植物耐旱性相關(guān)蛋白OsERF71及其編碼基因與應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種植物耐旱性相關(guān)蛋白OsERF71及其編碼基因與應(yīng)用。本發(fā)明所提供的蛋白來源于旱稻IRAT109，名稱為OsERF71，由序列表序列1所示的氨基酸序列組成。實驗證明，將含有序列表序列2的第81位至第1166位所示DNA分子（即所述蛋白的編碼基因）的重組表達(dá)載體35S::OsERF71轉(zhuǎn)化水稻日本晴得到的OsERF71基因超表達(dá)的T2代轉(zhuǎn)基因株系，在20%PEG、250mmol/L甘露醇和土壤斷水三種干旱脅迫實驗下，植株的存活率或生長勢均顯著高于野生型水稻日本晴。本發(fā)明為提高植物耐旱性提供了一個新的基因和方法，在植物遺傳改良和耐旱性研究方面具有重要意義。
【專利說明】植物耐旱性相關(guān)蛋白0sERF71及其編碼基因與應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種植物耐旱性相關(guān)蛋白〇sERF71及其編碼基因與應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 水稻是世界三大糧食作物之一，干旱是制約水稻可持續(xù)發(fā)展的主要限制因素。據(jù) 統(tǒng)計，世界上有50多個國家和地區(qū)處于干旱半干旱區(qū)，43%的耕地為干旱半干旱區(qū)。我國干 旱和半干旱耕地5. 7億畝，占全國耕地面積的38%，每年因缺水造成糧食減產(chǎn)高達(dá)700-800 億公斤；即使在南方非干旱地區(qū)，也會因降雨量的時空分布不均而經(jīng)常發(fā)生強(qiáng)季節(jié)性干旱， 這些都嚴(yán)重影響了我國水稻的生產(chǎn)。因此培育抗旱水稻品種以達(dá)到高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)的目的顯得尤 為重要。
[0003] 利用傳統(tǒng)育種方法培育抗旱水稻品種周期長、偶然性大，所培育的品種不穩(wěn)定，進(jìn) 展比較緩慢；而利用基因工程技術(shù)可以直接在基因水平上改造植物的遺傳背景，定向改造 植物的遺傳性狀。外源基因的轉(zhuǎn)入豐富了基因資源，彌補(bǔ)了常規(guī)育種方法的不足，是抗旱品 種選育的有效途徑之一。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種植物耐旱性相關(guān)蛋白0SERF71及其編碼基因與應(yīng)用。
[0005] 本發(fā)明所提供的與植物耐旱性相關(guān)的蛋白質(zhì)，來源于旱稻品種IRAT109,名稱為 0sERF71，是如下a)或b)的蛋白質(zhì)：
[0006]a)由序列表序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；
[0007]b)將序列表序列1的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和 /或添加且與植物耐旱性相關(guān)的由（a)衍生的蛋白質(zhì)。
[0008] 序列表序列1所示的氨基酸序列由362個氨基酸殘基組成。
[0009] 為了使上述（a)中的蛋白便于純化，可在由序列表序列1所示的氨基酸序列組成 的蛋白質(zhì)的氨基末端或羧基末端連接上如表1所示的標(biāo)簽。
[0010] 表1標(biāo)簽的序列
[0011]

【權(quán)利要求】
1. 一種蛋白質(zhì)，是如下a)或b)的蛋白質(zhì)： a) 由序列表序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)； b) 將序列表序列1的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或 添加且與植物耐旱性相關(guān)的由（a)衍生的蛋白質(zhì)。
2. 權(quán)利要求1所述蛋白質(zhì)的編碼基因。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的基因，其特征在于：所述蛋白質(zhì)的編碼基因為如下1) -5)基 因中的任意一種： 1) 其核苷酸序列是序列表序列2的第63位至第1167位所示的DNA分子； 2) 其核苷酸序列是序列表序列2的第81位至第1166位所示的DNA分子； 3) 其核苷酸序列是序列表序列2的第1位至第1676位所示的DNA分子； 4) 與1)或2)或3)限定的DNA序列至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少 具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具 有99%同源性且編碼所述蛋白質(zhì)的DNA分子； 5) 在嚴(yán)格條件下與1)或2)或3)或4)限定的DNA序列雜交且編碼所述蛋白質(zhì)的DNA 分子。
4. 含有權(quán)利要求2或3所述基因的重組載體、表達(dá)盒、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系、重組菌或重組病 毒； 所述重組載體具體可為在載體PMDC32的Asc I和Pac I位點間插入序列表序列2的 第63位至第1167位核苷酸序列所示的DNA片段得到的重組載體。
5. 權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)或權(quán)利要求2或3所述的基因在調(diào)控目的植物耐旱性中的 應(yīng)用。
6. -種提高植物耐旱性的方法，包括將權(quán)利要求2或3所述基因?qū)肽康闹参镏械牟?驟。
7. -種培育抗旱轉(zhuǎn)基因植物的方法，是將權(quán)利要求2或3所述基因?qū)肽康闹参镏?，?到耐旱性大于目的植物的轉(zhuǎn)基因植物。
8. 根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的方法，其特征在于：所述導(dǎo)入是通過權(quán)利要求4所述重 組載體實現(xiàn)的。
9. 根據(jù)權(quán)利要求5-8中任一所述的應(yīng)用或方法，其特征在于：所述目的植物為單子葉 植物或雙子葉植物，所述單子葉植物具體可為水稻。
10. 根據(jù)權(quán)利要求5- 9中任一所述的應(yīng)用或方法，其特征在于：所述耐旱性表現(xiàn)為與 如下A-C性狀中的至少一種正相關(guān)： A、 經(jīng)PEG脅迫后的存活率； B、 經(jīng)甘露醇脅迫后的生長勢； C、 經(jīng)斷水脅迫后的存活率。
【文檔編號】C12N5/10GK104341492SQ201310322576
【公開日】2015年2月11日 申請日期:2013年7月29日 優(yōu)先權(quán)日:2013年7月29日
【發(fā)明者】李自超, 趙炎, 李金杰, 張洪亮, 張明輝, 郭蕭 申請人:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)