專利名稱：一種一鍋法制備γ-谷氨酰小肽類化合物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種采用一鍋法制備Y -谷氨酰小肽類化合物的方法。
背景技術(shù)：
權(quán)利要求
1.一種一鍋法制備Y-谷氨酰小肽類化合物(I)的方法，其特征在于該方法包括下列步驟:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一鍋法制備Y-谷氨酰小肽類化合物的方法，其特征在于所述的Y-谷氨酰小肽類化合物(I)的R基團(tuán)為甘氨酸、L-氨基酸、D-氨基酸、側(cè)鏈保護(hù)L-氨基酸或側(cè)鏈保護(hù)D-氨基酸的殘基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一鍋法制備Y-谷氨酰小肽類化合物的方法，其特征在于步驟I)中，所述的水相接肽試劑為EDC.HCl/HOBt、EDC.HCl/HOOBt、EDC.HCl/HOAt和EDC.HCl/HOSu中的任意一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一鍋法制備Y-谷氨酰小肽類化合物的方法，其特征在于步驟I)中，所述的水相接肽試劑與5-羧乙基海因的摩爾比為I 1.4: 1，氨基酸與5-羧乙基海因的摩爾比為I 1.6: I。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一鍋法制備Y-谷氨酰小肽類化合物的方法，其特征在于步驟I)中，所述的水相接肽反應(yīng)為先將水相接肽試劑與5-羧乙基海因反應(yīng)I 8h，再加入氨基酸反應(yīng)10 18h。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一鍋法制備Y-谷氨酰小肽類化合物的方法，其特征在于步驟2)中，所述的同時(shí)含有海因酶和氨甲酰酶的菌體為芽孢桿菌(Bacillus fordii)MH602或洋蔥伯克霍爾德氏菌(Burkholderia cepecia) JS-02。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一鍋法制備Y-谷氨酰小肽類化合物的方法，其特征在于步驟2)中，所述的弱堿性條件為pH7.5 9.5。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一鍋法制備Y-谷氨酰小肽類化合物的方法，其特征在于步驟2)中，所述的菌體與5-羧乙基海因小肽類化合物的重量比為1: 0.5 8。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一鍋法制備Y-谷氨酰小肽類化合物的方法，其特征在于步驟2)中，所述的催化水解開環(huán)反應(yīng)溫度為35 45°C，反應(yīng)時(shí)間為10 24h。
10.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一鍋法制備Y-谷氨酰小肽類化合物的方法，其特征在于所述的L-氨基酸為L-丙氨酸、L-纈氨酸、L-亮氨酸、L-異亮氨酸、L-絲氨酸、L-蘇氨酸、L-半胱氨酸、L-甲硫氨酸、L-天冬氨酸、L-谷氨酸、L-天冬酰胺、L-谷氨酰胺、L-賴氨酸、L-精氨酸、L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、L-色氨酸、L-組氨酸和L-脯氨酸中的任意一種； 所述的D-氨基酸為D-丙氨酸、D-纈氨酸、D-亮氨酸、D-異亮氨酸、D-絲氨酸、D-蘇氨酸、D-半胱氨酸、D-甲硫氨酸、D-天冬氨酸、D-谷氨酸、D-天冬酰胺、D-谷氨酰胺、D-賴氨酸、D-精氨酸、D-苯丙氨酸、D-酪氨酸、D-色氨酸、D-組氨酸和D-脯氨酸中的任意一種； 所述的側(cè)鏈保護(hù)L-氨基酸為O-保護(hù)-L-絲氨酸、O-保護(hù)-L-蘇氨酸、S-保護(hù)-L-半胱氨酸、Νε -保護(hù)-L-賴氨酸、Νω-保護(hù)-L-精氨酸、O-保護(hù)-L-酪氨酸和Nim-保護(hù)-L-組氨酸中的任意一種； 所述的側(cè)鏈保護(hù)D-氨基酸為O-保護(hù)-D-絲氨酸、O-保護(hù)-D-蘇氨酸、S-保護(hù)-D-半胱氨酸、Ne -保護(hù)-D-賴氨酸、Νω-保護(hù)-D-精氨酸、O-保護(hù)-D-酪氨酸和Nim-保護(hù)-D-組氨酸中的任意 一種。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種一鍋法制備γ-谷氨酰小肽類化合物的方法。該方法包括下列步驟采用5-羧乙基海因與氨基酸進(jìn)行水相接肽反應(yīng)，形成5-羧乙基海因小肽類化合物；反應(yīng)完成后無需提取分離直接加入同時(shí)含有海因酶與氨甲酰酶的菌體為催化劑進(jìn)行酶催化水解開環(huán)反應(yīng)，得到γ-谷氨酰小肽類化合物。本發(fā)明方法采用海因環(huán)共保護(hù)谷氨酸的α-氨基和α-羧基，僅暴露出γ-羧基，保證了接肽反應(yīng)的位置專一性；采用水相接肽，中間產(chǎn)物無需提取分離直接進(jìn)行下一步酶反應(yīng)，“一鍋法”反應(yīng)過程可有效提高反應(yīng)總收率，同時(shí)水相反應(yīng)也避免了有機(jī)溶劑帶來的環(huán)境污染問題；采用酶法水解開環(huán)，避免了多數(shù)化學(xué)合成中反復(fù)的保護(hù)與脫保護(hù)步驟，減少了副反應(yīng)的發(fā)生。
文檔編號(hào)C12R1/07GK103243141SQ20131019986
公開日2013年8月14日 申請(qǐng)日期2013年5月27日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月27日
發(fā)明者周佳棟, 曹飛, 姚琴, 王月霞, 李曉婉, 文斌斌, 湯智群, 韋萍 申請(qǐng)人:南京工業(yè)大學(xué)