一種便于使用和封閉性好的脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠培養(yǎng)基的制作方法
【專利摘要】本實(shí)用新型涉及一種便于使用和封閉性好的脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠培養(yǎng)基。它設(shè)有包括底座和頂蓋的培養(yǎng)板，底座設(shè)有底板和底座側(cè)板，頂蓋設(shè)有頂板和頂蓋側(cè)板，底座側(cè)板和頂蓋側(cè)板通過(guò)鉸接塊鉸接，底板上設(shè)有垂直于頂板且圍繞底板一周、同時(shí)與底座側(cè)板平行的內(nèi)擋板，內(nèi)擋板高于底座側(cè)板且與底座側(cè)板之間形成嵌合槽；底板上設(shè)有陣列方式排列且內(nèi)部裝有脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠的培養(yǎng)柱，頂板上設(shè)有與培養(yǎng)柱一一對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)柱蓋，頂蓋側(cè)板上設(shè)有固定銷，底座側(cè)板上設(shè)有固定孔。該培養(yǎng)基方便進(jìn)行大量培養(yǎng)物培養(yǎng)，操作簡(jiǎn)便，封閉性好，不易污染。
【專利說(shuō)明】一種便于使用和封閉性好的脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠培養(yǎng)基
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及生物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體地說(shuō)，是一種便于使用和封閉性好的脫細(xì)胞
血管基質(zhì)凝膠培養(yǎng)基。
【背景技術(shù)】
[0002]纖維蛋白凝膠是一種良好的支架材料，一直是組織工程研究的重點(diǎn)之一。纖維蛋白凝膠主要由天然的細(xì)胞外基質(zhì)成分構(gòu)成，具有良好的生物相容性、有效的生物活性以及生物可降解性，同時(shí)還具有三維多孔結(jié)構(gòu)和良好的可塑性。近年來(lái)，纖維蛋白凝膠作為支架材料日益廣泛地應(yīng)用到組織工程研究中，其對(duì)肌組織、骨及軟骨組織、上皮組織等的形成具有重要作用，但同時(shí)卻不能為骨及軟骨組織工程提供足夠的機(jī)械強(qiáng)度。
[0003]脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠是一種組織工程化凝膠，其可應(yīng)用于以下領(lǐng)域:1)用于注射直接治療缺血性疾病:比如下肢缺血、心肌缺血等；2)作為細(xì)胞治療的載體，凝膠混合細(xì)胞后局部注射治療，起到局部限制細(xì)胞流動(dòng)和流失的作用；3)作為內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)過(guò)程中鋪層用，從而起到幫助細(xì)胞粘附、維持細(xì)胞形態(tài)和功能、促進(jìn)增殖等作用；4)可作為細(xì)胞三維培養(yǎng)的載體，誘導(dǎo)細(xì)胞分化等。當(dāng)用于細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，一般需要在諸多容器中進(jìn)行并對(duì)容器進(jìn)行編號(hào)，以用于培養(yǎng)不同的細(xì)胞、設(shè)置不同的實(shí)驗(yàn)參數(shù)用，還需要將培養(yǎng)基分裝至各個(gè)容器。由于通常實(shí)驗(yàn)設(shè)置組別較多，則該種細(xì)胞培養(yǎng)方式給實(shí)驗(yàn)人員帶來(lái)較大不便，且容易混淆，分裝培養(yǎng)基則需要反復(fù)吸取、添加，操作十分繁瑣，而且培養(yǎng)容器的蓋子和底部分離，易被外界污染。因此亟需一種便于使用、封閉性好的脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠培養(yǎng)基。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本實(shí)用新型的目的是，提供一種便于使用和封閉性好的培養(yǎng)板。
[0005]本實(shí)用新型的另一目的是，提供一種便于使用和封閉性好的脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠
培養(yǎng)基。
[0006]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本實(shí)用新型采取的技術(shù)方案是:
[0007]—種便于使用和封閉性好的培養(yǎng)板,設(shè)有底座和頂蓋,所述的底座設(shè)有底板和底座側(cè)板，所述的頂蓋設(shè)有頂板和頂蓋側(cè)板，所述的底座側(cè)板和頂蓋側(cè)板通過(guò)鉸接塊鉸接；所述的底板上設(shè)有垂直于頂板且圍繞底板一周、同時(shí)與底座側(cè)板平行的內(nèi)擋板，所述的內(nèi)擋板高于底座側(cè)板，與底座側(cè)板之間形成嵌合槽；所述的底板上設(shè)有陣列方式排列的培養(yǎng)柱，所述的頂板上設(shè)有與所述培養(yǎng)柱一一對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)柱蓋；所述的頂蓋側(cè)板上設(shè)有固定銷，所述的底座側(cè)板上設(shè)有固定孔；所述的底座和頂蓋扣合時(shí)，所述的頂蓋側(cè)板插入在嵌合槽內(nèi)，所述的培養(yǎng)柱蓋一一蓋合在培養(yǎng)柱上，所述的固定銷插入在固定孔內(nèi)。
[0008]所述的絞接塊包括軸座和兩個(gè)插銷，所述的軸座為圓柱形中空管狀，固定在底座側(cè)板的外側(cè)壁上，插銷呈倒“L”型，兩個(gè)插銷呈鏡面對(duì)稱，分別插入在軸座的兩個(gè)端部?jī)?nèi)。
[0009]所述的培養(yǎng)柱與底座側(cè)板的距離> 1cm，相鄰的培養(yǎng)柱的距離> 1cm，所述的嵌合槽寬度比頂蓋側(cè)板厚度大0.5-lmm。
[0010]所述的培養(yǎng)柱有六個(gè)或二十四個(gè)。
[0011]所述的第一排培養(yǎng)柱上方標(biāo)有列號(hào),所述的第一列培養(yǎng)柱左側(cè)標(biāo)有排號(hào)。
[0012]為實(shí)現(xiàn)上述第二個(gè)目的，本實(shí)用新型采取的技術(shù)方案是:
[0013]一種便于使用和封閉性好的脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠培養(yǎng)基，它設(shè)有如上任一所述的培養(yǎng)板，所述的培養(yǎng)柱內(nèi)裝有脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠培養(yǎng)基，所述的細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠的高度設(shè)置為培養(yǎng)柱高度的1/3-3/5。
[0014]本實(shí)用新型優(yōu)點(diǎn)在于:
[0015]1、底座內(nèi)設(shè)有多個(gè)培養(yǎng)柱并標(biāo)有排號(hào)和列號(hào)，方便進(jìn)行大量培養(yǎng)物培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)分組；
[0016]2、底座和頂蓋鉸接，連為一體，使用過(guò)程中方便頂蓋的打開(kāi)和扣合，同時(shí)不易混淆；
[0017]3、底座和頂蓋扣合時(shí),頂蓋側(cè)板嵌合于嵌合槽內(nèi)，培養(yǎng)柱蓋覆蓋在培養(yǎng)柱上，固定銷與固定孔固定，如此保證了底座和頂蓋不易脫落，培養(yǎng)物與外界充分隔離，有效防止了污染的發(fā)生；
[0018]4、培養(yǎng)柱與底座側(cè)板的距離設(shè)計(jì)成> 1cm，可避免邊緣效應(yīng)，相鄰的培養(yǎng)柱的距離設(shè)計(jì)成> 1cm，可防止不同培養(yǎng)柱內(nèi)培養(yǎng)物的相互影響，增加了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0019]附圖1是實(shí)施例1的脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠培養(yǎng)基結(jié)構(gòu)示意圖。
[0020]附圖2是底座和頂蓋絞接不意圖。
[0021]附圖3是實(shí)施例2的脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠培養(yǎng)基結(jié)構(gòu)示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0022]下面結(jié)合實(shí)施例并參照附圖對(duì)本實(shí)用新型作進(jìn)一步描述。
[0023]附圖中涉及的附圖標(biāo)記和組成部分如下所示:
[0024]1.底座，11.底板,12.底座側(cè)板,2.頂蓋,21.頂板,22.頂蓋側(cè)板,3.內(nèi)擋板，
4.嵌合槽，5.培養(yǎng)柱,61.列號(hào),62.排號(hào),7.培養(yǎng)孔,8.脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠,9.鉸接塊，91.軸座，92.插銷，10.培養(yǎng)柱蓋，101.固定銷基座，102.固定銷，103.固定孔基座，104.固定孑L
[0025]實(shí)施例1
[0026]請(qǐng)參照?qǐng)D1，圖1是實(shí)施例1的脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠培養(yǎng)基結(jié)構(gòu)示意圖。所述的培養(yǎng)基設(shè)有底座I和頂蓋2。
[0027]所述的底座I為長(zhǎng)方體形狀，一面開(kāi)口，包括底板11和底座側(cè)板12，所述的底座側(cè)板12圍繞底板11的四條邊一周。所述的底板11上設(shè)有內(nèi)擋板3，所述的內(nèi)擋板3與垂直于底板11且圍繞底板11 一周，同時(shí)與底座側(cè)板12平行，內(nèi)擋板3的高度大于底座側(cè)板12的高度，與底座側(cè)板12之間形成嵌合槽4。所述的底板11上還設(shè)有六個(gè)培養(yǎng)柱5，六個(gè)培養(yǎng)柱5在底板11上為兩排三列方式排列，第一排的培養(yǎng)柱5上方位置的底板11上均標(biāo)有列號(hào)61,第一列的培養(yǎng)柱5左側(cè)位置的底板11上均標(biāo)有排號(hào)62。所述的培養(yǎng)柱5為圓柱狀，垂直于底板11，頂面開(kāi)口，中空內(nèi)部形成培養(yǎng)孔7。所述的培養(yǎng)孔7內(nèi)部裝有脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠8，所述的脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠8的高度是培養(yǎng)孔7高度的1/3-3/5。
[0028]所述的頂蓋2也為長(zhǎng)方體形狀，一面開(kāi)口，設(shè)有頂板21和頂蓋側(cè)板22，所述的頂蓋側(cè)板22圍繞頂板21的四條邊一周。
[0029]所述底座I的一條長(zhǎng)邊上的底座側(cè)板12的外側(cè)壁與所述頂蓋2的一條長(zhǎng)邊上的頂蓋側(cè)板22的外側(cè)壁通過(guò)兩個(gè)鉸接塊9鉸接。
[0030]請(qǐng)參照?qǐng)D2，圖2是底座和頂蓋鉸接示意圖。每個(gè)鉸接塊9包括軸座91和兩個(gè)插銷92。所述的軸座91為圓柱形中空管狀，固定在底座側(cè)板12的外側(cè)壁上。所述的插銷92固定在頂蓋側(cè)板22上，單個(gè)插銷92呈倒“L”型，兩個(gè)插銷92呈鏡面對(duì)稱，分別插入在軸座91的兩個(gè)端部?jī)?nèi)。
[0031]再請(qǐng)參照?qǐng)D1，所述的頂板21上設(shè)有六個(gè)培養(yǎng)柱蓋10。所述的培養(yǎng)柱蓋10為圓柱狀，頂面開(kāi)口，內(nèi)徑與所述培養(yǎng)柱5外徑相等，六個(gè)培養(yǎng)柱蓋10的位置與六個(gè)所述培養(yǎng)柱5的位置一一對(duì)應(yīng)。與鉸接邊相對(duì)的頂蓋側(cè)板22的中央位置設(shè)有半圓形的固定銷基座101，所述的固定銷基座101中央位置設(shè)有圓柱形的固定銷102。與鉸接邊相對(duì)的底座側(cè)板12的中央位置設(shè)有半圓形的固定孔基座103，所述的固定孔基座103中央位置設(shè)有圓形的固定孔104。所述的固定銷102與固定孔104大小相匹配，正好可以插入到固定孔104內(nèi)且不易脫出。
[0032]當(dāng)本實(shí)用新型的脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠培養(yǎng)基的底座I和頂蓋2扣合時(shí)，所述的頂蓋側(cè)板22正好插入在嵌合槽4內(nèi)，所述的六個(gè)培養(yǎng)柱蓋10 蓋合在六個(gè)培養(yǎng)柱5之上，所述的固定銷102插入在固定孔104內(nèi)。
[0033]該實(shí)施例的脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠培養(yǎng)基的規(guī)格為:所述的培養(yǎng)柱5與底座側(cè)板12的距離> 1cm，相鄰的培養(yǎng)柱5的距離> 1cm，所述的嵌合槽4寬度比頂蓋側(cè)板22厚度大
0.5-lmm ;所述的培養(yǎng)孔7的底面積為9.6cm2，所述的培養(yǎng)柱蓋10的高度為2_5mm。
[0034]實(shí)施例2
[0035]請(qǐng)參照?qǐng)D2，圖2是實(shí)施例2的脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠培養(yǎng)基結(jié)構(gòu)示意圖。所述的培養(yǎng)基結(jié)構(gòu)與實(shí)施例1的培養(yǎng)基結(jié)構(gòu)基本相同，不同之處僅在于:所述的底板11上設(shè)有二十四個(gè)培養(yǎng)柱5，二十四個(gè)培養(yǎng)柱5在底板11上為四排六列方式排列；所述的頂板21上相應(yīng)地設(shè)有二十四個(gè)培養(yǎng)柱蓋10 ;所述的培養(yǎng)孔7的底面積為2cm2。
[0036]針對(duì)實(shí)施例1-2,需要說(shuō)明的是:所述的內(nèi)擋板3的設(shè)計(jì)是為了底座側(cè)板12之間形成嵌合槽4,使得底座I和頂蓋2扣合時(shí)頂蓋側(cè)板22正好插入在嵌合槽4內(nèi)，而且內(nèi)擋板3的高度大于底座側(cè)板12的高度，所以將底座I的內(nèi)部形成封閉的空間，有效防止培養(yǎng)物的污染。所述的列號(hào)61可以用阿拉伯?dāng)?shù)字按順序編號(hào)，所述的排號(hào)62可使用英文字母依次按順序編號(hào)，如此每個(gè)培養(yǎng)柱5的標(biāo)號(hào)可用對(duì)應(yīng)的列號(hào)和排號(hào)的組合表不，方面對(duì)區(qū)別不同的實(shí)驗(yàn)組。所述的脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠可按照常規(guī)方法制備，如按照以下方法制備:
(I)從屠宰場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)成年豬(約120kg)主動(dòng)脈，剔除外膜及筋膜成份后剪碎成不規(guī)則的血管小片，放置于1% Triton X-100溶液中，37°C搖床，200rpm震蕩脫細(xì)胞處理6.5天，期間隔天水洗并更換1% Triton X-100溶液直至血管片發(fā)白為止。將經(jīng)過(guò)脫細(xì)胞處理后的血管片放置于一 80°C冰箱冷凍過(guò)夜后置于真空冷凍干燥箱(Labconco Triad 2.5L，美國(guó))冷凍干燥直至血管片變干燥堅(jiān)硬。然后用小型粉碎機(jī)將其打碎成粉，經(jīng)過(guò)60目篩網(wǎng)過(guò)濾；(2)分別稱取50、100、150mg上述步驟(I)制備的脫細(xì)胞血管基質(zhì)粉放置于IOml含濃度為0.1%的胃蛋白酶(P7012-lG，Sigma)的0.01mol/L鹽酸溶液中，磁力攪拌消化72小時(shí)后加入1/10體積(即Iml)的0.lmol/L氫氧化鈉溶液中和鹽酸，然后加入1/9體積(即1.1llml)的10XPBS平衡離子濃度。吸取500μ1凝膠溶液放入削掉頭部的2ml注射器中，放入37°C培養(yǎng)箱I小時(shí)后即可形成脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠。所述的細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠8的高度設(shè)置為培養(yǎng)孔7高度的1/3-3/5，可以滿足常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)及研究的需求。所述的底座I和頂蓋2通過(guò)鉸接塊9鉸接，因此在使用過(guò)程中直接掀開(kāi)頂蓋2即可，且不會(huì)導(dǎo)致不同實(shí)驗(yàn)組的頂蓋2混淆，避免了交叉污染。所述的鉸接塊9設(shè)計(jì)成兩個(gè)插銷92從兩端分別插入到軸座91內(nèi)，能保證鉸接的牢固性，防止脫落。所述的培養(yǎng)柱蓋10的設(shè)計(jì)可保證每個(gè)培養(yǎng)柱5在培養(yǎng)過(guò)程中的封閉性，進(jìn)一步防止了被外界污染以及交叉污染的發(fā)生概率。所述的固定銷102與固定孔104的設(shè)計(jì)可進(jìn)一步保證在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中底座I和頂蓋2不會(huì)脫落及培養(yǎng)空間的封閉性。所述的培養(yǎng)柱5與底座側(cè)板12的距離設(shè)計(jì)成> 1cm，可避免邊緣效應(yīng)，相鄰的培養(yǎng)柱5的距離設(shè)計(jì)成> 1cm，可防止不同培養(yǎng)柱5內(nèi)培養(yǎng)物的相互影響，增加實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。所述的嵌合槽4寬度比頂蓋側(cè)板22厚度大0.5-lmm，可保證頂蓋I較好扣合，不易錯(cuò)位，同時(shí)又保留了較小的間隙，防止污染物的進(jìn)入。以上數(shù)值的設(shè)計(jì)為發(fā)明人根據(jù)多年實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)總結(jié)得出，可顯著有效地避免培養(yǎng)物的相互影響及污染。
[0037]本實(shí)用新型的脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠培養(yǎng)基在使用時(shí)，打開(kāi)頂蓋2，直接將欲培養(yǎng)細(xì)胞添加到各個(gè)培養(yǎng)柱5內(nèi)的脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠8上即可，簡(jiǎn)單方便，免去了分裝培養(yǎng)基和培養(yǎng)容器過(guò)多、不便于區(qū)分組別的麻煩，且培養(yǎng)過(guò)程不易污染，培養(yǎng)物之間影響小，實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確。
[0038]以上所述僅是本實(shí)用新型的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本【技術(shù)領(lǐng)域】的普通技術(shù)人員，在不脫離本實(shí)用新型原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和補(bǔ)充，這些改進(jìn)和補(bǔ)充也應(yīng)視為本實(shí)用新型的保護(hù)范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種便于使用和封閉性好的培養(yǎng)板，設(shè)有底座和頂蓋，所述的底座設(shè)有底板和底座側(cè)板，所述的頂蓋設(shè)有頂板和頂蓋側(cè)板，其特征在于，所述的底座側(cè)板和頂蓋側(cè)板通過(guò)鉸接塊鉸接；所述的底板上設(shè)有垂直于頂板且圍繞底板一周、同時(shí)與底座側(cè)板平行的內(nèi)擋板，所述的內(nèi)擋板高于底座側(cè)板，與底座側(cè)板之間形成嵌合槽；所述的底板上設(shè)有陣列方式排列的培養(yǎng)柱，所述的頂板上設(shè)有與所述培養(yǎng)柱一一對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)柱蓋；所述的頂蓋側(cè)板上設(shè)有固定銷，所述的底座側(cè)板上設(shè)有固定孔；所述的底座和頂蓋扣合時(shí)，所述的頂蓋側(cè)板插入在嵌合槽內(nèi)，所述的培養(yǎng)柱蓋一一蓋合在培養(yǎng)柱上，所述的固定銷插入在固定孔內(nèi)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)板，其特征在于，所述的鉸接塊包括軸座和兩個(gè)插銷，所述的軸座為圓柱形中空管狀，固定在底座側(cè)板的外側(cè)壁上，插銷呈倒“L”型，兩個(gè)插銷呈鏡面對(duì)稱，分別插入在軸座的兩個(gè)端部?jī)?nèi)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)板，其特征在于，所述的培養(yǎng)柱與底座側(cè)板的距離^ Icm,相鄰的培養(yǎng)柱的距離> Icm,所述的嵌合槽寬度比頂蓋側(cè)板厚度大0.5_lmm。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)板，其特征在于，所述的培養(yǎng)柱有六個(gè)或二十四個(gè)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的培養(yǎng)板，其特征在于，所述的第一排培養(yǎng)柱上方標(biāo)有列號(hào)，所述的第一列培養(yǎng)柱左側(cè)標(biāo)有排號(hào)。
6.一種便于使用和封閉性好的脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠培養(yǎng)基，其特征在于，它設(shè)有如權(quán)利要求1-5任一所述的培養(yǎng)板，所述的培養(yǎng)柱內(nèi)裝有脫細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠培養(yǎng)基，所述的細(xì)胞血管基質(zhì)凝膠的高度設(shè)置 為培養(yǎng)柱高度的1/3-3/5。
【文檔編號(hào)】C12M3/00GK203613201SQ201320785497
【公開(kāi)日】2014年5月28日 申請(qǐng)日期:2013年12月4日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月4日
【發(fā)明者】付煒, 馮蓓, 殷猛, 王偉 申請(qǐng)人:上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬上海兒童醫(yī)學(xué)中心