一種海水分歧桿菌魚肝培養(yǎng)基及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種海水分歧桿菌魚肝培養(yǎng)基及其制備方法，其特征在于包括：90g～100g的鮮魚肝、8g～12g瓊脂粉、350ml～400ml蒸餾水。其制備方法包括以下步驟：搗碎處理、混合攪拌、滅菌處理、后處理操作，獲得培養(yǎng)基。本發(fā)明的魚肝培養(yǎng)基與現(xiàn)有各種細菌培養(yǎng)相比，營養(yǎng)成分配比更適合海水分歧桿菌生長，培養(yǎng)制備操作方法簡潔。另，采用美洲鰣魚肝臟為主要成分培養(yǎng)基分離出病原菌，并經(jīng)過形態(tài)特征鑒定和分子基因測定，確定為海水分歧桿菌，為防治奠定基礎。
【專利說明】一種海水分歧桿菌魚肝培養(yǎng)基及其制備方法
【技術(shù)領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種海水分歧桿菌的培養(yǎng)基及其制備方法，屬于微生物領域。
【背景技術(shù)】
[0002]美洲鋪魚從美國引進中國10多年，每年氣溫超過25°C時，美洲鋪魚就會發(fā)病死亡，其主要表現(xiàn)癥狀是:肝臟先出現(xiàn)小白點病灶，然后肝臟潰爛，魚體出現(xiàn)小紅點，最后死亡。多年來不少科研所專家一直努力想分離病菌，找到預防治療方案，先后使用營養(yǎng)瓊脂、胰蛋白胨大豆瓊脂、硫檸膽蔗瓊脂、麥康凱瓊脂、血瓊脂、伊紅美藍瓊脂、淀粉瓊脂培養(yǎng)基、馬鈴薯培養(yǎng)基、羅氏培養(yǎng)基和小川培養(yǎng)基等10多種培養(yǎng)基均無法找出導致魚病的病原菌。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有細菌培養(yǎng)基配方的不足，提供一種營養(yǎng)成分全面適合海水分歧桿菌生長的海水分歧桿菌的培養(yǎng)基。
[0004]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案為:一種海水分歧桿菌魚肝培養(yǎng)基，其創(chuàng)新點在于包括:90g~100g的鮮魚肝、8g~12g瓊脂粉、350ml~400ml蒸懼水。
[0005]優(yōu)選地，所述海水分歧桿菌魚肝培養(yǎng)基的最佳配比為:95g的鮮魚肝、IOg瓊脂粉、400ml蒸餾水。
[0006]一種海水分歧桿菌魚肝培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟:
1)搗碎處理
首先將鮮魚肝搗碎，確保搗碎后的鮮魚肝目數(shù)控制在15目~30目之間；
2)混合攪拌
將搗碎處理后的鮮魚肝倒入高壓滅菌鍋中，并倒入上述比例的蒸餾水，攪拌均勻，此時再倒入上述比例的瓊脂粉，充分攪拌混合；
3)滅菌處理
加熱高壓滅菌鍋，保持高壓滅菌鍋內(nèi)溫度在121 °C，滅菌時間維持20min ；
4)后處理操作
滅菌完成后，揭開高壓滅菌鍋鍋蓋，自然冷卻到高壓滅菌鍋內(nèi)溫度到90°C，獲得培養(yǎng)基，接著取出滅菌后的培養(yǎng)基至滅菌操作臺上，利用無菌玻璃棒攪拌均勻后倒入若干直徑為IOcm的培養(yǎng)皿，每個培養(yǎng)皿中加入20~25ml的培養(yǎng)基，靜置2h后即可。
[0007]本發(fā)明的優(yōu)點在于:本發(fā)明的魚肝培養(yǎng)基與現(xiàn)有各種細菌培養(yǎng)相比，營養(yǎng)成分配比更適合海水分歧桿菌生長，培養(yǎng)制備操作方法簡潔。另，采用美洲鋪魚肝臟為主要成分培養(yǎng)基分離出病原菌，并經(jīng)過形態(tài) 特征鑒定和分子基因測定，確定為海水分歧桿菌，為防治奠定基礎。
【具體實施方式】
[0008]下面結(jié)合具體實施案例對本發(fā)明進行詳細闡述。[0009]實施例1:
一種海水分歧桿菌魚肝培養(yǎng)基，由下列組份組成:鮮魚肝100g、瓊脂粉10g、蒸餾水400ml。
[0010]對應的一種海水分歧桿菌魚肝培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟:
1)搗碎處理
首先將鮮魚肝搗碎，確保搗碎后的鮮魚肝目數(shù)控制在15目~30目之間；
2)混合攪拌
將搗碎處理后的鮮魚肝倒入高壓滅菌鍋中，并倒入上述比例的蒸餾水，攪拌均勻，此時再倒入上述比例的瓊脂粉，充分攪拌混合；
3)滅菌處理
加熱高壓滅菌鍋，保持高壓滅菌鍋內(nèi)溫度在121 °C，滅菌時間維持20min ；
4)后處理操作
滅菌完成后，揭開高壓滅菌鍋鍋蓋，自然冷卻到高壓滅菌鍋內(nèi)溫度到90°C，獲得培養(yǎng)基，接著取出滅菌后的培養(yǎng)基至滅菌操作臺上，利用無菌玻璃棒攪拌均勻后倒入若干直徑為IOcm的培養(yǎng)皿，每個培養(yǎng)皿中加入20~25ml的培養(yǎng)基，靜置2h后即可。
[0011]實施例2:
一種海水分歧桿菌魚肝培養(yǎng)基，由下列組份組成:鮮魚肝95g、瓊脂粉10g、蒸餾水400ml ο
[0012]對應的一種海水分歧桿菌魚肝培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟:
1)搗碎處理
首先將鮮魚肝搗碎，確保搗碎后的鮮魚肝目數(shù)控制在15目~30目之間；
2)混合攪拌
將搗碎處理后的鮮魚肝倒入高壓滅菌鍋中，并倒入上述比例的蒸餾水，攪拌均勻，此時再倒入上述比例的瓊脂粉，充分攪拌混合；
3)滅菌處理
加熱高壓滅菌鍋，保持高壓滅菌鍋內(nèi)溫度在121 °C，滅菌時間維持20min ；
4)后處理操作
滅菌完成后，揭開高壓滅菌鍋鍋蓋，自然冷卻到高壓滅菌鍋內(nèi)溫度到90°C，獲得培養(yǎng)基，接著取出滅菌后的培養(yǎng)基至滅菌操作臺上，利用無菌玻璃棒攪拌均勻后倒入若干直徑為IOcm的培養(yǎng)皿，每個培養(yǎng)皿中加入20~25ml的培養(yǎng)基，靜置2h后即可。
[0013] 以上對本發(fā)明創(chuàng)造的一個實施例進行了詳細說明，但所述內(nèi)容僅為本發(fā)明創(chuàng)造的較佳實施例，不能被認為用于限定本發(fā)明創(chuàng)造的實施范圍。凡依本發(fā)明創(chuàng)造申請范圍所作的均等變化與改進等，均歸屬于本發(fā)明創(chuàng)造的專利涵蓋范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種海水分歧桿菌魚肝培養(yǎng)基，其特征在于包括:90g~100g的鮮魚肝、8g~12g瓊脂粉、350ml~400ml蒸餾水。
2.如權(quán)利要求1所述的一種海水分歧桿菌魚肝培養(yǎng)基，其特征在于，所述海水分歧桿菌魚肝培養(yǎng)基的最佳配比為:95g的鮮魚肝、10g瓊脂粉、400ml蒸餾水。
3.—種海水分歧桿菌魚肝培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于包括以下步驟: 1)搗碎處理 首先將鮮魚肝搗碎，確保搗碎后的鮮魚肝目數(shù)控制在15目~30目之間； 2)混合攪拌 將搗碎處理后的鮮魚肝倒入高壓滅菌鍋中，并倒入上述比例的蒸餾水，攪拌均勻，此時再倒入上述比例的瓊脂粉，充分攪拌混合； 3)滅菌處理 加熱高壓滅菌鍋，保持高壓滅菌鍋內(nèi)溫度在121 °C，滅菌時間維持20min ； 4)后處理操作 滅菌完成后，揭開高壓滅菌鍋鍋蓋，自然冷卻到高壓滅菌鍋內(nèi)溫度到90°C，獲得培養(yǎng)基，接著取出滅菌后的培養(yǎng)基至滅菌操作臺上，利用無菌玻璃棒攪拌均勻后倒入若干直徑為10cm的培養(yǎng)皿，每個培養(yǎng)皿中加入20~25ml的培養(yǎng)基，靜置2h后即可。
【文檔編號】C12R1/01GK103898027SQ201410146610
【公開日】2014年7月2日 申請日期:2014年4月14日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月14日
【發(fā)明者】蔡星, 張飛, 王婷 申請人:江蘇中洋集團股份有限公司