從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法，包括如下步驟：(1)去脂：以新鮮雞皮為原料，剪碎洗凈，加入質(zhì)量濃度為0.8～1.2％的H2O2的NaOH溶液，浸泡，用清水洗至中性，瀝干，得去脂雞皮；(2)制備膠原蛋白：向去脂雞皮加入去離子水，升溫，加入復(fù)合蛋白酶Ⅰ，進行酶解，雞皮解體成為散狀膠原蛋白；(3)制備低分子量活性膠原蛋白肽：向散狀膠原蛋白加復(fù)合蛋白酶Ⅱ，進一步酶解，酶解完全后，升溫，將酶滅活，靜置，分離出清澈液體，加入活性炭，脫色后過濾，再用超濾裝置過濾濃縮，濃縮液經(jīng)干燥后制得低分子量活性膠原蛋白肽。本發(fā)明優(yōu)化了工藝步驟，提高了生產(chǎn)率，提升了膠原蛋白肽的得率，提高了膠原蛋白肽的活性。
【專利說明】從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及雞皮的深加工【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]雞皮屬于富含動物結(jié)締組織的原料，有很好的美容功效，其含有豐富的膠原蛋白，能使皮膚光滑祛皺，效果是其它東西沒法比較的。膠原蛋白具有獨特的三股超螺旋結(jié)構(gòu)，三條鏈相互平行而且由鏈間氫鍵相連，具有十分穩(wěn)定的性質(zhì)，一般的加工溫度及短時間加熱都難使其分解，因此難被人體吸收，直接食用利用率較低；如將膠原蛋白水解為多肽后，消化吸收率低幾乎達到100%，而其營養(yǎng)劑生理功能也會顯著提高，如:保護胃黏膜以及抗?jié)?，促進皮膚膠原代謝，抑制血壓上升，能促進鈣吸收和降低血清中膽固醇含量，對關(guān)節(jié)炎等膠原病也都有很好的預(yù)防和治療作用。
[0003]近幾年來，膠原蛋白的開發(fā)和利用已引起人們廣泛的關(guān)注。不過，并非所有的膠原蛋白肽都能輕易地應(yīng)用于不同的領(lǐng)域。膠原蛋白肽的用途主要取決于膠原水解產(chǎn)物量，膠原蛋白肽在醫(yī)藥、食品、化妝品、精細(xì)化工產(chǎn)品中的應(yīng)用都與其分子量有關(guān)。分子量的大小已經(jīng)成為衡量產(chǎn)品質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)。
[0004]目前，國內(nèi)生產(chǎn)的膠原蛋白肽，其分子量多在2000道爾頓以上，生物學(xué)活性很低。
[0005]經(jīng)過專利檢索，還未發(fā)現(xiàn)從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法的相關(guān)文獻。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法，該方法生產(chǎn)出的膠原蛋白肽的分子量分布在500~1500道爾頓之間。
[0007]本發(fā)明提供的技術(shù)方案如下:
[0008]從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法，包括以下步驟:
[0009](I)去脂:以新鮮雞皮為原料，剪碎洗凈，用18~20倍原料重的質(zhì)量濃度為0.8~
1.2%的H2O2的0.0ImoI/LNaOH溶液在18~22°C下攪拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙干，得去脂雞皮；
[0010](2)制備膠原蛋白:向去脂雞皮加入原料重量5~10倍量的去離子水，升溫至38~45°C，加入原料質(zhì)量1%。~3%。的復(fù)合蛋白酶I ,進行酶解,雞皮解體成為散狀膠原蛋白；
[0011]( 3)制備低分子量活性膠原蛋白肽:向散狀膠原蛋白加入原料重量1%。~3%。復(fù)合蛋白酶II，進一步酶解，酶解完全后，升溫至90~100°C，保持15~30min，將酶滅活，靜置，分離出清澈液體，加入活性炭，脫色后過濾，再用超濾裝置過濾濃縮，濃縮液經(jīng)干燥后制得低分子量活性膠原蛋白肽。
[0012]步驟⑵中所述復(fù)合蛋白酶I為氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶。[0013]步驟(3)中所述復(fù)合蛋白酶II為內(nèi)切蛋白酶。
[0014]優(yōu)選地，步驟(3)中所述干燥為噴霧干燥。
[0015]本發(fā)明的有益效果在于:
[0016]本發(fā)明采用兩步酶切法從雞皮中提取膠原蛋白，具有產(chǎn)品活性高、得率高的優(yōu)點。在酶解前，對雞皮進行去脂處理，有效避免了酶解液中顆粒狀的脂肪與酶解液形成混懸液，也防止脂肪粒殘存在膠原蛋白中，影響膠原蛋白得率，降低膠原蛋白肽的生物學(xué)活性。氨肽酶和羧肽酶是外切酶，本發(fā)明首先采用氨肽酶和羧肽酶對雞皮中的膠原蛋白進行外切，將膠原蛋白與雞皮的其他組織成分離開，使雞皮成為散狀后，再用內(nèi)切蛋白酶對蛋白質(zhì)進行酶解，使蛋白成為小分子的蛋白肽。
[0017]綜上所述，本發(fā)明在不同階段科學(xué)選取了不同的蛋白酶，優(yōu)化了工藝步驟，提高了生產(chǎn)率，提升了膠原蛋白肽的得率，提高了膠原蛋白肽的活性。采用本發(fā)明制得的產(chǎn)品，分子量在500~1500道爾頓之間約占90%，活性多肽含量高達90%以上。
【具體實施方式】
[0018]以下結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步說明，但本發(fā)明并不局限于這些實施例。
[0019]實施例1
[0020](I)去脂:以新鮮 雞皮為原料，剪碎洗凈，用18倍原料重的質(zhì)量濃度為1.2%的H2O2的0.0ImoI/LNaOH溶液在18°C下攪拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙干，得去脂雞皮；
[0021](2)制備膠原蛋白:向去脂雞皮加入原料重量10倍量的去離子水，升溫至45°C，加入原料質(zhì)量1%。的氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶，進行酶解，雞皮解體成為散狀膠原蛋白；
[0022](3)制備低分子量活性膠原蛋白肽:向散狀膠原蛋白加入原料重量3%。內(nèi)切蛋白酶，進一步酶解，酶解完全后，升溫至90°C，保持30min，將酶滅活，靜置，分離出清澈液體，加入活性炭，脫色后過濾，再用超濾裝置過濾濃縮，濃縮液經(jīng)噴霧干燥后制得低分子量活性膠原蛋白肽。
[0023]實施例2
[0024](I)去脂:以新鮮雞皮為原料，剪碎洗凈，用19倍原料重的質(zhì)量濃度為1.1%的H2O2的0.0ImoI/LNaOH溶液在19°C下攪拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙干，得去脂雞皮；
[0025](2)制備膠原蛋白:向去脂雞皮加入原料重量9倍量的去離子水，升溫至43°C，加入原料質(zhì)量2%。的氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶，進行酶解，雞皮解體成為散狀膠原蛋白；
[0026](3)制備低分子量活性膠原蛋白肽:向散狀膠原蛋白加入原料重量1%。內(nèi)切蛋白酶，進一步酶解，酶解完全后，升溫至95°C，保持25min，將酶滅活，靜置，分離出清澈液體，加入活性炭，脫色后過濾，再用超濾裝置過濾濃縮，濃縮液經(jīng)噴霧干燥后制得低分子量活性膠原蛋白肽。
[0027]實施例3
[0028](I)去脂:以新鮮雞皮為原料，剪碎洗凈，用20倍原料重的質(zhì)量濃度為1.0%的H2O2的0.0ImoI/LNaOH溶液在20°C下攪拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙干，得去脂雞皮；
[0029](2)制備膠原蛋白:向去脂雞皮加入原料重量7倍量的去離子水，升溫至38°C，加入原料質(zhì)量3%。的氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶，進行酶解，雞皮解體成為散狀膠原蛋白；
[0030](3)制備低分子量活性膠原蛋白肽:向散狀膠原蛋白加入原料重量2%。內(nèi)切蛋白酶，進一步酶解，酶解完全后，升溫至10(TC，保持15min，將酶滅活，靜置，分離出清澈液體，加入活性炭，脫色后過濾，再用超濾裝置過濾濃縮，濃縮液經(jīng)噴霧干燥后制得低分子量活性膠原蛋白肽。
[0031]實施例4
[0032](I)去脂:以新鮮雞皮為原料，剪碎洗凈，用20倍原料重的質(zhì)量濃度為0.8%的H2O2的0.0ImoI/LNaOH溶液在20°C下攪拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙干，得去脂雞皮；
[0033](2)制備膠原蛋白:向去脂雞皮加入原料重量5倍量的去離子水，升溫至45°C，加入原料質(zhì)量3%。的氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶，進行酶解，雞皮解體成為散狀膠原蛋白；
[0034](3)制備低分子量活性膠原蛋白肽:向散狀膠原蛋白加入原料重量3%。內(nèi)切蛋白酶，進一步酶解，酶解完全后，升溫至100°C，保持20min，將酶滅活，靜置，分離出清澈液體，加入活性炭，脫色后過濾，再用超濾裝置過濾濃縮，濃縮液經(jīng)噴霧干燥后制得低分子量活性膠原蛋白肽。[0035]實施例5
[0036](I)去脂:以新鮮雞皮為原料，剪碎洗凈，用20倍原料重的質(zhì)量濃度為0.9%的H2O2的0.0ImoI/LNaOH溶液在22°C下攪拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙干，得去脂雞皮；
[0037](2)制備膠原蛋白:向去脂雞皮加入原料重量10倍量的去離子水，升溫至40°C，加入原料質(zhì)量2%。的氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶，進行酶解，雞皮解體成為散狀膠原蛋白；
[0038](3)制備低分子量活性膠原蛋白肽:向散狀膠原蛋白加入原料重量2%。內(nèi)切蛋白酶，進一步酶解，酶解完全后，升溫至95°C，保持20min，將酶滅活，靜置，分離出清澈液體，加入活性炭，脫色后過濾，再用超濾裝置過濾濃縮，濃縮液經(jīng)噴霧干燥后制得低分子量活性膠原蛋白肽。
【權(quán)利要求】
1.從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)去脂:以新鮮雞皮為原料，剪碎洗凈，用18~20倍原料重的質(zhì)量濃度為0.8~1.2%的H2O2的0.01mol/L NaOH溶液在18~22°C下攪拌浸泡4h，用清水洗至中性，浙干，得去脂雞皮； (2)制備膠原蛋白:向去脂雞皮加入原料重量5~10倍量的去離子水，升溫至38~45°C，加入原料質(zhì)量1%。~3%。的復(fù)合蛋白酶I，進行酶解，雞皮解體成為散狀膠原蛋白； (3)制備低分子量活性膠原蛋白肽:向散狀膠原蛋白加入原料重量1%。~3%。復(fù)合蛋白酶II，進一步酶解，酶解完全后，升溫至90~100°C，保持15~30min，將酶滅活，靜置，分離出清澈液體，加入活性炭，脫色后過濾，再用超濾裝置過濾濃縮，濃縮液經(jīng)干燥后制得低分子量活性膠原蛋白肽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法，其特征在于:步驟(2)中所述復(fù)合蛋白酶I為氨肽酶和羧肽酶混合蛋白酶。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述從雞皮中 提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法，其特征在于:步驟⑶中所述復(fù)合蛋白酶II為內(nèi)切蛋白酶。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述從雞皮中提取低分子量活性膠原蛋白肽的方法，其特征在于:步驟(3)中所述干 燥為噴霧干燥。
【文檔編號】C12P21/06GK103952457SQ201410179061
【公開日】2014年7月30日 申請日期:2014年4月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月30日
【發(fā)明者】周冠旻 申請人:桂林軍供生化技術(shù)開發(fā)有限公司