一種幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑，該快速生長(zhǎng)添加劑制備用各組份以質(zhì)量份表示如下：豬胃500份；牛肉500份；氯化鈉7份；不溶性淀粉1份；尿素1份；純凈水適量；碳酸氫鈉適量，調(diào)節(jié)pH值7.4～7.6。通過依次對(duì)原材料預(yù)處理、切塊、兩次煮沸、過濾、合并濾液冷藏、再煮沸、冷卻，過濾，定容、加氯化鈉、不溶性淀粉和尿素溶解、調(diào)節(jié)pH、滅菌、貯存。本發(fā)明的快速生長(zhǎng)添加劑能夠促使指示菌縮短體外培養(yǎng)時(shí)的延滯期時(shí)間，有效縮短指示菌在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖的時(shí)代時(shí)間，提高檢測(cè)陽(yáng)性率，供制備出優(yōu)質(zhì)的幽門螺桿菌分離培養(yǎng)基。該快速生長(zhǎng)添加劑可采用本發(fā)明所披露的制備方法制備得到。
【專利說明】一種幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑及其制備方法
[0001]
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]本發(fā)明涉及一種快速生長(zhǎng)添加劑，具體涉及一種用于制備優(yōu)質(zhì)幽門螺桿菌分離培養(yǎng)基的幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0003]一般細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖具有以下特征:
一、細(xì)菌的個(gè)體生長(zhǎng)繁殖
細(xì)菌通常以簡(jiǎn)單的無性二分裂法繁殖，極個(gè)別的細(xì)菌可有分枝狀分裂的方式。在適宜條件下，多數(shù)細(xì)菌繁殖速度很快，分裂一次僅需20?30min ;少數(shù)細(xì)菌繁殖較慢，如結(jié)核桿菌約18?20h分裂一次。
[0004]二、細(xì)菌的群體生長(zhǎng)繁殖
細(xì)菌繁殖很快，一般細(xì)菌以20min分裂一次，即一代。按此速度計(jì)算，經(jīng)IOh后，一個(gè)細(xì)菌將繁殖成23°個(gè)菌，細(xì)菌群體將出現(xiàn)龐大至難以想象的程度。但由于細(xì)菌營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的耗竭，毒性產(chǎn)物的積累，經(jīng)過一段時(shí)間后，細(xì)菌繁殖速度逐漸減慢，死亡菌數(shù)則不斷增多，活菌增長(zhǎng)率隨之將趨于停滯至衰退。
[0005]經(jīng)適宜的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，細(xì)菌群體的生長(zhǎng)繁殖一般可分為四期:. (I)、延滯期:
延滯期(O?a)——細(xì)菌數(shù)目保持不變或略有下降，倍增速率為零。
[0006]遲緩期:此時(shí)細(xì)菌尚未開始繁殖，只是為繁殖作準(zhǔn)備。以菌種、菌齡與接種量和營(yíng)養(yǎng)物的不同而異，遲緩期可從數(shù)小時(shí)至數(shù)天不等。
[0007]注:適應(yīng)新的環(huán)境，合成新的酶，有時(shí)可見到接種群體大部分死亡，如果接種用的是饑餓的細(xì)菌或新的培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)不豐富，則該時(shí)期延長(zhǎng)。
[0008]加速生長(zhǎng)期(a?b)——細(xì)菌開始增殖，倍增速率(世代時(shí)間的倒數(shù)，即單位時(shí)間內(nèi)的分裂次數(shù))隨時(shí)間的延長(zhǎng)，而使菌數(shù)增大。
[0009](2)、對(duì)數(shù)期:
對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期(b?c)——倍增速率達(dá)到最大值，且保持垣定，它說明平均世代時(shí)間不變，細(xì)菌數(shù)目以幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng)。
[0010]細(xì)菌生長(zhǎng)迅速，以恒定的速度進(jìn)行分裂繁殖，通常菌數(shù)以幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng)。此時(shí)的細(xì)菌的形態(tài)、染色性、生理活性等較典型、對(duì)外界環(huán)境因素的作用也較為敏感。多數(shù)細(xì)菌約在培養(yǎng)18?24h左右。
[0011]注:其速率取決于培養(yǎng)基組分和環(huán)境因子。
[0012]減速生長(zhǎng)期(c?d)——倍增速率隨時(shí)間的延長(zhǎng)而減少，平均世代時(shí)間也延長(zhǎng)。
[0013]注:由于一種或多種底物的濃度成為限制因子，使倍增速率隨之降低。
[0014](3)、穩(wěn)定期:穩(wěn)定期(d?e)-生長(zhǎng)速率與死亡速率相等,倍增速率為零,活菌數(shù)目保持垣定。
[0015]穩(wěn)定期:對(duì)數(shù)期之后，細(xì)菌繁殖速度趨于下降，細(xì)菌死亡數(shù)則逐步上升，此期細(xì)菌繁殖數(shù)與死亡數(shù)幾乎相等。是由于培養(yǎng)基上營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗，供不應(yīng)求、毒性產(chǎn)物逐漸積聚，培養(yǎng)基PH下降等。細(xì)菌的代謝產(chǎn)物如抗生素、外毒素等，多在此期產(chǎn)生。芽孢也多在此期形成。
[0016]注:由于營(yíng)養(yǎng)耗盡和有害代謝產(chǎn)物積累,細(xì)菌停止增殖,但菌體仍然存活,利用細(xì)胞內(nèi)的能量?jī)?chǔ)存物質(zhì)維持生存。其些G+和許多真核微生物，在減速期后進(jìn)入產(chǎn)孢期，其生存與產(chǎn)孢所需的能量也是由于對(duì)數(shù)期積累的能量物質(zhì)所提供。
[0017](4)、死亡期:
衰亡期:隨著穩(wěn)定期繼續(xù)發(fā)展，細(xì)菌繁殖速度越來越慢、死亡越來多，活菌數(shù)急劇下降，死菌數(shù)明顯超過活菌數(shù)，但細(xì)菌總數(shù)(包括活菌與死菌)并不減少。有些菌死亡后發(fā)生自溶，則細(xì)菌總數(shù)也可下降。
[0018]加速死亡期(e?f)——死亡速率超過生長(zhǎng)速率，并越來越大，活菌數(shù)目迅速減少。
[0019]對(duì)數(shù)死亡期(f?g)——死亡速率超達(dá)到最大值,并保持恒定。
[0020]殘留期(h?)——死亡速率降低，從理論上講，只要培養(yǎng)基不干涸，少數(shù)細(xì)菌仍可活較長(zhǎng)時(shí)間。
[0021]細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線 在研究工作和生產(chǎn)實(shí)踐中都有指導(dǎo)意義。但必須指出，上述生長(zhǎng)曲線僅在體外人工培養(yǎng)的條件時(shí)能出現(xiàn)，并受培養(yǎng)基成分、PH值、培養(yǎng)溫度等因素的影響。而細(xì)菌在人體或動(dòng)物體內(nèi)生長(zhǎng)繁殖，并不存在這樣典型的生長(zhǎng)曲線。
[0022]細(xì)菌在培養(yǎng)基上有一個(gè)適應(yīng)時(shí)間，即延滯期((O?a)，一般需要2h，進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后一般需要20min繁殖一代，同時(shí)個(gè)別弱小菌體存在生長(zhǎng)不良的問題。為保證幽門螺桿菌檢測(cè)，縮短幽門螺桿菌生長(zhǎng)的世代時(shí)間，提高檢測(cè)陽(yáng)性率，制備優(yōu)質(zhì)幽門螺桿菌分離培養(yǎng)基，有必要在培養(yǎng)基中加入幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑。
[0023]
【發(fā)明內(nèi)容】

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是，提供一種幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑，該添加劑能夠縮短幽門螺桿菌生長(zhǎng)的世代時(shí)間，提高檢測(cè)陽(yáng)性率，本發(fā)明還提供了該幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑的制備方法。
[0024]為解決以上技術(shù)問題，本發(fā)明研究了一種幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑，該快速生長(zhǎng)添加劑以豬胃、牛肉為原材料，加純凈水煮沸，濾液中添加氯化鈉、不溶性淀粉和尿素制備得到，制備用各組份以質(zhì)量份表示如下:
豬胃500份；
牛肉500份；
氯化鈉7份；
不溶性淀粉 I份；
尿素I份；
純凈水適量；
碳酸氫鈉適量，調(diào)節(jié)pH值7.4?7.6。
[0025]進(jìn)一步地，所述豬胃、牛肉采用新鮮所得或使用前貯存在4?8°C環(huán)境中< 8h。[0026]進(jìn)一步地，所述純凈水pH值5.0-7.0，電導(dǎo)率≤5.0 μ s/cm。
[0027]進(jìn)一步地，所述不溶性淀粉為干燥玉米去皮，研磨成細(xì)顆粒，再用100目細(xì)篩過篩后所得。
[0028]前述幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑的制備方法，其特征在于該制備方法包括如下步驟:
(1)、將作為原材料的豬胃和牛肉進(jìn)行預(yù)處理，并切成小塊；
(2)、將步驟(1)切成小塊的原材料與質(zhì)量為原材料兩倍量的純凈水混合，加熱煮沸Ih后過濾,收集濾液A ;
(3)、將步驟(2)所得濾渣與質(zhì)量為原材料一倍量的純凈水混合，加熱煮沸Ih后過濾，收集濾液B ；
(4)、將步驟(2)與步驟(3)所得的濾液A和濾液B混合，并置于4°C環(huán)境中過夜，然后刮掉油脂，過濾，得新的濾液C ;
(5)、將步驟(4)所得的濾液C加熱煮沸使其質(zhì)量濃縮至原材料量；
(6)、將步驟(5)煮沸的濾液C冷卻至50-60°C，過濾，收集濾液D，并加純凈水補(bǔ)充至每毫升濾液中含有豬胃和牛肉各0.5克；
(7)、加入氯化鈉、不溶性淀粉和尿素，攪拌溶解；
(8)、用碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH值7.4-7.6 ;
(9 )、滅菌處理，冷卻，得幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑。
[0029]進(jìn)一步地，步驟(I)所述預(yù)處理包括依次對(duì)豬胃、牛肉原材料用自來水漂洗干凈、去筋、去膜、去油脂，再依次用自來水浸泡、漂洗干凈，然后濾掉水份，晾干。
[0030]進(jìn)一步地,步驟(2)和步驟(3)采用紗布過濾；步驟(4)和步驟(6)采用棉花過濾。
[0031]進(jìn)一步地，步驟(9)所述滅菌處理為將步驟(8)所得的液體分裝，然后置于壓力蒸汽滅菌器內(nèi)，121°C條件下滅菌20min。
[0032]進(jìn)一步地，所得幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑置于O-4°C環(huán)境中貯存。
[0033]本發(fā)明的快速生長(zhǎng)添加劑能夠促使指示菌縮短體外培養(yǎng)時(shí)的延滯期時(shí)間，可以從2h縮短到lh，有效縮短指示菌在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖的時(shí)代時(shí)間，使世代時(shí)間小于20min，提高檢測(cè)陽(yáng)性率，促使弱小菌體生長(zhǎng)良好，供制備出優(yōu)質(zhì)的幽門螺桿菌分離培養(yǎng)基。該快速生長(zhǎng)添加劑可采用本發(fā)明所披露的制備方法制備得到。
【具體實(shí)施方式】
[0034]下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于此。
[0035]本發(fā)明的實(shí)施例1:
一、幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑的制備:
(1)、取500g豬胃、500g牛肉作為原材料，用自來水漂洗干凈、去筋、去膜、去油脂，再依次用自來水浸泡、漂洗干凈，然后濾掉水份，晾干，并切成I cm3大小的小塊，其中原材料要求色澤鮮艷、新鮮、無異味、無油脂，采用新鮮所得，如果未能及時(shí)使用，則可以貯存于4?8°C環(huán)境中不超過8小時(shí)以實(shí)現(xiàn)保鮮，一般為4-8小時(shí)；
(2)、將步驟(1)切成小塊的原材料置于大桶內(nèi)，加入質(zhì)量為原材料兩倍量的純凈水混合，加熱煮沸Ih后用紗布過濾，收集濾液A ；
(3)、將步驟(2)所得濾渣置于大桶內(nèi)，加入質(zhì)量為原材料一倍量的純凈水混合，加熱煮沸Ih后用紗布過濾，收集濾液B ；
(4)、將步驟(2)與步驟(3)所得的濾液A和濾液B混合，并置于4°C環(huán)境中過夜，然后刮掉油脂，立即用棉花過濾，得新的濾液C ；
(5)、將步驟(4)所得的濾液C置于大桶內(nèi)，加熱煮沸使其質(zhì)量濃縮至原材料量；
(6)、將步驟(5)煮沸的濾液C冷卻至50-60°C，用棉花過濾，收集濾液D，并加純凈水補(bǔ)充至每毫升濾液中含有豬胃和牛肉各0.5克；
(7)、加入7g氯化鈉、Ig不溶性淀粉(由干燥玉米去皮，研磨成細(xì)顆粒，再用100目細(xì)篩過篩后所得。)和Ig尿素，用玻璃棒攪拌溶解；
(8)、用1%(質(zhì)量)的碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH值7.4?7.6 ;
(9)、分裝步驟(8)所得液體，IOOml/瓶，然后置于壓力蒸汽滅菌器內(nèi)，121°C條件下滅菌處理20min，冷卻后取出，得幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑，置于O?4°C環(huán)境中貯存，備用。
[0036]拿起裝有所述幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑的瓶子，對(duì)著光線，輕輕搖動(dòng)，用肉眼觀察外觀，要求外觀呈淡黃色粘液狀液體，無顆粒雜質(zhì)。用酸度計(jì)測(cè)定PH值為7.4?7.6。
[0037]以上制備過程所用的純凈水的酸堿度pH值5.0?7.0，電導(dǎo)率≤5.0 μ s/cm。
[0038]二、促生長(zhǎng)試驗(yàn):
1、材料
(I)、指示菌:金黃色葡萄球菌ATCC 25923。說明:ATCC為美國(guó)菌種保藏中心，即美國(guó)模式培養(yǎng)物集存庫(kù)(American type culture collection)的簡(jiǎn)寫,ATCC所給的菌株編號(hào)為25923，在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC)以及中國(guó)典型微生物保藏中心(CCTCC)等我國(guó)保藏單位均有售。
[0039](2)、培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基(米用市售)；
營(yíng)養(yǎng)瓊脂(采用市售)。
[0040](3)、試劑:0.85% (質(zhì)量)鹽水(經(jīng)滅菌處理)；
(4)、器材:15mmX 150mm試管若干(經(jīng)滅菌處理)；
Iml和IOml的移液管若干(經(jīng)滅菌處理)；
平皿(經(jīng)滅菌處理)。
[0041](5)、試驗(yàn)培養(yǎng)基制備:取90毫升營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,置于100毫升三角燒瓶?jī)?nèi)，加入10毫升本發(fā)明制備的快速生長(zhǎng)添加劑，充分混勻，分裝于試管，每支9毫升，121°C滅菌20mino
[0042](6)、對(duì)照培養(yǎng)基制備:100毫升營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，分裝于試管，每支9毫升，121°C滅菌20min。
[0043]2、方法:
(I)、菌懸液制備計(jì)數(shù):
A、用接種環(huán)，挑取金黃色葡萄球菌菌種，接種到營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上，作分離。
[0044]B、平板置于36°C培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)18小時(shí)。
[0045]C、用接種環(huán)挑取二只直徑為1.5毫米的金黃色葡萄球菌菌落，置于2毫升的滅菌
0.85% (質(zhì)量)鹽水中，用接種環(huán)研磨成菌懸液。[0046]D、取滅菌試管6支，每支試管中加入滅菌0.85% (質(zhì)量)鹽水9毫升。
[0047]E、用滅菌I毫升移液管，吸取菌懸液I毫升，加入第I支試管中，稀釋度為10'
[0048]F、另取I支滅菌I毫升移液管，吹打第I支試管中的液體，使其充分混勻，吸取I毫升混和的菌懸液，置于第2支試管中，稀釋度為10_2。
[0049]G、另取I支滅菌I毫升移液管，吹打第2支試管中的液體，使其充分混勻，吸取I毫升混和的菌懸液，置于第3支試管中，稀釋度為10_3。
[0050]H、依上述過程類推，用同樣的方法，直至將菌懸液稀釋為10_6。
[0051]1、另取I支滅菌I毫升移液管，吸取I毫升稀釋度為10_6的混和菌懸液，置于滅菌平皿中，共4只滅菌平皿。
[0052]J、每只滅菌平皿中，傾注入已熔化、并冷卻到42?45°C的營(yíng)養(yǎng)瓊脂18?20ml，充分混勻。凝固后，置于36°C培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)18小時(shí)。
[0053]K、取出，計(jì)數(shù)。
[0054]結(jié)果:85、83、82、82。
[0055]得到平均為83cfu/皿,其中，cfu為菌落形成單位(Colony-Forming Units)。
[0056]菌懸液菌量為8.3 X 107cfu/ml。
[0057](2)、促生長(zhǎng)試驗(yàn)
A、取試驗(yàn)培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基各6支試管,每支試管中放9ml試驗(yàn)培養(yǎng)基或?qū)φ张囵B(yǎng)基，再分別加入按前述菌懸液制備計(jì)數(shù)中所述稀釋方法得到的稀釋度為10_5菌懸液各I毫升，得到稀釋度為10_6菌懸液。
[0058]B、將試管置于36°C培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)2小時(shí)。
[0059]C、用滅菌I毫升移液管,從各試管中吸取培養(yǎng)2小時(shí)的菌懸液I毫升,各置于一個(gè)滅菌平皿中，每只平皿中分別傾注入已熔化、并冷卻到42?45°C的營(yíng)養(yǎng)瓊脂18?20ml，充分混勻。凝固后，置于36°C培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)18小時(shí)。
[0060]D、取出，計(jì)數(shù)。
[0061]結(jié)果:
試驗(yàn)培養(yǎng)基菌落數(shù):106、102、110、109、105、108。平均為:106.67cfu/ 皿。
[0062]對(duì)照培養(yǎng)基菌落數(shù):69、66、64、63、70、68。平均為:66.67 cfu/皿。
[0063]E、將試管繼續(xù)在36°C培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)6小時(shí)。
[0064]F、取出，按菌懸液制備計(jì)數(shù)中步驟D?K的方法進(jìn)行計(jì)數(shù)。
[0065]G、稀釋度為10_6的計(jì)數(shù)結(jié)果:
試驗(yàn)培養(yǎng)基:29、30、28、27、31、28。平均為:28.83。
[0066]對(duì)照培養(yǎng)基:16、18、17、16、15、18。平均為:16.67。
[0067](3)統(tǒng)計(jì)分析(根據(jù)衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)學(xué)中兩個(gè)樣本均數(shù)比較的方差分析，從分析的結(jié)果可以看到總變異、組內(nèi)變異、組間變異等三種變異，分析兩個(gè)樣本的差異。):
A、培養(yǎng)2小時(shí)結(jié)果分析。
[0068]表1:培養(yǎng)基菌落形成單位數(shù)
【權(quán)利要求】
1.一種幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑，其特征在于該快速生長(zhǎng)添加劑以豬胃、牛肉為原材料，加純凈水煮沸，濾液中添加氯化鈉、不溶性淀粉和尿素制備得到，制備用各組份以質(zhì)量份表示如下: 豬胃500份； 牛肉500份； 氯化鈉7份； 不溶性淀粉 I份； 尿素I份； 純凈水適量； 碳酸氫鈉適量，調(diào)節(jié)pH值7.4?7.6。
2.根據(jù)權(quán)利要求1 所述的幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑，其特征在于:所述豬胃、牛肉采用新鮮所得或使用前貯存在4?8°C環(huán)境中< 8h。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑，其特征在于:所述純凈水pH值5.0 ?7.0,電導(dǎo)率< 5.0 μ s/cm。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑，其特征在于:所述不溶性淀粉為干燥玉米去皮，研磨成細(xì)顆粒，再用100目細(xì)篩過篩后所得。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述的幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑的制備方法，其特征在于該制備方法包括如下步驟: (1)、將作為原材料的豬胃和牛肉進(jìn)行預(yù)處理，并切成小塊； (2)、將步驟(I)切成小塊的原材料與質(zhì)量為原材料兩倍量的純凈水混合，加熱煮沸I?1.5h后過濾,收集濾液A ； (3)、將步驟(2)所得濾渣與質(zhì)量為原材料一倍量的純凈水混合，加熱煮沸I?1.5h后過濾，收集濾液B ； (4)、將步驟(2)與步驟(3)所得的濾液A和濾液B混合，并置于4°C環(huán)境中過夜，然后刮掉油脂，過濾，得新的濾液C ； (5)、將步驟(4)所得的濾液C加熱煮沸，使其質(zhì)量濃縮至原材料量； (6)、將步驟(5)經(jīng)濃縮的濾液C冷卻至50-60°C，過濾，收集濾液D，并加純凈水補(bǔ)充至每毫升濾液中含有豬胃和牛肉各0.5克； (7)、加入氯化鈉、不溶性淀粉和尿素，攪拌溶解； (8)、用碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH值7.4?7.6 ; (9 )、滅菌處理，冷卻，得幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑的制備方法，其特征在于:步驟(1)所述預(yù)處理包括依次對(duì)豬胃、牛肉原材料用自來水漂洗干凈、去筋、去膜、去油脂，再依次用自來水浸泡、漂洗干凈，然后濾掉水份，晾干。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑的制備方法，其特征在于:步驟(2)和步驟(3)采用紗布過濾；步驟(4)和步驟(6)采用棉花過濾。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑的制備方法，其特征在于:步驟(9)所述滅菌處理為將步驟(8)所得的液體分裝，然后置于壓力蒸汽滅菌器內(nèi)，121°C條件下滅菌20min。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的幽門螺桿菌快速生長(zhǎng)添加劑的制備方法，其特征在于:所得幽門螺 桿菌快速生長(zhǎng)添加劑置于O?4°C環(huán)境中貯存。
【文檔編號(hào)】C12N1/20GK103436468SQ201310346279
【公開日】2013年12月11日 申請(qǐng)日期:2013年8月11日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月11日
【發(fā)明者】楊寧敏, 屠苗穎 申請(qǐng)人:杭州致遠(yuǎn)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司