專(zhuān)利名稱(chēng)：益生菌高濃度活性菌粉的生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種益生菌高濃度活性菌粉的生產(chǎn)方法，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，生產(chǎn)出來(lái)的益生菌菌粉常用于食品、藥品、保健品和動(dòng)物飼料中。
背景技術(shù)：
益生菌(Probiotics) —詞來(lái)源于希臘語(yǔ)，意思是“對(duì)生命有益”，翻譯成中文即益生菌或益生素，又稱(chēng)促生素、微生態(tài)制劑、活菌制劑等，是一類(lèi)能夠促進(jìn)宿主腸內(nèi)微生物菌群的生態(tài)平衡，對(duì)宿主健康和生理功能產(chǎn)生有益作用的活性微生物，目前常用于食品、藥品、保健品和動(dòng)物飼料中，起到改善腸道菌群結(jié)構(gòu)、促進(jìn)腸道中有益菌的增殖、抑制有害菌的生長(zhǎng)，提高機(jī)體免疫力、抵御疾病、促進(jìn)生長(zhǎng)等作用。盡管益生菌對(duì)人體健康的有益作用人所共知，但是益生菌普遍抗逆性較差，在生產(chǎn)過(guò)程中容易失活，因此，如何將發(fā)酵后的活菌菌體成功地從發(fā)酵液中分離出來(lái)并保持其活性，成了決定益生菌實(shí)際應(yīng)用效果的關(guān)鍵因素之一。目前采用的菌體分離方法主要有過(guò)濾分離、高速離心分離等。常規(guī)的過(guò)濾方法如板框壓濾因需要加入大量的硅藻土等助濾劑，難于提高活菌濃度，而膜分離等過(guò)濾方法，除成本高之外，由于益生菌發(fā)酵液粘度高、菌體小，過(guò)濾困難，容易堵塞，不易清洗，膜污染嚴(yán)重；高速離心設(shè)備投入成本高、能耗大，高速離心過(guò)程中容易導(dǎo)致細(xì)胞破裂，降低益生菌的活性。因此，目前的工藝條件下，很難生產(chǎn)出每克菌粉活菌含量在IO13以上的益生菌菌粉。

發(fā)明內(nèi)容
為了有效解決上述問(wèn)題，本發(fā)明提出了一種益生菌高濃度活性菌粉的生產(chǎn)方法，在益生菌液態(tài)發(fā)酵后的發(fā)酵液中，加入生物安全性高的酸性殼聚糖溶液作為生物沉降劑，將菌體得以自然沉降分離 ，沉降得到的菌體濃縮漿液經(jīng)冷凍干燥得到具有高濃度活菌含量的益生菌菌粉。本發(fā)明的具體技術(shù)方案如下:
(O選取乳酸桿菌屬、雙歧桿菌屬、鏈球菌屬、乳球菌屬、腸球菌屬、明串球菌屬、丙酸桿菌屬、芽孢桿菌屬的益生菌或酵母菌類(lèi)益生菌的菌種，進(jìn)行液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)，獲得含有活菌的發(fā)酵液；
(2)將殼聚糖用1%乙酸溶液配制成的1.(Γ10.0 g/L殼聚糖溶液；
(3)在發(fā)酵液緩慢加入占總體積10%的上述殼聚糖溶液并攪拌5 30min ；
(4)靜置0.5飛h，將菌體充分沉降；
(5)吸去上層清液或放出下層菌泥，得到菌體濃縮漿液；
(6)菌體濃縮漿液經(jīng)真空冷凍干燥得到高濃度活性菌粉。本發(fā)明由于采用的生物沉降劑生物毒性低、用量小，因而分離過(guò)程中對(duì)對(duì)益生菌傷害小且稀釋度低，生產(chǎn)出的益生菌菌粉具有很高的活菌含量，每克菌粉中的活菌數(shù)量可以達(dá)到IO13數(shù)量級(jí)，且操作簡(jiǎn)便，成本低，污染小，具有很高的應(yīng)用價(jià)值。
具體實(shí)施例方式將通過(guò)如下的實(shí)施例來(lái)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的闡述:
選取I株枯草芽孢桿菌菌種，活化后通過(guò)3級(jí)發(fā)酵，在發(fā)酵生產(chǎn)罐中得到約600 L含有活菌的發(fā)酵液；將殼聚糖用1%乙酸溶液配制成的3.0 g/L殼聚糖溶液，往發(fā)酵液中緩慢加入約66 L的殼聚糖溶液，100 r/min攪拌15 min，靜置3 h，將菌體充分沉降；打開(kāi)生產(chǎn)罐底部閥門(mén)，緩慢放出 沉降下來(lái)的下層菌泥，將得到的菌體濃縮漿液在-6(T-7(TC溫度下、抽真空4 5Pa、冷凍干燥24 h，得到約I kg的高濃度活性菌粉，經(jīng)活菌計(jì)數(shù)芽孢桿菌含量為2.6X1013f/g。
權(quán)利要求
1.一種益生菌高濃度活性菌粉的生產(chǎn)方法，在益生菌液態(tài)發(fā)酵后的發(fā)酵液中，加入生物安全性高的酸性殼聚糖溶液作為生物沉降劑，將菌體得以自然沉降分離，沉降得到的菌體濃縮漿液經(jīng)冷凍干燥后得到具有高濃度活菌含量的益生菌菌粉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述的益生菌包括乳酸桿菌屬、雙歧桿菌屬、鏈球菌屬、乳球菌屬、腸球菌屬、明串球菌屬、丙酸桿菌屬、芽孢桿菌屬的益生菌以及酵母菌。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述的生物沉降劑指的是酸性殼聚糖溶液，即用1%乙酸溶液配制成的1.(Γιο.0 g/L殼聚糖溶液，在發(fā)酵液中的加入量為占加入后總體積10%的體 積含量。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種益生菌高濃度活性菌粉的生產(chǎn)方法，在益生菌液態(tài)發(fā)酵后的發(fā)酵液中，加入生物安全性高的酸性殼聚糖溶液作為生物沉降劑，將菌體得以自然沉降分離，沉降得到的菌體濃縮漿液經(jīng)冷凍干燥得到具有高濃度活菌含量的益生菌菌粉。由于采用的生物沉降劑生物毒性低、用量小，因而分離過(guò)程中對(duì)益生菌傷害小且稀釋度低，生產(chǎn)出的益生菌菌粉具有很高的活菌含量，每克菌粉中的活菌數(shù)量可以達(dá)到1013數(shù)量級(jí)，且操作簡(jiǎn)便，成本低，污染小，具有很高的應(yīng)用價(jià)值。
文檔編號(hào)C12R1/01GK103194406SQ20131008361
公開(kāi)日2013年7月10日 申請(qǐng)日期2013年3月17日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月17日
發(fā)明者袁書(shū)林, 郭小華 申請(qǐng)人:袁書(shū)林