高壓處理和酶解制備高純度大米蛋白肽的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種高壓處理和酶解制備高純度大米蛋白肽的方法，包括將大米渣粉碎、浸泡、第一次酶解，得到第一次大米蛋白，將第一次大米蛋白高壓處理，將第二次大米蛋白進行第二次酶解，得到大米蛋白的酶解物，離心，噴霧干燥，得到大米蛋白肽。本發(fā)明所采用的原料包括淀粉糖生產(chǎn)和發(fā)酵工業(yè)副產(chǎn)物，來源廣泛，價格較低。制備高純度大米蛋白肽的過程中先經(jīng)過淀粉酶除雜和高壓預(yù)處理，有利于后續(xù)的酶解，因而最終制得的大米蛋白肽含量高于75%，分子量在400~2000Da小肽含量高于65%，其使用在食品中有利于兒童的生長發(fā)育，提高人體的免疫機能、減少體內(nèi)的過氧化物，延緩衰老，使用在動物飼料中，可以提高動物的生產(chǎn)性能和抗應(yīng)激能力，減少發(fā)病死亡和污物排放。
【專利說明】高壓處理和酶解制備高純度大米蛋白肽的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種高壓處理和酶解制備高純度大米蛋白肽的方法，屬于食品工藝學(xué)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]大米蛋白是公認的優(yōu)質(zhì)植物蛋白，其蛋氨酸和精氨酸含量高、過敏性低，還具有抗糖尿病、抗膽固醇和抗癌變等保健功能，非常適合作為嬰幼兒和特殊人群的營養(yǎng)食品。大米蛋白經(jīng)酶解所得到的大米蛋白肽具有多種生物活性，如抗氧化、降血壓、提高免疫機能、加快蛋白質(zhì)在體內(nèi)的吸收沉積，促進生長發(fā)育、減少污物排出等，可以廣泛應(yīng)用到食品、化妝品和詞料廣品中。
[0003]我國的大米產(chǎn)量占世界的三分之一。但大米中的蛋白質(zhì)只有8%左右，直接從大米中提取大米蛋白在經(jīng)濟上有一定的局限性。我國大量的的早秈米、碎米和糧庫周轉(zhuǎn)米被廣泛用于淀粉糖的生產(chǎn)和發(fā)酵工業(yè)，產(chǎn)生大量的副產(chǎn)品一俗稱大米渣，其蛋白質(zhì)含量一般在45%以上。但由于上述加工過程中經(jīng)歷了高溫(95°C以上)處理，大米蛋白發(fā)生了嚴重的熱變性，幾乎不溶于水。常壓條件下酶解大米蛋白其酶解率低于50%。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是常壓條件下酶解大米蛋白其酶解率低，提供一種高壓條件下處理大米蛋白后再進行酶解的方法，提高了大米蛋白酶解生產(chǎn)小肽的得率和小肽的有益組分，分子量400-1200Da的小肽比例有所上升。
[0005]本發(fā)明的技術(shù)方案是:一種高壓處理和酶解制備高純度大米蛋白肽的方法，包括將大米渣粉碎、浸泡、第一次酶解，得到第一次大米蛋白，將第一次大米蛋白高壓處理，所述第一次大米蛋白高壓處理步驟為:將第一次大米蛋白用水配制成質(zhì)量體積濃度為10-15%的大米蛋白懸浮液，用氫氧化鈉溶液調(diào)整大米蛋白懸浮液的PH為8.(T9.0，裝入兩層聚乙烯塑料袋，真空密封后置于高壓裝置內(nèi)腔的油介質(zhì)中，升壓，在介質(zhì)溫度為35~40°C，壓力為10(T300Mpa的條件下處理10~30分鐘，再降壓，升壓、降壓的時間為I分鐘內(nèi)，得到第二次大米蛋白，將第二次大米蛋白進行第二次酶解，得到大米蛋白的酶解物，離心，噴霧干燥，得到大米蛋白肽。 [0006]所述第一次酶解步驟為將浸泡在水中的大米渣加熱到65~70°C，加入耐高溫α-淀粉酶，耐高溫α-淀粉酶與大米渣的比例為100(Tl500 U/kg，攪拌狀態(tài)下保溫
1.(Tl.5 h，在3500~4000轉(zhuǎn)/分鐘的條件下離心20~25分鐘，得到第一次大米渣沉淀物；在第一次大米渣沉淀物中加入水，第一次大米渣沉淀物在水中的質(zhì)量濃度為10-12%，攪拌后加熱到45飛(TC，加入β淀粉酶，β淀粉酶與大米渣的比例為50(T800 U/kg，攪拌條件下保溫2.5~3h后，在3500-4000轉(zhuǎn)/分鐘的條件下離心20~25分鐘，得到第二次大米渣沉淀物；在第二次大米渣沉淀物中加入水，第二次大米渣沉淀物與水的質(zhì)量比為1:2~2.5，加入450C~50°C的水洗滌，得到第一次大米蛋白。[0007]所述將第二次大米蛋白進行第二次酶解步驟為:將第二次大米蛋白轉(zhuǎn)入酶反應(yīng)器中，加熱到5(T55°C，加入堿性蛋白酶，堿性蛋白酶與第二次大米蛋白的比例為1000~1500U/g,在5(T55°C的條件下攪拌反應(yīng)1.2小時，用酸度計監(jiān)測pH，在反應(yīng)初期的45分鐘內(nèi)，通過滴加2mol/L的氫氧化鈉溶液維持第二次大米蛋白溶液的pH為8.0-8.5 ;反應(yīng)結(jié)束后，將溫度降到45~50°C，用鹽酸調(diào)整pH為6.5^7.0，添加復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶與第二次大米蛋白的比例為200(T2500 U/g，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1.5小時，再加熱至70°C，保持8~10分鐘，得到大米蛋白的酶解物。
[0008]所述大米蛋白的酶解物在2000-2500轉(zhuǎn)/分的條件下離心10-?5分鐘，上清液經(jīng)
噴霧干燥得到大米蛋白肽。
[0009]本發(fā)明具有如下積極有益的效果:本發(fā)明所采用的原料包括淀粉糖生產(chǎn)和發(fā)酵工業(yè)副產(chǎn)物，來源廣泛，價格較低。制備高純度大米蛋白肽的過程中先經(jīng)過淀粉酶除雜和高壓預(yù)處理，有利于后續(xù)的酶解，因而最終制得的大米蛋白肽含量高于75%，分子量在40(T2000Da小肽含量高于65%，其使用在食品中有利于兒童的生長發(fā)育，提高人體的免疫機能、減少體內(nèi)的過氧化物，延緩衰老，使用在動物飼料中，可以提高動物的生產(chǎn)性能和抗應(yīng)激能力，減少發(fā)病死亡和污物排放。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0010]圖1為實施例1大米蛋白肽分子量測定結(jié)果；
圖2為實施例2大米蛋白肽分子量測定結(jié)果；
圖3為實施例3大米蛋白肽分子量測定結(jié)果。
【具體實施方式】
[0011]實施例1
一種高壓處理和酶解制備大米蛋白肽的方法，步驟如下:
(1)原料粉碎:取IKg大米渣，粉碎過80目篩；
(2)淀粉酶除雜:將粉碎好的大米渣按照8~10%(W/V)比例分散到水中，加熱到65°C后，加入耐高溫α-淀粉酶(1500 U/kg蛋白)，攪拌狀態(tài)下保溫1.5h后，4000轉(zhuǎn)/分鐘離心20分鐘；沉淀物再按12% (原料和水比例)懸浮后加熱到45°C，加入β淀粉酶，加酶量為(500U/kg)，攪拌條件下保溫2.5h后，4000轉(zhuǎn)/分鐘離心20分鐘；沉淀物洗滌:再按1:2(原料和水比例)加入45°C熱水洗滌一次，沉淀物即為大米蛋白；上清液回收:兩次離心和洗滌后的上清液均回收，用于下一批次大米渣的浸泡，減少廢水的排放；
(3)將大米蛋白用水配制成10(W/V)的懸浮液，用2mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)整PH8.(T9.0后，裝入兩層聚乙烯塑料袋，真空密封后置于高壓裝置內(nèi)腔的油介質(zhì)中，介質(zhì)溫度35~40°C，壓力lOOMpa，處理時間20分鐘，升壓、降壓均在I分鐘內(nèi)完成；
(4)大米蛋白的酶解:將上述高壓處理過的蛋白質(zhì)溶液轉(zhuǎn)入酶反應(yīng)器中，加熱到50°C后，按照(1000U/g )比例加入堿性蛋白酶，此溫度下攪拌反應(yīng)1.2小時，用酸度計監(jiān)測pH，在反應(yīng)前45分鐘內(nèi)，通過滴加2mol/L的氫氧化鈉溶液維持反應(yīng)體系pH8.0。反應(yīng)結(jié)束后，將溫度降到45°C，用HCL調(diào)整pH6.5，添加復(fù)合蛋白酶(2000U/g )，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1.5小時，再加熱至70°C，保持8鐘終止酶反應(yīng)；(5)酶解物的分離和干燥:將上述酶解物于2000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘后，上清液經(jīng)噴霧干燥得到大米蛋白肽。經(jīng)凱氏定氮法測定，大米蛋白肽的含量75.2%，經(jīng)凝膠過濾色譜法(TSK gel G2000 SWXL色譜柱，7.8 X 300 mm))分析，分子量在40(T2000Da小肽含量大于65.3%。
[0012]用小鼠做試驗(6~8周齡BALB雄性小鼠，體重約2(T22g，試驗3周)，每千克體重每日在常規(guī)飼料中額外給予實施例1制得的大米蛋白肽5克，結(jié)果小鼠血液中SOD的活力提高35.91%，乳酸脫氫酶含量降低25.7%，表明大米蛋白肽具有抗氧化作用，還有利于保護組織免受損傷。
[0013]實施例2 一種借助高壓處理制備高純度大米蛋白肽的方法，步驟如下:
(1)原料粉碎:取IKg大米渣，粉碎過80目篩；
(2)淀粉酶除雜:將粉碎好的大米渣按照10%(W/V)比例分散到水中，加熱到70°C后，攪拌狀態(tài)下加入耐高溫α -淀粉酶(1500 U/kg蛋白)，保溫1.5h后，4000轉(zhuǎn)/分鐘離心20分鐘；沉淀物再按12% (原料和水比例)懸浮后加熱到45°C，加入β淀粉酶，加酶量為(500U/kg)，攪拌條件下保溫2.5h后，4000轉(zhuǎn)/分鐘離心20分鐘；沉淀物洗滌:再按1:2 (原料和水比例)加入45°C熱水洗滌一次，沉淀物即為大米蛋白，上清液回收:兩次離心和洗滌后的上清液回收，用于下一批次大米渣的浸泡，減少廢水的排放；
(3)將大米蛋白用水配制成10(W/V)的懸浮液，用2mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)整pH8.5后，裝入高壓處理樣品專用的兩層聚乙烯塑料袋，真空密封后置于高壓容器內(nèi)腔的加壓介質(zhì)中，介質(zhì)溫度40°C，壓力200Mpa，處理時間20分鐘，升壓、降壓均在I分鐘內(nèi)完成；
(4)大米蛋白的酶解:將上述高壓處理過的蛋白質(zhì)溶液轉(zhuǎn)入酶反應(yīng)器中，加熱到5(T55°C后，按照1500 U/g比例加入堿性蛋白酶，此溫度下攪拌反應(yīng)1.2小時，用酸度計監(jiān)測pH,在反應(yīng)前45分鐘內(nèi)，通過滴加2mol/L的氫氧化鈉溶液維持反應(yīng)體系pH8.5,反應(yīng)結(jié)束后，將溫度降到50°C，用HCL調(diào)整pH7.0添加復(fù)合蛋白酶(2500 U/g )，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1.5小時，再加熱至70°C，保持10分鐘終止酶反應(yīng)；
(5)酶解物的分離和干燥:將上述酶解物于2500轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘后，上清液經(jīng)噴霧干燥得到大米蛋白肽。經(jīng)凱氏定氮法測定，大米蛋白肽的含量78.3%，經(jīng)凝膠過濾色譜法(TSK gel G2000 SWXL色譜柱，7.8 X 300 mm))分析，分子量在40(T2000Da小肽含量大于69.5%。
[0014]將實施例2制得的大米蛋白肽按2% (重量百分比)加入肉雞料中(選擇I日齡健康A(chǔ)A肉雞200只，試驗周期40天)，結(jié)果使肉雞的日增重提高7.04%，蛋白質(zhì)沉積率提高13.45%，肉雞體內(nèi)的IGF提高28.6%，GH提高23.44%，糞便中氮含量降低25.31%，腹瀉率降低29.82%，舍內(nèi)氨氣濃度降低21.6%，硫化氫濃度降低18.9%。
[0015]實施例3
一種高壓處理和酶解制備高純度大米蛋白肽的方法，它的步驟如下:
(O將大米渣粉碎，過80目篩，將大米渣分散在水中，大米渣在水中的質(zhì)量濃度為8%，浸泡1-2小時；
(2)將浸泡后的大米渣加熱到65°C，加入耐高溫α-淀粉酶，耐高溫α-淀粉酶與大米渣的比例為1000 U/kg，攪拌狀態(tài)下保溫1.0 h，在3500轉(zhuǎn)/分鐘的條件下離心20分鐘，得到第一次大米洛沉淀物；在第一次大米洛沉淀物中加入水，第一次大米洛沉淀物在水中的質(zhì)量濃度為10%，攪拌后加熱到45°C，加入β淀粉酶，β淀粉酶與大米渣的比例為500 U/kg，攪拌條件下保溫2.5 h后，在3500轉(zhuǎn)/分鐘的條件下離心20分鐘，得到第二次大米渣沉淀物；在第二次大米渣沉淀物中加入水，第二次大米渣沉淀物與水的質(zhì)量比為1:2，加入45°C的水洗滌，得到第一次大米蛋白；
(3)將第一次大米蛋白用水配制成質(zhì)量體積濃度為10%的大米蛋白懸浮液，用氫氧化鈉溶液調(diào)整大米蛋白懸浮液的PH為8.0，裝入兩層聚乙烯塑料袋，真空密封后置于高壓裝置內(nèi)腔的油介質(zhì)中，升壓，在介質(zhì)溫度為35°C，壓力為IOOMpa的條件下處理10分鐘，再降壓，升壓、降壓的時間為I分鐘內(nèi)，得到第二次大米蛋白；
(4)將第二次大米蛋白轉(zhuǎn)入酶反應(yīng)器中，加熱到50°C，加入堿性蛋白酶，堿性蛋白酶與第二次大米蛋白的比例為1000 U/g，在5(T55°C的條件下攪拌反應(yīng)1.2小時，用酸度計監(jiān)測pH,在反應(yīng)初期的45分鐘內(nèi)，通過滴加2mol/L的氫氧化鈉溶液維持第二次大米蛋白溶液的PH為8.0 ;反應(yīng)結(jié)束后，將溫度降到45°C，用鹽酸調(diào)整pH為6.5，添加復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶與第二次大米蛋白的比例為2000 U/g,繼續(xù)攪拌反應(yīng)1.5小時，再加熱至70°C，保持8分鐘，得到大米蛋白的酶解物；
(5)將大米蛋白的酶解物在2000轉(zhuǎn)/分的條件下離心10分鐘，上清液經(jīng)噴霧干燥得到大米蛋白肽。
[0016] 實施例4 一種高壓處理和酶解制備高純度大米蛋白肽的方法，它的步驟如下:
(1)將大米渣粉碎，過100目篩，將大米渣分散在水中，大米渣在水中的質(zhì)量濃度為10%，浸泡2小時;
(2)將浸泡后的大米渣加熱到70°C，加入耐高溫α-淀粉酶，耐高溫α-淀粉酶與大米渣的比例為1500 U/kg，攪拌狀態(tài)下保溫1.5 h，在4000轉(zhuǎn)/分鐘的條件下離心25分鐘，得到第一次大米洛沉淀物；在第一次大米洛沉淀物中加入水，第一次大米洛沉淀物在水中的質(zhì)量濃度為12%，攪拌后加熱到50°C，加入β淀粉酶，β淀粉酶與大米渣的比例為800 U/kg，攪拌條件下保溫3 h后，在4000轉(zhuǎn)/分鐘的條件下離心25分鐘，得到第二次大米渣沉淀物；在第二次大米渣沉淀物中加入水，第二次大米渣沉淀物與水的質(zhì)量比為1: 2.5，加入50°C的水洗滌，得到第一次大米蛋白；
(3)將第一次大米蛋白用水配制成質(zhì)量體積濃度為15%的大米蛋白懸浮液，用氫氧化鈉溶液調(diào)整大米蛋白懸浮液的PH為9.0，裝入兩層聚乙烯塑料袋，真空密封后置于高壓裝置內(nèi)腔的油介質(zhì)中，升壓，在介質(zhì)溫度為35~40°C，壓力為10(T300Mpa的條件下處理30分鐘，再降壓，升壓、降壓的時間為I分鐘內(nèi)，得到第二次大米蛋白；
(4)將第二次大米蛋白轉(zhuǎn)入酶反應(yīng)器中，加熱到55°C，加入堿性蛋白酶，堿性蛋白酶與第二次大米蛋白的比例為1500 U/g,在55°C的條件下攪拌反應(yīng)1.2小時，用酸度計監(jiān)測pH，在反應(yīng)初期的45分鐘內(nèi)，通過滴加2mol/L的氫氧化鈉溶液維持第二次大米蛋白溶液的pH為8.5 ;反應(yīng)結(jié)束后，將溫度降到50°C，用鹽酸調(diào)整pH為7.0，添加復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶與第二次大米蛋白的比例為2500 U/g，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1.5小時，再加熱至70°C，保持10分鐘，得到大米蛋白的酶解物；
(5)將大米蛋白的酶解物在2500轉(zhuǎn)/分的條件下離心15分鐘，上清液經(jīng)噴霧干燥得到大米蛋白肽。
[0017]實施例5
一種高壓處理和酶解制備高純度大米蛋白肽的方法，它的步驟如下:
(1)將大米渣粉碎，過120目篩，將大米渣分散在水中，大米渣在水中的質(zhì)量濃度為10%，浸泡1-2小時；
(2)將浸泡后的大米渣加熱到70°C，加入耐高溫α-淀粉酶，耐高溫α-淀粉酶與大米渣的比例為1200 U/kg，攪拌狀態(tài)下保溫1.5 h，在4000轉(zhuǎn)/分鐘的條件下離心20分鐘，得到第一次大米洛沉淀物；在第一次大米洛沉淀物中加入水，第一次大米洛沉淀物在水中的質(zhì)量濃度為10%，攪拌后加熱到45飛(TC，加入β淀粉酶，β淀粉酶與大米渣的比例為600U/kg，攪拌條件下保溫3h后，在4000轉(zhuǎn)/分鐘的條件下離心25分鐘，得到第二次大米渣沉淀物；在第二次大米渣沉淀物中加入水，第二次大米渣沉淀物與水的質(zhì)量比為1:2，加入45°C的水洗滌，得到第一次大米蛋白；
(3)將第一次大米蛋白用水配制成質(zhì)量體積濃度為12%的大米蛋白懸浮液，用氫氧化鈉溶液調(diào)整大米蛋白懸浮液的PH為8.(T9.0，裝入兩層聚乙烯塑料袋，真空密封后置于高壓裝置內(nèi)腔的油介質(zhì)中，升壓，在介質(zhì)溫度為40°C，壓力為200Mpa的條件下處理10~30分鐘，再降壓，升壓、降壓的時間為I分鐘內(nèi)，得到第二次大米蛋白；
(4)將第二次大米蛋白轉(zhuǎn)入酶反應(yīng)器中，加熱到55°C，加入堿性蛋白酶，堿性蛋白酶與第二次大米蛋白的比例為1200 ~8，在50飛51:的條件下攪拌反應(yīng)1.2小時，用酸度計監(jiān)測pH,在反應(yīng)初期的45分鐘內(nèi)，通過滴加2mol/L的氫氧化鈉溶液維持第二次大米蛋白溶液的PH為8.0 ;反應(yīng)結(jié)束后，將溫度降到50°C，用鹽酸調(diào)整pH為7.0，添加復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶與第二次大米蛋白的比例為2200 U/g，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1.5小時，再加熱至70°C，保持10分鐘，得到大米蛋白的酶解物；
(5)將大米蛋白的酶解物在2200轉(zhuǎn)/分的條件下離心12分鐘，上清液經(jīng)噴霧干燥得到大米蛋白肽。
[0018]實施例6
一種高壓處理和酶解制備高純度大米蛋白肽的方法，它的步驟如下:
(1)將大米渣粉碎，過80目篩，將大米渣分散在水中，大米渣在水中的質(zhì)量濃度為10%，浸泡2小時;
(2)將浸泡后的大米渣加熱到70°C，加入耐高溫α-淀粉酶，耐高溫α-淀粉酶與大米渣的比例為1500 U/kg，攪拌狀態(tài)下保溫1.5 h，在3500轉(zhuǎn)/分鐘的條件下離心25分鐘，得到第一次大米洛沉淀物；在第一次大米洛沉淀物中加入水，第一次大米洛沉淀物在水中的質(zhì)量濃度為12%，攪拌后加熱到50°C，加入β淀粉酶，β淀粉酶與大米渣的比例為800 U/kg,攪拌條件下保溫3h后，在4000轉(zhuǎn)/分鐘的條件下離心25分鐘，得到第二次大米渣沉淀物；在第二次大米渣沉淀物中加入水，第二次大米渣沉淀物與水的質(zhì)量比為1:2，加入45°C的水洗滌，得到第一次大米蛋白；
(3)將第一次大米蛋白用水配制成質(zhì)量體積濃度為15%的大米蛋白懸浮液，用氫氧化鈉溶液調(diào)整大米蛋白懸浮液的PH為9.0，裝入兩層聚乙烯塑料袋，真空密封后置于高壓裝置內(nèi)腔的油介質(zhì)中，升壓，在介質(zhì)溫度為40°C，壓力為150Mpa的條件下處理30分鐘，再降壓，升壓、降壓的時間為I分鐘內(nèi)，得到第二次大米蛋白；(4)將第二次大米蛋白轉(zhuǎn)入酶反應(yīng)器中，加熱到55°C，加入堿性蛋白酶，堿性蛋白酶與第二次大米蛋白的比例為1100 U/g,在50°C的條件下攪拌反應(yīng)1.2小時，用酸度計監(jiān)測pH，在反應(yīng)初期的45分鐘內(nèi)，通過滴加2mol/L的氫氧化鈉溶液維持第二次大米蛋白溶液的pH為8.5 ;反應(yīng)結(jié)束后，將溫度降到50°C，用鹽酸調(diào)整pH為7.0，添加復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶與第二次大米蛋白的比例為2300 U/g，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1.5小時，再加熱至70°C，保持10分鐘，得到大米蛋白的酶解物；
(5)將大米蛋白的酶解物在2200轉(zhuǎn)/分的條件下離心12分鐘，上清液經(jīng)噴霧干燥得到大米蛋白肽。
【權(quán)利要求】
1.一種高壓處理和酶解制備高純度大米蛋白肽的方法，包括將大米渣粉碎、浸泡、第一次酶解，得到第一次大米蛋白，其特征在于:將第一次大米蛋白高壓處理，得到第二次大米蛋白，將第二次大米蛋白進行第二次酶解，得到大米蛋白的酶解物，離心，噴霧干燥，得到大米蛋白肽，所述第一次大米蛋白高壓處理步驟為:將第一次大米蛋白用水配制成質(zhì)量體積濃度為10-15%的大米蛋白懸浮液，用氫氧化鈉溶液調(diào)整大米蛋白懸浮液的pH為8.(T9.0，裝入兩層聚乙烯塑料袋，真空密封后置于高壓裝置內(nèi)腔的油介質(zhì)中，升壓，在介質(zhì)溫度為35~40°C，壓力為IOOlOOMpa的條件下處理10~30分鐘，再降壓，升壓、降壓的時間為I分鐘內(nèi)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的借助高壓處理制備高純度大米蛋白肽的方法，其特征在于:所述第一次酶解步驟為將浸泡在水中的大米渣加熱到65~7(TC，加入耐高溫α -淀粉酶，耐高溫α-淀粉酶與大米渣的比例為100(Tl500 U/kg，攪拌狀態(tài)下保溫l.(Tl.5 h，在3500-4000轉(zhuǎn)/分鐘的條件下離心20-25分鐘，得到第一次大米渣沉淀物；在第一次大米渣沉淀物中加入水，第一次大米渣沉淀物在水中的質(zhì)量濃度為10-12%，攪拌后加熱到45~50°C，加入β淀粉酶，β淀粉酶與大米渣的比例為500~800 U/kg，攪拌條件下保溫2.5~3h后，在3500~4000轉(zhuǎn)/分鐘的條件下離心20~25分鐘，得到第二次大米渣沉淀物；在第二次大米渣沉淀物中加入水，第二次大米渣沉淀物與水的質(zhì)量比為1:2~2.5，加入450C~50°C的水洗滌，得到第一次大米蛋白。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的借助高壓處理制備高純度大米蛋白肽的方法，其特征在于:所述將第二次大米蛋白進行第二次酶解步驟為: 將第二次大米蛋白轉(zhuǎn)入酶反應(yīng)器中，加熱到5(T55°C，加入堿性蛋白酶，堿性蛋白酶與第二次大米蛋白的比例為1000~1500 U/g，在5(T55°C的條件下攪拌反應(yīng)1.2小時，用酸度計監(jiān)測pH，在反應(yīng)初期的45分鐘內(nèi)，通過滴加2mol/L的氫氧化鈉溶液維持第二次大米蛋白溶液的pH為8.0-8.5 ;反應(yīng)結(jié)束后，將溫度降到45飛(TC，用鹽酸調(diào)整pH為6.5~7.0，添加復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶與第二次大米蛋白的比例為200(T2500 U/g，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1.5小時，再加熱至70°C，保持8~10分鐘，得到大米蛋白的酶解物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高壓處理和酶解制備大米蛋白肽的方法，其特征在于:所述大米蛋白的酶解物在2000-2500轉(zhuǎn)/分的條件下離心10-15分鐘，上清液經(jīng)噴霧干燥得到大米蛋白肽。
【文檔編號】C12P21/06GK103540637SQ201310452888
【公開日】2014年1月29日 申請日期:2013年9月29日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月29日
【發(fā)明者】王章存, 袁道強, 趙學(xué)偉, 鄭堅強, 李昌文 申請人:鄭州輕工業(yè)學(xué)院