一種含耐熱超氧化物歧化酶和生長因子的口腔護理組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種抗菌消炎、預(yù)防修護作用的口腔護理組合物。其有效組分包括耐熱超氧化物歧化酶、表皮細(xì)胞生長因子和脂質(zhì)體。耐熱超氧化物歧化酶比普通超氧化物歧化酶穩(wěn)定性更高，對多種口腔問題導(dǎo)致的牙齦出血、紅腫的癥狀有改善作用；表皮生長因子具有促進皮膚和粘膜創(chuàng)傷愈合、消炎止痛、防止?jié)兊墓π?；單室脂質(zhì)體包裹耐熱超氧化物歧化酶和表皮細(xì)胞生長因子使其生物活性更持久，具有靶向性和透皮吸收性。
【專利說明】一種含耐熱超氧化物歧化酶和生長因子的口腔護理組合物
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及口腔護理領(lǐng)域，具體涉及一種脂質(zhì)體包裹耐熱超氧化物歧化酶和表皮細(xì)胞生長因子的口腔護理組合物。
【背景技術(shù)】
[0002]超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase),簡稱SOD ;是富含金屬離子的蛋白質(zhì)，廣泛存在于動物、植物、微生物細(xì)胞或細(xì)胞器中。按其所含金屬輔基不同可分為三類；第一類含Cu、Zn (簡稱Cu-Zn-SOD)，主要存在于真核細(xì)胞的細(xì)胞漿中；第二類含Mn (Mn-SOD)，存在于真核細(xì)胞的線粒體和原核細(xì)胞中；第三類含F(xiàn)e (Fe-SOD)，只存在于原核生物中。1969年Mc Cord和Fridovich純化并闡明了牛血紅細(xì)胞超氧化物歧化酶的酶學(xué)特性及主要生物學(xué)功能。不同類型、不同來源的超氧化物歧化酶都具有一個極其重要的生物學(xué)功能，即催化超氧自由基發(fā)生歧化反應(yīng)，號稱超氧自由基的第一道防線和最重要的抗氧化酶。實驗證明，超氧化物歧化酶具有促進細(xì)胞生長、治療皮膚炎癥、抗衰老的作用。
[0003]表皮細(xì)胞生長因子(Epidermai Growth Factor),簡稱EGF ;是一種廣泛存在于人的皮膚細(xì)胞、體液、腎臟和腦組織中的由53個氨基酸組成的生物活性多肽，是一種具有生理功能的生物活性物質(zhì)，具有很強的生物學(xué)效應(yīng)。在人體內(nèi)，極微量的表皮細(xì)胞生長因子就能起到很大的生物學(xué)作用，能促進皮膚組織細(xì)胞的增殖與生長，使新生年輕的細(xì)胞迅速代替衰老和死亡細(xì)胞。定期為皮膚細(xì)胞補充表皮細(xì)胞生長因子，就可以持續(xù)促進細(xì)胞的合成，保持表皮細(xì)胞旺盛的新陳代謝，還有促進皮膚和粘膜創(chuàng)傷愈合、消炎止痛、防治潰瘍的功效。
[0004]但是在研究中發(fā)現(xiàn)，超氧化物歧化酶在口腔護理應(yīng)用方面存在以下問題:首先，超氧化物歧化酶進入細(xì)胞后其活性半衰期較短(僅幾小時)；再者，超氧化物歧化酶生物活性可能受到口腔用品中其他基質(zhì)的影響而不穩(wěn)定。表皮細(xì)胞生長因子也屬于生物技術(shù)制劑，具有特殊的生物活性，往往會與口腔用品中的化學(xué)物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)而失去活性。同時，表皮細(xì)胞生長因子、超氧化物歧化酶在高于37°C或者在中性以外的pH條件下均會失活。各種生物制劑都有不同的作用點和受體，如果配方不當(dāng)或者使用不當(dāng)，不僅效果不明顯，而且不安全。
[0005]有研究人員從一種極端嗜熱菌(Aquifex pyrophilus)提取到的Fe-SOD,制成耐熱超氧化物歧化酶，解決了普通超氧化物歧化酶應(yīng)用當(dāng)中穩(wěn)定性不夠的問題。
[0006]同時采用脂質(zhì)體包裹也可以提高生物制劑的穩(wěn)定性。脂質(zhì)體在化妝品中的應(yīng)用比較多，主要包括兩方面:一、脂質(zhì)體作為功能性成分的載體避免生物活性物質(zhì)相互作用或發(fā)生生物降解；二、脂質(zhì)體膜中的磷脂和不飽和脂肪酸本身具有很好的保濕和護膚作用。脂質(zhì)體特別是其與皮膚組成相似的類脂，如神經(jīng)鞘磷脂所形成的脂質(zhì)體與皮膚角質(zhì)層脂質(zhì)有高度相似性，能增加藥物在皮膚局部的蓄積，增強皮膚靶向性，并能持續(xù)釋放藥物；具有增強藥物進入角質(zhì)層和表皮類脂內(nèi)的作用。
[0007]脂質(zhì)體在化妝品中應(yīng)用本質(zhì)上是為皮膚的局部給藥:在以皮膚為靶向部位設(shè)計脂質(zhì)體時，應(yīng)使藥物最大量地保留在皮膚中，盡量少地進入血液循環(huán)，即有效性成分作用于皮膚表面的角質(zhì)層或進入表皮或真皮。即化妝品中脂質(zhì)體及其他功能性成分要實現(xiàn)經(jīng)皮滲透而又同時避免透過皮膚進入血循環(huán)，引起毒副作用。目前，脂質(zhì)體經(jīng)皮給藥的研究表明:月旨質(zhì)體粒徑大于1000nm的脂質(zhì)體主要滯留于角質(zhì)層；600nm-1000nm的脂質(zhì)體可以滲透到表皮層和真皮層；而小于200nm的脂質(zhì)體則會直接進入體循環(huán)系統(tǒng)，引起毒副作用。因此，我們在選擇制備方法時以制備單室脂質(zhì)體的方法為基礎(chǔ)。
[0008]目前，將超氧化物歧化酶或者表皮細(xì)胞生長因子單獨使用于口腔護理產(chǎn)品已有相關(guān)研究報道；而耐熱超氧化物歧化酶沒有相關(guān)應(yīng)用研究報道，將耐熱超氧化物歧化酶和表皮細(xì)胞生長因子通過脂質(zhì)體包裹應(yīng)用于口腔護理產(chǎn)品也沒有相關(guān)研究報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種穩(wěn)定性好、靶向性、緩釋控釋效果好、且對口腔炎癥、潰瘍防治有效的脂質(zhì)體包裹耐熱超氧化物歧化酶和表皮細(xì)胞生長因子的口腔護理組合物。
[0010]本發(fā)明的另外一個目的是提供上述口腔護理組合物在口腔護理產(chǎn)品中的應(yīng)用。
[0011]本發(fā)明的上述目的是通過如下方案予以實現(xiàn)的:
[0012]一種口腔護理組合物，所述口腔護理組合物由脂質(zhì)體以單室脂質(zhì)體形式包裹耐熱超氧化物歧化酶、表皮細(xì)胞生長因子而構(gòu)成；所述脂質(zhì)體平均粒徑在600-1000nm之間；所述的耐熱超氧化物歧化酶占組合物重量的0.1-10.0%，濃度為50-500U/ml ;所述的表皮細(xì)胞生長因子占組合物重量的0.1-10.0%，濃度為0.l-100mg/ml ;所述的脂質(zhì)體占組合物重量的80%-99.8%，平均粒徑在20-5000nm之間。
[0013]本發(fā)明的口腔護理組合物，所述的耐熱超氧化物歧化酶是從一種極端嗜熱菌(Aquifex pyrophilus)中提取到的 Fe-SOD 凍干粉。
[0014]本發(fā)明的口腔護理組合物，其中的耐熱超氧化物歧化酶其分子量在38700至40000之間，濃度在100-250U/ml之間。
[0015]本發(fā)明的口腔護理組合物，所述的表皮細(xì)胞生長因子是凍干粉、原液形態(tài)中的至少一種，濃度在0.2-20mg/ml之間。
[0016]本發(fā)明的口腔護理組合物，所述的脂質(zhì)體是由一個磷酸基和一個季銨鹽基組成的親水性基團和兩個較長的烴基組成的親脂性基團。
[0017]本發(fā)明的口腔護理組合物，其中脂質(zhì)體至少包含卵磷脂、膽固醇、神經(jīng)酰胺、鞘磷脂中的一種或幾種組成，平均粒徑300-1300nm之間。
[0018]本發(fā)明的口腔護理組合物，其等電點位于5-7之間。
[0019]本發(fā)明的口腔護理組合物可在牙膏、漱口水、凝膠劑、散劑、糖食和錠劑等口腔護理產(chǎn)品中使用。其含量占口腔護理產(chǎn)品中重量百分比為0.01%-5%。
[0020]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明有如下有益效果:
[0021]1.本發(fā)明提供的口腔護理用品組合物中采用耐熱超氧化物歧化酶，在生產(chǎn)應(yīng)用和產(chǎn)品儲存期的穩(wěn)定性高于普通超氧化物歧化酶。
[0022]2.本發(fā)明提供的口腔護理用品組合物采用單室脂質(zhì)體包裹耐熱超氧化物歧化酶和表皮細(xì)胞生長因子，脂質(zhì)體對兩種生物制劑提供保護，提高了組合物的穩(wěn)定性。[0023]3.由于人體皮膚的角質(zhì)層磷脂層含量較少，基底層中磷脂質(zhì)含量最高，本發(fā)明提供的口腔護理用品組合物在基底層中更容易被磷脂質(zhì)溶解并緩慢釋放，讓耐熱超氧化物歧化酶和表皮細(xì)胞生長因子被皮膚吸收。
[0024]4.本發(fā)明提供的口腔護理用品組合物采用耐熱超氧化物歧化酶和表皮細(xì)胞生長因子復(fù)配使用，起到協(xié)同增效的作用，擴大了在口腔用品里的使用范圍。
[0025]5.本發(fā)明提供的口腔護理用品的組合物使用范圍廣泛，適用于牙周炎、牙齦炎、牙齦出血等多種口腔疾病。
【具體實施方式】
[0026]本發(fā)明耐熱超氧化物歧化酶是由一種極端嗜熱菌(Aquifex pyrophilus)提取到的Fe-SOD，其分子量在38700至40000之間。具有以下兩個特征:(I)在高溫條件下表現(xiàn)出良好的熱穩(wěn)定性，在80°C處理I~2小時，酶活力保持在95%以上，在100°C處理I~2小時，酶活力保持在40%以上；(2)在pH4-ll范圍內(nèi)保持90%以上的酶活力。發(fā)酵耐高溫超氧化物歧化酶的工藝技術(shù)已獲得國家發(fā)明專利(Z1200510005207.9)。
[0027]本發(fā)明的脂質(zhì)體可以由卵磷脂、膽固醇、神經(jīng)酰胺、鞘磷脂中的一種或幾種組成?？梢员ＷC耐熱超氧化物歧化酶和表皮細(xì)胞生長因子的穩(wěn)定性、生物相容性、透皮吸收和緩釋控釋效果。
[0028]本發(fā)明的脂質(zhì)體可由以脫水再水化法或預(yù)制脂質(zhì)體法制備。該制備方法已被現(xiàn)有技術(shù)所公開，且包封率相比較其他方法最高，達到65-80%。
[0029]本發(fā)明的組合物采用單室脂質(zhì)體包裹，粒徑在600-1000nm之間。根據(jù)研究直徑600nm以下的脂質(zhì)體極易穿透皮膚，直徑IOOOnm以上的脂質(zhì)體則易停留在角質(zhì)層內(nèi)。該脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)能有效將包裹物作用在皮膚層中，體現(xiàn)其靶向性。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0030]圖1是牙周病患者使用實施例2牙膏組合物前后的LDH比較(n=40)。
[0031]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明做進一步地描述，但具體實施例并不對本發(fā)明做任何限定。
[0032]實施例1
[0033]本發(fā)明口腔護理組合物由如下質(zhì)量分?jǐn)?shù)各組分組成:
【權(quán)利要求】
1.一種口腔護理組合物，其特征在于:所述口腔護理組合物由脂質(zhì)體以單室脂質(zhì)體形式包裹耐熱超氧化物歧化酶、表皮細(xì)胞生長因子而構(gòu)成；所述脂質(zhì)體平均粒徑在600-1000nm之間；所述的耐熱超氧化物歧化酶占組合物重量的0.1-10.0%，濃度為50-500U/ml ;所述的表皮細(xì)胞生長因子占組合物重量的0.1-10.0%，濃度為0.l-100mg/ml ；所述的脂質(zhì)體占組合物重量的80%-99.8%，平均粒徑在20-5000nm之間。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的口腔護理組合物，其特征在于:所述的耐熱超氧化物歧化酶是從一種極端嗜熱菌(Aquifex pyrophilus)中提取到的Fe-SOD凍干粉。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的口腔護理組合物，其中的耐熱超氧化物歧化酶其分子量在 38700 至 40000 之間，濃度為 100_250U/ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的口腔護理組合物，其特征在于:所述的表皮細(xì)胞生長因子是凍干粉、原液形態(tài)中的至少一種，濃度為0.2-20mg/ml。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的口腔護理組合物，其特征在于:所述脂質(zhì)體是由一個磷酸基和一個季銨鹽基組成的親水性基團和兩個較長的烴基組成的親脂性基團組成。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的口腔護理組合物，其特征在于:其中脂質(zhì)體至少包含卵磷脂、膽固醇、神經(jīng)酰胺、鞘磷脂中的一種或幾種組成，平均粒徑300-1300nm之間。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的口腔護理組合物，其等電點位于5-7之間。
8.前述權(quán)利要求中任一項的口腔護理組合物，在牙膏、漱口水凝膠劑、散劑、糖食和錠劑口腔護理產(chǎn)品中的應(yīng)用。
【文檔編號】A23G3/44GK103463627SQ201310413876
【公開日】2013年12月25日 申請日期:2013年9月11日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月11日
【發(fā)明者】田俊 申請人:拉芳家化股份有限公司