專利名稱：一種采用梯度pH順序控制發(fā)酵生產(chǎn)腺苷的方法
技術領域：
本發(fā)明屬于生物工程領域，涉及發(fā)酵過程控制，特別是一種梯度pH控制策略，應用于腺苷的發(fā)酵法生產(chǎn)。
背景技術：
腺苷(Adenosine)，即為腺嘌呤核苷，化學名9_β -D-呋喃核糖基腺嘌呤，分子式為CltlH13N5O4、相對分子質(zhì)量為267.24的白色或類白色的粉末。腺苷在生物化學上扮演重要角色，包括以腺苷三磷酸(ATP)或腺苷雙磷酸(ADP)形式轉移能量，或是以環(huán)狀腺苷單磷酸(cAMP)進行信號傳遞等。此外腺苷也是一種抑制性神經(jīng)傳導物(inhibitoryneurotransmitter),可能會促進睡眠。迄今為止,腺苷已被廣泛應用于化工、食品、醫(yī)藥、日
化等領域，由此可見，該化 合物具有非常廣泛的應用前景。其化學結構式為:
權利要求
1.一種采用梯度PH順序控制發(fā)酵生產(chǎn)腺苷的方法，其特征在于所述方法采用二階段梯度PH順序控制的方式分批發(fā)酵生產(chǎn)腺苷，在菌體生長階段，控制pH為6.7-7.0,菌體濃度達到OD600nm*20l.0-1.5后，控制pH為6.0-6.3 ;發(fā)酵菌株采用枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis) XGL0
2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于該方法具體操作如下:以枯草芽孢桿菌XGL為出發(fā)菌株，接種至活化斜面，28 32°C培養(yǎng)24 26h后，用接種環(huán)刮取斜面菌種接種至種子培養(yǎng)基，28 33°C，180 220rpm培養(yǎng)7 8h ;按10 15%的接種量轉接至裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，30 34°C，溶氧維持在10 20%，用NH3.Η20調(diào)節(jié)pH，培養(yǎng)時間58_60h。
3.根據(jù)權利要求書2所述的方法，其特征是: ⑴斜面培養(yǎng)基成分以g/L計:葡萄糖2，蛋白胨10，牛肉膏10，酵母粉5，NaC12.5，瓊脂30，ρΗ7.0 7.2 ; ⑵種子培養(yǎng)基成分以g/L計:口服葡萄糖20，玉米漿25mL/L，豆柏水解液10mL/L，酵母粉5，味精5，蛋白胨8, KH2PO4I,MgSO4.7Η200.4，尿素5，黃嘌呤0.03，組氨酸0.03，ρΗ7.0 7.2 ； ⑶液體發(fā)酵培養(yǎng)基成分以g/L計:口服葡萄糖80，酵母膏18，味精12，K2HP043，黃嘌呤0.03，組氨酸 0.03，MgSO4.7H205, MnSO40.006，F(xiàn)eS047H200.006，CaCl22,玉米漿 15mL/L。
4.根據(jù)權利要求書1、2或3所述的方法，其特征在于所述的枯草芽孢桿菌，用其他芽孢桿菌類細菌、腸桿菌 科細菌或酵母類真菌代替。
全文摘要
一種采用梯度pH順序控制發(fā)酵生產(chǎn)腺苷的方法。該方法以枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)XGL為生產(chǎn)菌株，以梯度pH的順序控制方式分批發(fā)酵生產(chǎn)腺苷，在菌體生長階段控制pH為6.7-7.0，在達到一定菌體量后控制pH為6.0-6.3，發(fā)酵60h，腺苷產(chǎn)量為18.2g/L。該方法可以提高腺苷的產(chǎn)量，發(fā)酵過程無需增加額外設備，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C12R1/125GK103146786SQ20131009739
公開日2013年6月12日 申請日期2013年3月25日 優(yōu)先權日2013年3月25日
發(fā)明者陳寧, 劉玥, 徐慶陽, 謝希賢, 張成林, 劉淑云 申請人:天津科技大學