝作用，可應用于保護肝臟的保健食品O
3.權利要求1所述的方法制備的酶解人參具有抗紫外防輻射作用，可用于防曬化妝品O
4.權利要求1所述的的方法制備的酶解人參具有較強的抗疲勞作用，可作為保健食品應用。
【文檔編號】A23L1/29GK103893051SQ201210584107
【公開日】2014年7月2日 申請日期:2012年12月28日 優(yōu)先權日:2012年12月28日
【發(fā)明者】鄭毅男, 李永娟, 胡同童 申請人:鄭毅男