一種高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉及其培養(yǎng)和制備普魯蘭多糖的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉，保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心（CCTCC），保藏號(hào)為CCTCC?M2013611。本發(fā)明還公開了一種高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉的誘變篩選方法及其培養(yǎng)方法以及一種高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉發(fā)酵生產(chǎn)普魯蘭多糖的方法。應(yīng)用上述茁芽短梗霉菌株GM-1發(fā)酵培養(yǎng)得到的培養(yǎng)物不會(huì)因黑色素樣物質(zhì)積累而呈現(xiàn)出暗綠色或者墨綠色，而是形成乳白色或淡黃色組合物。本發(fā)明的芽短梗霉菌株GM-1與常規(guī)普魯蘭糖生產(chǎn)菌株相比，其得到普魯蘭多糖為無色，且普魯蘭多糖的產(chǎn)率更高，實(shí)現(xiàn)原料利用率的提高、降低生成成本，以及滿足了食品、醫(yī)藥、環(huán)境等應(yīng)用領(lǐng)域?qū)o色普魯蘭糖的要求。
【專利說明】一種高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉及其培養(yǎng)和制備普魯蘭多糖的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于普魯蘭多糖的微生物菌種生物工程【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種大量產(chǎn)生無色素普魯蘭多糖的誘變茁芽短梗霉菌株及發(fā)酵培養(yǎng)方法。
本發(fā)明茁芽短梗霉保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心CCTCC，保藏地址是中國(guó)武漢武漢大學(xué)，保藏日期是2013年11月27日，保藏號(hào)為CCTCC M 2013611 ;保藏名稱:出芽短梗霉GM-1(Aureobasidium pullulans GM-1)。
技術(shù)背景
[0002]普魯蘭多糖是范芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)產(chǎn)生的胞外多糖,易溶于水，具有非常優(yōu)良的增稠作用，造膜性強(qiáng)、易形成良好的水溶性的可食薄膜，并且具有無毒無害、無色無味等優(yōu)良特性，常用其作為保色、保香、保鮮、抗氧化等的包裝材料。普魯蘭糖的生產(chǎn)及應(yīng)用已經(jīng)有30多年的研究歷史，日本林原公司在70年代進(jìn)行中試規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)，至今一直壟斷國(guó)際市場(chǎng)。經(jīng)過20年研究發(fā)展，國(guó)內(nèi)的相關(guān)研究中篩選到了一些多糖產(chǎn)量高色素較低的茁芽短梗霉菌株，方宣鈞等(茁芽短梗霉菌株紫外誘變及發(fā)酵條件優(yōu)化，農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào)，1998年02期)也通過紫外照射得到變異株ZY047，通過優(yōu)化培養(yǎng)條件多糖轉(zhuǎn)化率達(dá)到54.1%，但其含有色素；劉娜等(茁霉多糖生產(chǎn)菌的復(fù)合誘變篩選及發(fā)酵條件研究，吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，食品科學(xué)，2005，碩士論文)研究了普魯蘭多糖生產(chǎn)菌種和發(fā)酵條件的優(yōu)化，確定了菌種與發(fā)酵條件，雖然其色素水平低，但其普魯蘭多糖產(chǎn)量不高，原料利用率也低,增加了生產(chǎn)成本,因此使得工業(yè)化過程相當(dāng)緩慢。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是針對(duì)現(xiàn)有生產(chǎn)方法得到的普魯蘭多糖為黑色或色素較淺并且得率普遍不高的問題，通過紫外`線和亞硝基胍NTG誘變，從誘變菌株中篩選無色透明和/或顏色白而且轉(zhuǎn)化率較高的誘變菌株，獲得一種大量產(chǎn)生無色素普魯蘭多糖的菌株。本發(fā)明還提出一種大量生產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的方法，利用CCTCC M 2013611菌株生產(chǎn)無色素普魯蘭糖，優(yōu)化培養(yǎng)基配方，以及在發(fā)酵過程中按發(fā)酵時(shí)間對(duì)攪拌速度及通氣量進(jìn)行調(diào)控，使培養(yǎng)基底物得到充分利用，提高了原料的利用率，降低了生產(chǎn)成本，實(shí)現(xiàn)高效率、低成本、無色素的普魯蘭糖生產(chǎn)。
[0004]為達(dá)到上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:
一種高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉，保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心CCTCC，保藏地址是中國(guó)武漢武漢大學(xué)，保藏日期是2013年11月27日，保藏號(hào)為CCTCC M 2013611 ；所述高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉呈淡乳白色或淡乳黃色，色度以明度L值計(jì)在15以上。
[0005]一種高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉的誘變篩選方法，包括以下步驟:
I)茁芽短梗霉為出發(fā)菌株，采用紫外線(15W 3min)和亞硝基胍NTG(lmg/ml)復(fù)合誘變的方法對(duì)出發(fā)菌株進(jìn)行處理；2)從誘變菌株中篩選無色透明或者顏色白的誘變菌株；
3)培養(yǎng)誘變菌株，檢測(cè)菌株培養(yǎng)物的色度L值，以及測(cè)定培養(yǎng)物中普魯蘭多糖的含量，并以此作為復(fù)篩的依據(jù)，獲得高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉GM-1。
[0006]一種高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉的培養(yǎng)方法，包括如下步驟:
O菌種活化:將斜面菌種茁芽短梗霉GM-1轉(zhuǎn)接斜面PDA培養(yǎng)基，30°C活化培養(yǎng)3d ；
2)種子培養(yǎng):選取生長(zhǎng)良好的斜面作為種子，用接種針挑一塊接入種子培養(yǎng)基中，于300C，200 士 20 rpm下培養(yǎng)48h，制得種子液；
3)發(fā)酵培養(yǎng):將上述步驟2)中的種子培養(yǎng)液以體積比5~15%接種量接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，在28°C下，220rpm振蕩培養(yǎng)5d。
[0007]為了獲得更好的技術(shù)效果，步驟2)中所述種子培養(yǎng)基組成為:蔗糖20.0g/L，蛋白胨 2.0g/L,米糠 3.0g/L,草酸 0.3g/L, K2HP04 1.0g/L, NaCl 1.0g/L, MgSO 4.7H20
0.2g/L，F(xiàn)eS04 -7H20 0.01g/L,pH 6.5 ;步驟3)中所述發(fā)酵培養(yǎng)基組成為:蔗糖30.0g/L,蛋白胨 5.0g/L，米糠 5.0g/L，草酸 1.0g/L，K2HP04 3.0g/L, NaCI 2.50g/L, MgSO 4.7H200.20g/L, FeS04.7H20 0.01g/L,pH6.5。
[0008]經(jīng)上述過程培養(yǎng)茁芽短梗霉突變株GM-1后，得到的培養(yǎng)物呈淡乳白色或淡乳黃色，不會(huì)出現(xiàn)深綠色或者墨綠色，且培養(yǎng)物的著色度以Lab色度系統(tǒng)化得到的明度L值在15以上。
[0009]一種高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉發(fā)酵生產(chǎn)普魯蘭多糖的方法，包括以下步驟:
O制備種子培養(yǎng)基，其水溶液組成為:蔗糖20.0 g/L，蛋白胨2.0 g/L，米糠3.0 g/L,草酸0.3 g/L，K2HP04 1.0 g/L, NaCl 1.0 g/L, MgSO 4.7Η20 0.2 g/L，F(xiàn)eSO4.7Η20 0.01g/L, pH5.5~8.0，121°C滅菌20min ;用接種環(huán)蘸取少許茁芽短梗霉GM-1接入所述種子培養(yǎng)基中，于30°C,轉(zhuǎn)速為200rpm培養(yǎng)48h,作為一級(jí)種子液；將一級(jí)種子液以體積比5%~10%的接種量接種于所述種子培養(yǎng)基中，于30°C，轉(zhuǎn)速為200rpm培養(yǎng)48h，作為二級(jí)種子液；經(jīng)一級(jí)種子、二級(jí)種子逐步擴(kuò)大培養(yǎng)后，作為液體種子；
2)制備發(fā)酵培養(yǎng)基，其水溶液組成為:蔗糖30.08/1，蛋白胨5.0 8/1，米糠5.0 g/L,草酸 1.0g/L，K2HP04 3.0g/L, NaCI 2.5g/L，MgSO 4.7H20 0.2g/L，F(xiàn)eSO4.7H20 0.01g/L，pH5.5，121°C滅菌20min ;按體積比2%~12%的接種量將液體種子接入發(fā)酵罐中；前24小時(shí)發(fā)酵溫度為30°C ；24小時(shí)后將溫度調(diào)整為28°C，再持續(xù)發(fā)酵120~144h ；
3)將上述得到的茁芽短梗霉突變株GM-1培養(yǎng)物在罐壓維持在0.08~0.1 MPa下保持20~30min后，用200目的過濾板進(jìn)行過濾除菌，然后進(jìn)行超濾濃縮，得到濃縮糖液；
4)對(duì)濃縮糖液進(jìn)行噴霧干燥，得到粉末狀普魯蘭多糖。
[0010]為了獲得更好的技術(shù)效果，步驟(2)中發(fā)酵罐的工藝參數(shù)為:發(fā)酵前24h，攪拌速度150~300 rpm，通空氣量I~2L/min ；24小時(shí)后菌體濃度達(dá)到1.5~2.5 X IO8個(gè)/mL，調(diào)攪拌速度到300~600 rpm，通空氣量3~5L/min ；48h以后，攪拌速度調(diào)為300~600rpm,通空氣量5~8L/min,直至發(fā)酵結(jié)束。
[0011] 本發(fā)明的茁芽短梗霉菌株GM-1與常規(guī)普魯蘭糖生產(chǎn)菌株相比，本發(fā)明得到普魯蘭多糖為無色，且普魯蘭多糖的產(chǎn)率更高，實(shí)現(xiàn)原料利用率的提高、降低生成成本，以及滿足了食品、醫(yī)藥、環(huán)境等應(yīng)用領(lǐng)域?qū)o色普魯蘭糖的要求。[0012]具體實(shí)施方法
下面結(jié)合實(shí)施例具體闡述本發(fā)明。
[0013]實(shí)施例1:復(fù)合誘變處理篩選茁芽短梗霉突變株及性能 Cl)菌株
出發(fā)菌株為茁芽短梗霉(Aureobasidium pullulans ATCC 201253)，經(jīng)復(fù)合誘變后的突變株為茁芽短梗霉GM-1。該突變株茁芽短梗霉突變株GM-1于2013年11月27日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)，保藏號(hào)為CCTCC M 2013611。
[0014](2)菌種活化及種子培養(yǎng)
將出發(fā)菌株茁芽短梗霉(Aureobasidium pullulans ATCC 201253)轉(zhuǎn)接PDA斜面培養(yǎng)基，28~33°C恒溫培養(yǎng)3~4d，選擇生長(zhǎng)良好的活化斜面菌種轉(zhuǎn)接于裝有種子培養(yǎng)基的三角瓶中，于28~33°C 200±20rpm下培養(yǎng)36h。
[0015](3)菌種選育
以茁芽短梗霉為出發(fā)菌株進(jìn)行紫外線、亞硝基胍NTG誘變，從大量的誘變菌株中篩選分泌黑色素極少而且轉(zhuǎn)化率高的誘變菌株；
O孢子懸浮液的制備將活化后的出發(fā)菌株接種至種子培養(yǎng)液中，30°C恒溫振蕩培養(yǎng)；吸取經(jīng)培養(yǎng)20h后的種子培養(yǎng)液I ml, 1000Orpm下離心2min,棄上清液,加入滅菌的生理鹽水洗滌離心三次，以I ml生理鹽水重新懸浮，制成單孢子懸浮液，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，將孢子濃度調(diào)整到I X 106CFU/ml。
[0016]2)紫外誘變
誘變處理時(shí)取IOml孢子懸浮液放于直徑`9 cm的培養(yǎng)皿中，放入無菌攪拌鐵芯，液層厚度為2~3_，將培養(yǎng)皿放入恒溫箱中備用；將磁力攪拌器(包括轉(zhuǎn)子)放入超凈工作臺(tái)，調(diào)整高度使距15W紫外燈30cm處，隨后打開紫外燈5-30min，使其穩(wěn)定。將培養(yǎng)箱中存放的培養(yǎng)皿迅速放至磁力攪拌器上,攪拌并開始計(jì)時(shí)，分別在30sec、lmin、2min、4min、6min的時(shí)候?qū)⑴囵B(yǎng)皿的蓋子蓋上，關(guān)閉紫外燈；然后將照射后的培養(yǎng)皿中的菌液0.2ml加入到PDA培養(yǎng)基中，振蕩均勻，于30°C恒溫箱中倒置培養(yǎng)72h，挑取平板上的無色透明的菌落進(jìn)行搖瓶復(fù)篩，根據(jù)檢測(cè)培養(yǎng)物明度L值在15以上，作為亞硝基胍NTG誘變的出發(fā)菌株。
[0017]3)亞硝基胍NTG誘變
在上述紫外線誘變菌株孢子懸浮液中添加亞硝基胍溶液至終濃度為lmg/ml，于28°C160rpm下培養(yǎng)2h，處理后離心分離，并反復(fù)用生理鹽水洗滌離心5次以上，最后用生理鹽水恢復(fù)原體積后稀釋IO3倍，取100 μ L誘變后菌液涂布平板培養(yǎng)；72h后，挑取平板上的無色透明的菌落進(jìn)行搖瓶復(fù)篩，確定篩選培養(yǎng)物含普魯蘭糖量最高，且檢測(cè)培養(yǎng)物明度L值在15以上，由此獲得高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉突變株GM-1。
[0018](4)誘變菌株的特性
(1)菌體形態(tài):發(fā)酵液中主要呈現(xiàn)酵母樣形態(tài)，細(xì)胞橢圓形且大小均一，數(shù)個(gè)菌體可連成桿狀，菌株的繁殖方式類似于酵母的出芽生殖方式；
(2)菌落形態(tài):菌落由最初粘稠乳白色漸漸轉(zhuǎn)變?yōu)榈S色；菌落呈圓形，中心隆起，表面光滑，濕潤(rùn)，質(zhì)地粘稠不易挑取，生長(zhǎng)后期有菌絲體產(chǎn)生；
(3)培養(yǎng)特征:28~33°C，200rpm下震蕩培養(yǎng)5d后，發(fā)酵液顏色乳白或淡黃色；
(4)可以利用的碳源:葡萄糖，蔗糖，麥芽糖，果糖，可溶性淀粉，糊精等，上述氮源可以混合使用，也可單一使用；
(5)可以利用的氮源:牛肉膏、蛋白胨、米糠、玉米漿、硝酸鈉、酵母膏、硫酸銨等，上述氮源可以混合使用，也可單一使用；
實(shí)施例2芽短梗霉突變株的培養(yǎng)及性能
培養(yǎng)方法:1)將斜面菌種茁芽短梗霉突變株GM-1轉(zhuǎn)接斜面PDA培養(yǎng)基，30°C活化培養(yǎng)
3d ；
2)將茁芽短梗霉GM-1接種于含蔗糖20.0 8/1，蛋白胨2.(^/1，米糠3.0 g/L，草酸
0.3 g/L，K2HPO4L O g/L, NaCl 1.0 g/L，MgSO 4.7H20 0.2 g/L，F(xiàn)eSO4.7H20 0.01 g/L, pH
6.0的液體營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中，于28°C 220rpm下振蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)至增值穩(wěn)定期(從接種起144小時(shí))。經(jīng)誘變后的突變株GM-1發(fā)酵得到的培養(yǎng)物呈淡乳白色或淡乳黃色，而出發(fā)親本株茁芽短梗霉(Aureobasidium pullulans ATCC 201253)發(fā)酵培養(yǎng)物具有深綠色或者墨綠色。
[0019]為了測(cè)定前述培養(yǎng)物中的葡聚糖含量，以1000Orpm離心收集培養(yǎng)物上清液，加入2倍體積無水乙醇，4°C靜置12小時(shí)，于12000rpm離心10min，得到多糖沉淀，用乙醇等有機(jī)溶劑洗滌3次，在105°C下烘3h至恒重，測(cè)定其重量，作為普魯蘭多糖的量。
[0020](I)芽短梗霉突變株色素積聚性 為了將范芽短梗霉GM-1的色素積累性與親本的范芽短梗霉(Aureobasidiumpullulans ATCC 201253)的色素積累性進(jìn)行比較，將兩者以實(shí)施例二的培養(yǎng)方法至增殖穩(wěn)定期，該培養(yǎng)期間從接種起48小時(shí)后到144小時(shí)后分別采集培養(yǎng)物的一部分。為了對(duì)采集的培養(yǎng)物的色成分進(jìn)行定性分析，使用PR-650 SpectraScan Colorimeter光譜光度計(jì)/色度計(jì)進(jìn)行分析，表中表示將分析結(jié)果通過CIE (國(guó)際照明委員會(huì))Lab色度系統(tǒng)化得到的測(cè)定值。
[0021]
【權(quán)利要求】
1.一種高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉，其特征在于，保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心CCTCC，保藏地址是中國(guó)武漢武漢大學(xué)，保藏日期是2013年11月27日，保藏號(hào)為CCTCC M 2013611。
2.權(quán)利要求1所述的高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉，其特征在于，所述高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉呈淡乳白色或淡乳黃色，色度以明度L值計(jì)在15以上。
3.一種高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉的誘變篩選方法，包括以下步驟: 1)茁芽短梗霉為出發(fā)菌株，采用紫外線照射和亞硝基胍NTG復(fù)合誘變的方法對(duì)出發(fā)菌株進(jìn)行處理； 2)從誘變菌株中篩選無色透明或者顏色白的誘變菌株； 3)培養(yǎng)誘變菌株，檢測(cè)菌株培養(yǎng)物的色度L值，以及測(cè)定培養(yǎng)物中普魯蘭多糖的含量，并以此作為復(fù)篩的依據(jù)，獲得高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉GM-1。
4.一種高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉的培養(yǎng)方法，包括如下步驟: 1)菌種活化:將斜面菌種茁芽短梗霉GM-1轉(zhuǎn)接斜面PDA培養(yǎng)基，30°C活化培養(yǎng)3d； 2)種子培養(yǎng):選取生長(zhǎng)良好的斜面作為種子，用接種針挑一塊接入種子培養(yǎng)基中，于300C，200 士 20 rpm下培養(yǎng)48h，制得種子液； 3)發(fā)酵培養(yǎng):將上述步驟2)中的種子培養(yǎng)液以體積比5~15%接種量接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，在28°C下，220rpm振蕩培養(yǎng)5d。
5.如權(quán)利要求4所述的高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉的培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟2)中所述種子培養(yǎng)基組成為:蔗糖20.0g/L,蛋白胨2.0g/L,米糠3.0g/L,草酸0.3g/L, K2HPO4 1.0g/L, NaCl 1.0g/L, MgSO 4.7H20 0.2g/L，F(xiàn)eSO4.7H20 0.01g/L, pH6.5o
6.如權(quán)利要求4所述 的高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉的培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟3)中所述發(fā)酵培養(yǎng)基組成為:蔗糖30.0g/L，蛋白胨5.0g/L，米糠5.0g/L，草酸1.0g/L, K2HPO4 3.0g/L, NaCI 2.50g/L, MgSO 4.7H20 0.20g/L, FeSO4.7H20 0.01g/L,pH6.5。
7.如權(quán)利要求4所述的高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉的培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟3)中得到的培養(yǎng)物呈淡乳白色或淡乳黃色，且培養(yǎng)物的著色度以Lab色度系統(tǒng)化得到的明度L值在15以上。
8.一種高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉發(fā)酵制備普魯蘭多糖的方法，包括以下步驟: O制備種子培養(yǎng)基，其水溶液組成為:蔗糖20.0 g/L，蛋白胨2.0 g/L，米糠3.0 g/L，草酸0.3 g/L，K2HP04 1.0 g/L, NaCl 1.0 g/L, MgSO 4.7Η20 0.2 g/L，F(xiàn)eSO4.7Η20 0.01g/L, pH5.5~8.0，121°C滅菌20min ;用接種環(huán)蘸取少許茁芽短梗霉GM-1接入所述種子培養(yǎng)基中，于30°C,轉(zhuǎn)速為200rpm培養(yǎng)48h,作為一級(jí)種子液；將一級(jí)種子液以體積比5%~10%的接種量接種于所述種子培養(yǎng)基中，于30°C，轉(zhuǎn)速為200rpm培養(yǎng)48h，作為二級(jí)種子液；經(jīng)一級(jí)種子、二級(jí)種子逐步擴(kuò)大培養(yǎng)后，作為液體種子； 2)制備發(fā)酵培養(yǎng)基，其水溶液組成為:蔗糖30.0 g/L，蛋白胨5.0 g/L，米糠5.0 g/L,草酸 1.0g/L，K2HP04 3.0g/L, NaCI 2.5g/L，MgSO4.7H20 0.2g/L，F(xiàn)eSO4.7H20 0.01g/L，pH5.5，121°C滅菌20min ;按體積比2%~12%的接種量將液體種子接入發(fā)酵罐中；前24小時(shí)發(fā)酵溫度為30°C ；24小時(shí)后將溫度調(diào)整為28°C，再持續(xù)發(fā)酵120~144h ； 3)將上述得到的茁芽短梗霉突變株GM-1培養(yǎng)物在罐壓維持在0.08~0.1 MPa下保持20~30min后，用200目的過濾板進(jìn)行過濾除菌，然后進(jìn)行超濾濃縮，得到濃縮糖液； 4)對(duì)濃縮糖液進(jìn)行噴霧干燥，得到粉末狀普魯蘭多糖。
9.如權(quán)利要求8所述的高產(chǎn)無色素普魯蘭多糖的茁芽短梗霉發(fā)酵制備普魯蘭多糖的方法，其特征在于，其中步驟(2)中發(fā)酵罐的工藝參數(shù)為:發(fā)酵前24h，攪拌速度150~300rpm，通空氣量I~2L/min ；24小時(shí)后菌體濃度達(dá)到1.5~2.5 X IO8個(gè)/mL，調(diào)攪拌速度到300~600 rpm，通空氣量3~5L/min ；48h以后，攪拌速度調(diào)為300~600 rpm，通空氣量5~8L/m in，直至發(fā)酵結(jié)束。
【文檔編號(hào)】C12N1/14GK103881927SQ201410076179
【公開日】2014年6月25日 申請(qǐng)日期:2014年3月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月4日
【發(fā)明者】袁林, 郭建軍, 張小華, 楊罡 申請(qǐng)人:江西省科學(xué)院微生物研究所