一種國(guó)酒香茶葉的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明屬于食品【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種國(guó)酒香茶葉，所述的國(guó)酒香茶葉由1-40重量份石斛或茶槲寄生、0.01-10重量份產(chǎn)醬香功能菌、1-50重量份茶葉組成。本發(fā)明提供了一種國(guó)酒香茶葉的制備方法，采用本發(fā)明方法得到茶葉成既具有醇厚酒香又包含茶葉中的茶多酚等生理活性物質(zhì)的國(guó)酒香茶葉，該茶葉滿(mǎn)足現(xiàn)代人對(duì)健康的追求，可以在飲茶的同時(shí)也滿(mǎn)足對(duì)酒香的需要。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種國(guó)酒香茶葉
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于食品【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種國(guó)酒香茶葉。
【背景技術(shù)】
[0002]我國(guó)是世界上釀酒最早的國(guó)家之一，品種繁多，以果酒和米酒居多，而且度數(shù)偏高，人長(zhǎng)期飲用就會(huì)中毒，輕者會(huì)出現(xiàn)頭暈，頭疼，惡心，嘔吐，視力模糊等癥，重者會(huì)出現(xiàn)呼吸困難，昏迷甚至死亡。隨著社會(huì)的發(fā)展進(jìn)步，人們?cè)絹?lái)越認(rèn)識(shí)到長(zhǎng)期飲用高度酒對(duì)身體的危害，于是應(yīng)運(yùn)而生了各種低度的果露酒，奶酒，藥酒等。而茶也是我國(guó)人民生活的必需品，同時(shí)具有較好的解酒效果，現(xiàn)在飲用的茶葉品種繁多、花色各異，但還未見(jiàn)將茶葉與酒進(jìn)行
芩口 口廣口口。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是利用發(fā)酵技術(shù)提供一種國(guó)酒香茶葉及其制造方法。在本發(fā)明的工藝條件下，制成既具有醇厚酒香又包含茶葉中的茶多酚等生理活性物質(zhì)的國(guó)酒香茶葉。該茶葉滿(mǎn)足現(xiàn)代人對(duì)健康的追求，可以在飲茶的同時(shí)也滿(mǎn)足對(duì)酒香的需要。
[0004]本發(fā)明通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。
[0005]一種國(guó)酒香茶葉，由1-40重量份石斛或茶槲寄生、0.01-10重量份產(chǎn)醬香功能菌、1-50重量份茶葉組成。
[0006]所述的石斛是天然石斛或人工種植石斛或石斛組織培養(yǎng)物。
[0007]所述的茶槲寄生是天然茶槲寄生或人工種植茶槲寄生或茶槲寄生組織培養(yǎng)物。
[0008]所述的石斛組織培養(yǎng)物或茶槲寄生組織培養(yǎng)物由以下方法制備:
[0009]步驟1:切取石斛或茶槲寄生嫩莖節(jié)，在無(wú)菌環(huán)境下用75%的酒精浸泡1-lOmin，再用0.1 %氯化萊溶液或2%次氯酸鈉浸泡l_20min,無(wú)菌水沖洗3_5遍后切成0.1-1cm組織塊，將其接種到由1/2MS培養(yǎng)基、l-80g/L茶葉或苔蘚組成的固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，得到無(wú)菌植株；
[0010]步驟2:切取步驟I所得的無(wú)菌植株的莖段接種到pH值為4-9的培養(yǎng)基上進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)，所述的培養(yǎng)基由MS培養(yǎng)基、0.l-10mg/L的6_BA、0.1-lmg/L的NAA、l-80g/L茶葉或苔蘚、3-30g/L瓊脂組成或由MS、l-80g/L茶葉或苔蘚、l_200g/L馬鈴薯汁、
3-30g/L瓊脂組成；
[0011]步驟3:取步驟2中愈傷組織接種到PH4-9的培養(yǎng)基A及pH4_9的培養(yǎng)基B中在光照強(qiáng)度為1000-8000LX，培養(yǎng)溫度為10-39°C條件下交替培養(yǎng)直至分化出小苗，得到石斛組織培養(yǎng)物或茶槲寄生組織培養(yǎng)物；
[0012]所述的培養(yǎng)基A由1/2MS培養(yǎng)基、10-60g/L蔗糖、l-200g/L馬鈴薯汁、l_80g/L茶葉或苔蘚、3_30g/L瓊脂組成；
[0013]所述的培養(yǎng)基B由N6培養(yǎng)基、l-80g/L茶葉或苔蘚、0_10g/L活性炭、30_200g/L香蕉、10-60g/L鹿糖、3-30g/L瓊脂組成。[0014]所述的醬香功能菌為從醬香型酒高溫大曲中分離出的細(xì)菌。
[0015]所述的醬香功能菌包括紅曲霉、地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、嗜熱芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌的一種或幾種。
[0016]所述的石斛、茶槲寄生、茶葉的含水量均在5-55%之間。
[0017]所述的國(guó)酒香茶葉由以下方法制備:
[0018]步驟1:將石斛或茶槲寄生切成直徑0.05-0.2cm、長(zhǎng)l-2cm的細(xì)條或直接使用其組織培養(yǎng)物整株小苗，在自然萎凋后用微波殺青設(shè)備進(jìn)行殺青處理，時(shí)間為10-300min，功率為 Ι-lOkW，頻率為 2450±50MHZ ；
[0019]步驟2:將步驟I所得的石斛或茶槲寄生和茶葉混配后在溫度20_35°C、相對(duì)濕度25-90%條件下揉捻5-75min制成混合物；
[0020]步驟3:將發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液均勻噴灑到混合物上面，重復(fù)2-10次并不斷翻動(dòng)直至噴透，然后置于15-60°C，相對(duì)濕度30-90%條件下發(fā)酵10-200h，在發(fā)酵過(guò)程中可以向混合物補(bǔ)噴發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液；所述的發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液由葡萄糖、鹿糖、麩皮浸出汁、產(chǎn)醬香功能菌在麩皮浸出汁中的發(fā)酵萃取物、甘氨酸、脯氨酸、類(lèi)胡蘿卜素、產(chǎn)醬香功能菌重懸液、葡萄糖苷、高粱提取物的一種或幾種組成；
[0021]步驟4:發(fā)酵完成后再向發(fā)酵混合物噴一次發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液后用烘箱迅速升溫至85-120°C保溫l_50h進(jìn)行美拉德反應(yīng)；
[0022]步驟5:將混合物于15_39°C相對(duì)濕度為30-90%的恒溫恒濕箱平衡l_50h ；
[0023]步驟6:將經(jīng)步驟5發(fā)酵平衡后混合物在溫度為110_200°C的炒鍋中快炒1-1Omin后再?gòu)?fù)揉1-1Omin ；
[0024]步驟7:復(fù)揉后用手工焙籠或微波遠(yuǎn)紅外設(shè)備干燥提香，于85_125°C下進(jìn)行0.1-Sh的烘焙；干燥至含水量4-8%后獲得具有茅臺(tái)酒一樣香氣的茶葉；所述的微波頻率為2450 ± 50MHz，遠(yuǎn)紅外線波長(zhǎng)為2_30 μ m。
[0025]所述的產(chǎn)醬香功能菌由以下方法制備:
[0026]步驟1:在無(wú)菌條件下取醬香型白酒生產(chǎn)制曲、堆積酒醅和發(fā)酵期酒醅，分別加入裝有玻璃珠的90g無(wú)菌生理鹽水中，在20-39°C、20-200rpm振蕩培養(yǎng)1_15小時(shí)；
[0027]步驟2:取上清液梯度稀釋涂布于分離培養(yǎng)基上，于20_39°C培養(yǎng)1_50小時(shí)；挑取單菌落，經(jīng)多次平板劃線純化后，再轉(zhuǎn)接2-5代后挑2環(huán)菌株于裝有IOOml液體分離培養(yǎng)基的250ml搖瓶中，在20-39°C、20-200rpm振蕩培養(yǎng)1_50小時(shí)，即制得菌株發(fā)酵液；所述分離培養(yǎng)基由0.l_30g/L葡萄糖、l-50g/L胰化蛋白胨、l-30g/L酵母膏、l-90g/L黑木耳汁、0.l-20g/L氯化鈉、0.l-10g/L硫酸鎂，0.l_10g/L磷酸二氫鉀、3_30g/L瓊脂組成，經(jīng)121°C滅菌20min后去掉瓊脂即得液體分離培養(yǎng)基；
[0028]步驟3:將步驟2所得的菌株發(fā)酵液在4°C條件下，以3000r/min-10000r/min離心2min-20min,棄上清液得到濕菌體，用生理鹽水清洗除去培養(yǎng)基后制成凍干粉保藏于4°C冰禮備用。
實(shí)施例
[0029]實(shí)施例1
[0030]—種國(guó)酒香茶葉，由40g天然石斛、IOg紅曲霉、50g茶葉組成。[0031]紅曲霉的制備方法:
[0032]步驟1:在無(wú)菌條件下，取IOg醬香型白酒生產(chǎn)制曲、5g堆積酒醅和Sg發(fā)酵期酒醅，分別加入裝有玻璃珠的90g無(wú)菌生理鹽水中，在25°C、150rpm振蕩培養(yǎng)7小時(shí)；
[0033]步驟2:取上清液梯度稀釋涂布于分離培養(yǎng)基上，于28°C培養(yǎng)20小時(shí)；挑取單菌落，經(jīng)多次平板劃線純化后，再轉(zhuǎn)接4代后挑2環(huán)菌株于裝有IOOml液體分離培養(yǎng)基的250ml搖瓶中，在26°C、80rpm振蕩培養(yǎng)35小時(shí)，即制得菌株發(fā)酵液；所述分離培養(yǎng)基由30g/L葡萄糖、25g/L胰化蛋白胨、20g/L酵母膏、70g/L黑木耳汁、8g/L氯化鈉、6g/L硫酸鎂，3g/L磷酸二氫鉀、10g/L瓊脂組成，經(jīng)121°C滅菌20min后去掉瓊脂即得液體分離培養(yǎng)基;
[0034]步驟3:將所得的菌株發(fā)酵液在4°C條件下，以8000r/min離心12min,棄上清液得到濕菌體，用生理鹽水清洗除去培養(yǎng)基后制成凍干粉保藏于4°C冰箱備用。
[0035]國(guó)酒香茶葉的制備方法
[0036]步驟1:將天然石斛切成直徑0.05-0.2cm、長(zhǎng)l_2cm的細(xì)條，在自然萎凋后用微波殺青設(shè)備進(jìn)行殺青處理，時(shí)間為lOmin，功率為6kW，頻率為2450±50MHZ ；
[0037]步驟2:將步驟I所得的石斛和茶葉混配后在溫度20_25°C、相對(duì)適度87%條件下揉搶65min制成混合物；
[0038]步驟3:將發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液均勻噴灑到混合物上面，重復(fù)8次并不斷翻動(dòng)直至噴透，然后置于48°C，相對(duì)濕度73%條件下發(fā)酵150h，在發(fā)酵過(guò)程中可以向混合物補(bǔ)噴發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液；所述的發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液由葡萄糖、甘氨酸、脯氨酸、類(lèi)胡蘿卜素、紅曲霉重懸液、葡萄糖昔、聞梁提取物組成；
[0039]步驟4:發(fā)酵完成后再向發(fā)酵混合物噴一次發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液后用烘箱迅速升溫至110°c保溫45h進(jìn)行美拉德反應(yīng)；
[0040]步驟5:將混合物于30°C相對(duì)濕度為78%的恒溫恒濕箱平衡43h ；
[0041]步驟6:將經(jīng)步驟5發(fā)酵平衡后混合物在溫度為190°C的炒鍋中快炒3min后再?gòu)?fù)揉 8min ；
[0042]步驟7:用微波遠(yuǎn)紅外設(shè)備干燥提香，于95°C下進(jìn)行3h的烘焙干燥至含水量4-8%后獲得具有茅臺(tái)酒一樣香氣的茶葉；所述的微波頻率為2450±50MHz，遠(yuǎn)紅外線波長(zhǎng)為 2-30 μ m。
[0043]實(shí)施例2
[0044]—種國(guó)酒香茶葉，由Ig人工種植石斛、0.0lg地衣芽孢桿菌、Ig茶葉組成。
[0045]地衣芽孢桿菌由以下方法制備:
[0046]步驟1:在無(wú)菌條件下取醬香型白酒生產(chǎn)制曲、堆積酒醅和發(fā)酵期酒醅，分別加入裝有玻璃珠的90g無(wú)菌生理鹽水中，在39°C、20rpm振蕩培養(yǎng)5小時(shí)；
[0047]步驟2:取上清液梯度稀釋涂布于分離培養(yǎng)基上，于29°C培養(yǎng)15小時(shí)；挑取單菌落，經(jīng)多次平板劃線純化后，再轉(zhuǎn)接2代后挑2環(huán)菌株于裝有IOOml液體分離培養(yǎng)基的250ml搖瓶中，在20°C、20rpm振蕩培養(yǎng)10小時(shí)，即制得菌株發(fā)酵液；所述分離培養(yǎng)基由0.3g/L葡萄糖、15g/L胰化蛋白胨、13g/L酵母膏、18g/L黑木耳汁、10g/L氯化鈉、lg/L硫酸鎂，0.5g/L磷酸二氫鉀、3g/L瓊脂組成，經(jīng)121°C滅菌20min后去掉瓊脂即得液體分離培養(yǎng)基；[0048]步驟3:將步驟2所得的菌株發(fā)酵液在4°C條件下，以3000r/min離心2min,棄上清液得到濕菌體，用生理鹽水清洗除去培養(yǎng)基后制成凍干粉保藏于4°C冰箱備用。
[0049]國(guó)酒香茶葉制備方法
[0050]步驟1:將人工種植石斛切成直徑0.05-0.2cm、長(zhǎng)l-2cm的細(xì)條，在自然萎凋后用微波殺青設(shè)備進(jìn)行殺青處理，時(shí)間為50min，功率為3kW，頻率為2450±50MHZ:
[0051]步驟2:將步驟I所得的人工種植石斛和茶葉混配后在溫度28°C、相對(duì)濕度49%條件下揉捻35min制成混合物；
[0052]步驟3:將發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液均勻噴灑到混合物上面，重復(fù)4次并不斷翻動(dòng)直至噴透，然后置于50°C，相對(duì)濕度40%條件下發(fā)酵150h，在發(fā)酵過(guò)程中可以向混合物補(bǔ)噴發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液；所述的發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液由葡萄糖、鹿糖、麩皮浸出汁、地衣芽孢桿菌在麩皮浸出汁中的發(fā)酵萃取物、甘氨酸組成；
[0053]步驟4:發(fā)酵完成后再向發(fā)酵混合物噴一次發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液后用烘箱迅速升溫至85°C保溫IOh進(jìn)行美拉德反應(yīng)；
[0054]步驟5:將混合物于19°C相對(duì)濕度為50%的恒溫恒濕箱平衡25h ；
[0055]步驟6:將經(jīng)步驟5發(fā)酵平衡后混合物在溫度為120°C的炒鍋中快炒4min后再?gòu)?fù)揉 5min ；
[0056]步驟7:復(fù)揉后用手工焙籠干燥提香，于100°C下進(jìn)行Ih的烘焙；干燥至含水量4-8 %后獲得具有茅臺(tái)酒一樣香氣的茶葉。
[0057]實(shí)施例3
[0058]一種國(guó)酒香茶葉，由IOg石斛組織培養(yǎng)物、Ig枯草芽孢桿菌、IOg茶葉組成。
[0059]石斛組織培養(yǎng)物由下列方法制得:
[0060]步驟1:切取石斛嫩莖節(jié)，在無(wú)菌環(huán)境下用75%的酒精浸泡lmin，再用0.1%氯化汞溶液20min，無(wú)菌水沖洗5遍后切成0.1-1cm組織塊，將其接種到由1/2MS培養(yǎng)基、lg/L茶葉組成的固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，得到無(wú)菌植株；
[0061]步驟2:切取步驟I所得的無(wú)菌植株的莖段接種到pH值為9的培養(yǎng)基上進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)，所述的培養(yǎng)基由MS培養(yǎng)基、10mg/L的6-BA、0.lmg/L的NAA、80g/L茶葉、30g/L瓊脂組成；
[0062]步驟3:取步驟2中愈傷組織接種到pH9的培養(yǎng)基A及pH9的培養(yǎng)基B中在光照強(qiáng)度為lOOOLx，培養(yǎng)溫度為39°C條件下交替培養(yǎng)直至分化出小苗，得到石斛組織培養(yǎng)物；
[0063]所述的培養(yǎng)基A由1/2MS培養(yǎng)基、60g/L蔗糖、lg/L馬鈴薯汁、lg/L茶葉、3g/L瓊脂組成；
[0064]所述的培養(yǎng)基B由N6培養(yǎng)基、lg/L苔蘚、200g/L香蕉、10g/L蔗糖、3g/L瓊脂組成。
[0065]枯草芽孢桿菌的制備方法:
[0066]步驟1:在無(wú)菌條件下，取Sg醬香型白酒生產(chǎn)制曲、IOg堆積酒醅和7g發(fā)酵期酒醅，分別加入裝有玻璃珠的90g無(wú)菌生理鹽水中，在29°C、100rpm振蕩培養(yǎng)10小時(shí)；
[0067]步驟2:取上清液梯度稀釋涂布于分離培養(yǎng)基上，于29°C培養(yǎng)30小時(shí)；挑取單菌落，經(jīng)多次平板劃線純化后，再轉(zhuǎn)接3代后挑2環(huán)菌株于裝有IOOml液體分離培養(yǎng)基的250ml搖瓶中，在25°C、100rpm振蕩培養(yǎng)30小時(shí)，即制得菌株發(fā)酵液；所述分離培養(yǎng)基由10g/L葡萄糖、10g/L胰化蛋白胨、10g/L酵母膏、20g/L黑木耳汁、2g/L氯化鈉、lg/L硫酸鎂，5g/L磷酸二氫鉀、lOg/L瓊脂組成，經(jīng)121°C滅菌20min后去掉瓊脂即得液體分離培養(yǎng)基;
[0068]步驟3:將所得的菌株發(fā)酵液在4°C條件下，以5000r/min離心IOmin,棄上清液得到濕菌體，用生理鹽水清洗除去培養(yǎng)基后制成凍干粉保藏于4°C冰箱備用；
[0069]國(guó)酒香茶葉的制備方法:
[0070]步驟1:直接使用石斛組織培養(yǎng)物整株小苗，在自然萎凋后用微波殺青設(shè)備進(jìn)行殺青處理，時(shí)間為200min，功率為5kW，頻率為2450±50MHZ ；
[0071]步驟2:將步驟I所得的石斛組織培養(yǎng)物和茶葉混配后在溫度20_25°C、相對(duì)適度88%條件下揉捻50min制成混合物；
[0072]步驟3:將發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液均勻噴灑到混合物上面，重復(fù)4次并不斷翻動(dòng)直至噴透，然后置于38°C，相對(duì)濕度60%條件下發(fā)酵100h，在發(fā)酵過(guò)程中可以向混合物補(bǔ)噴發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液；所述的發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液由、枯草芽孢桿菌在麩皮浸出汁中的發(fā)酵萃取物、甘氨酸、脯氨酸、類(lèi)胡蘿卜素組成；
[0073]步驟4:發(fā)酵完成后再向發(fā)酵混合物噴一次發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液后用烘箱迅速升溫至100°C保溫20h進(jìn)行美拉德反應(yīng)；
[0074]步驟5:將混合物于29°C相對(duì)濕度為60%的恒溫恒濕箱平衡30h ；
[0075]步驟6:將經(jīng)步驟5發(fā)酵平衡后混合物在溫度為140°C的炒鍋中快炒4min后再?gòu)?fù)揉 8min ；
[0076]步驟7:用手工焙籠干燥提香，于100°C下進(jìn)行3h的烘焙干燥至含水量4-8%后獲得具有茅臺(tái)酒一樣香氣的茶葉。
[0077]實(shí)施例4
[0078]一種國(guó)酒香茶葉，由20g石斛組織培養(yǎng)物、4g嗜熱芽孢桿菌、3g茶葉組成。
[0079]所述石斛組織培養(yǎng)物由下列方法制得:
[0080]步驟1:切取石斛嫩莖節(jié)，在無(wú)菌環(huán)境下用75%的酒精浸泡lOmin，再用2%次氯酸鈉浸泡lmin，無(wú)菌水沖洗3遍后切成0.1-1cm組織塊，將其接種到由1/2MS培養(yǎng)基、80g/L苔蘚組成的固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，得到無(wú)菌植株；
[0081]步驟2:切取步驟I所得的無(wú)菌植株的莖段接種到pH值為4的培養(yǎng)基上進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)，所述的培養(yǎng)基由MS培養(yǎng)基、0.lmg/L的6-BA、lmg/L的NAA、10g/L苔蘚、3g/L瓊脂組成；
[0082]步驟3:取步驟2中愈傷組織接種到pH4的培養(yǎng)基A及pH9的培養(yǎng)基B中在光照強(qiáng)度4000LX，培養(yǎng)溫度為19°C條件下交替培養(yǎng)直至分化出小苗，得到石斛組織培養(yǎng)物；
[0083]所述的培養(yǎng)基A由1/2MS培養(yǎng)基、10g/L蔗糖、10g/L馬鈴薯汁、10g/L苔蘚、30g/L瓊脂組成；
[0084]所述的培養(yǎng)基B由N6培養(yǎng)基、10g/L苔蘚、10g/L活性炭、10g/L香蕉、10g/L蔗糖、30g/L瓊脂組成。
[0085]嗜熱芽孢桿菌由以下方法制備:
[0086]步驟1:在無(wú)菌條件下取醬香型白酒生產(chǎn)制曲、堆積酒醅和發(fā)酵期酒醅，分別加入裝有玻璃珠的90g無(wú)菌生理鹽水中，在20°C、100rpm振蕩培養(yǎng)5小時(shí)；
[0087]步驟2:取上清液梯度稀釋涂布于分離培養(yǎng)基上，于23°C培養(yǎng)20小時(shí)；挑取單菌落，經(jīng)多次平板劃線純化后，再轉(zhuǎn)接4代后挑2環(huán)菌株于裝有IOOml液體分離培養(yǎng)基的250ml搖瓶中，在30°C、150rpm振蕩培養(yǎng)30小時(shí)，即制得菌株發(fā)酵液；所述分離培養(yǎng)基由8g/L葡萄糖、27g/L胰化蛋白胨、19g/L酵母膏、30g/L黑木耳汁、5g/L氯化鈉、0.8g/L硫酸鎂，1.6g/L磷酸二氫鉀、5g/L瓊脂組成，經(jīng)121°C滅菌20min后去掉瓊脂即得液體分離培養(yǎng)基;
[0088]步驟3:將步驟2所得的菌株發(fā)酵液在4°C條件下，以4000r/min離心15min,棄上清液得到濕菌體，用生理鹽水清洗除去培養(yǎng)基后制成凍干粉保藏于4°C冰箱備用。
[0089]國(guó)酒香茶葉制備方法
[0090]步驟1:直接使用石斛組織培養(yǎng)物整株小苗，在自然萎凋后用微波殺青設(shè)備進(jìn)行殺青處理，時(shí)間為300min，功率為10kW，頻率為2450±50MHZ ；
[0091]步驟2:將步驟I所得的石斛組織培養(yǎng)物和茶葉混配后在溫度35°C、相對(duì)濕度90%條件下揉捻75min制成混合物；
[0092]步驟3:將發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液均勻噴灑到混合物上面，重復(fù)10次并不斷翻動(dòng)直至噴透，然后置于60°C，相對(duì)濕度90%條件下發(fā)酵200h，在發(fā)酵過(guò)程中可以向混合物補(bǔ)噴發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液；所述的發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液由葡萄糖、鹿糖、麩皮浸出汁、嗜熱芽孢桿菌在麩皮浸出汁中的發(fā)酵萃取物、甘氨酸、脯氨酸、類(lèi)胡蘿卜素、嗜熱芽孢桿菌重懸液、葡萄糖苷、高粱提取物組成；
[0093]步驟4:發(fā)酵完成后再向發(fā)酵混合物噴一次發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液后用烘箱迅速升溫至120°C保溫50h進(jìn)行美拉德反應(yīng)；
[0094]步驟5:將混合物于39°C相對(duì)濕度為90%的恒溫恒濕箱平衡50h ；
[0095]步驟6:將經(jīng)步驟5發(fā)酵平衡后混合物在溫度為200°C的炒鍋中快炒IOmin后再?gòu)?fù)揉 IOmin ；
[0096]步驟7:復(fù)揉后用手工焙籠干燥提香，于125°C下進(jìn)行8h的烘焙；干燥至含水量4-8 %后獲得具有茅臺(tái)酒一樣香氣的茶葉。
[0097]實(shí)施例5
[0098]一種國(guó)酒香茶葉，由30g石斛組織培養(yǎng)物、8g解淀粉芽孢桿菌、20g茶葉組成。
[0099]所述石斛組織培養(yǎng)物由下列方法制得:
[0100]步驟1:切取石斛嫩莖節(jié)，在無(wú)菌環(huán)境下用75%的酒精浸泡Ι-lOmin，再用2%次氯酸鈉浸泡lOmin，無(wú)菌水沖洗3-5遍后切成0.1-1cm組織塊，將其接種到由1/2MS培養(yǎng)基、30g/L苔蘚組成的固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，得到無(wú)菌植株；
[0101]步驟2:切取步驟I所得的無(wú)菌植株的莖段接種到pH值為7的培養(yǎng)基上進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)，所述的培養(yǎng)基由MS培養(yǎng)基、10g/L苔蘚、80g/L馬鈴薯汁、10g/L瓊脂組成；
[0102]步驟3:取步驟2中愈傷組織接種到pH6的培養(yǎng)基A及pH6的培養(yǎng)基B中在光照強(qiáng)度為4000LX，培養(yǎng)溫度為29°C條件下交替培養(yǎng)直至分化出小苗，得到石斛組織培養(yǎng)物；
[0103]所述的培養(yǎng)基A由1/2MS培養(yǎng)基、30g/L蔗糖、70g/L馬鈴薯汁、40g/L茶葉、20g/L瓊脂組成；
[0104]所述的培養(yǎng)基B由N6培養(yǎng)基、40g/L苔蘚、5g/L活性炭、130g/L香蕉、15g/L蔗糖、14g/L瓊脂組成。
[0105]解淀粉芽孢桿菌由以下方法制備:[0106]步驟1:在無(wú)菌條件下取醬香型白酒生產(chǎn)制曲、堆積酒醅和發(fā)酵期酒醅，分別加入裝有玻璃珠的90g無(wú)菌生理鹽水中，在33°C、180rpm振蕩培養(yǎng)3小時(shí)；
[0107]步驟2:取上清液梯度稀釋涂布于分離培養(yǎng)基上，于29°C培養(yǎng)40小時(shí)；挑取單菌落，經(jīng)多次平板劃線純化后，再轉(zhuǎn)接5代后挑2環(huán)菌株于裝有IOOml液體分離培養(yǎng)基的250ml搖瓶中，在25°C、50rpm振蕩培養(yǎng)40小時(shí)，即制得菌株發(fā)酵液；所述分離培養(yǎng)基由Ig/L葡萄糖、35g/L胰化蛋白胨、23g/L酵母膏、20g/L黑木耳汁、0.5g/L氯化鈉、0.7g/L硫酸鎂，1.5g/L磷酸二氫鉀、3.8g/L瓊脂組成，經(jīng)121°C滅菌20min后去掉瓊脂即得液體分離培養(yǎng)基;
[0108]步驟3:將步驟2所得的菌株發(fā)酵液在4°C條件下，以5000r/min離心9min,棄上清液得到濕菌體，用生理鹽水清洗除去培養(yǎng)基后制成凍干粉保藏于4°C冰箱備用。
[0109]國(guó)酒香茶葉制備方法
[0110]步驟1:直接使用石斛組織培養(yǎng)物整株小苗，在自然萎凋后用微波殺青設(shè)備進(jìn)行殺青處理，時(shí)間為lOmin，功率為lkW，頻率為2450±50MHZ ；
[0111]步驟2:將步驟I所得的石斛組織培養(yǎng)物和茶葉混配后在溫度20°C、相對(duì)濕度25%條件下揉捻5min制成混合物；
[0112]步驟3:將發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液均勻噴灑到混合物上面，重復(fù)2次并不斷翻動(dòng)直至噴透，然后置于15°C，相對(duì)濕度30%條件下發(fā)酵10h，在發(fā)酵過(guò)程中可以向混合物補(bǔ)噴發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液；所述的發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液由葡萄糖、解淀粉芽孢桿菌在麩皮浸出汁中的發(fā)酵萃取物、甘氨酸、脯氨酸、類(lèi)胡蘿卜素組成；
[0113]步驟4:發(fā)酵完成后再向發(fā)酵混合物噴一次發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液后用烘箱迅速升溫至85°C保溫Ih進(jìn)行美拉德反應(yīng)；
[0114]步驟5:將混合物于15°C相對(duì)濕度為30%的恒溫恒濕箱平衡Ih ；
[0115]步驟6:將經(jīng)步驟5發(fā)酵平衡后混合物在溫度為110°C的炒鍋中快炒Imin后再?gòu)?fù)揉 Imin ；
[0116]步驟7:復(fù)揉后用微波遠(yuǎn)紅外設(shè)備干燥提香，于85°C下進(jìn)行0.1h的烘焙；干燥至含水量4-8%后獲得具有茅臺(tái)酒一樣香氣的茶葉；所述的微波頻率為2450±50MHz，遠(yuǎn)紅外線波長(zhǎng)為2-30 μ m。
[0117]實(shí)施例6
[0118]一種國(guó)酒香茶葉，由23g天然茶槲寄生、2g納豆芽孢桿菌、Ig紅曲霉、42g茶葉組成。
[0119]納豆芽孢桿菌由以下方法制備:
[0120]步驟1:在無(wú)菌條件下取醬香型白酒生產(chǎn)制曲、堆積酒醅和發(fā)酵期酒醅，分別加入裝有玻璃珠的90g無(wú)菌生理鹽水中，在25°C、180rpm振蕩培養(yǎng)8小時(shí)；
[0121]步驟2:取上清液梯度稀釋涂布于分離培養(yǎng)基上，于28°C培養(yǎng)20小時(shí)；挑取單菌落，經(jīng)多次平板劃線純化后，再轉(zhuǎn)接4代后挑2環(huán)菌株于裝有IOOml液體分離培養(yǎng)基的250ml搖瓶中，在25°C、20rpm振蕩培養(yǎng)30小時(shí)，即制得菌株發(fā)酵液；所述分離培養(yǎng)基由
10.8g/L葡萄糖、30g/L胰化蛋白胨、10g/L酵母膏、28g/L黑木耳汁、3.2g/L氯化鈉、6.5g/L硫酸鎂，5.8g/L磷酸二氫鉀、20g/L瓊脂組成，經(jīng)121°C滅菌20min后去掉瓊脂即得液體分離培養(yǎng)基;[0122]步驟3:將步驟2所得的菌株發(fā)酵液在4°C條件下，以8000r/min離心20min,棄上清液得到濕菌體，用生理鹽水清洗除去培養(yǎng)基后制成凍干粉保藏于4°C冰箱備用。
[0123]國(guó)酒香茶葉制備方法
[0124]步驟1:將天然茶槲寄生切成直徑0.05-0.2cm、長(zhǎng)l-2cm的細(xì)條，在自然萎凋后用微波殺青設(shè)備進(jìn)行殺青處理，時(shí)間為180min，功率為7kW，頻率為2450±50MHZ:
[0125]步驟2:將步驟I所得的天然茶槲寄生和茶葉混配后在溫度28°C、相對(duì)濕度75%條件下揉捻65min制成混合物；
[0126]步驟3:將發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液均勻噴灑到混合物上面，重復(fù)8次并不斷翻動(dòng)直至噴透，然后置于35°C，相對(duì)濕度70%條件下發(fā)酵130h，在發(fā)酵過(guò)程中可以向混合物補(bǔ)噴發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液；所述的發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液由葡萄糖、蔗糖、納豆芽孢桿菌在麩皮浸出汁中的發(fā)酵萃取物、甘氨酸、脯氨酸、β -葡萄糖苷、高粱提取物組成；
[0127]步驟4:發(fā)酵完成后再向發(fā)酵混合物噴一次發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液后用烘箱迅速升溫至110°c保溫45h進(jìn)行美拉德反應(yīng)；
[0128]步驟5:將混合物于25°C相對(duì)濕度為70%的恒溫恒濕箱平衡5h ；
[0129]步驟6:將經(jīng)步驟5發(fā)酵平衡后混合物在溫度為150°C的炒鍋中快炒6min后再?gòu)?fù)揉 4min ；
[0130]步驟7:復(fù)揉后用微波遠(yuǎn)紅外設(shè)備干燥提香，于95°C下進(jìn)行7h的烘焙；干燥至含水量4-8%后獲得具有茅臺(tái)酒一樣香氣的茶葉；所述的微波頻率為2450±50MHz，遠(yuǎn)紅外線波長(zhǎng)為2-30 μ m。
[0131]實(shí)施例7
[0132]一種國(guó)酒香茶葉，由14g人工種植茶槲寄生、4g納豆芽孢桿菌、48g茶葉組成。
[0133]納豆芽孢桿菌制備方法:
[0134]步驟1:在無(wú)菌條件下取15g醬香型白酒生產(chǎn)制曲、7g堆積酒醅和9g發(fā)酵期酒醅，分別加入裝有玻璃珠的90g無(wú)菌生理鹽水中，在20°C、200rpm振蕩培養(yǎng)15小時(shí)；
[0135]步驟2:取上清液梯度稀釋涂布于分離培養(yǎng)基上，于20°C培養(yǎng)50小時(shí)；挑取單菌落，經(jīng)多次平板劃線純化后，再轉(zhuǎn)接5代后挑2環(huán)菌株于裝有IOOml液體分離培養(yǎng)基的250ml搖瓶中，在20-°C、20-200rpm振蕩培養(yǎng)50小時(shí)，即制得菌株發(fā)酵液；所述分離培養(yǎng)基由0.lg/L葡萄糖、lg/L胰化蛋白胨、lg/L酵母膏、lg/L黑木耳汁、0.lg/L氯化鈉、0.lg/L硫酸鎂，0.lg/L磷酸二氫鉀、3g/L瓊脂組成，經(jīng)121°C滅菌20min后去掉瓊脂即得液體分離培養(yǎng)基;
[0136]步驟3:將所得的菌株發(fā)酵液在4°C條件下，以10000r/min離心2min,棄上清液得到濕菌體，用生理鹽水清洗除去培養(yǎng)基后制成凍干粉保藏于4°C冰箱備用。
[0137]國(guó)酒香茶葉制備方法:
[0138]步驟1:將人工種植茶槲寄生生切成直徑0.05-0.2cm、長(zhǎng)l-2cm的細(xì)條，在自然萎凋后用微波殺青設(shè)備進(jìn)行殺青處理，時(shí)間為lOOmin，功率為10kW，頻率為2450±50MHZ ；
[0139]步驟2:將步驟I所得的人工種植茶槲寄生和茶葉混配后在溫度20°C、相對(duì)適度90%條件下揉捻5min制成混合物；
[0140]步驟3:將發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液均勻噴灑到混合物上面，重復(fù)2次并不斷翻動(dòng)直至噴透，然后置于15°C，相對(duì)濕度30%條件下發(fā)酵10h，在發(fā)酵過(guò)程中可以向混合物補(bǔ)噴發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液；所述的發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液由蔗糖、麩皮浸出汁、納豆芽孢桿菌在麩皮浸出汁中的發(fā)酵萃取物、甘氨酸、脯氨酸納豆芽孢桿菌重懸液、β-葡萄糖苷、高粱提取物組成；
[0141]步驟4:發(fā)酵完成后再向發(fā)酵混合物噴一次發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液后用烘箱迅速升溫至85°C保溫Ih進(jìn)行美拉德反應(yīng)；
[0142]步驟5:將混合物于15°C相對(duì)濕度為30%的恒溫恒濕箱平衡50h ；
[0143]步驟6:將經(jīng)步驟5發(fā)酵平衡后混合物在溫度為110°C的炒鍋中快炒IOmin后再?gòu)?fù)揉 Imin ；
[0144]步驟7:用手工焙籠干燥提香，于85°C下進(jìn)行8h的烘焙，干燥至含水量4_8%后獲得具有茅臺(tái)酒一樣香氣的茶葉。
[0145]實(shí)施例8
[0146]一種國(guó)酒香茶葉，由13g茶槲寄生組織培養(yǎng)物、7g嗜熱芽孢桿菌、30g茶葉組成。
[0147]所述茶槲寄生組織培養(yǎng)物由下列方法制得:
[0148]步驟1:切取茶槲寄生嫩莖節(jié)，在無(wú)菌環(huán)境下用75%的酒精浸泡6min，再用0.1%氯化汞溶液lOmin，無(wú)菌水沖洗3-5遍后切成0.1-1cm組織塊，將其接種到由1/2MS培養(yǎng)基、18g/L苔蘚組成的固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，得到無(wú)菌植株；
[0149]步驟2:切取步驟I所得的無(wú)菌植株的莖段接種到pH值為8的培養(yǎng)基上進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)，所述的培養(yǎng)基由MS培養(yǎng)基、4mg/L的6-BA、6mg/L的NAA、20g/L茶葉或苔蘚、8g/L瓊脂組成；
[0150]步驟3:取步驟2中愈傷組織接種到pH7的培養(yǎng)基A及pH5的培養(yǎng)基B中在光照強(qiáng)度為3000LX，培養(yǎng)溫度為25°C條件下交替培養(yǎng)直至分化出小苗，得到茶槲寄生組織培養(yǎng)物；
[0151]所述的培養(yǎng)基A由1/2MS培養(yǎng)基、45g/L蔗糖、122g/L馬鈴薯汁、32g/L茶葉、13g/L瓊脂組成；
[0152]所述的培養(yǎng)基B由N6培養(yǎng)基、44g/L茶葉或苔蘚、4g/L活性炭、150g/L香蕉、30g/L蔗糖、25g/L瓊脂組成。
[0153]嗜熱芽孢桿菌制備方法:
[0154]步驟1:在無(wú)菌條件下取5g醬香型白酒生產(chǎn)制曲、12g堆積酒醅和7g發(fā)酵期酒醅，分別加入裝有玻璃珠的90g無(wú)菌生理鹽水中，在39°C、20rpm振蕩培養(yǎng)15小時(shí)；
[0155]步驟2:取上清液梯度稀釋涂布于分離培養(yǎng)基上，于39°C培養(yǎng)I小時(shí)；挑取單菌落，經(jīng)多次平板劃線純化后，再轉(zhuǎn)接2代后挑2環(huán)菌株于裝有IOOml液體分離培養(yǎng)基的250ml搖瓶中，在39°C、200rpm振蕩培養(yǎng)I小時(shí)，即制得菌株發(fā)酵液；所述分離培養(yǎng)基由30g/L葡萄糖、50g/L胰化蛋白胨、30g/L酵母膏、90g/L黑木耳汁、20g/L氯化鈉、10g/L硫酸鎂，10g/L磷酸二氫鉀、30g/L瓊脂組成，經(jīng)121°C滅菌20min后去掉瓊脂即得液體分離培養(yǎng)基;
[0156]步驟3:將所得的菌株發(fā)酵液在4°C條件下，以3000r/min離心2min,棄上清液得到濕菌體，用生理鹽水清洗除去培養(yǎng)基后制成凍干粉保藏于4°C冰箱備用。
[0157]國(guó)酒香茶葉制備方法:
[0158]步驟1:直接使用茶槲寄生組織培養(yǎng)物的整株小苗，在自然萎凋后用微波殺青設(shè)備進(jìn)行殺青處理，時(shí)間為300min，功率為10kW，頻率為2450±50MHZ ；[0159]步驟2:將步驟I所得的茶槲寄生組織培養(yǎng)物和茶葉混配后在溫度20_25°C、相對(duì)適度90%條件下揉捻75min制成混合物；
[0160]步驟3:將發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液均勻噴灑到混合物上面，重復(fù)10次并不斷翻動(dòng)直至噴透，然后置于60°C，相對(duì)濕度90%條件下發(fā)酵200h，在發(fā)酵過(guò)程中可以向混合物補(bǔ)噴發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液；所述的發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液由葡萄糖、鹿糖、麩皮浸出汁、嗜熱芽孢桿菌在麩皮浸出汁中的發(fā)酵萃取物、嗜熱芽孢桿菌重懸液、葡萄糖苷、高粱提取物；
[0161]步驟4:發(fā)酵完成后再向發(fā)酵混合物噴一次發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液后用烘箱迅速升溫至120°C保溫50h進(jìn)行美拉德反應(yīng)；
[0162]步驟5:將混合物于39°C相對(duì)濕度為90%的恒溫恒濕箱平衡50h ；
[0163]步驟6:將經(jīng)步驟5發(fā)酵平衡后混合物在溫度為200°C的炒鍋中快炒Imin后再?gòu)?fù)揉 Imin ；
[0164]步驟7:用微波遠(yuǎn)紅外設(shè)備干燥提香，于125°C下進(jìn)行0.1h的烘焙，干燥至含水量
4-8%后獲得具有茅臺(tái)酒一樣香氣的茶葉；所述的微波頻率為2450±50MHz，遠(yuǎn)紅外線波長(zhǎng)為 2-30 μ m。
[0165]實(shí)施例9
[0166]一種國(guó)酒香茶葉，由20g茶槲寄生組織培養(yǎng)物、8g納豆芽孢桿菌、30g茶葉組成。
[0167]所述茶槲寄生組織培養(yǎng)物由下列方法制得:
[0168]步驟1:切取茶槲寄生嫩莖節(jié)，在無(wú)菌環(huán)境下用75%的酒精浸泡Ι-lOmin，再用2%次氯酸鈉浸泡18min，無(wú)菌水沖洗3-5遍后切成0.1-1cm組織塊，將其接種到由1/2MS培養(yǎng)基、60g/L茶葉組成的固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，得到無(wú)菌植株；
[0169]步驟2:切取步驟I所得的無(wú)菌植株的莖段接種到pH值為5的培養(yǎng)基上進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)，所述的培養(yǎng)基由MS培養(yǎng)基、70g/L苔蘚、19g/L瓊脂、120g/L馬鈴薯汁組成；
[0170]步驟3:取步驟2中愈傷組織接種到pH5的培養(yǎng)基A及pH7.4的培養(yǎng)基B中在光照強(qiáng)度為6000LX，培養(yǎng)溫度為25°C條件下交替培養(yǎng)直至分化出小苗，得到石斛組織培養(yǎng)物或茶槲寄生組織培養(yǎng)物；
[0171]所述的培養(yǎng)基A由1/2MS培養(yǎng)基、40g/L蔗糖、130g/L馬鈴薯汁、40g/L苔蘚、5g/L瓊脂組成；
[0172]所述的培養(yǎng)基B由N6培養(yǎng)基、80g/L苔蘚、lg/L活性炭、130g/L香蕉、30g/L蔗糖、3g/L瓊脂組成。
[0173]納豆芽孢桿菌由以下方法制備:
[0174]步驟1:在無(wú)菌條件下取醬香型白酒生產(chǎn)制曲、堆積酒醅和發(fā)酵期酒醅，分別加入裝有玻璃珠的90g無(wú)菌生理鹽水中，在25°C、80rpm振蕩培養(yǎng)9小時(shí)；
[0175]步驟2:取上清液梯度稀釋涂布于分離培養(yǎng)基上，于25°C培養(yǎng)20小時(shí)；挑取單菌落，經(jīng)多次平板劃線純化后，再轉(zhuǎn)接2代后挑2環(huán)菌株于裝有IOOml液體分離培養(yǎng)基的250ml搖瓶中，在30°C、80rpm振蕩培養(yǎng)35小時(shí)，即制得菌株發(fā)酵液；所述分離培養(yǎng)基由
0.8g/L葡萄糖、45g/L胰化蛋白胨、23g/L酵母膏、70g/L黑木耳汁、lg/L氯化鈉、2g/L硫酸鎂，7g/L磷酸二氫鉀、8g/L瓊脂組成，經(jīng)121°C滅菌20min后去掉瓊脂即得液體分離培養(yǎng)基;
[0176]步驟3:將步驟2所得的菌株發(fā)酵液在4°C條件下，以10000r/min離心2min,棄上清液得到濕菌體，用生理鹽水清洗除去培養(yǎng)基后制成凍干粉保藏于4°C冰箱備用。
[0177]國(guó)酒香茶葉制備方法
[0178]步驟1:直接使用茶槲寄生組織培養(yǎng)物的整株小苗，在自然萎凋后用微波殺青設(shè)備進(jìn)行殺青處理，時(shí)間為130min，功率為9kW，頻率為2450±50MHZ ；
[0179]步驟2:將步驟I所得的茶槲寄生組織培養(yǎng)物和茶葉混配后在溫度30°C、相對(duì)濕度30%條件下揉捻25min制成混合物；
[0180]步驟3:將發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液均勻噴灑到混合物上面，重復(fù)9次并不斷翻動(dòng)直至噴透，然后置于55°C，相對(duì)濕度80%條件下發(fā)酵180h，在發(fā)酵過(guò)程中可以向混合物補(bǔ)噴發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液；所述的發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液由葡萄糖、蔗糖、麩皮浸出汁、納豆芽孢桿菌在麩皮浸出汁中的發(fā)酵萃取物、納豆芽孢桿菌重懸液、β -葡萄糖苷、高粱提取物組成；
[0181]步驟4:發(fā)酵完成后再向發(fā)酵混合物噴一次發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液后用烘箱迅速升溫至115°C保溫49h進(jìn)行美拉德反應(yīng)；
[0182]步驟5:將混合物于38°C相對(duì)濕度為88%的恒溫恒濕箱平衡47h ；
[0183]步驟6:將經(jīng)步驟5發(fā)酵平衡后混合物在溫度為190°C的炒鍋中快炒2min后再?gòu)?fù)揉 8min ；
[0184]步驟7:復(fù)揉后用微波遠(yuǎn)紅外設(shè)備干燥提香，于90°C下進(jìn)行0.5h的烘焙；干燥至含水量4-8%后獲得具有茅臺(tái)酒一樣香氣的茶葉；所述的微波頻率為2450±50MHz，遠(yuǎn)紅外線波長(zhǎng)為2-30 μ m。
[0185]試驗(yàn)例
[0186]茶多酚檢測(cè)方法:
[0187]①試劑配制:酒石酸亞鐵溶液:稱(chēng)取1.0g硫酸亞鐵(FeSO4.7H20)和5.0g酒石酸鉀鈉(C14H4O6KNa.4H20)，用水溶解并定容至IL (低溫保存有效期10天)。pH7.5磷酸鹽緩沖液:l/15mol/L磷酸氫二鈉:稱(chēng)取23.9g十二水磷酸氫二鈉(Na2HPO4.12H20)，加水溶解后定容至IL ;l/15mol/L磷酸二氫鉀:稱(chēng)取經(jīng)110°C烘干2h的磷酸二氫鉀(KH2P04)9.08g，加水溶解后定容至IL ;取l/15mol/L的磷酸氫二鈉溶液85mL和l/15mol/L的磷酸二氫鉀溶液15mL混合均勻。
[0188]②具體操作:
[0189]準(zhǔn)確吸取試液(換算成相同茶葉量)(普通茶葉用開(kāi)水浸泡3次，合并茶水，檢測(cè)時(shí)取相同茶葉量的茶水)，注入25mL的容量瓶中，加水4mL和酒石酸亞鐵溶液5mL，充分混合，再加ρΗ7.5磷酸鹽緩沖液至刻度，用IOmm比色杯，在波長(zhǎng)540nm處，測(cè)定吸光度(A)，以試劑空白溶液作參比，測(cè)定吸光度A2。量取25ml充分混勻的樣液于50ml容量瓶中，加入15111195%乙醇,充分搖勻,放置15min,用水定容,濾紙過(guò)濾。
[0190]公式:茶多酚(mg/l)= (A-A2) XL 975X2XKX 1000/V ；
[0191]K:稀釋倍數(shù)；
[0192]II1、總酸總酯檢測(cè)方法參照GB/T10345-2007，結(jié)果為總酸以乙酸達(dá)3.0g/1、總酯以乙酸乙酯達(dá)2.60g/l (取相同茶葉量的液體)。
[0193]按上述方法檢測(cè)實(shí)施例1-9的茶多酚及總酸總酯含量結(jié)果如下:
[0194]
【權(quán)利要求】
1.一種國(guó)酒香茶葉，其特征在于由1-40重量份石斛或茶槲寄生、0.01-10重量份產(chǎn)醬香功能菌、1-50重量份茶葉組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的國(guó)酒香茶葉，其特征在于所述的石斛是天然石斛或人工種植石斛或石斛組織培養(yǎng)物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的國(guó)酒香茶葉，其特征在于所述的茶槲寄生是天然茶槲寄生或人工種植茶槲寄生或茶槲寄生組織培養(yǎng)物。
4.根據(jù)權(quán)利要求2和權(quán)利要求3所述的國(guó)酒香茶葉，其特征在于所述的石斛組織培養(yǎng)物或茶槲寄生組織培養(yǎng)物由以下方法制備: 步驟1:切取石斛或茶槲寄生嫩莖節(jié)，在無(wú)菌環(huán)境下用75%的酒精浸泡Ι-lOmin，再用0.1 %氯化萊溶液或2%次氯酸鈉浸泡l-20min,無(wú)菌水沖洗3-5遍后切成0.1-1cm組織塊，將其接種到由1/2MS培養(yǎng)基、l-80g/L茶葉或苔蘚組成的固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，得到無(wú)菌植株； 步驟2:切取步驟I所得的無(wú)菌植株的莖段接種到pH值為4-9的培養(yǎng)基上進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)，所述的培養(yǎng)基由MS培養(yǎng)基、0.l-10mg/L的6_BA、0.1-lmg/L的NAA、l_80g/L茶葉或苔蘚、3_30g/L瓊脂組成或由MS、l-80g/L茶葉或苔蘚、l_200g/L馬鈴薯汁、3_30g/L瓊脂組成； 步驟3:取步驟2中愈傷組織接種到pH4-9的培養(yǎng)基A及pH4-9的培養(yǎng)基B中在光照強(qiáng)度為1000-8000LX，培養(yǎng)溫度為10-39°C條件下交替培養(yǎng)直至分化出小苗，得到石斛組織培養(yǎng)物或茶槲寄生組織培養(yǎng)物； 所述的培養(yǎng)基A由1/2MS培 養(yǎng)基、10-60g/L蔗糖、l_200g/L馬鈴薯汁、l_80g/L茶葉或苔鮮、3_30g/L瓊脂組成； 所述的培養(yǎng)基B由N6培養(yǎng)基、l-80g/L茶葉或苔蘚、0-10g/L活性炭、30_200g/L香蕉、10-60g/L鹿糖、3-30g/L瓊脂組成。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的國(guó)酒香茶葉，其特征在于所述的醬香功能菌為從醬香型酒高溫大曲中分離出的細(xì)菌。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的國(guó)酒香茶葉，其特征在于所述的醬香功能菌包括紅曲霉、地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、嗜熱芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌的一種或幾種。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的國(guó)酒香茶葉，其特征在于所述的石斛、茶槲寄生、茶葉的含水量均在5-55%之間。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的國(guó)酒香茶葉由以下方法制備: 步驟1:將石斛或茶槲寄生切成直徑0.05-0.2cm、長(zhǎng)l-2cm的細(xì)條或直接使用其組培整株小苗，在自然萎凋后用微波殺青設(shè)備進(jìn)行殺青處理，時(shí)間為10-300min，功率為l_10kW，頻率為 2450±50MHZ ； 步驟2:將步驟I所得的石斛或茶槲寄生和茶葉混配后在溫度20-35°C、相對(duì)濕度25-90%條件下揉捻5-75min制成混合物； 步驟3:將發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液均勻噴灑到混合物上面，重復(fù)2-10次并不斷翻動(dòng)直至噴透，然后置于15-60°C，相對(duì)濕度30-90%條件下發(fā)酵10-200h，在發(fā)酵過(guò)程中可以向混合物補(bǔ)噴發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液；所述的發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液由葡萄糖、鹿糖、麩皮浸出汁、產(chǎn)醬香功能菌在麩皮浸出汁中的發(fā)酵萃取物、甘氨酸、脯氨酸、類(lèi)胡蘿卜素、產(chǎn)醬香功能菌重懸液、葡萄糖苷、高粱提取物的一種或幾種組成；步驟4:發(fā)酵完成后再向發(fā)酵混合物噴一次發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液后用烘箱迅速升溫至85-120°C保溫l_50h進(jìn)行美拉德反應(yīng)； 步驟5:將混合物于15-39°C相對(duì)濕度為30-90%的恒溫恒濕箱平衡l_50h ； 步驟6:將經(jīng)步驟5發(fā)酵平衡后混合物在溫度為110-200°C的炒鍋中快炒1-1Omin后再?gòu)?fù)揉 1-1Omin ； 步驟7:復(fù)揉后用手工焙籠或微波遠(yuǎn)紅外設(shè)備干燥提香，于85-125°C下進(jìn)行0.1-Sh的烘焙；干燥至含水量4-8%后獲得具有茅臺(tái)酒一樣香氣的茶葉；所述的微波頻率為2450 土 50MHz，遠(yuǎn)紅外線波長(zhǎng)為2_30 μ m。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于所述的產(chǎn)醬香功能菌菌種由以下方法制備: 步驟1:在無(wú)菌條件下取醬香型白酒生產(chǎn)制曲、堆積酒醅和發(fā)酵期酒醅，分別加入裝有玻璃珠的90g無(wú)菌生理鹽水中，在20-39°C、20-200rpm振蕩培養(yǎng)1_15小時(shí)； 步驟2:取上清液梯度稀釋涂布于分離培養(yǎng)基上，于20-39°C培養(yǎng)1-50小時(shí)；挑取單菌落，經(jīng)多次平板劃線純化后，再轉(zhuǎn)接2-5代后挑2環(huán)菌株于裝有100ml液體分離培養(yǎng)基的250ml搖瓶中，在20-39°C、20-200rpm振蕩培養(yǎng)1_50小時(shí)，即制得菌株發(fā)酵液；所述分離培養(yǎng)基由0.l_30g/L葡萄糖、l-50g/L胰化蛋白胨、l-30g/L酵母膏、l-90g/L黑木耳汁、0.l-20g/L氯化鈉、0.l-10g/L硫酸鎂，0.l_10g/L磷酸二氫鉀、3_30g/L瓊脂組成，經(jīng)121°C滅菌20min后去掉瓊脂即得液體分離培養(yǎng)基； 步驟3:將步驟2所得的菌株發(fā)酵液在4 °C條件下，以3000r/min-10000r/min離心2min-20min,棄上清液得到濕菌體，用生理鹽水清洗除去培養(yǎng)基后制成凍干粉保藏于4°C冰禮備用。
【文檔編號(hào)】A23F3/10GK103704387SQ201310727534
【公開(kāi)日】2014年4月9日 申請(qǐng)日期:2013年12月26日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月26日
【發(fā)明者】郭景龍 申請(qǐng)人:郭景龍