產(chǎn)堿性過氧化氫酶的海洋微生物菌株ys0810的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及高產(chǎn)堿性過氧化氫酶的海洋微生物菌株YS0810,該菌株是從青島海域底泥樣品中篩選獲得一株高產(chǎn)堿性過氧化氫酶的野生菌菌株,屬于不動桿菌屬(Acinetobacter?sp.)革蘭氏陰性桿菌,無芽孢,平板培養(yǎng)24h形成2-3mm乳白色的菌落,表面光滑,邊緣規(guī)則,有粘性,易挑起,為短桿菌,菌體體型較小,長度大約為1μm,寬度大約為0.5μm。該菌株YS0810的16S?rDNA基因序列長度為1443bp。該菌株發(fā)酵周期短,高產(chǎn)過氧化氫酶酶活相對較高,酶性能優(yōu)良,可應(yīng)用于臨床分析、食品加工、紡織、造紙、醫(yī)械器具的消毒及藥物等。
【專利說明】產(chǎn)堿性過氧化氫酶的海洋微生物菌株YS0810
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及海洋微生物領(lǐng)域,特別是涉及一株產(chǎn)堿性過氧化氫酶的海洋微生物菌株 YS0810。
【背景技術(shù)】
[0002]微生物過氧化氫酶(EC1.11.1.6)又稱觸酶(Catalase,簡稱CAT),普遍存在于好氧微生物體內(nèi)。作為一種酶類清除劑,其主要功能是催化過氧化氫分解成氧氣和水,防止體內(nèi)羥基自由基的過量積累?;谄涓咝У拇呋钚裕F(xiàn)已被廣泛應(yīng)用于臨床分析、食品加工、紡織、造紙、醫(yī)械器具的消毒及抗腫瘤藥物的研究。近年來,過氧化氫酶由于其在紡織工業(yè)中的應(yīng)用而倍受關(guān)注。多數(shù)的過氧化氫酶的應(yīng)用是在堿性高溫條件下進(jìn)行的,而商品化的過氧化氫酶很少具有這一特性,因而限制了過氧化氫酶更多的推廣應(yīng)用。雖然近些年過氧化氫酶產(chǎn)生菌的相關(guān)研究有些報(bào)道,但堿性過氧化氫酶產(chǎn)生菌的篩選及應(yīng)用研究鮮見。盡管目前國內(nèi)微生物過氧化氫酶仍處于應(yīng)用開發(fā)階段,但隨著人們對微生物過氧化氫酶的日益關(guān)注,以及研究技術(shù)和方法不斷完善成熟,微生物過氧化氫酶必將成為許多應(yīng)用發(fā)展的重要方向。
[0003]現(xiàn)代發(fā)酵工業(yè)主要是以微生物純培養(yǎng)為主,依據(jù)不同菌株的特性,應(yīng)用不同的手段獲得所需微生物,也可通過篩選方法最終獲得新菌種。過氧化氫酶是廣泛存在于各種動植物和微生物中。目前國內(nèi)外對微生物源的過氧化氫酶研究有大腸桿菌、黑曲霉、芽孢桿菌、球形紅假單孢菌和溶壁微球菌等。但對不動桿菌特別是海洋源的不動桿菌的研究尚未見報(bào)道。微生物過氧化氫酶種類多,且能適應(yīng)各種不同的環(huán)境,尤其是海洋微生物過氧化氫酶更具有獨(dú)特的生理功能和特異的性質(zhì)。目前,不同來源的過氧化氫酶的研究仍是一個熱點(diǎn)。海洋微生物為適應(yīng)海洋這一生命極限環(huán)境,海洋微生物酶表現(xiàn)了比陸源微生物酶更為獨(dú)特的生理功能與酶學(xué)特性,其開發(fā)應(yīng)用潛力巨大,愈來愈引起世界各國的重視與開發(fā)。
[0004]國內(nèi)目前報(bào)道的過氧化氫酶以動植物源和微生物發(fā)酵為主,其研究主要集中在菌株的篩選,培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的優(yōu)化,基于過氧化氫酶在紡織工業(yè)的應(yīng)用的重要性,仍需開發(fā)更適堿性的過氧化氫酶。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005]本發(fā)明的目的在于經(jīng)發(fā)明人長期開發(fā)研究海洋微生物及其酶產(chǎn)物和生產(chǎn)實(shí)踐,開發(fā)提供高產(chǎn)堿性過氧化氫酶(簡稱過氧化氫酶)的海洋微生物菌株YS0810。
[0006]本發(fā)明提供一株高產(chǎn)堿性過氧化氫酶的海洋微生物菌株YS0810 (簡稱菌株YS0810)是從青島海域底泥樣品中篩選獲得一株(種)高產(chǎn)堿性過氧化氫酶的海洋微生物菌株(Acinetobacter sp.),將其命名為海洋微生物菌株YS0810 (簡稱菌株YS0810)。對其16S rDNA基因序列同源性的系統(tǒng)發(fā)育分析,PCR產(chǎn)物測序結(jié)果顯示菌株YS0810的16SrDNA如圖1以及基因序列長度為1443bp。應(yīng)用Blast程序與EzTaxon數(shù)據(jù)庫(http://eztaxon-e.ezbiocloud.net/)分析,通過BioEdit程序進(jìn)行多重序列比對后,利用MEGA5.1軟件,采用Neighbor-Joining分析法最大似然法(Maximum-Likelihood Method)構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。應(yīng)用MEGA5.1軟件進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育樹分析(圖2),結(jié)合形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果,將高產(chǎn)堿性過氧化氫酶的海洋微生物菌株YS0810鑒定為不動桿菌屬(Acinetobacter sp.)。該菌株YS0810于于2013年7月6日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心(簡稱CCTCC),保藏號為CCTCCNO:M2013315o
[0007]本發(fā)明提供的海洋微生物菌株YS0810形態(tài)特征和生理生化特征:
[0008]菌株YS0810 (菌落)的形態(tài)特征:
[0009]海洋微生物菌株YS0810為革蘭氏陰性桿菌,無芽孢,平板培養(yǎng)24h形成2_3mm乳白色的菌落,表面光滑,邊緣規(guī)則,有粘性,易挑起。從該菌株YS0810掃描電鏡圖(如圖3)可以明顯看出,該菌株YS0810為短桿菌,菌體體型較小,長度為I Pm(左右),寬度為0.5iim
(左右)。
[0010]菌株YS0810生理生化特征:
[0011]菌株YS0810生理生化特征見表1。表1為菌株YS0810與不動桿菌屬各個種的分類學(xué)特征比較。
[0012]表1
【權(quán)利要求】
1.一株產(chǎn)堿性過氧化氫酶的海洋微生物菌株YS0810,其特征在于該菌株是從青島海域底泥樣品中篩選獲得一株產(chǎn)堿性過氧化氫酶的野生菌菌株,屬于不動桿菌屬(Acinetobacter sp.)革蘭氏陰性桿菌,無芽孢,形成2_3mm乳白色的菌落,表面光滑,邊緣規(guī)則,有粘性,易挑起,菌體體型較小,長度I Pm,寬度0.5 iim;該菌株YS0810的16S rDNA基因序列如圖1所示,16S rDNA基因序列長度為1443bp;該菌株YS0810于2013年7月6日保藏于中國武漢典型培養(yǎng)物保藏中心,保藏號為CCTCC NO:M2013315。
2.由權(quán)利要求1的海洋微`生物菌株YS0810產(chǎn)的堿性過氧化氫酶。
【文檔編號】C12N9/08GK103525738SQ201310508243
【公開日】2014年1月22日 申請日期:2013年10月24日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月24日
【發(fā)明者】孫謐, 郝建華, 王偉, 鄭鴻飛, 陳世建 申請人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所