胎盤清洗液的制作方法
【專利摘要】一種胎盤清洗液，pH值為7.35-7.50，滲透壓為300mmol/LH2O-400mmol/LH2O，每1000ml溶液有20mmol-30mmol磷酸二氫鉀、45mmol-55mmol氯化鈉、25mmol-35mmol氯化鉀、3mmol-7mmol硫酸鎂、100000U-1000000U青霉素、60mg-100mg鏈霉素、50mg-70mg慶大霉素、120mg-150mg梔子甙和80mg-100mg異噻唑啉酮。以本發(fā)明提供的胎盤清洗液清洗胎盤能有效控制和降低胎盤的染菌率，減少自分娩之后細菌的滋生，對胎盤干細胞的分離培養(yǎng)起到了非常重要的作用。
【專利說明】胎盤清洗液
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種用于組織清洗的組合物，尤其涉及一種胎盤清洗液，用于對分娩過程中受到細菌污染的胎盤進行清洗，以利于的胎盤的體外保存和醫(yī)學(xué)應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]人類胎盤由羊膜、絨毛膜和基蛻膜構(gòu)成。羊膜和絨毛膜來源于胎兒，不同區(qū)域的蛻膜則起源于母體。胎盤除在胎兒發(fā)育、營養(yǎng)支持和維持耐受中發(fā)揮重要作用外，還是一個干細胞儲備庫。胎盤組織容易得到，易于處理，不需要侵入性操作，對其研究不會涉及倫理道德問題，因此目前已成為尋找人類干細胞新來源的研究熱點。
[0003]胎盤干細胞的發(fā)現(xiàn)，解決了干細胞的來源問題。胎盤的取材幾乎不受限制，在產(chǎn)婦知情同意的基礎(chǔ)上就可以獲得胎盤。胎盤的平均重量約為500克，其中含有豐富的干細胞資源。胎盤是伴隨胚胎發(fā)育過程中的附屬品，其中的細胞成分相應(yīng)也是處于胚胎發(fā)育早期，具有更強的增殖和分化能力。胎盤作為胎兒和母體之間的免疫屏障，其中的細胞成分同樣具有很強的免疫調(diào)節(jié)能力，尤其是胎盤干細胞具有很低的免疫原性，這在異體移植治療過程中具有無可比擬的優(yōu)勢。
[0004]然而胎盤在分娩過程中先經(jīng)過產(chǎn)婦陰道，而后又暴露于產(chǎn)房當中，這些都會致使胎盤染菌。胎盤附著的細菌不利于胎盤干細胞的分離培養(yǎng)。簡單快速的清洗胎盤去除細菌對胎盤干細胞的分離培養(yǎng)及臨床應(yīng)用都有著重要的意義
[0005]當前使用胎盤清洗液大都為生理鹽水或磷酸緩沖液，雖然配制簡便，但不能有效解決染菌問題，也有采用加入抗生素的方法實現(xiàn)，但染菌的情況仍無法完全解決，不利于之后的干細胞分離和獲取。`
【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的在于提供一種胎盤清洗液，用于對分娩過程中受到細菌污染的胎盤進行清洗，以利于的胎盤的體外保存和醫(yī)學(xué)應(yīng)用。
[0007]本發(fā)明提供的一種胎盤清洗液，pH值為7.35-7.50，滲透壓為300mmol/LH20-400mmo 1/LH20，每1000ml溶液加入的各組分和用量如下:
[0008]磷酸二氫鉀2Ommol-3OmmoU
[0009]氯化鈉45mmol-55mmol、
[0010]氯化鉀25mmol-35mmol、
[0011]硫酸續(xù)3mmol-7mmol、
[0012]青霉素100000U-1000000U、
[0013]鏈霉素60mg_100mg、
[0014]慶大霉素50mg_70mg、
[0015]桅子式120mg_150mg 和
[0016]異喔唑琳麗80mg-100mg。[0017]本發(fā)明中，異噻唑啉酮和桅子甙單獨使用均能有效降低胎盤的染菌率，其共同使用后效果更為突出，幾乎能解決胎盤染菌的問題。
[0018]本發(fā)明提供的胎盤清洗液，以磷酸緩沖液為溶劑，加入若干種抗生素后，還同時加入了桅子甙和異噻唑啉酮等物質(zhì)共同組成。以此清洗液清洗胎盤能有效控制和降低胎盤的染菌率，減少自分娩之后細菌的滋生，對胎盤干細胞的分離培養(yǎng)起到了非常重要的作用。
【具體實施方式】
[0019]以下詳細描述本發(fā)明的技術(shù)方案。本發(fā)明實施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管參照較佳實施例對本發(fā)明進行了詳細說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當理解，可以對發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的精神和范圍，其均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍中。
[0020]本發(fā)明實施例其它所用的試劑若未經(jīng)說明，均購自西格瑪一奧德里奇(Sigma —Aldrich)公司。
[0021]實施例1胎盤清洗液的制取
[0022]以去離子水為溶劑，加入20mmol-30mmol磷酸二氫鉀、45mmol-55mmol氯化鈉、25mmol-35mmol 氯化鉀、3mmol-7mmol 硫酸鎂、100000U-1000000U 青霉素、60mg-100mg 鏈霉素、50mg-70mg慶大霉素、120mg-150mg桅子式和80mg-100mg異噻唑啉酮，制成1000ml胎盤清洗液，pH 值 7.35-7.50，滲透壓為 300mmol/LH20-400mmol/LH20。分裝，封口，(TC _4°C保存。
[0023]實施例2胎盤染菌率測試
[0024]將胎盤分別置于生理鹽水、溶解100000U-1000000U青霉素、60mg-100mg鏈霉素和50mg-70mg慶大霉素的生理鹽水和實施例1制取的胎盤清洗液分別清洗后，進行干細胞分離培養(yǎng)實驗，其細胞染菌率比較參見表1。`
[0025]表1
[0026]
【權(quán)利要求】
1.一種胎盤清洗液，其特征在于pH值為7.35-7.50，滲透壓為300mmol/LH20-400mmol/LH2O，每1000ml溶液加入的各組分和用量如下: 憐酸二氫!鐘 20mmol-30mmol、 氯化鈉 45mmol-55mmol> 氯化鉀 25mmol-35mmol、 硫酸續(xù) 3mmol-7mmol、 青霉素 100000U-1000000U、 鏈霉素 60mg-100mg、 慶大霉素50mg-70mg和 桅子式。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的胎盤清洗液，其特征在于加入120mg-150mg桅子甙。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的胎盤清洗液，其特征在于還加入異噻唑啉酮。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的胎盤清洗液，其特征在于還加入80mg-100mg異噻唑啉酮。
【文檔編號】C12N5/073GK103805556SQ201410018677
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2014年1月13日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月13日
【發(fā)明者】章毅, 霍思維, 陸瑤, 洪艷 申請人:章毅, 中國干細胞集團上海生物科技有限公司, 重慶市干細胞技術(shù)有限公司, 陜西省干細胞技術(shù)有限公司, 蘇州市干細胞技術(shù)有限公司, 上海市干細胞技術(shù)有限公司, 三亞市干細胞技術(shù)有限公司, 中國干細胞集團上海有限公司, 中國干細胞集團重慶有限公司, 中國干細胞集團陜西有限公司, 中國干細胞集團三亞有限公司