一種宛氏擬青霉菌株及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及生物菌株【技術(shù)領(lǐng)域】,尤其是一種宛氏擬青霉菌株及其應(yīng)用,宛氏擬青霉(Paecilomyces?varioti)菌株MM2,于2013年7月8日保藏于中國微生物保藏管理委員會,保藏號是CGMCC?NO.7903;將菌株加入到稻草麩皮液體培養(yǎng)基、濾紙無機(jī)鹽液體培養(yǎng)基、PDA液體培養(yǎng)基中的任意一種液體培養(yǎng)基中,28-30℃下培養(yǎng)2-9d,制得單菌株的固體菌劑;能夠高效降解利用纖維素,可用作木質(zhì)纖維素類固體廢棄物的資源化處理的外接菌種源,加快纖維素的降解;同時(shí),從酒渣堆肥中分離出,應(yīng)用于酒渣堆肥中,避免了定值難的問題,添加含該種菌株的菌劑后,有效的促進(jìn)了酒渣堆肥的腐熟,加快有機(jī)肥的加工。
【專利說明】一種宛氏擬青霉菌株及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物菌株【技術(shù)領(lǐng)域】,尤其是一種宛氏擬青霉菌株及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 酒糟又叫酒渣,是指自谷物中蒸出酒精或酒精飲料后的殘?jiān)?,即釀酒后產(chǎn)生的渣 滓,常用作家畜飼料。某些白酒生產(chǎn)企業(yè)的酒渣年產(chǎn)量達(dá)上萬噸,如果不及時(shí)加以處理,就 會腐敗變質(zhì),嚴(yán)重污染周圍環(huán)境。利用酒渣堆肥生產(chǎn)有機(jī)肥,不僅可以變廢為寶,還有利于 促進(jìn)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,減少環(huán)境的污染。由于釀酒企業(yè)采用有機(jī)高粱、有機(jī)小麥作為白酒生 產(chǎn)的主要原料,其酒渣含有蛋白質(zhì)、纖維素、脂肪、維生素以及各種微量元素等,也為有機(jī)肥 的也創(chuàng)造了有利條件。然而,在現(xiàn)有技術(shù)中,對于用于酒渣堆肥中的纖維素降解外源菌株報(bào) 道較少。
[0003] 目前,白酒酒渣主要用作飼料喂養(yǎng)豬牛等粗飼動物,主要因?yàn)檫@些動物的食物較 雜,且酒渣的適口性較好。根據(jù)一系列的實(shí)驗(yàn)證明,添加比例在25 %比較合適,除幼畜和孕 產(chǎn)期母畜外,其他牲畜均可用加工后的酒渣制品飼喂,尤其在育肥期增重效果十分明顯,可 提高10%以上,同時(shí)降低成本13%以上。近幾年有報(bào)道用加工后的酒渣作為能量飼料代替 麩皮喂養(yǎng)雞、鴨、兔、魚等,也收到了良好效果。蠅蛆是很好的動物性蛋白飼料,蠅蛆干粉的 蛋白質(zhì)含量高達(dá)53. 26 %,賴氨酸4. 09 %,蛋氨酸1. 41 %,其中,必需氨基酸總量是魚粉的 2. 3倍,蛋氨酸、賴氨酸分別是魚粉的2. 7倍及2. 6倍,因此也有人使用酒渣為培養(yǎng)物養(yǎng)殖蠅 蛆生產(chǎn)動物性蛋白飼料。李許濱,吳建偉等利用固態(tài)醬香白酒酒渣生產(chǎn)工程蠅蛋白,同時(shí) 通過工程蠅的代謝生長,作用于白酒酒渣,生產(chǎn)生物活性有機(jī)肥。但以上方法消耗的酒渣量 較小,不能充分利用酒渣,因此需要為酒渣的資源化尋找更為有效的途徑。
[0004] 堆肥是利用有機(jī)固體廢棄物,在高溫、多濕的條件下,經(jīng)過微生物發(fā)酵腐熟而制成 的一種有機(jī)肥料。經(jīng)堆肥化過程制成的有機(jī)肥具有改良土壤、培肥地力的優(yōu)點(diǎn)。有機(jī)肥料施 入土壤后,有機(jī)質(zhì)能有效地改善土壤理化狀況和生物特性,熟化土壤,增強(qiáng)土壤的保肥供肥 能力和緩沖能力,為作物的生長創(chuàng)造良好的土壤條件。另外,經(jīng)堆肥化過程制成的有機(jī)肥還 可增加廣量、提1?品質(zhì)。有機(jī)肥料含有豐富的有機(jī)物和各種營養(yǎng)兀素,為農(nóng)作物提供營養(yǎng)。 有機(jī)肥腐解后,為土壤微生物活動提供能量和養(yǎng)料,促進(jìn)微生物活動,加速有機(jī)質(zhì)分解,產(chǎn) 生的活性物質(zhì)等能促進(jìn)作物的生長和提高農(nóng)產(chǎn)品的品質(zhì)。經(jīng)堆肥化過程制成的有機(jī)肥還能 提高肥料的利用率。有機(jī)肥含有養(yǎng)分多但相對含量低,釋放緩慢,而化肥單位養(yǎng)分含量高, 成分少,釋放快。兩者合理配合施用,相互補(bǔ)充,有機(jī)質(zhì)分解產(chǎn)生的有機(jī)酸還能促進(jìn)土壤和 化肥中礦質(zhì)養(yǎng)分的溶解。有機(jī)肥與化肥相互促進(jìn),有利于作物吸收,提高肥料的利用率。
[0005] 雖然酒渣中含有大量纖維素,但是如CN1928074A、CN101560488A、CN101974436A 和CN1460664A公開的微生物菌株,應(yīng)用于酒渣堆肥的效果并不理想。
[0006] 如 CN102021120A 公開的一種宛氏擬青霉(Paecilonyces variotii)菌株 H6 及其 應(yīng)用,所述宛氏擬青霉(Paecilomyces variotii)菌株H6于2010年4月9日保藏于中國微 生物菌種保藏管理委員會,保藏號是CGMCC No. 3722。該種宛氏擬青霉菌株在降解甲醛的 效果較好,但是在降解纖維素和應(yīng)用于酒渣堆肥時(shí)的效果不理想。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0007] 本發(fā)明的目的在于提供一種可加速纖維素降解和腐熟的菌株,以及這種宛氏擬青 霉菌株在降解纖維素和酒渣堆肥中的應(yīng)用。
[0008] 為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的,本發(fā)明的宛氏擬青霉菌株麗2,其分類命名為 Paecilomyces varioti,現(xiàn)已經(jīng)保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,地 址北京市朝陽區(qū)北辰西路中科院微生物研究所,保藏編號CGMCC N0. 7903,保藏日期2013年 7月8日。
[0009] 本發(fā)明的宛氏擬青霉菌株MM2的形態(tài)和顯微學(xué)特征是:菌株加在麥芽汁瓊脂培養(yǎng) 基上,在25°C黑暗條件下,培養(yǎng)7天,菌落直徑擴(kuò)展為80mm,黃褐色,絨毛狀,至近粉狀;分生 孢子梗自氣生菌絲生出,瓶梗單生或輪生(8-20) X (2. 5-3) μ m。分生孢子呈橢圓形或短柱 形,光滑,鏈狀著生于瓶梗上,長徑為(3-5) X (2-2. 5) μ m。
[0010] 由微檢字第052號檢測鑒定報(bào)告得出,根據(jù)送檢菌種的培養(yǎng)特征、顯微特征和 rRNA基因序列的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的綜合分析,送檢菌種編號為:麗2的菌株,其鑒定結(jié)果為一新 菌,屬于宛氏擬青霉菌株(Paecilomyces varioti MM2);并且經(jīng)過中國微生物菌種保藏管理 委員會普通微生物中心對該生物材料的存活性檢測,結(jié)果為存活。
[0011] 本發(fā)明的宛氏擬青霉菌株麗2的培養(yǎng)方法,是將菌株加入到液體培養(yǎng)基中, 28-30°C下培養(yǎng)2-9d,制得單菌株的固體菌劑;其中,培養(yǎng)基為稻草麩皮液體培養(yǎng)基、濾紙 無機(jī)鹽液體培養(yǎng)基、PDA液體培養(yǎng)基中的任意一種。
[0012] 所述的稻草麩皮液體培養(yǎng)基為 K2HP04 2g、(NH4)2S04 1. 4g、MgS04. 7H20 0· 3g、CaCl2 0· 3g、CoCl2 2mg、FeS04. 7H20 5mg、MnS04. H20 1. 6mg、ZnS04 1. 7mg、瓊脂 20g,蒸餾水 1000mL、 稻草粉和麩皮10. 56g、調(diào)節(jié)pH為7. 2?7. 3配制。
[0013] 所述的濾紙無機(jī)鹽液體培養(yǎng)基為 NaN032. 5g、KH2P04 lg、CaCl2 · 2H20 0. lg、MgS04 0· 3g、NaClO. lg、FeCl3 0· 01g、濾紙片 10g、蒸饋水 lOOOmL 配制。
[0014] 所述的PDA液體培養(yǎng)基為馬鈴薯100g/L、葡萄糖20g/L、瓊脂20g/L,PH7. 2?7. 4, 以蒸餾水配制。
[0015] 本發(fā)明的宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2的應(yīng)用方案是通過以下技 術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的:
[0016] 當(dāng)固體菌劑含菌量> 6X108CFU/g時(shí),將固體菌劑以> 8%。的接種量添加到酒渣 堆肥中,可有效促進(jìn)酒渣堆肥升溫,并獲得保持較高溫度的高溫期,從而加快堆肥進(jìn)程,縮 短堆肥周期,提高堆肥的腐熟度。
[0017] 本發(fā)明的宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2在纖維素降解中的應(yīng)用。
[0018] 本發(fā)明的宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2在利用酒漁堆肥生產(chǎn)有機(jī) 肥中的應(yīng)用。
[0019] 本發(fā)明的宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2在制備用于酒漁堆肥的微 生物菌株中的應(yīng)用。
[0020] 本發(fā)明通過原位分離方法,在白酒酒糟中分離純化得到宛氏擬青霉 (Paecilomyces varioti)MM2菌株,可加速纖維素降解和腐熟;按一定比例接種添加到酒漁 中,能夠高效降解利用纖維素。
[0021] 本發(fā)明在長期探索用于酒渣堆肥的菌株時(shí),經(jīng)試驗(yàn)偶然發(fā)現(xiàn),宛氏擬青霉麗2菌 株在某白酒生產(chǎn)基地廣泛分布,并且具有較強(qiáng)的纖維素降解性能,在酒渣中生長迅速。因 此,將其應(yīng)用于酒渣堆肥中,既可避免外來菌源對當(dāng)?shù)匚⑸鷳B(tài)的不適應(yīng)性及干擾性,又可加 快當(dāng)?shù)鼐圃馁Y源化處理,同時(shí)也豐富了菌種資源。
[0022] 與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明具有的技術(shù)效果體現(xiàn)在:
[0023] ①本發(fā)明的宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2能夠高效降解利用纖維 素,可以作為酒渣堆肥的起爆劑和強(qiáng)化劑,加快堆肥過程,提高堆肥腐熟度,制作有機(jī)肥,尤 其適用于木質(zhì)纖維素類固體廢棄物的資源化處理和利用酒渣生產(chǎn)有機(jī)肥。
[0024] ②本發(fā)明采用的纖維素降解菌株可從酒渣堆肥中篩選出,并用于酒渣堆肥中, 由于菌種原位施用,避免了菌種對酒渣環(huán)境的不適應(yīng)性和對酒渣生態(tài)的干擾性,加之菌 株依據(jù)碳源協(xié)同性組合,不僅有利于菌株間協(xié)同性增強(qiáng),也有利于菌株在酒渣中的定植, 能有效促進(jìn)酒渣堆肥的有機(jī)質(zhì)的轉(zhuǎn)化,加快堆肥腐熟,促進(jìn)了宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2在酒漁堆肥中的應(yīng)用。
[0025] ③本發(fā)明通過稻草粉與麩皮的平板培養(yǎng)試驗(yàn)及濾紙潰爛試驗(yàn),證明了宛氏擬青霉 (Paecilomyces varioti)菌株MM2能夠高效降解利用纖維素,可用作木質(zhì)纖維素類固體廢 棄物的資源化處理的外接菌種源。
[0026] ④本發(fā)明在研究高效降解纖維素的菌種組成的時(shí)候,針對有機(jī)物質(zhì)纖維素,篩選 含有宛氏擬青霉MM2菌株的菌劑來有效降解纖維素,可以加快纖維素的降解;同時(shí),該種菌 株可從酒渣堆肥中分離出,對酒渣堆肥具有很強(qiáng)的適應(yīng)性,不存在難以定植的問題,因此添 加由該種菌株制成的菌劑,尤其適于對酒渣中的主要有機(jī)物纖維素的降解,能有效促進(jìn)酒 渣堆肥腐熟進(jìn)程,加快有機(jī)肥的制作效率。
【具體實(shí)施方式】
[0027] 下面結(jié)合具體的實(shí)施方式來對本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步的限定,但要求保護(hù)的 范圍不僅局限于所作的描述。
[0028] 實(shí)施例1
[0029] 將宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株 MM2 加入到由 K2HP04 2g、(NH4)2S04 1. 4g、MgS04· 7H20 0· 3g、CaCl2 0· 3g、CoC12 2mg、FeS04· 7H20 5mg、MnS04· H20 1. 6mg、ZnS04 1. 7mg、瓊脂20g、蒸餾水1000mL、稻草粉和麩皮10. 56g、其中通過滅菌處理的稻草粉和麩皮 按照2:1的比例,調(diào)節(jié)pH為7. 2配制的稻草麩皮液體培養(yǎng)基中,在28°C下進(jìn)行液體培養(yǎng)2d, 得到宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2。
[0030] 實(shí)施例2
[0031] 將宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株 MM2 加入到由 K2HP042g、(NH4)2S04 1. 4g、MgS04. 7H20 0· 3g、CaCl2 0· 3g、CoC12 2mg、FeS04. 7H20 5mg、MnS04. H20 1. 6mg、ZnS04 1. 7mg、瓊脂20g、蒸餾水1000mL、稻草粉和麩皮3%、其中通過滅菌處理的稻草粉和麩皮按 照1:1的比例,調(diào)節(jié)pH為7. 3配制的稻草麩皮液體培養(yǎng)基中,在30°C下進(jìn)行液體培養(yǎng)9d, 得到宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2。
[0032] 實(shí)施例3
[0033] 將宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2加入到含有由K2HP04 2g、 (NH4)2S04 1. 4g、MgS04. 7H20 0· 3g、CaCl2 0· 3g、CoCl22mg、FeS04. 7H20 5mg、MnS04. H20 1. 6mg、 ZnS04 1. 7mg、瓊脂20g、蒸餾水1000mL、稻草粉和麩皮3%、其中通過滅菌處理的稻草粉和麩 皮按照1:1的比例,調(diào)節(jié)pH為7. 3配制的稻草麩皮液體培養(yǎng)基的斜面培養(yǎng)器皿中,在28°C 下進(jìn)行液體培養(yǎng)2d,得到宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2的單菌株菌劑。
[0034] 實(shí)施例4
[0035] 將宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2加入到含有由K2HP04 2g、 (NH4) 2S04 1. 4g、MgS04. 7H20 0· 3g、CaC12 0· 3g、CoC122mg、FeS04. 7H20 5mg、MnS04. H20 1. 6mg、ZnS04 1. 7mg、瓊脂20g、蒸餾水1000mL、稻草粉和麩皮3%、其中通過滅菌處理的稻草 粉和麩皮按照1:1的比例,調(diào)節(jié)pH為7. 3配制的稻草麩皮液體培養(yǎng)基的斜面培養(yǎng)器皿中, 在28°C下進(jìn)行液體培養(yǎng)2d,得到宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2的單菌株, 再將該單菌株與其他纖維素降解菌混合得到復(fù)合固體菌劑。
[0036] 實(shí)施例5
[0037] 將宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株 MM2 加入到由 NaN032. 5g、KH2P04 lg、 CaCl2 · 2H20 0· lg、MgS04 0· 3g、NaCl 0· lg、FeCl30. 01g、濾紙片 10g、蒸餾水 1000mL 配制,并 經(jīng)121°C滅菌30min后,自然PH環(huán)境下的濾紙無機(jī)鹽液體培養(yǎng)基中,在28°C的環(huán)境下培養(yǎng) 9d,觀察濾紙有明顯的潰爛狀態(tài),濾紙失重率達(dá)15. 85%。
[0038] 實(shí)施例6
[0039] 將宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株 MM2 加入到由 NaN032. 5g、KH2P04 lg、 CaCl2 · 2H20 0· lg、MgS04 0· 3g、NaCl 0· lg、FeCl30. 01g、濾紙片 10g、蒸餾水 1000mL 配制,并 經(jīng)121°C滅菌30min后,自然PH環(huán)境下的濾紙傾斜放入的無機(jī)鹽液體培養(yǎng)基中,在28°C的 環(huán)境下培養(yǎng)9d,觀察濾紙有明顯的潰爛狀態(tài),濾紙失重率達(dá)15. 85%。
[0040] 實(shí)施例7
[0041] 將宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2接種于500ml三角瓶中的PDA液 體培養(yǎng)基內(nèi),在三角瓶中裝入液量為200ml,置于搖床上,在30°C,135r · mirT1的條件下培 養(yǎng)48h,獲得種子菌劑;再將種子菌劑以10% (v/w)接種于滅菌后的麩皮和/或稻草上,接 種均勻后,置于竹簍中,采用4層紗布覆蓋,在室溫條件下培養(yǎng),每1天攪拌一次,培養(yǎng)6天 后,微生物數(shù)量達(dá)6X108個/克,瞭曬,共制得宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株 麗2固體菌劑20kg左右。
[0042] 實(shí)施例8
[0043] 將宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2接種于500ml三角瓶中由馬鈴 薯l〇〇g/L、葡萄糖20g/L、瓊脂20g/L,以蒸餾水配制,調(diào)節(jié)PH為7. 2的PDA液體培養(yǎng)基內(nèi), 在三角瓶中裝入的液量為200ml,置于搖床上,在30°C,135r 的條件下培養(yǎng)48h,獲得 種子菌劑;再將種子菌劑以10% (v/V)接種于滅菌后的麩皮和/或稻草上,接種均勻后,置 于竹簍中,采用4層紗布覆蓋,在室溫條件下培養(yǎng),每1天攪拌一次,培養(yǎng)6天后,微生物數(shù) 量達(dá)6X108個/克,瞭曬,共制得宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2固體菌劑 20kg左右。
[0044] 實(shí)施例9
[0045] 將宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2接種于500ml三角瓶中由馬鈴 薯l〇〇g/L、葡萄糖20g/L、瓊脂20g/L,以蒸餾水配制,調(diào)節(jié)PH為7. 4的PDA液體培養(yǎng)基內(nèi), 在三角瓶中裝入的液量為200ml,置于搖床上,在28°C,130r 的條件下培養(yǎng)3d,獲得 種子菌劑。
[0046] 實(shí)施例10
[0047] 將宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2接種于500ml三角瓶中由馬鈴薯 l〇〇g/L、葡萄糖20g/L、瓊脂20g/L,以蒸餾水配制,調(diào)節(jié)PH為7. 4的PDA液體培養(yǎng)基內(nèi),在 三角瓶中裝入的液量為200ml,置于搖床上,在29°C,140r 的條件下培養(yǎng)2d,獲得種 子菌劑;再將種子菌劑以10% (v/V)接種于滅菌后的麩皮和/或稻草上,接種均勻后,置于 竹簍中,采用4層紗布覆蓋,在室溫條件下培養(yǎng),每1天攪拌一次,培養(yǎng)7d后,微生物數(shù)量達(dá) 6X 108個/克,瞭曬,共制得宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2固體菌劑20kg 左右。
[0048] 實(shí)施例11
[0049] 在實(shí)施例1-4或7-10的基礎(chǔ)上,當(dāng)固體菌劑含菌量> 6X108CFU/g時(shí),將固體菌 劑以質(zhì)量含量為8%。的接種量添加到酒渣堆肥中。
[0050] 實(shí)施例12
[0051] 在實(shí)施例1-4或7-10的基礎(chǔ)上,當(dāng)固體菌劑含菌量> 6X108CFU/g時(shí),將固體菌 劑以質(zhì)量含量為2%。的接種量添加到酒渣堆肥中。
[0052] 實(shí)施例13
[0053] 在實(shí)施例1-4或7-10的基礎(chǔ)上,當(dāng)固體菌劑含菌量> 6X108CFU/g時(shí),將固體菌 劑以質(zhì)量含量為4%。的接種量添加到酒渣堆肥中。
[0054] 實(shí)施例14
[0055] 在實(shí)施例1-4或7-10的基礎(chǔ)上,當(dāng)固體菌劑含菌量> 6X108CFU/g時(shí),將固體菌 劑以質(zhì)量含量為6%。的接種量添加到酒渣堆肥中。
[0056] 實(shí)施例15
[0057] 在實(shí)施例1-4或7-10的基礎(chǔ)上,當(dāng)固體菌劑含菌量> 6X108CFU/g時(shí),將固體菌 劑以質(zhì)量含量為7%。的接種量添加到酒渣堆肥中。
[0058] 實(shí)施例16
[0059] 在實(shí)施例1-4或7-10的基礎(chǔ)上,當(dāng)固體菌劑含菌量> 6X108CFU/g時(shí),將固體菌 劑以質(zhì)量含量為10%。的接種量添加到酒渣堆肥中。
[0060] 實(shí)施例17
[0061] 在實(shí)施例1-4或7-10的基礎(chǔ)上,當(dāng)固體菌劑含菌量> 6X108CFU/g時(shí),將固體菌 劑以質(zhì)量含量為12%。的接種量添加到酒渣堆肥中。
[0062] 實(shí)施例18
[0063] 在實(shí)施例1-4或7-10的基礎(chǔ)上,當(dāng)固體菌劑含菌量> 6X108CFU/g時(shí),將固體菌 劑以質(zhì)量含量為>8%。的接種量添加到酒渣堆肥中,使酒渣堆肥升溫發(fā)酵生產(chǎn)有機(jī)肥。
[0064] 試驗(yàn)例:
[0065] 試驗(yàn)例1宛氏擬青霉(Paecilomyces variotii)MM2菌株的應(yīng)用量的測定。
[0066] 堆置8堆酒渣堆肥,其中堆2至堆8分別采用實(shí)施例11-17的所述的固體菌劑量 加入到酒渣堆肥中,測定堆肥開始的10天內(nèi)的溫度變化情況,如表1所示:
[0067] 表1堆肥開始的10天內(nèi)的溫度高低情況,單位°c
[0068]
【權(quán)利要求】
1. 一種宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2,其特征在于:于2013年7月8 日保藏于中國微生物保藏管理委員會,保藏號是CGMCCN0. 7903。
2. 如權(quán)利要求1所述的宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2的培養(yǎng)方法,其 特征在于:是將菌株加入到液體培養(yǎng)基中,28-30°C下培養(yǎng)2-9d,制得單菌株的固體菌劑; 其中,培養(yǎng)基為稻草麩皮液體培養(yǎng)基、濾紙無機(jī)鹽液體培養(yǎng)基、PDA液體培養(yǎng)基中的任意一 種。
3. 如權(quán)利要求2所述的宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2的培養(yǎng)方法, 其特征在于:所述的稻草麩皮液體培養(yǎng)基為K2HP042g、(NH 4)2S041. 4g、MgS04. 7H200. 3g、 CaCl20. 3g、CoCl22mg、FeS04. 7H205mg、MnS04. H20L 6mg、ZnS04l. 7mg、瓊脂 20g,蒸餾水 1000mL、稻草粉和麩皮10. 56g、調(diào)節(jié)pH為7. 2?7. 3配制。
4. 如權(quán)利要求2所述的宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2的培養(yǎng)方法, 其特征在于:所述的濾紙無機(jī)鹽液體培養(yǎng)基為NaN032. 5g、KH2P04lg、CaCl2 · 2H200. lg、 MgS040. 3g、NaClO. lg、FeCl30. Olg、濾紙片 10g、蒸饋水 lOOOmL 配制。
5. 如權(quán)利要求2所述的宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2的培養(yǎng)方法, 其特征在于:所述的PDA液體培養(yǎng)基為馬鈴薯100g/L、葡萄糖20g/L、瓊脂20g/L,PH7. 2? 7. 4,以蒸餾水配制。
6. 如權(quán)利要求1所述宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2或權(quán)利要求 2-5任一項(xiàng)所述宛氏擬青霉(Paecilomycesvarioti)菌株MM2培養(yǎng)方法培養(yǎng)的宛氏擬 青霉(Paecilomyces varioti)菌株麗2的應(yīng)用方法,其特征在于:當(dāng)固體菌劑含菌量 彡6X108CFU/g時(shí),將固體菌劑以彡8%。的接種量添加到酒渣堆肥中。
7. 如權(quán)利要求1所述宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2或權(quán)利要求2-5任 一項(xiàng)所述宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2培養(yǎng)方法或權(quán)利要求6所述的宛氏 擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2的應(yīng)用方法在纖維素降解中的應(yīng)用。
8. 如權(quán)利要求1所述宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2或權(quán)利要求2-5 任一項(xiàng)所述宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti )菌株MM2培養(yǎng)方法或權(quán)利要求6所述的宛 氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2的應(yīng)用方法在利用酒漁堆肥生產(chǎn)有機(jī)肥中的應(yīng) 用。
9. 如權(quán)利要求1所述宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2或權(quán)利要求2-5任 一項(xiàng)所述宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2培養(yǎng)方法或權(quán)利要求6所述的宛氏 擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2的應(yīng)用方法在制備用于酒漁堆肥的微生物菌株中 的應(yīng)用。
【文檔編號】C12N1/14GK104059854SQ201410130198
【公開日】2014年9月24日 申請日期:2014年4月2日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月2日
【發(fā)明者】王和玉, 汪地強(qiáng), 江友峰, 胡旭, 袁頡, 王巖 申請人:貴州茅臺酒股份有限公司