一種氣虛體質(zhì)保健食品及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種氣虛體質(zhì)保健食品及其制備方法，該保健食品以藥食同源原料黃精、桔梗、山藥、人參為有效藥物組分以及在藥品和食品中允許使用的輔助添加成分組成，以重量份計(jì)的各有效藥食兩用組分的生藥原料組成為：黃精75～250份、桔梗30～105份、山藥54～180份和人參9～45份。該保健食品針對(duì)氣虛體質(zhì)人群，具有益氣健脾，滋養(yǎng)心腎的功效。
【專利說(shuō)明】一種氣虛體質(zhì)保健食品及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種藥食同源保健食品及其制備方法，具體涉及針對(duì)氣虛體質(zhì)保健食品及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]體質(zhì)是由先天遺傳和后天獲得所形成的，個(gè)體在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)方面所固有的、相對(duì)穩(wěn)定的特性，與心理性格具有相關(guān)性。個(gè)體的體質(zhì)不同，表現(xiàn)為在生理狀態(tài)下對(duì)外界刺激的反應(yīng)和適應(yīng)性上的某些差異性，以及發(fā)病過(guò)程中對(duì)某些致病因子的易感性和疾病發(fā)展的傾向性。
[0003]中醫(yī)體質(zhì)理論淵源于《內(nèi)經(jīng)》，在《內(nèi)經(jīng)》中對(duì)個(gè)體及不同群體的體質(zhì)特征、體質(zhì)的形成、體質(zhì)的分型及其與疾病發(fā)生發(fā)展的關(guān)系、疾病的防治等問(wèn)題均有詳細(xì)的闡述。中醫(yī)體質(zhì)學(xué)說(shuō)的形神構(gòu)成論認(rèn)為，體質(zhì)是特定軀體素質(zhì)與一定心理素質(zhì)的綜合體，體現(xiàn)了中醫(yī)的“形神合一”思想。
[0004]中醫(yī)體質(zhì)分類是以人體生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)-陰、陽(yáng)、氣、血、津液盛衰狀態(tài)為依據(jù)而確立的，正因?yàn)轶w內(nèi)陰、陽(yáng)、氣、血、津液的盛衰狀態(tài)不同，從而表現(xiàn)為個(gè)體之間的體質(zhì)
差異性。
[0005]中醫(yī)對(duì)氣虛體質(zhì)的認(rèn)識(shí)，始于《內(nèi)經(jīng)》。氣虛體質(zhì)由于先天稟賦不足，后天失養(yǎng)，如孕育時(shí)父母體弱、早產(chǎn)、人工喂養(yǎng)不當(dāng)、偏食、厭食，或因病后氣虧、年老氣弱等。氣虛體質(zhì)和陽(yáng)虛體質(zhì)比較相近，從性質(zhì)上來(lái)說(shuō)，屬于虛性體質(zhì)。陽(yáng)虛體質(zhì)以熱量不夠，陽(yáng)氣虛，缺乏溫煦，畏寒怕冷為主。氣虛體質(zhì)也有陽(yáng)虛體質(zhì)的這些傾向，但它最主要是反映在臟腑功能的低下。氣虛體質(zhì)的人相對(duì)五臟來(lái)說(shuō)，他肺臟功能和脾臟功能弱一點(diǎn)。特征為形體消瘦或偏胖，體倦乏力，面色蒼白，語(yǔ)聲低怯，常自汗出，且動(dòng)則尤甚，心悸食少，舌淡苔白，脈虛弱，是其基本特征。若患病則諸癥加重，或伴有氣短懶言、咳喘無(wú)力；或食少腹脹、大便溏泄；或脫肛、子宮脫垂；或心悸怔忡、精神疲憊；或腰膝酸軟、小便頻多，男子滑精早泄、女子白帶清稀。氣虛體質(zhì)主要亞健康癥狀總結(jié)三字經(jīng)為:氣虛質(zhì)，免疫差，易疲乏，常虛喘。
[0006]目前，用于改善氣虛體質(zhì)癥狀，補(bǔ)氣養(yǎng)氣的都是一些中藥，口感差，服用不方便。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的上述問(wèn)題，本發(fā)明提供一種針對(duì)氣虛體質(zhì)，具有益氣健脾，滋養(yǎng)心腎功效的保健食品及其制備方法。
[0008]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明包括如下技術(shù)方案:
[0009]一種氣虛體質(zhì)保健食品，其是以藥食兩用原料黃精、桔梗、山藥和人參的提取物為有效藥物組分以及在藥品和食品中允許使用的輔助添加成分組成，以重量份計(jì)的各有效藥食兩用組分的生藥原料組成為:黃精75?250份、桔梗30?105份、山藥54?180份和人參9?45份。
[0010]如上所述的保健食品，優(yōu)選地，所述以重量份計(jì)的各有效藥食兩用組分的生藥原料組成為:黃精125?200份、桔梗45?90份、山藥90?120份和人參15?30份。
[0011]如上所述的保健食品，優(yōu)選地，所述以重量份計(jì)的各有效藥食兩用組分的生藥原料組成為:黃精150份、桔梗60份、山藥112.5份和人參22.5份。
[0012]如上所述的保健食品，優(yōu)選地，所述有效藥物組分的重量份組成配比為:黃精提取物15?50份、桔梗提取物10?35份、山藥提取物9?30份和人參提取物3?15份。
[0013]如上所述的保健食品，優(yōu)選地，所述有效藥物組分的重量份組成配比為:黃精提取物25?40份、桔梗提取物15?30份、山藥提取物15?20份和人參提取物5?10份。
[0014]如上所述的保健食品，優(yōu)選地，所述有效藥物組分的重量份組成配比為:黃精提取物30份、桔梗提取物20份、山藥提取物18.75份和人參提取物7.5份。
[0015]如上所述的保健食品，優(yōu)選地，所述各提取物的提取方法如下:
[0016]黃精、桔梗、山藥和人參均使用水煎煮法獲得提取物。
[0017]如上所述的保健食品，優(yōu)選地，該保健食品中還含有輔料，選自南瓜粉、橙粉、魔芋粉和羅漢果甜苷中的一種或幾種。
[0018]如上所述的保健食品，優(yōu)選地，每100重量份的保健食品含南瓜粉20?45份、橙粉5?20份、魔芋粉3?10份和/或羅漢果甜苷0.3?1.0份。
[0019]如上所述的保健食品，優(yōu)選地，所述黃精提取物的制備方法如下:
[0020]黃精飲片，加4-10倍量水煮沸提取0.5-2小時(shí)，提取1_3次，提取液過(guò)濾，合并過(guò)濾液備用；過(guò)濾液濃縮，濃縮至比重1.06-1.14 ;濃縮液用離心機(jī)離心，取離心液備用；離心液加入成品量的5-15%麥芽糊精混合均勻后至噴霧干燥器中干燥，噴霧干燥器進(jìn)風(fēng)溫度為180-205°C，出風(fēng)溫度為90-105°C ;取噴霧干燥所得干膏粉碎，過(guò)80目篩，得黃精提取物。
[0021]如上所述的保健食品，優(yōu)選地，所述桔梗提取物的制備方法如下:
[0022]桔梗飲片，粗碎至0.5cm-l.5cm左右長(zhǎng)短，加5_12倍量水煮沸提取1_3小時(shí)，提取1-3次，提取液過(guò)濾，合并過(guò)濾液備用；過(guò)濾液濃縮，濃縮至比重1.06-1.14 ;濃縮液用離心機(jī)離心，取離心液備用；離心液加入成品量的25-35%麥芽糊精混合均勻后至噴霧干燥器中干燥，噴霧干燥器進(jìn)風(fēng)溫度為180-205°C，出風(fēng)溫度為90-105°C ;取噴霧干燥所得干膏粉碎，過(guò)80目篩，得桔梗提取物。
[0023]如上所述的保健食品，優(yōu)選地，所述山藥提取物的制備方法如下:
[0024]山藥飲片，加4-10倍量水煮沸提取0.5-2小時(shí)，提取1_3次，合并提取液，過(guò)濾，過(guò)濾液備用；過(guò)濾液濃縮，濃縮至比重1.06-1.14 ;濃縮液用離心機(jī)離心，取離心液備用；離心液噴霧干燥，噴霧干燥器進(jìn)風(fēng)溫度為180-205°C,出風(fēng)溫度為90-105°C ;取噴霧干燥所得干膏粉碎，過(guò)80目篩,得山藥提取物。
[0025]如上所述的保健食品，優(yōu)選地，所述人參提取物的制備方法如下:
[0026]人參飲片，粗碎至0.5cm-l.5cm左右長(zhǎng)短，加5_12倍量水煮沸提取1_3小時(shí)，提取1-3次，提取液過(guò)濾，合并過(guò)濾液備用；過(guò)濾液至外循環(huán)濃縮器中，真空度為0.04-0.0Smpa,溫度為60-80攝氏度，濃縮至比重1.06-1.14 ;濃縮液用離心機(jī)離心，取離心液備用；離心液加入成品量的25-35%麥芽糊精混合均勻后至噴霧干燥器中干燥，噴霧干燥器進(jìn)風(fēng)溫度為180-205°C，出風(fēng)溫度為90-105°C ;取噴霧干燥所得干膏粉碎，過(guò)80目篩，得人參提取物。
[0027]如上所述的保健食品，優(yōu)選地，所述南瓜粉的制備方法如下:
[0028]將南瓜去皮、去籽，烘干，粉碎，過(guò)篩既得。[0029]如上所述的保健食品，優(yōu)選地，所述橙粉的制備方法如下:
[0030]將鮮橙去核、破碎制成橙漿，橙漿經(jīng)超高溫瞬時(shí)滅菌，過(guò)濾，噴霧干燥既得。
[0031]本發(fā)明所述的魔芋粉、羅漢果甜苷可以市場(chǎng)購(gòu)買。
[0032]本發(fā)明的保健食品，針對(duì)氣虛體質(zhì)人群。在生產(chǎn)時(shí)可按照相應(yīng)的比例增大或減少，如大規(guī)模生產(chǎn)可以以公斤或以噸為單位，小規(guī)模生產(chǎn)也可以以克為單位，重量可以增大或減小，但各組成之間的原料重量配比比例不變。
[0033]再一方面，本發(fā)明提供了如上所述的組合物在制備氣虛體質(zhì)保健食品和藥品中的應(yīng)用。
[0034]如上所述的應(yīng)用，優(yōu)選地,所述的保健食品的劑量為5_15g/天。
[0035]本發(fā)明針對(duì)氣虛體質(zhì)人群，具有益氣健脾，滋養(yǎng)心腎作用的保健食品，其有益效果在于，配方設(shè)計(jì)采用中醫(yī)藥“君、臣、佐、使”的框架結(jié)構(gòu)。方中君藥人參大補(bǔ)元?dú)?，《神農(nóng)本草經(jīng)》“主補(bǔ)五臟，安精神，定魂魄，除邪氣，名目開心，益智。久服強(qiáng)力延年”。臣藥山藥“補(bǔ)虛贏，益氣力，長(zhǎng)肌肉，久服耳目聰明，強(qiáng)力，不饑，延年”。佐藥黃精，補(bǔ)脾潤(rùn)肺，益氣，《本草別錄》“補(bǔ)中益氣，除風(fēng)濕，安五臟，久服強(qiáng)力、延年、不饑”。使藥桔梗:《大明本草》“補(bǔ)五勞，養(yǎng)氣”，為藥中之舟楫，共載諸益氣藥升清，以防瀉下。諸藥合用，共奏益氣健脾，滋養(yǎng)心腎之功。
[0036]本發(fā)明的保健食品以藥食兩用食材進(jìn)行配伍，調(diào)理人體體質(zhì)的偏頗，療效可靠，無(wú)副作用，口味容易接受，不含任何防腐劑、合成色素、合成香精，穩(wěn)定性良好，便于攜帶。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0037]圖1.巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞照片。
【具體實(shí)施方式】
[0038]本發(fā)明的主要原料為黃精、桔梗、山藥和人參。
[0039]黃精:甘、平。歸脾、肺、腎三經(jīng)。滋腎潤(rùn)脾，補(bǔ)氣養(yǎng)陰，健脾、潤(rùn)肺、益腎。
[0040]桔梗:苦、辛、平。歸肺經(jīng)。開宣肺氣，祛痰排膿。
[0041]山藥:甘、平。歸脾、肺、腎精。補(bǔ)脾養(yǎng)胃，生津益肺，補(bǔ)腎澀精。
[0042]人參:甘、微苦、微溫。歸脾、肺、心、腎經(jīng)。大補(bǔ)元?dú)狻?br> [0043]南瓜粉:廣泛用于天然保健營(yíng)養(yǎng)品、功能性食品、飲品，高檔面食和肉類食品添加劑、強(qiáng)化劑。本配方中主要作為產(chǎn)品的賦形劑，改善產(chǎn)品中草藥的口感。
[0044]橙粉:本產(chǎn)品添加橙粉作為賦形劑，改善產(chǎn)品中草藥的口感。
[0045]羅漢果甜苷:本品屬低熱量甜味劑。
[0046]以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。以下實(shí)施例中所使用的原料的來(lái)源或制備方法如下:
[0047]1、黃精提取物的制備方法
[0048]黃精飲片，加8倍量水煮沸提取1.5小時(shí)，提取液過(guò)濾，藥渣加6倍量水煮沸提取I小時(shí)，提取液過(guò)濾，合并過(guò)濾液備用。過(guò)濾液濃縮，濃縮至比重1.06-1.14 ;濃縮液用離心機(jī)離心，取離心液備用；離心液加入成品量的10%麥芽糊精混合均勻后至噴霧干燥器中干燥，噴霧干燥器進(jìn)風(fēng)溫度為180-205°C，出風(fēng)溫度為90-105°C;取噴霧干燥所得干膏粉碎，過(guò)80目篩，得黃精提取物。經(jīng)上述步驟，每100重量份生藥原料獲得提取物約20重量份。
[0049]2、桔梗提取物的制備方法
[0050]桔梗飲片，粗碎至Icm左右長(zhǎng)短，加10倍量水煮沸提取2.0小時(shí)，提取液過(guò)濾，藥渣加8倍量水煮沸提取2.0小時(shí)，提取液過(guò)濾，合并過(guò)濾液備用。過(guò)濾液濃縮，濃縮至比重
1.06-1.14 ;濃縮液用離心機(jī)離心，取離心液備用；離心液加入成品量的30%麥芽糊精混合均勻后至噴霧干燥器中干燥，噴霧干燥器進(jìn)風(fēng)溫度為180-205°C,出風(fēng)溫度為90-105°C ;取噴霧干燥所得干膏粉碎，過(guò)80目篩，得桔梗提取物。經(jīng)上述步驟，每100重量份生藥原料獲得提取物約33.3重量份。
[0051]3、山藥提取物的制備方法
[0052]山藥飲片，加8倍量水煮沸提取1.5小時(shí)，提取液過(guò)濾，藥渣加6倍量水煮沸提取I小時(shí)，提取液過(guò)濾，合并過(guò)濾液備用。過(guò)濾液濃縮，濃縮至比重1.06-1.14 ;濃縮液用離心機(jī)離心，取離心液備用；離心液噴霧干燥，噴霧干燥器進(jìn)風(fēng)溫度為180-205°C，出風(fēng)溫度為90-105°C ;取噴霧干燥所得干膏粉碎，過(guò)80目篩，得山藥提取物。經(jīng)上述步驟，每100重量份生藥原料獲得提取物約16.7重量份。
[0053]4、人參提取物的制備方法
[0054]人參飲片，粗碎至Icm左右長(zhǎng)短，加10倍量水煮沸提取2.0小時(shí)，提取液過(guò)濾，藥渣加8倍量水煮沸提取2.0小時(shí)，提取液過(guò)濾，合并過(guò)濾液備用。過(guò)濾液至外循環(huán)濃縮器中，真空度為0.04-0.08mpa，溫度為60-80攝氏度，濃縮至比重1.06-1.14 ;濃縮液用離心機(jī)離心，取離心液備用；離心液加入成品量的30%麥芽糊精混合均勻后至噴霧干燥器中干燥，噴霧干燥器進(jìn)風(fēng)溫度為180-205°C，出風(fēng)溫度為90-105°C;取噴霧干燥所得干膏粉碎，過(guò)80目篩，得人參提取物。經(jīng)上述步驟，每100重量份生藥原料獲得提取物約33.3重量份。
[0055]5、南瓜粉，購(gòu)自北京圣倫食品有限公司，批號(hào)20131010。
[0056]6、橙粉，購(gòu)自大閩食品(漳州)有限公司，批號(hào)181012。
[0057]7、魔芋粉，購(gòu)自汕頭市捷成生物科技有限公司，20131015。
[0058]8、羅漢果甜苷，購(gòu)買自寧波立華植物提取技術(shù)有限公司，批號(hào)20131001。
[0059]實(shí)施例1氣虛體質(zhì)的保健食品(一)
[0060]1、生藥原料組成:黃精150重量份，山藥112.5重量份，桔梗60重量份，人參22.5
重量份；
[0061]制成提取物后的組成:黃精提取物30重量份，山藥提取物18.75重量份，桔梗提取物20重量份，人參提取物7.5重量份；
[0062]輔料:南瓜粉48.84重量份、橙粉15重量份、魔芋粉9重量份和羅漢果甜苷0.9重量份。
[0063]2、制備步驟:
[0064]I)稱重:總投料量150kg，按照配方量稱重，備用。
[0065]2)制漿:將稱重好的羅漢果甜苷，溶于配方總量20%的水中(30kg)，備用。
[0066]3)沸騰制粒:將南瓜粉、人參粉、山藥粉、黃精粉、桔梗粉、魔芋粉、橙粉依次投入制粒機(jī)中。先吹10分鐘混合均勻，待進(jìn)風(fēng)溫度上升到76°C，將步驟2制成的羅漢果漿料噴入沸騰制粒機(jī)中，沸騰制粒，物料水分< 4.0 %出料。
[0067]4)過(guò)篩:18目振動(dòng)篩。[0068]5)灌裝(內(nèi)包裝):用量杯式10列機(jī)進(jìn)行灌裝，5g/袋。
[0069]實(shí)施例2氣虛體質(zhì)的保健食品(二)
[0070]1、生藥原料組成:黃精125重量份，山藥120重量份,桔梗45重量份,人參30重量份；
[0071]制成提取物后的組成:黃精提取物25重量份，山藥提取物20重量份，桔梗提取物15重量份，人參提取物10重量份；
[0072]輔料:南瓜粉45重量份、橙粉20重量份、魔芋粉5重量份和羅漢果甜苷0.5重量份。
[0073]2、采用與實(shí)施例1相同的制備步驟制備氣虛體質(zhì)的保健食品(產(chǎn)品2)。
[0074]實(shí)施例3氣虛體質(zhì)的保健食品(三)
[0075]1、生藥原料組成:黃精80重量份，山藥60重量份,桔梗30重量份,人參9重量份；
[0076]制成提取物后的組成:黃精提取物16重量份，山藥提取物10重量份，桔梗提取物10重量份，人參提取物3重量份；
[0077]輔料:南瓜粉20重量份、橙粉5重量份、魔芋粉3.5重量份和羅漢果甜苷0.3重量份；
[0078]2、采用與實(shí)施例1相同的制備步驟制備氣虛體質(zhì)的保健食品(產(chǎn)品3)。
[0079]實(shí)施例4氣虛體質(zhì)的保健食品(四)
[0080]1、生藥原料組成:黃精125重量份，山藥90重量份,桔梗45重量份,人參15重量份；
[0081]制成提取物后的組成:黃精提取物25重量份，山藥提取物15重量份，桔梗提取15重量份，人參提取物5重量份；
[0082]輔料:南瓜粉40重量份、橙粉15重量份、魔芋粉8重量份和羅漢果甜苷I重量份；
[0083]2、采用與實(shí)施例1相同的制備步驟制備氣虛體質(zhì)的保健食品(產(chǎn)品4)。
[0084]實(shí)施例5氣虛體質(zhì)的保健食品(五)
[0085]1、生藥原料組成:黃精150重量份，山藥120重量份,桔梗60重量份,人參18重量份；
[0086]制成提取物后的組成:黃精提取物30重量份，山藥提取物20重量份，桔梗提取20重量份，人參提取物6重量份；
[0087]輔料:南瓜粉35重量份、橙粉12重量份、魔芋粉7.5重量份和羅漢果甜苷0.8重量份；
[0088]2、采用與實(shí)施例1相同的制備步驟制備氣虛體質(zhì)的保健食品(產(chǎn)品5)。
[0089]實(shí)施例6氣虛體質(zhì)的保健食品(六)
[0090]1、生藥原料組成:黃精150重量份，山藥120重量份,桔梗60重量份,人參24重量份；
[0091]制成提取物后的組成:黃精提取物30重量份，山藥提取物20重量份，桔梗提取物20重量份，人參提取物8重量份；
[0092]輔料:南瓜粉45重量份、橙粉20重量份、魔芋粉5重量份和羅漢果甜苷0.5重量份。
[0093]2、采用與實(shí)施例1相同的制備步驟制備氣虛體質(zhì)的保健食品(產(chǎn)品6)。[0094]實(shí)驗(yàn)例I氣虛產(chǎn)品對(duì)氣虛體質(zhì)狀態(tài)小鼠免疫功能及抗疲勞能力的影響
[0095]一、實(shí)驗(yàn)原理
[0096]根據(jù)“控食少氣、疲勞耗氣”的中醫(yī)理論原則及“從證測(cè)因”的現(xiàn)代研究方法，通過(guò)控制飲食和力竭游泳以造成小鼠氣虛體質(zhì)狀態(tài)，觀察氣虛產(chǎn)品對(duì)氣虛體質(zhì)狀態(tài)小鼠免疫功能及抗疲勞能力的影響。
[0097]二、實(shí)驗(yàn)材料
[0098]1.受試品及陽(yáng)性對(duì)照
[0099](I)產(chǎn)品:氣虛產(chǎn)品(實(shí)施例1-3制備的產(chǎn)品1-3)。
[0100](2)服用方法:熱水沖服。
[0101](3)服用量:2袋/人/日。
[0102](4)規(guī)格:顆粒劑，5g/袋。
[0103](5)陽(yáng)性對(duì)照:恬愉山藥茶，批號(hào)20121123，南京桃園應(yīng)用生物技術(shù)有限公司；補(bǔ)中益氣丸，批號(hào)12083191，北京同仁堂科技發(fā)展股份有限公司制藥廠。
[0104]以上樣品均由中國(guó)食品發(fā)酵工業(yè)研究院提供。
[0105]2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與細(xì)胞株
[0106]SPF級(jí)ICR小鼠88只，雌性，體重18_22g，購(gòu)于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，合格證號(hào)SCXX (京)2012-0001，飼養(yǎng)于SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)；
[0107]K562細(xì)胞株，中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所藥理毒理研究中心常規(guī)傳代。
[0108]羊血:購(gòu)自北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。
[0109]雞紅細(xì)胞由中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院惠贈(zèng)。
[0110]豚鼠血清，中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所藥理毒理研究中心常規(guī)保存。
[0111]3.試劑
[0112]四唑藍(lán)(MTT,Amresco 公司);
[0113]刀豆蛋白A (ConA, Sigma 公司)；
[0114]CytoTox 96?非放射性細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(Promega公司)，用于NK活性檢測(cè)；
[0115]RPMI Mediuml640，GIBCO 公司；
[0116]特級(jí)胎牛血清，北京元亨圣馬生物技術(shù)研究所；
[0117]其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。
[0118]4.儀器
[0119]BCN-1360型生物潔凈工作臺(tái)(北京東聯(lián)哈爾儀器制造有限公司)；
[0120]5410型二氧化碳培養(yǎng)箱(Napco,美國(guó))；
[0121]MQX200 型酶標(biāo)儀(Bio-Tek，美國(guó));
[0122]DFC300FX正置熒光顯微鏡(Leica，德國(guó))；
[0123]CKX41倒置熒光顯微鏡(Olympus，日本)；
[0124]Labofuge4OOR 離心機(jī)(Heraeush,德國(guó))；
[0125]TT快速細(xì)胞分析儀(Casy Innovatis,德國(guó))。
[0126]三、實(shí)驗(yàn)方法
[0127]1.實(shí)驗(yàn)組設(shè)計(jì)[0128](I)產(chǎn)品14個(gè)劑量組:以人體推薦量的2.5,5,10,20倍設(shè)4個(gè)劑量組(具體給藥劑量:0.416g/kg、0.833g/kg、l.667g/kg、3.334g/kg)。產(chǎn)品 2、3 各一個(gè)劑量組(具體給藥劑量:3.334g/kg)
[0129](2)空白對(duì)照組、模型對(duì)照組。
[0130](3)陽(yáng)性對(duì)照組2個(gè):恬愉山藥茶(劑量:1/3包/kg)、補(bǔ)中益氣丸(3g/kg)，均按照人體劑量10倍給藥。
[0131]2、飼喂方案
[0132]受試樣品嚴(yán)格按照推薦人體服用方式預(yù)防性給予15天，然后采用小鼠力竭游泳試驗(yàn)法造模，詳見參考文獻(xiàn)[成細(xì)華等，“益氣解毒法”對(duì)力竭性游泳所致氣虛體質(zhì)狀態(tài)小鼠運(yùn)動(dòng)能力及免疫功能的影響，中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2007 (25):4]，同時(shí)繼續(xù)給予受試樣品15天，在實(shí)驗(yàn)開始后第7、15天記錄力竭游泳時(shí)間(本實(shí)驗(yàn)參照MCARDLE推薦的力竭判斷標(biāo)準(zhǔn)，即游泳最后下沉，經(jīng)IOs后仍不能返回水面為力竭)，實(shí)驗(yàn)第16天處死動(dòng)物，觀察免疫功能指標(biāo)的變化。[0133]3、觀測(cè)指標(biāo)
[0134](I)緩解體力疲勞參考《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》(衛(wèi)生部2003版)。具體為口服給予受試樣品后30min，將小鼠尾根部負(fù)荷6%體重的焊錫絲，置于游泳箱中游泳，水深不少于30cm，水溫25±1.(TC，記錄小鼠自游泳開始至力竭的時(shí)間，即小鼠負(fù)重游泳的時(shí)間。比較受試品組與對(duì)照品組間的差異。
[0135](2)增強(qiáng)免疫功能指標(biāo)主要參考《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》(衛(wèi)生部2003版)。
[0136]①動(dòng)物處理及臟器指數(shù):末次力竭游泳后小鼠眼球后靜脈取血，分離血清待測(cè)。動(dòng)物脫白處死，取脾臟、胸腺，用電子天平精密稱重，計(jì)算臟器指數(shù)。
[0137]②細(xì)胞免疫功能-ConA誘導(dǎo)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn):無(wú)菌取出的小鼠脾臟按常規(guī)制備脾細(xì)胞懸液，用含10%胎牛血清的RPM1-1640培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為5 X IO6個(gè)/ml。將每份脾細(xì)胞懸液分兩孔加入48孔培養(yǎng)板中，每孔300 μ I，一孔加300 μ I Con A液(終濃度2 μ g/ml)作為實(shí)驗(yàn)孔，另一孔加300 μ I培養(yǎng)基作為對(duì)照孔，置37°C、5% CO2孵箱中培養(yǎng)72h。培養(yǎng)結(jié)束前4h，每孔加入MTT(5mg/ml)30l.! 1，繼續(xù)培養(yǎng)4h。培養(yǎng)結(jié)束后，每孔小心吸取240 μ I上清液棄去，然后加入240 μ I細(xì)胞裂解液，置37°C、5% CO2孵箱中過(guò)夜。用酶標(biāo)儀以570nm波長(zhǎng)測(cè)定光密度值(OD)。
[0138]③體液免疫功能-血清溶血素測(cè)定:于實(shí)驗(yàn)處理前5天每只動(dòng)物腹腔注射2% (v/V)綿羊紅細(xì)胞(SRBC)懸液0.2ml。實(shí)驗(yàn)開始首先摘眼球取血，放置約lh，使血清充分析出，2000r/min離心10min分離血清，用生理鹽水稀釋200倍。將稀釋后的血清100 μ I置Ep管中，依次加入10% (v/v)SRBC50y 1，補(bǔ)體100 μ I (用生理鹽水稀釋1:8)。置37 °C恒溫水浴中保溫30min后，冰浴終止反應(yīng)，2000r/min離心10min。取上清液50 μ I加入到平底96孔培養(yǎng)板中，加都氏試劑150 μ I ;SRBC半數(shù)溶血值加10% (v/v)SRBC12.5μ 1，加都氏試劑187.5μ I ;上述各項(xiàng)均設(shè)三個(gè)平行孔，振蕩混勻10min，540nm測(cè)定吸光度值，并計(jì)算半數(shù)溶血值。
[0139]④非特異免疫功能-小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn):動(dòng)物免疫同③。動(dòng)物脫臼處死后，每只小鼠腹腔注射加入含5%胎牛血清的Hank' s液2ml，用吸管吸取腹腔洗液至試管內(nèi)。將0.3ml腹腔洗液加入到盛有0.3mll%的雞紅細(xì)胞懸液中。混勻后滴于玻片上并推片，37°C孵育30min。孵育結(jié)束后生理鹽水洗3次，用甲醇液固定lmin，Giemsa液染色15min。用蒸餾水沖洗，晾干。油鏡下觀察小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬情況，計(jì)數(shù)100個(gè)巨噬細(xì)胞中吞噬雞紅細(xì)胞的個(gè)數(shù)，計(jì)算吞噬百分率。
[0140]⑤NK細(xì)胞活性測(cè)定-按照CytoTox 96?非放射性細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明，即小鼠脫頸椎處死后，無(wú)菌取脾，常規(guī)制備脾懸液，滅菌蒸餾水裂解紅細(xì)胞后，加入適量含10%小牛血清的RPM1-1640完全培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為2X IO7個(gè)/ml ;實(shí)驗(yàn)前24h將K562細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)，用含10%小牛血清的RPM1-1640完全培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為4X IO5個(gè)/ml。反應(yīng)孔取靶細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞各50μ I (效靶比50: I)，加入到U型96孔培養(yǎng)板；靶細(xì)胞自然釋放孔加靶細(xì)胞和培養(yǎng)液各50 μ 1，靶細(xì)胞最大釋放孔加靶細(xì)胞和裂解液各50 μ 1，上述各項(xiàng)設(shè)三個(gè)平行孔，于37°C、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4h，然后將96孔培養(yǎng)板以1500r/min離心5min，每孔吸取上清50 μ I置平底96孔培養(yǎng)板中，同時(shí)加入底物混合物50 μ I，振搖混勻后避光室溫孵育30min后，每孔加入50 μ I終止液，在酶標(biāo)儀490nm處測(cè)定光密度值。
[0141]4、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
[0142]所有數(shù)據(jù)用[土^表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，P < 0.05為有顯著性差異，P < 0.01為有極顯著差異。
[0143]四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0144]1、對(duì)力竭游泳時(shí)間的影響
[0145]結(jié)果見表1，模型組在第7天時(shí)，力竭游泳時(shí)間與空白對(duì)照無(wú)明顯差別，陽(yáng)性對(duì)照恬愉山藥茶與模型組相比具有明顯的增加力竭游泳時(shí)間的作用(P < 0.01)，補(bǔ)中益氣丸和待測(cè)樣品各劑量組力竭游泳平均時(shí)間與模型相比均明顯延長(zhǎng)。在第15天時(shí)，力竭游泳模型組力竭游泳時(shí)間明顯比空白組增加(P <0.01)，這與文獻(xiàn)報(bào)道[I]不符，而陽(yáng)性藥組和產(chǎn)品I的5、10、20倍給藥劑量組、產(chǎn)品2、3的20倍給藥劑量組力竭游泳時(shí)間比模型組明顯延長(zhǎng)。
[0146]表1力竭游泳時(shí)間(η = 11)
[0147]
【權(quán)利要求】
1.一種氣虛體質(zhì)保健食品，其特征在于，以藥食兩用原料黃精、桔梗、山藥和人參的提取物為有效藥物組分以及在藥品和食品中允許使用的輔助添加成分組成，以重量份計(jì)的各有效藥食兩用組分的生藥原料組成為:黃精75?250份、桔梗30?105份、山藥54?180份和人參9?45份。
2.如權(quán)利要求1所述的保健食品，其特征在于，所述以重量份計(jì)的各有效藥食兩用組分的生藥原料組成為:黃精125?200份、桔梗45?90份、山藥90?120份和人參15?30份。
3.如權(quán)利要求1所述的保健食品，其特征在于，所述以重量份計(jì)的各有效藥食兩用組分的生藥原料組成為:黃精150份、桔梗60份、山藥112.5份和人參22.5份。
4.如權(quán)利要求1所述的保健食品，其特征在于，所述有效藥物組分的重量份組成配比為:黃精提取物15?50份、桔梗提取物10?35份、山藥提取物9?30份和人參提取物3?15份。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的保健食品，其特征在于，所述有效藥物組分的重量份組成配比為:黃精提取物25?40份、桔梗提取物15?30份、山藥提取物15?20份和人參提取物5?10份。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的保健食品，其特征在于，所述有效藥物組分的重量份組成配比為:黃精提取物30份、桔梗提取物20份、山藥提取物18.75份和人參提取物7.5份。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的保健食品，其特征在于，所述各提取物的提取方法如下: 黃精、桔梗、山藥和人參均使用水煎煮法獲得提取物。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的保健食品，其特征在于，該保健食品中還含有輔料，選自南瓜粉、橙粉、魔芋粉和羅漢果甜苷中的一種或幾種。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的保健食品，其特征在于，每100重量份的保健食品含南瓜粉20?45份、橙粉5?20份、魔芋粉3?10份和/或羅漢果甜苷0.3?1.0份。
10.權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)所述的保健食品在制備氣虛體質(zhì)保健食品和藥品中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A23L1/29GK103948030SQ201410182010
【公開日】2014年7月30日 申請(qǐng)日期:2014年4月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月30日
【發(fā)明者】李愛民, 李永強(qiáng), 夏泉, 溫波 申請(qǐng)人:新時(shí)代健康產(chǎn)業(yè)（集團(tuán)）有限公司, 煙臺(tái)新時(shí)代健康產(chǎn)業(yè)有限公司