抗酸染色液質(zhì)控品制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及生物醫(yī)療【技術(shù)領(lǐng)域】，提供一種抗酸染色液質(zhì)控品制備方法，包含以下步驟：將H37Ra結(jié)核桿菌作為抗酸染色陽性菌株，與抗酸染色陰性菌株分別裝在2支試管中，標(biāo)為試樣1和試樣2，放在冰箱中；將試樣1的H37Ra結(jié)核桿菌從培養(yǎng)基上用生理鹽水洗下，取H37Ra結(jié)核桿菌菌液加入無菌組織研磨器中進(jìn)行研磨，制成分支H37Ra結(jié)核桿菌；向試樣2中加入生理鹽水，將抗酸染色陰性菌株溶解，制備成菌懸液；向試樣3中加入無菌生理鹽水；分別向試樣3中加入分支H37Ra結(jié)核桿菌、試樣2的菌懸液，放在震蕩器上混勻；取試樣3的菌懸液滴在玻片上；將該玻片放在室溫下自然干燥；將干燥的該玻片涂面朝上，放在酒精燈火焰上來回通過，固定菌膜。本發(fā)明提高工作人員的工作效率。
【專利說明】抗酸染色液質(zhì)控品制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物醫(yī)療【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及抗酸染色液質(zhì)控品制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]抗酸染色法，是1882年由埃利希首創(chuàng)并經(jīng)齊爾改進(jìn)而創(chuàng)造出的細(xì)菌染色法。分枝桿菌的細(xì)胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì)，包圍在肽聚糖的外面，所以分枝桿菌一般不易著色，要經(jīng)過加熱和延長染色時(shí)間來促使其著色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結(jié)合后，就很難被酸性脫色劑脫色，故名抗酸染色。齊-尼氏抗酸染色法是在加熱條件下使分枝菌酸與石炭酸復(fù)紅牢固結(jié)合成復(fù)合物，用鹽酸酒精處理也不脫色。當(dāng)再加堿性美蘭復(fù)染后，分枝桿菌仍然為紅色，而其他細(xì)菌及背景中的物質(zhì)為藍(lán)色。
[0003]抗酸染色法一般包括:初染、脫色、復(fù)染三個(gè)步驟，具體操作方法是:細(xì)菌涂片標(biāo)本的制作和固定；用玻片夾夾持涂片標(biāo)本，滴加石炭酸復(fù)紅2-3滴，在火焰高處徐徐加熱，切勿沸騰，出現(xiàn)蒸汽即暫時(shí)離開，若染液蒸發(fā)減少，應(yīng)再加染液，以免干涸，加熱3-5分鐘，待標(biāo)本冷卻后用水沖洗；加入3%鹽酸酒精脫色30秒分鐘，用水沖洗；用堿性美蘭溶液復(fù)染I分鐘，水洗，用吸水紙吸干后用油鏡觀察。
[0004]抗酸染色三步法效果很好，但操作比較復(fù)雜，工作人員每操作一次就要做一次細(xì)菌涂片標(biāo)本，浪費(fèi)時(shí)間，并且工作效率低，對染色液質(zhì)量、染色時(shí)間長短、工作人員操作技術(shù)熟練程度都有很高的要求，但是目前市場沒有任何一款預(yù)先制好的細(xì)菌涂片標(biāo)本，供工作人員工作時(shí)直接拿來使用。
[0005]因此，生物醫(yī)療【技術(shù)領(lǐng)域】急需一種節(jié)省時(shí)間、操作簡單、提高工作人員工作效率、能夠檢測染色液的質(zhì)量、對工作人員起到監(jiān)督作用的抗酸染色液質(zhì)控品制備方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的抗酸染色液質(zhì)控品制備方法，技術(shù)方案如下:
本發(fā)明的抗酸染色液質(zhì)控品制備方法，其特征在于，包含以下步驟:
第一步，將H37Ra結(jié)核桿菌作為抗酸染色陽性菌株，與抗酸染色陰性菌株分別裝在2支試管中，標(biāo)為試樣I和試樣2,放在冰箱中冷凍、干燥保存；
第二步，從冰箱中取出試樣I和試樣2，將試樣I的H37Ra結(jié)核桿菌，從培養(yǎng)基上用生理鹽水洗下，并取H37Ra結(jié)核桿菌菌液加入無菌組織研磨器中進(jìn)行研磨，制成分支H37Ra結(jié)核桿菌；向試樣2中加入生理鹽水，將抗酸染色陰性菌株溶解，制備成菌懸液；
第三步，重新拿取試管，標(biāo)為試樣3 ;首先，向試樣3中加入無菌生理鹽水；然后，分別向試樣3中加入分支H37Ra結(jié)核桿菌、試樣2的菌懸液，放在震蕩器上混勻；
第四步，從試樣3中取出稀釋后的菌懸液，滴在玻片上；
第五步，將玻片放在室溫下自然干燥；
第六步，將干燥的玻片涂面朝上，放在酒精燈火焰上來回通過，固定菌膜。
[0007]如上的抗酸染色液質(zhì)控品制備方法，其中，抗酸染色陰性菌株為I種菌株。[0008]如上的抗酸染色液質(zhì)控品制備方法，其中，抗酸染色陰性菌株為2種或者多種菌株的混合物。
[0009]如上的抗酸染色液質(zhì)控品制備方法，其中，抗酸染色陰性菌株為球菌。
[0010]如上的抗酸染色液質(zhì)控品制備方法，其中，抗酸染色陰性菌株為桿菌。
[0011]如上的抗酸染色液質(zhì)控品制備方法，其中，抗酸染色陰性菌株為球菌和桿菌的混合物。
[0012]本發(fā)明的有益效果是:
通過制備好的抗酸染色質(zhì)控品與新制作的涂片同時(shí)進(jìn)行初染、脫色、復(fù)染的過程，可以檢測出染色液是否過期。
[0013]通過制備好的抗酸染色質(zhì)控品與新制作的涂片同時(shí)進(jìn)行初染、脫色、復(fù)染的過程，能夠?qū)Σ僮魅藛T的操作步驟、熟練程度進(jìn)行監(jiān)督和檢驗(yàn)。
[0014]本發(fā)明操作簡單、節(jié)省時(shí)間。
[0015]本發(fā)明提高了操作人員的工作效率，從而提高了經(jīng)濟(jì)效益，具有更加廣泛的適用性。
【具體實(shí)施方式】
[0016]為了使本發(fā)明的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達(dá)成目的與功效易于明白了解，下面結(jié)合具體示例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。
[0017]實(shí)施例一:
本發(fā)明的具體實(shí)施步驟如下:
第一步，將H37Ra結(jié)核桿菌作為抗酸染色陽性菌株，與抗酸染色陰性菌株分別裝在2支試管中，標(biāo)為試樣I和試樣2,放在冰箱中冷凍、干燥保存；
第二步，從冰箱中取出試樣I和試樣2，將試樣I的H37Ra結(jié)核桿菌，從培養(yǎng)基上用Iml生理鹽水洗下，并取lmlH37Ra結(jié)核桿菌菌液加入無菌組織研磨器中進(jìn)行研磨，制成分支H37Ra結(jié)核桿菌；向試樣2中加入0.5ml生理鹽水，將抗酸染色陰性菌株溶解，制備成菌懸液；
第三步，重新拿取試管，標(biāo)為試樣3 ;首先，向試樣3中加入Iml無菌生理鹽水；然后，分別向試樣3中加入0.1ml研磨后的分支H37Ra結(jié)核桿菌、0.05ml試樣2的菌懸液，放在震蕩器上混勻；
第四步，從試樣3中取出0.1ml稀釋后的菌懸液，滴在玻片上；
第五步，將玻片放在室溫下自然干燥；
第六步，將干燥的玻片涂面朝上，放在酒精燈火焰上來回通過三次，固定菌膜。
[0018]實(shí)施例二:
本發(fā)明的具體實(shí)施步驟如下:
第一步，將H37Ra結(jié)核桿菌作為抗酸染色陽性菌株，與抗酸染色陰性菌株分別裝在2支試管中，標(biāo)為試樣I和試樣2,放在冰箱中冷凍、干燥保存；
第二步，從冰箱中取出試樣I和試樣2，將試樣I的H37Ra結(jié)核桿菌，從培養(yǎng)基上用2ml生理鹽水洗下，并取lmlH37Ra結(jié)核桿菌菌液加入無菌組織研磨器中進(jìn)行研磨；向試樣2中加入0.4ml生理鹽水，將抗酸染色陰性菌株溶解，制備成菌懸液；第三步，重新拿取試管，標(biāo)為試樣3 ;首先，向試樣3中加入2ml無菌生理鹽水；然后，分別向試樣3中加入0.2ml研磨后的分支H37Ra結(jié)核桿菌、0.1ml試樣2的菌懸液，放在震蕩器上混勻；
第四步，從試樣3中取出0.2ml稀釋后的菌懸液，滴在玻片上；
第五步，將玻片放在室溫下自然干燥；
第六步，將干燥的玻片涂面朝上，放在酒精燈火焰上來回通過4次，固定菌膜。
[0019]如上對本發(fā)明的描述中，具體量取試劑的體積均為一個(gè)示例，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以選擇其他的體積。
[0020]抗酸染色陰性菌株為I種菌株或2種或者多種菌株的混合物。
[0021]抗酸染色陰性菌株為球菌、桿菌或球菌與桿菌的混合物。
[0022]本發(fā)明的有益效果是:通過制備好的抗酸染色液質(zhì)控品與新制作的涂片同時(shí)進(jìn)行初染、脫色、復(fù)染的過程，可以檢測出染色液是否過期。
[0023]通過制備好的抗酸染色液質(zhì)控品與新制作的涂片同時(shí)進(jìn)行初染、脫色、復(fù)染的過程，能夠?qū)Σ僮魅藛T的操作步驟、熟練程度進(jìn)行監(jiān)督和檢驗(yàn)。
[0024]本發(fā)明操作簡單、節(jié)省時(shí)間。
[0025]本發(fā)明提高了操作人員的工作效率，從而提高了經(jīng)濟(jì)效益，具有更加廣泛的適用性。
[0026]以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例的限制，上述實(shí)施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書及其等同物界定。
【權(quán)利要求】
1.抗酸染色液質(zhì)控品制備方法，其特征在于，包含以下步驟: 第一步，將H37Ra結(jié)核桿菌作為抗酸染色陽性菌株，與抗酸染色陰性菌株分別裝在2支試管中，標(biāo)為試樣I和試樣2,放在冰箱中冷凍、干燥保存； 第二步，從冰箱中取出該試樣I和試樣2，將該試樣I的H37Ra結(jié)核桿菌，從培養(yǎng)基上用生理鹽水洗下，并取H37Ra結(jié)核桿菌菌液加入無菌組織研磨器中進(jìn)行研磨，制成分支H37Ra結(jié)核桿菌；向試樣2中加入生理鹽水，將抗酸染色陰性菌株溶解，制備成菌懸液； 第三步，重新拿取試管，標(biāo)為試樣3 ;首先，向試樣3中加入無菌生理鹽水；然后，分別向試樣3中加入該分支H37Ra結(jié)核桿菌、試樣2的菌懸液，放在震蕩器上混勻； 第四步，從試樣3中取出稀釋后的菌懸液，滴在玻片上； 第五步，將該玻片放在室溫下自然干燥； 第六步，將干燥的該玻片涂面朝上，放在酒精燈火焰上來回通過，固定菌膜。
2.如權(quán)利要求1所述的抗酸染色液質(zhì)控品制備方法，其特征在于，該抗酸染色陰性菌株為I種菌株。
3.如權(quán)利要求1所述的抗酸染色液質(zhì)控品制備方法，其特征在于，該抗酸染色陰性菌株為2種以上菌株的混合物。
4.如權(quán)利要求1所述的抗酸染色液質(zhì)控品制備方法，其特征在于，該抗酸染色陰性菌株為球菌。
5.如權(quán)利要求1所 述的抗酸染色液質(zhì)控品制備方法，其特征在于，該抗酸染色陰性菌株為桿菌。
6.如權(quán)利要求1所述的抗酸染色液質(zhì)控品制備方法，其特征在于，該抗酸染色陰性菌株為球菌和桿菌的混合物。
【文檔編號(hào)】C12Q1/00GK103451260SQ201310403881
【公開日】2013年12月18日 申請日期:2013年9月9日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月9日
【發(fā)明者】婁崢 申請人:上海蘭衛(wèi)臨床檢驗(yàn)有限公司