一種用于鑒別泡菜生花病害菌的微生物純化方法
【專利摘要】本發(fā)明通過對疑似生花病害微生物接種培養(yǎng)，利用不同種類的微生物不同的生長特性和菌落特征得以將目標(biāo)病害疑似菌挑取出來，并多次重復(fù)純化過程從而達(dá)到將雜菌剔除，獲得待鑒定目標(biāo)病害疑似菌的純培養(yǎng)物。本發(fā)明方法具有實驗簡單、成本低廉、易操作實施、重復(fù)性好等優(yōu)點。
【專利說明】—種用于鑒別泡菜生花病害菌的微生物純化方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及食品病害微生物鑒別【技術(shù)領(lǐng)域】，具體是提供一種簡單且準(zhǔn)確的用于鑒別泡菜生花病害茵的微生物純化方法。

【背景技術(shù)】
[0002]泡菜，是指經(jīng)過發(fā)酵的蔬菜，古稱菹。我國泡菜歷史悠久，流傳廣泛，我國最早的詩集《詩經(jīng)》中有“中田有廬，疆場有瓜是剝是菹，獻之皇祖”的詩句。廬和瓜是蔬菜，“剝”和“菹”是腌潰加工的意思。據(jù)漢許慎《說文解字》解釋“菹菜者，酸菜也”。說明至遲在3100多年前的商代武丁時期，我國勞動人民就能用鹽來潰梅烹飪用。由此可見，我國的鹽潰菜應(yīng)早于《詩經(jīng)》，應(yīng)起源于3100年前的商周時期。
[0003]一般來說，只要是纖維豐富的蔬菜或水果，都可以被制成泡菜，是一種既營養(yǎng)又衛(wèi)生的蔬菜加工品。因為泡菜的主要原料是各種蔬菜，維生素及鈣、鐵、磷等礦物質(zhì)含量豐富，其中豆類還含有豐富的全價蛋白質(zhì)。在泡制過程中，蔬菜的溫度一直保持在常溫下，蔬菜中的維生素C和B族維生素不會受到破壞，因此，泡菜比起炒菜來營養(yǎng)價值更高。泡菜富含乳酸，一般為0.4%?0.8%，可刺激消化腺分泌消化液，幫助食物的消化吸收。同時，發(fā)酵生成的左旋乳酸易被人體利用。泡菜中的乳酸菌群可抑制多種病原菌的生長繁殖，如痢疾桿菌在泡菜中經(jīng)3?6小時、霍亂菌經(jīng)I?2小時、傷寒菌經(jīng)2?9小時均能被殺滅。新鮮蔬菜上所沾附的蛔蟲卵，在密封的泡菜壇內(nèi)也會因缺氧窒息死亡。因此，常吃泡菜可以增加腸胃中的有益菌，抑制腸道中的致病菌，降低患胃腸道疾病的幾率，增加身體抵抗力。此外，蔬菜中含有一定量的蛋白質(zhì)，在加工泡菜過程中，蛋白質(zhì)由于受到微生物和蛋白質(zhì)水解酶的作用，逐漸被分解為小分子多肽物質(zhì)直至氨基酸。這是一種重要的生物化學(xué)變化，使腌制品不僅產(chǎn)生一定的光澤、香氣和風(fēng)味，還促進了營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，增加了食物的營養(yǎng)價值。因而泡菜既能為人體提供充足的營養(yǎng)，又能預(yù)防動脈硬化等疾病。
[0004]泡菜以其獨特的風(fēng)味以及豐富的營養(yǎng)價值，受到世界各地越來越多人們的喜愛。但由于各種原因，我國泡菜出口總額還比較低，其中影響最大的是泡菜生產(chǎn)的工業(yè)化改造技術(shù)還不夠成熟，工業(yè)化生產(chǎn)出來的泡菜質(zhì)量不及傳統(tǒng)法生產(chǎn)出來的泡菜，而工業(yè)化生產(chǎn)泡菜過程中“生花”的侵害最大，給泡菜質(zhì)量和產(chǎn)量帶來的損失也是最大。
[0005]在泡菜生產(chǎn)過程中常常易出現(xiàn)“生花”病害也叫產(chǎn)膜，俗稱“臭風(fēng)”，會散發(fā)一種令人不愉悅的氣味，而且會產(chǎn)生澀味，使受侵害泡菜口感和營養(yǎng)價值比正常發(fā)酵泡菜差很多。常出現(xiàn)在啤酒、醬油、果汁、葡萄酒及泡菜的生產(chǎn)過程中。主要是由氧化性酵母(包括假絲酵母和畢氏酵母等)所引起的，同時還附帶產(chǎn)生不愉快氣味。目前，國內(nèi)外還沒有學(xué)者對泡菜“生花”現(xiàn)象進行比較系統(tǒng)的研究。在工業(yè)化生產(chǎn)中，鑒別生花泡菜的方法只能單純依靠工人的經(jīng)驗人工進行粗略的鑒定和分離。如何在鑒別泡菜是否受到生花病害菌污染的過程中對待鑒定的生花病害疑似菌準(zhǔn)確地提取出來并在較大程度上剔除影響鑒定的雜菌，將疑似菌進行純化用于進一步鑒定是加工技術(shù)的一個重要待解決問題。
[0006]因此提供一種簡單且準(zhǔn)確的用于鑒別泡菜生花病害菌的微生物純化方法，幫助工人避免“生花”病原菌對泡菜生產(chǎn)帶來的不利影響，也為其它農(nóng)產(chǎn)品深加工中類似問題提供參考。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]針對現(xiàn)有生產(chǎn)存在的技術(shù)問題，本發(fā)明的目的是提供一種操作簡單、安全可靠、成本低廉的用于鑒別泡菜生花病害菌的微生物純化方法。
[0008]本發(fā)明采用傳統(tǒng)微生物鑒定方法對泡菜“生花”病害微生物進行挑取，并進一步對挑取得到的產(chǎn)物進行培養(yǎng)純化。具體技術(shù)方案為一種用于鑒別泡菜生花病害菌的微生物純化方法，其特征在于包括步驟:
[0009]I)取樣接種:取出現(xiàn)“生花”現(xiàn)象的泡菜液液面上層白色物質(zhì)作為樣品，接種于培養(yǎng)基上，置于31?35°C恒溫培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)6?7d,觀察菌落生長狀況；
[0010]2)分選純化:將培養(yǎng)后的疑似菌單菌落接種培養(yǎng)于新的培養(yǎng)基上，重復(fù)5?6次進行純化；
[0011]3)取菌:挑取病害菌純培養(yǎng)物，以備用于進一步鑒定。
[0012]本發(fā)明通過對疑似生花病害微生物接種培養(yǎng)，利用不同種類的微生物不同的生長特性和菌落特征得以將目標(biāo)病害疑似菌挑取出來，并多次重復(fù)純化過程從而達(dá)到將雜菌剔除，獲得待鑒定目標(biāo)病害疑似菌的純培養(yǎng)物。本發(fā)明方法具有實驗簡單、成本低廉、易操作實施、重復(fù)性好等優(yōu)點。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0013]圖1是本發(fā)明用于鑒別泡菜生花病害菌的微生物純化方法步驟示意圖；

【具體實施方式】
[0014]以下將結(jié)合具體實施例和說明書附圖對本發(fā)明做進一步詳細(xì)說明。
[0015]實施例1
[0016]試驗原料和試劑
[0017]I)泡菜疑似菌:出現(xiàn)“生花”現(xiàn)象的泡菜液中取液面上層白色物質(zhì)；
[0018]2)糖發(fā)酵基礎(chǔ)肉湯:胰蛋白胨10.0g，牛肉浸粉3.0g，氯化鈉5.0g，溴甲酚紫0.04g，加水至 1000ml，pH 值 7.0，121 °C 高壓滅菌 15min ；
[0019]3)營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基:蛋白胨10.0g，牛肉粉3.0g，氯化鈉5.0g，瓊脂15.0g，蒸餾水1000ml, 121°C 滅菌 20min。
[0020]試驗步驟:
[0021]I)取樣接種:取出現(xiàn)“生花”現(xiàn)象的泡菜液液面上層白色物質(zhì)作為樣品，接種于營養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基上，置于35°C恒溫培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)7d,觀察菌落生長狀況；
[0022]2)分選純化:將培養(yǎng)后的疑似菌單菌落劃線接種培養(yǎng)于新的營養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基上，重復(fù)6次進行純化；
[0023]3)取菌:挑取病害細(xì)菌純培養(yǎng)物，以備用于進一步鑒定。
[0024]實施例2
[0025]試驗原料和試劑
[0026]I)泡菜疑似菌:出現(xiàn)“生花”現(xiàn)象的泡菜液中取液面上層白色物質(zhì)；
[0027]2)糖發(fā)酵基礎(chǔ)肉湯:胰蛋白胨10.0g，牛肉浸粉3.0g，氯化鈉5.0g，溴甲酚紫0.04g，加水至 1000ml，pH 值 7.0，121 °C 高壓滅菌 15min ；
[0028]3)孟加拉紅培養(yǎng)基:蛋白胨5.0g,葡萄糖10.0g,磷酸二氫鉀1.0g,無水硫酸鎂0.5g，瓊脂20.0g,孟加拉紅0.033g,氯霉素0.1g,蒸餾水100ml，121 °C滅菌20min。
[0029]試驗步驟:
[0030]I)取樣接種:取出現(xiàn)“生花”現(xiàn)象的泡菜液液面上層白色物質(zhì)作為樣品，接種于孟加拉紅平板培養(yǎng)基上，置于31°C恒溫培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)7d,觀察菌落生長狀況；
[0031]2)分選純化:將培養(yǎng)后的疑似菌單菌落劃線接種培養(yǎng)于新的孟加拉紅平板培養(yǎng)基上，重復(fù)6次進行純化；
[0032]3)取菌:挑取病害細(xì)菌純培養(yǎng)物，以備用于進一步鑒定。
【權(quán)利要求】
1.一種用于鑒別泡菜生花病害菌的微生物純化方法，其特征在于包括步驟: 1)取樣接種:取出現(xiàn)“生花”現(xiàn)象的泡菜液液面上層白色物質(zhì)作為樣品，接種于培養(yǎng)基上，置于31?35°C恒溫培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)6?7d,觀察菌落生長狀況； 2)分選純化:將培養(yǎng)后的疑似菌單菌落接種培養(yǎng)于新的培養(yǎng)基上，重復(fù)5?6次進行純化； 3)取菌:挑取病害菌純培養(yǎng)物，以備用于進一步鑒定。
【文檔編號】C12N1/20GK104419655SQ201310395801
【公開日】2015年3月18日 申請日期:2013年8月30日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月30日
【發(fā)明者】張政 申請人:張政